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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIHUAHUA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

Laboratorio de Quimica Clinica

Practica 8:

Perfil de Lipidos

QBP Beatriz Portillo Arroyo

Ana Laura Ulloa Ogaz 239663


Daniel Alejandro Aceves Romero 235980
Josue Aguilar Enriquez 235890
7B
Quimico Bacteriologo Parasitologo
03/10/2012

OBJETIVOS

Determinar el nivel de Triglicridos, Colesterol total y


colesterol HDL.

RESUMEN
La
prctica
consisti
en
determinar
el
nivel
de
triglicridos, colesterol total y HDL, mediante el suero de
una muestra sangunea. Para las pruebas de colesterol y
triglicridos, se agregaron 10 l de suero y 1 ml de
reactivo de trabajo correspondiente para cada prueba,
posteriormente se llev a incubar por 5 minutos a 37C.
Finalmente se realiz la lectura de ambas muestras. Para la
muestra de triglicridos se ley a 385 nm y la de
colesterol a 500 nm.

INTRODUCCION

Los lpidos son una eficiente fuente de energa, que


consisten en enlaces Carbono- Hidrogeno, en donde el cuerpo
almacena un exceso de caloras. Los lpidos son tambin una
parte integral de membranas celulares, y desempean una
funcin estructural en las clulas. Los lpidos pueden ser:
triglicridos, colesterol, fosfolipidos, cidos grasos.
Los triglicridos son 3 molculas de cidos grasos unidos a
una
molcula
de
Glicerol,
por
enlaces
ester.
Los
triglicridos pueden ser de origen vegetal o animal; el
origen vegetal son ricas en cidos grasos poli insaturados
y son aceites, como en el maz, semillas de girasol, y
crtamo; en el origen animal, contienen principalmente
cidos grasos saturados, que por lo general son slidos a
temperatura ambiente.
El colesterol es un alcohol esteroideo no saturado que
contiene 4 anillos (A, B, C, D) y tiene una sola cadena
lateral C-H. La nica parte hidrofilica del colesterol es
el grupo hidroxilo del anillo A, el colesterol es un lpido
anfifatico y se haya en la superficie de capas lipidicas
junto con fosfolipidos.
El perfil lipidico lo constituye la
cuantificacin
analtica de una serie de lpidos que son transportados en

la sangre por los diferentes tipos de lipoprotenas


plasmticas. La determinacin de estos parmetros es un
procedimiento analtico bsico para
el diagnstico y
seguimiento de enfermedades metablicas, primarias o
secundarias. Entre estos parmetros analticos que se
pueden determinar estn: el colesterol total, el colesterol
transportado por las LDL, el colesterol transportado por
las HDL, los triglicridos totales, ciertas apoprotenas
particulares etc. Altos niveles de colesterol se asocian a
riesgo
de
padecer
enfermedades
cardiovasculares,
en
especial aquel unido a las LDL (colesterol malo). El
colesterol de las HDL (colesterol
bueno), puesto que
representa aquella fraccin de colesterol que se transporta
al hgado para su metabolizacin y excrecin por va
biliar, no se asocia con riesgo de enfermedad.

MATERIAL Y METODOS

Material

Reactivos

Tubos de ensaye
gradilla
Tubo tapn ROJO
Vacutainer
Aguja estril
Ligadura
Torundas con alcohol
Micropipetas
Puntas para micropipetas
Humalyzer 2000

Suero sanguneo
Reactivo enzimtico
STD 200 mg/dl
Reactivo precipitante

PROCEDIMIENTO
Se tom una muestra sangunea utilizando un tubo con
tapn rojo, el cual no contiene anticoagulante, y

posteriormente se llev a la centrifugacin durante 10


minutos.
Triglicridos METODO TGO- PAD
Preparar las soluciones como se indica en la siguiente
tabla:

Suero
Std
CN/CP
Reactivo
enzimtico

Muestra

Std

CN

CP

Blanco

10l
1ml

10l
1ml

10l
1ml

10l
1ml

1ml

Mezclar e incubar durante 5 minutos a 37C.


