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UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

UNAD
ESCUELA DE CIENCIAS AGRICOLAS PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE

COMPONENTE PRCTICO

ELABORADO POR:
LEIDY DANIELA GOMEZ BERMUDEZ
CODIGO: 1.110.178.126

PRESENTADO A:
ZULMA LORENA DURAN
TUTOR

GRUPO: 358027_7

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA - UNAD


TOXICOLOGIA AMBIENTAL
IBAGUE TOLIMA
2014

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA


UNAD
ESCUELA DE CIENCIAS AGRICOLAS PECUARIAS Y DEL MEDIO AMBIENTE

INTRODUCCION
El bioensayo de toxicidad con semillas de lechuga (Lactuca sativa) es una prueba esttica de
toxicidad aguda (120 horas de exposicin) en el que se pueden evaluar los efectos fitotxicos
de compuestos puros o de mezclas complejas en el proceso de germinacin de las semillas y
en el desarrollo de las plntulas durante los primeros das de crecimiento. Como puntos finales
para la evaluacin de los efectos fitotxicos, se determina la inhibicin en la germinacin y la
inhibicin en la elongacin de la radcula y del hipocotleo. Es importante destacar que durante
el perodo de germinacin y los primeros das de desarrollo de la plntula ocurren numerosos
procesos fisiolgicos en los que la presencia de una sustancia txica puede interferir alterando
la supervivencia y el desarrollo normal de la planta, siendo por lo tanto una etapa de gran
sensibilidad frente a factores externos adversos.
Si bien L. sativa no es una especie representativa de ecosistemas acuticos, la informacin
generada a partir de esta prueba de toxicidad proporciona datos acerca del posible efecto de
los contaminantes en las comunidades vegetales cercanas a las mrgenes de cuerpos de agua
contaminados, siendo tambin una especie interesante de considerar por su importancia desde
el punto de vista hortcola. Por otra parte, es de fcil y rpida germinacin por lo que es posible
desarrollar la prueba en pocos das.
Este bioensayo de toxicidad ha sido recomendado y aplicado por diferentes organismos de
proteccin ambiental para la evaluacin ecotoxicolgica de muestras ambientales y compuestos
puros, adems de la evaluacin del efecto fitotxico de plaguicidas sobre especies no blanco,
necesarios para el registro de estos compuestos (OECD, 1984; Wang, 1987; USEPA, 1989).
En la incorporacin de esta prueba en una batera de bioensayos es importante considerar el
compromiso entre la sensibilidad de la especie L. sativa, el reducido tiempo de exposicin de la
prueba con semillas, los bajos costos asociados y que no requiere equipamiento sofisticado, en
particular en la aplicacin a muestras ambientales o en el monitoreo de procesos de
detoxificacin, saneamiento, control de efluentes o reso de bioslidos.

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DIAGRAMA DE FLUJO DEL LABORATORIO ELABORADO


PREPARACIN DE SOLUCIN
MADRE DE NaCl

Aadir 11 gramos de sal a


recipiente de 1.5 L

Aadir 1 L de agua sin gas al


recipiente

Etiquetar

Cerrar la tapa y agitar bien

Aadir otros 100 ml de agua


sin gas al recipiente de
1.5L

PREPARACION DE SOLUCION
CONTROL POSITIVO

Aadir 250 ml de solucin


madre de NaCl a recipiente
de 500 ml

Aadircon
1 L de
aguadestilada
sin gas al
Diluir
agua

PREPARACION SOLUCION
CONTROL NEGATIVO

Etiquetar

Cerrar la tapa y agitar bien

Muestra de agua sin gas y sin


saborizante, alistar mnimo
500mL para el bioensayo.

