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El profesor
Explicara, que es un exudado farngeo o
nasofaringeo, un urocultivo y un coprocultivo.
En que caso clnico estn indicados?
Porque se utilizan diferentes medios de cultivo
para su siembra?
Cuales son los microorganismos patgenos ms
frecuentemente asociados a una faringoamigdalitis,
infeccin de vas urinarias y gastroenteritis y que
medios de cultivo selectivos y diferenciales se
emplean para su crecimiento?.
EL PROFESOR EXPLICARA EL DESARROLLO
DE LA PRACTICA
1. Exudado nasofaringeo
Seleccin de los medios de cultivo
Toma de exudado nasofaringeo y manejo
de la muestra clnica
Tcnica de sembrado para la obtencin de
colonias aisladas.
Condiciones y tiempo de incubacin
2. Urocultivo
Manejo de la muestra de orina
Seleccin de los medios de cultivo
Tcnica de sembrado de la muestra clnica
(cultivo cuantitativo)
Condiciones y tiempo de incubacin
3. Coprocultivo
Seleccin de los medios de cultivo
Tcnica de sembrado de la muestra clnica,
para la obtencin de colonias aisladas
Condiciones y tiempo de incubacin
4. Cultivo de flora bacteriana de piel
Relacin que guarda la densidad bacteriana
con el aseo de las manos
Participacin del lavado de manos en la
prevencin de diseminacin de enfermedades
infecciosas bacterianas.
Seleccin de los medios de cultivo
Tcnica de inoculacin en las placas de cultivo
Condiciones y tiempo de incubacin

I.- Objetivos
El alumno:
Conocer los medios selectivos y diferenciales que
se utilizan para sembrar un exudado farngeo, un
urocultivo, un coprocultivo y flora bacteriana de piel.
Descubrir el tipo de flora bacteriana predominante
en piel y su variacin en la densidad de acuerdo a
la tcnica de lavado de manos.
Se familiarizar con las tcnicas de sembrado y de
tincin que se utilizarn en el laboratorio de
bacteriologa.
Comprender la importancia de manejar la siembra
de las muestras clnicas en un campo de esterilidad.
II. Material
1.
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3.
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5.
6.
7.
8.
9.
10.

Asas bacteriolgicas
Portaobjetos de 26 x 75 mm
Frasco gotero con agua destilada estril
Puente para tincin
Reactivos para tincin de Gram
Mecheros
Aceite de inmersin
Papel limpia lentes
Microscopios
Preparaciones fijas y teidas de bacterias

III. Metodologa
Se emplearn los medios de cultivo slidos y
lquidos sembrados para realizar frotes y tincin de
Gram para su observacin.
Preparacin de frotes
1. Trabajar en un rea de aproximadamente
10 cm de distancia de la flama del mechero
(zona de esterilidad).
2. Esterilizar el asa, flamearla y enfriarla.
3. Tomar una pequea porcin de una colonia
aislada con el asa estril.

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4. Resuspender el material del asa en una


gota
de
agua
destilada,
colocada
previamente en un portaobjeto, mezclar y
extender la suspensin en un rea no
mayor de 2 cm de dimetro.
5. Secar la preparacin al aire libre.
6. Fijar la preparacin con el calor del
mechero,
evitando
el
calentamiento
excesivo.
7. Marcar cada preparacin con un marcador
indeleble.
8. Colocar el frote sobre el puente de tincin.
Tincin de Gram
1. Cubrir los frotes con cristal violeta, durante
un minuto.
2. Lavar con agua corriente ligeramente.
3. Cubrir con lugol bacteriolgico durante un
minuto.
4. Lavar con agua corriente ligeramente.
5. Decolorar el frote con un a mezcla de
alcohol-acetona (5 a 7 gotas).
6. Lavar con agua corriente ligeramente.
7. Cubrir con safranina durante 30 segundos.
8. Lavar con agua corriente.
9. Secar al aire libre.
10. Observar al microscopio.
Interpretacin
Las bacterias que retienen el colorante inicial y se
tien de color violeta son Gram positivas y las que
se decoloran y se tien con el colorante de
contraste son Gram negativas.

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