Leer absorbancias a 385 nm. Estabilidad: 30 minutos
(N de prueba 21)
Colesterol METODO CHOD- PAD

Preparar las soluciones como se indica en la siguiente


tabla:

Suero
Std
CN/CP
Reactivo
enzimtico

Muestra

Std

CN

CP

Blanco

10l
1ml

10l
1ml

10l
1ml

10l
1ml

1ml

Mezclar e incubar durante 5 minutos a 37C.


Leer absorbancias a 500 nm. Estabilidad: 60 minutos
(n de prueba 48)

RESULTADOS

Colesterol

ANA

DANIEL

V.R

214 mg/dl

198.1 mg/dl

Normal hasta 200 mg/dl

Limite 201- 220 mg/dl


Elevado > 220 mg/dl

Triglicrido
s

41 mg/dl

264.6 mg/dl

Normal < 150 mg/dl


Limite 150-220 mg/dl
Elevado >200 mg/dl

Glucosa

86.8 mg/dl

76.1 mg/dl

75-100mg/dl

Se realizo una comparacin de los perfiles realizados, se


puede observar que Ana est entre el lmite de colesterol
mientras que Daniel se encuentra entre los niveles
normales.
Respecto a los triglicridos, Ana presenta unos niveles
bajos lo cual no es ningn problema, puede deberse a una
baja ingesta de lpidos. En cambio, Daniel, presento un
ligero exceso de triglicridos por lo que indica un posible
acumulo de estos en el torrente sanguneo, ya que
probablemente hay un metabolismo de estas muy lento.
Por otro lado, los niveles de glucosa se analizaron para
conocer si la energa que est produciendo el cuerpo a la
hora de metabolizar los lpidos es adecuada, en cuanto a
ambos pacientes, los niveles estn dentro de lo normal, lo
cual indica que la energa se est aprovechando.

CONCLUSION
La cuantificacin de colesterol
y triglicridos en suero
es un procedimiento analtico bsico en el diagnstico y
seguimiento de enfermedades metablicas, primarias o
secundarias.
Altos niveles de colesterol se asocian a
riesgo de padecer enfermedades cardiovasculares. En esta
prctica se logro el objetivo de realizar la determinacin
en suero de colesterol total, glucosa y triglicridos.

APENDICE
Determinacin de colesterol por mtodo CHOD-PAD

Para la determinacin de colesterol total


se utilizan
reactivos comerciales que incluyen las enzimas y sustratos
necesarios para la cuantificacin de todas las formas de
colesterol presentes en el suero (Kit comercial de Linear
Chemicals). Las reacciones que tienen lugar son:

1. Una colesterol estearasa (CHE) hidroliza los steres


de colesterol a colesterol ms cidos grasos libre.
2. A continuacin una colesterol oxidasa (CHOD) oxida
todo el colesterol a colestenona
y perxido de
hidrgeno.
3. El perxido de hidrgeno es sustrato de una peroxidasa
(POD) que junto con 4-amino fenazona (4-AP) da lugar a
la formacin de una quinona roja. La quinona formada
es proporcional a la concentracin de colesterol en la
muestra.
Determinacin de triglicridos
Para la determinacin de triglicridos en suero se utilizan
reactivos comerciales (Kit comercial de Linear Chemicals)
que incluyen las enzimas y sustratos necesarios para la
cuantificacin
por
espectrofotometra
visible.
Las
reacciones que tienen lugar son:

1. Una lipasa hidroliza los triglicridos dando glicerol


mas cidos grasos libre.

2. El glicerol formado es sustrato de una glicerol


quinasa que en presencia de ATP lo fosforila a
glicerol 3P.
3. El glicerol 3P es oxidado a dihidroxiacetona por una
glicerol fosfato oxidasa dando tambin perxido de
hidrgeno.
4. El perxido de hidrgeno junto con los cromgenos pclorofenol y 4-AP son sustrato de una peroxidasa para
formar una quinona roja cuantificable a 505 nm. La
quinona formada es proporcional a la concentracin de
triglicridos presente en la muestra.

Residuos peligrosos biolgicos infecciosos utilizados

Bibliografa
Michael L. Bishop. QUIMICA CLINICA. Principios,
procedimientos
y
correlaciones.
5ta
Edicin.
McGrawHill. Mxico 2007.