FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

INGENIERA AGROINDUSTRIAL
TECNICAS DE ASEPCIA Y UBICUIDAD MICROBIANA
Garces Arlex, Moreno Viviana

1. METODOLOGIA
Durante las prcticas de laboratorio correspondientes al rea de microbiologa, es necesario cumplir con las normas de
seguridad personal, y verificar que los materiales de uso estn completamente esterilizados, limpios y secos para que no
se presente una alteracin en los resultados que vamos a obtener.
Durante el desarrollo de esta prctica, se procedi a la explicacin de la gua, para una correcta realizacin del
laboratorio por parte de la profesora; para ello se tomaron diferentes muestras tanto corporales, como fsicas que se
encontraban a nuestro alrededor, para proceder a realizar un cultivo de unidades formadoras de colonia (UFC). Para
tales casos se emplearon los isopos los cuales eran previamente introducidos en las diferentes muestras, para luego ser
llevados a las cajas de Petri y depositar las colonias ah. Se rotularon las cajas de Petri se sellaron y se incubaron a una
temperatura determinada por un lapso de 24 a 48 horas, necesario para el crecimiento colonial.
2. OBJETIVOS
-demostrar la ubicuidad de microorganismos a partir diferentes fuentes utilizando tcnicas de cultivos.
3. TABLAS DE DATOS
Tabla 1. Control microbiano en el cuerpo humano

rea
Contenido
Observada
de UFC

Manos
antes de
lavar

Ms de
300 UFC

Manos
58 UFC
despus de
lavar

Observaciones

Comparacin con la Literatura

Se observ que la muestra ha

tenido
un
crecimiento
microbiano prolongado durante
las 24 horas seguidas despus
de haber realizado la prctica
de laboratorio, la forma de las
bacterias presentes
son
circulares con variaciones en
sus tamaos, adems ha
ocupado toda la superficie de la
caja de Petri. Esto sucede ya
que las manos examinadas
estaban expuestas a una carga
microbiana elevada.

La flora de las manos principalmente est

constituida por Staphylococos coagulasa
negativos,
corynebacterium
spp
y
anaerobios tales como: Propinobacterium
spp, y rara vez causan infecciones a no
ser que la piel sea violentada por algn
dispositivo invasivo. La transferencia de
microorganismos a travs de las manos
han sido identificada como un factor
importante en la aparicin de brotes de
Staphylococcus aureus resistentes a la
meticilina
(MRSA),
bacterias
gram
negativas multirresistentes, tales como
Acinetobacter
spp
y
Enterococos
resistentes a la vancomicina.
La flora transitoria de las manos por su
parte, comienza a colonizar las capas
superficiales de la piel y son menos
adherentes, sta es fcilmente eliminada
por el lavado de manos y puede ser
transferida por contacto directo entre las
manos con la piel o el medio ambiente
inanimado como las superficies de trabajo
o la comida. Otras por el contrario son
eliminadas hasta un 99.9% con jabones
antibacteriales.

Durante esta prueba, las

manos como factor a evaluar
fueron sometidas a un lavado
con el fin de minimizar la carga
microbiana; se pudo observar
que las UFC minimizaron su
nmero, es decir, se pudieron
cuantificar. Sus formas fueron
circulares y se dispersaron por
toda la caja de Petri.

Imagen

Mucosas

Boca

Ms de
300 UFC

Ms de
300 UFC

Se determin que para esta

prueba las bacterias presentes
en las mucosas nasales
crecieron muy juntas, pero a su
vez se pueden distinguir unas
de otras. Su coloracin tiende
a ser amarillenta, presentan
varias
formas
la
ms
sobresaliente son la circular,
seguida de las ovaladas y
algunas largas. Estas UFC solo
se esparcieron por la parte
cntrica de la caja de Petri, no
ocuparon todo el espacio dado.

En este experimento, se not

que las UFC
fueron muy
pocas. Las causas posibles
para este resultado obtenido
fueron que la boca examinada
estaba
libre
de
microorganismos causantes de
diferentes efectos bucales, las
formas son circulas y de
coloracin
blanco
marfil.
Aunque
observando
minuciosamente se pueden
apreciar diminutos puntos en

Es el sitio tpico de predominio de los

estafilococos,
fundamentalmente
S.
Aureus y S. Epidermidis. Ocasionalmente
tambin
podemos
encontrar
Streptococcus
pyogenes
y
S.
Pneumoniae, as como especies no
patgenas de Neisseria, pero siempre
tomando a todas ellas como como flora no
residente sino ocasional o contaminante;
entre otras tenemos:
Staphilococcus (estafilococos)
Aureus (20% de la poblacin)
Epidermidis
Micrococcus
Streptococcus (estreptococos)
Difteroides
La cavidad oral es uno de los hbitats
microbianos
ms
complejos
y
heterogneos del cuerpo. La superficie de
los dientes y los surcos gingivales
contienen un gran nmero de bacterias
anaerbicas; la placa es una pelcula de
clulas bacterianas, que se anclan en una
matriz de polisacridos secretada por los
microorganismos. Cuando los dientes no
se limpian con regularidad, la placa se
puede acumular rpidamente y la
actividad
de
ciertas
bacterias,
especialmente de Estreptococos mutans,

Boca

Cuero
Cabelludo

Mas de
300 UFC

8 UFC

toda la caja de Petri, los cuales puede dar lugar a la destruccin dental
no se pudieron estimar ya que (caries).
el tamao fue muy diminuto y Estreptococos del grupo viridans:
solo se perciba un leve color
Mitis
blanco transparente
Mutans (relacin con caries)
Sanguis
Otros Estreptococos no viridans :
Bacteroides
Fusobacterium
Actinomices
Trichomonas tenax
Durante el anlisis sobre el Las infecciones por hongos en el cabello
cuero
cabelludo
se se producen por un tipo llamado
cuantificaron pocos UFC, esto dermatofitos, que se producen en la zona
se debe a que la superficie de la epidermis debido a la presencia de
analizada estaba limpia, libre a queratina, tambin en el pelo y las uas.
de grasa o caspa, se logr Los dermatofitos son un grupo de hongos
estimar su colorido y forma, por taxonmicamente relacionados, que tiene
lo general estas son circulares capacidad para invadir el tejido
y ovaladas blancas.
queratinizado del hombre y animales, y
producir una infeccin llamada
dermatofitosis, o conocida comnmente
como tia.

Tabla 2. Control microbiano en superficies

rea
Observa
da

Aire

Conteni
do de
UFC

11 UFC

Observaciones

comparacin con la Literatura

Se dej incubar el cultivo durante 24

Hrs donde se encuentra el su punto
mximo
de
vida
de
los
microorganismos,
las
unidades
formadoras de colonias poseen una
forma circular de coloracin blanca,
otras con transparencia en los
bordes, aunque otras existen UFC
de forma circular la cual presenta
una coloracin blancuzca con
coloracin ms clara en forma
concntrica.

El aire es un medio de transporte de

microorganismos como
esporas, virus,
bacterias y hongos. Estos pueden causar
enfermedades de tipo respiratorio, sistemticas
y alrgicas. El periodo de vida los
microorganismos depende de la naturaleza de
estos.
Generalmente, los microorganismos presentes
en el aire son los pilobolus, sarcoscypha y
sphaerobolus,
bacilus,
clostridium,
actinomicetos, corynebacterium, micrococcus,
taphylococus( Gram+), alcaligenes(Gram-),
flavobacterius, entre otros.Debido a la forma de
las UFC se puede decir que posiblemente en el
cultivo analizado
se encontraban los
micrococus
como tambin las esporas
aspergillus.

Imagen

Celular
sucio

Meson
sucio

Se pretende realizar el conteo de

UFC en un celular, para esto se
toma el rea del celular la cual fue
Ms de de 142 x72.5 cm con el fin de
300 UFC determinar la cantidad de UFC en el
rea calculada. Obteniendo que las
UFC poseen una coloracin blanca
sin embargo existen, otras colonias
cuya coloracin es ms oscura casi
amarilla.

Existen microorganismos que

pueden observarse a simple vista,
Mas de sin embargo la mayora de ellos
300 UFC requieren
de
instrumentos
especializados. Para medir la carga
microbiana se marco un rea de 100
cm2 con el fin de medir las UFC
observado a las 24 hrs colonias de
coloracin amarillenta oscura de
forma
circular, como
tambin
colonias blancas de la misma forma
e incluso colonias de mayor tamao
de formas irregulares.

Al ser un objeto manipulado con las manos

podemos inferir que la cantidad microbiana es
elevada debido a que esta en constante
contacto con la flora bacteriana de las manos
teniendo en su superficie microorganismos
Staphylococos
coagulasa
negativos,
corynebacterium
spp
como
tambin
Propinobacterium spp (anaerobios). E incluso
al ser manipulado durante mucho tiempo y no
se limpia con regularidad este posiblemente
puede tener microorganismos patgenos
provocando enfermedades y bacterias como el
E.coli. si se limpia con una solucin
desinfectante este instrumento electrnico la
carga microbiana debe disminuir.
El rea de laboratorio esta expuesta a la
contaminacin, esto se debe a que diariamente
los instrumentos usados y materias analizadas
estn en contacto con el medio ambiente,
diversas personas y adems el aire es un
medio de transporte donde se pueden trasladar
microorganismos, por ende el control de
microorganismos se ve limitado. Existen
diversos mtodos fsicos y qumicos que
destruyen la mayora de microorganismos
patgenos, pero esporas no se afectan. Sin
embargo, la disminucin de organismos
patogenos se puede lograr a travez de la
esterilizacin ya que se encuentra esteril y con

Meson
limpio con
solucin
4 UFC
de 70%
alcohol

Control

O UFC

Se busca evaluar la efectividad de

una
solucin
desinfectante
observando su eliminacin de
microorganismos.Para
medir
la
carga microbiana se marco un rea
de 100 cm2 con el fin de medir las
UFC
observado a las 24 hrs
colonias de coloracin amarillenta
oscura de forma circular, como
tambin colonias blancas de formas
irregulares.
Este cultivo se realiza con el fin de
verificar que estas no presentan
ninguna contaminacin y asi poder
tener resultados adecuados con la
muestra analizada y no generar un
falso positivo.

ninguna carga microbiana aunque se debe

tener cuidado debido a que puede afectar
nuestra salud. los microorganismos presentes
en el aire y flora humana son los pilobolus,
sarcoscypha
y
sphaerobolus,
bacilus,
clostridium, actinomicetos, corynebacterium,
cicrococcus, flavobacterius, entre otros.
Los desinfectantes son soluciones cuya
funcin principal es eliminar microorganismos,
sin embargo la eficiencia se ve afectada por la
resistencia de algunas cepas.
Por lo tanto, las UFC que no se eliminaron son
aquellas que son resistentes.

Debido a que es un cultivo estril, este no

presentara ningn tipo de microorganismo ni
agente contaminante. Por consiguiente, si no
se siembra un cultivo el agar nutritivo debe
permanecer constante sin ningn crecimiento
microbiano.

4. DISCUSIN
Los microorganismos estn en infinidad de partes, convivimos a diario con millones de ellos. Por consiguiente en todo lo
que tocamos llevamos miles de microrganimos. La flora bacteriana de las manos est constituida por microorganismos
como Staphylococcus coagulosa negativos, corybacterium spp los cuales pueden ocasionar enfermedades como la
aparicin de brotes de Staphylococcus aureus y otros tipos de microorganismos multi-resistentes. Una manera eliminar
microorganismos en nuestro cuerpo es incrementar una adecuada asepsia. Sin embargo, el uso de instrumentos anti
bacteriales como jabones destruyen microorganismos que benefician a nuestro organismo.
Nuestro organismo posee millones de bacterias tanto en nuestra fosa nasal, bucal y cuero cabelludo por tanto en ellas
existen microorganismos que permiten incrementar la defensa de nuestro organismo produciendo anticuerpos. Es posible
que estas bacterias Staphilococcus (estafilococos), Aureus (20% de la poblacin), Epidermidis sean estacionarias y estn
presentes en nuestro organismo por un tiempo corto. Por este motivo las UFC contadas superaban las 300 unidades
debido a los factores explicados anteriormente.
Por otro lado, tenemos la cavidad bucal la cual est habitada por microorganismos ms complejos. Debido a que en esta
rea prevalecen colonias de bacterias de tipo anaerobio estas prolongan su vida debido a una inadecuada higiene bucal
las bacterias o clulas bacterianas se adhieren a un nutriente en este caso a matrices de polisacridos existentes en
nuestra cavidad bucal. Entre los microorganismos ms comunes son los grupos varidans como mitis, mutans, sanguis,
entre otros estreptococus como bacteroides teniendo como resultado un cultivo numeroso con ms de 300 UFC de
diferentes coloraciones y formas que evidencia la existencia de multiples bacterias.
Si analizamos el cuero cabelludo se obtuvo una cantidad microbiana alta esto se debe a una posible mal higiene del
cuero cabelludo, infecciones que causa que la cantidad microbiana, por ende, la proliferacin de microorganismos se ven

afectadas por estos factores que hacen que las unidades formadoras de colonias superen las 300 que segn la literatura
es normal debido a el contacto con varios agentes con carga microbiana.
Por parte, el aire es un medio de transporte de microorganismos como esporas, virus, bacterias y hongos. Estos pueden
causar enfermedades de tipo respiratorio, sistemticas y alrgicas. El periodo de vida los microorganismos depende de la
naturaleza de estos.
Los microorganismos presentes en el aire son los pilobolus, sarcoscypha y sphaerobolus, bacilus, clostridium,
actinomicetos, corynebacterium, micrococcus, taphylococus( Gram+), alcaligenes(Gram-), flavobacterius, entre
otros.Debido a la forma de las UFC se puede decir que posiblemente en el cultivo analizado se encontraban los
micrococus como tambin las esporas aspergillus. Por tal motivo, en el cultivo se ve reflejado las multiples colonias que
superan las 300 UFC de diferentes tamaos, forma y coloraciones.
Mientras que, un celular al ser un objeto manipulado con las manos podemos inferir que la cantidad microbiana es
elevada debido a que est en constante contacto con la flora bacteriana de las manos teniendo en su superficie
Staphylococos coagulasa, corynebacterium.spp como tambin Propinobacterium spp (anaerobios) y adems, ser
manipulado durante mucho tiempo y no se limpia con regularidad este posiblemente puede tener microorganismos
patgenos provocando enfermedades y bacterias como el E.coli. si se limpia con una solucin desinfectante este
instrumento electrnico la carga microbiana debe disminuir. Por lo que en el cultivo, en un rea de 142 x72.5 cm presenta
una flora bacteriana de 300 UFC.
Finalmente, el medio ambiente, diversas personas y adems el aire es un medio de transporte donde se pueden trasladar
microorganismos contaminando reas como paredes, mesones por ende el control de microorganismos se ve limitado.
Existen diversos mtodos fsicos y qumicos que destruyen la mayora de microorganismos patgenos. Sin embargo, la
disminucin de organismos patogenos se puede lograr a travez de la esterilizacin ya que se encuentra esteril y con
ninguna carga microbiana aunque se debe tener cuidado debido a que puede afectar nuestra salud. los microorganismos
presentes en el aire y flora humana son los pilobolus, sarcoscypha y sphaerobolus, bacilus, clostridium, actinomicetos,
corynebacterium, cicrococcus, flavobacterius, entre otros, es decir, que los cultivos tanto del meson sin limpiar como el
meson desinfectado las unidades formadoras disminuyen si se limpia por tanto se reduce de 300 UFC a 4 UFC

observando que la eficiencia del desinfectante es considerablemente alta, y la ineficacia se debe a que algunas son
resistentes.
Debido a que es un cultivo estril, este no presentara ningn tipo de microorganismo ni agente contaminante. Por
consiguiente, si no se siembra un cultivo el agar nutritivo debe permanecer constante sin ningn crecimiento microbiano.

5. CONCLUSIONES
- Se determin el crecimiento de las UFC en todas las muestras presentes con el fin de identificar algunas cepas
gracias a sus formas y coloracin caracterstica.
- Se observ que el mayor nmero de UFC fue obtenido en la muestra de manos sucias, debido a que estas
albergan gran cantidad de flora microbiana debido a la manipulacin de diferentes objetos que incrementaan la
cantidad microbiana.
- la mayora de las muestras analizadas presentan una cantidad bacteriana alta, esto se debe al contacto del
media ambiente, sin embargo si se usan desinfectantes estos disminuyen por un determinado tiempo pero en
un tiempo extenso la el espacio desinfectado vuelve a afectar su carga microbiana.