MONTAJE DEL BIOENSAYO

Colocar en cada caja Petri un


disco de papel filtro

Colocar cuidadosamente 20
semillas

Colocar 4mL de cada


solucin en la caja de petri
correspondiente, saturar el
papel filtro

Marcar correctamente cada


caja de Petri con la dilucin

Colocar cuidadosamente 20
semillas

Tapar las cpsulas

Repetir el procedimiento
pero utilizando el agua
embotellada (control
negativo) y la solucin de
NaCl como control positivo

Ejecucin de las
observaciones y mediciones

Colocar las placas en un


lugar seguro, a temperatura
ambiente por cinco das

recipiente

Marcar con cinta de


enmascarar cada caja de
Petri envuelta con papel
aluminio

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DESCRIPCIN DE LA MUESTRA LLEVADA AL BIOENSAYO


Se obtuvieron las muestras de agua, proveniente de un rio contaminado, todas las aguas
residuales provenientes de las casas, de los negocios o de cualquier actividad humana van a
parar directamente al rio y que provocan contaminacin de este recurso llamado agua.
Se tom una la muestra de agua, previamente identificada (recolectada en un rio donde con la
ayuda de un tarro se procedi a recoger el agua, recolectndola en tarros, una vez tomado las
muestras se cerraron y se rotularon las muestras.
Para el montaje del bioensayo se tomaron las siguientes muestras:

Para el control negativo, se tom una muestra de agua sin gas y sin saborizante
Para el control positivo, Las soluciones de control positivo estn diseadas para obtener
resultados similares de los que se obtendran con agua contaminada. Se prepara una serie
de soluciones de agua salada, utilizando sal comn (NaCl). Estas soluciones permiten
observar cmo reaccionan las semillas al agua contaminada.
Para la solucin madre: En esta solucin se aaden 11 gramos (2 cucharaditas a ras) de
sal (NaCl) en agua envasada no carbonatada
Las muestras se obtuvieron del rio Ortega ubicado en el municipio de Ortega.

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RESULTADOS
Germinacin

control
control
positivo
negativo
9
11
buena
mala radcula
radcula
7
2
10
1
18
0
19
0
17
0

efecto de
germinacin
control positivo
control negativo
muestra R-1
muestra R-2
Muestra R-3

semilla

1
2
3
4

Elongacin de radcula (cm o mm)


contr
ol +
2 cm

contr
ol 1 cm

Muest
ra R1
3 cm

Muest
ra R-2
2,5cm

Muest
ra R-3
3 cm

0,5
cm
2 cm

1,9cm

3 cm

2, cm

1,5
cm
1 cm

3 cm

muestra
R-1
18

muestra
R-2
19

Muestra
R-3
17

Elongacin Hipocotleo (cm o mm)


contr
ol 3,5c
m
4 cm

Muest
ra R1
3 cm

Muest
ra R-2
3 cm

Muest
ra R-3
3 cm

1 cm

cont
rol +
2
cm
1 cm

3,5 cm

3,5 cm

2 cm

2,5 cm

2 cm

2 cm

4 cm

2,5 cm

2,5 cm

3 cm

3,8 cm

2,5 cm

3,5 cm

2 cm

2 cm

4,5
cm
4 cm

4 cm

1,7 cm

2,5
cm
2 cm

2,5 cm

2,5 cm

2 cm

3 cm

2 cm

4 cm

3 cm

3 cm

3 cm

4 cm

3 cm

2,5
cm
2 cm

4,5
cm
3,5
cm
1 cm

3 cm

2,5Cm

3,5 cm

3 cm

3 cm

2,5 cm

2,5m

2,5 cm

2 cm

1,5
cm
2 cm

1,8cm

1 cm

1 cm

2 cm

3 cm

2,5
cm
1,8
cm
3,5
cm
3 cm

2 cm

2 cm

3 cm

1,5 cm

2 cm

2 cm

0,2
cm

4 cm

2 cm

3,8 cm

2,5 cm

0, 3
cm

3,5
cm
0,5
cm

3 cm

2,5 cm

2cm

2,5 cm

2 cm

2 cm

3 cm

4 cm

2 cm

0,5 cm

3 cm

2 cm
2,5 cm

2 cm
2 cm

4 cm
4 cm

2 cm
4 cm

2 cm
3,5 cm

2 cm
2,5 cm

14

3,5
cm
1,8
cm
2 cm
1,5
cm
3 cm

2 cm

2 cm

4 cm

3 cm

15

2,8

4 cm

3 cm

4,5
cm
2 cm

3 cm

2 cm

3,5
cm
2,5 cm

10
11
12
13

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cm
2 cm
1,5
cm
2 cm

16
17

2,5 cm
3 cm

2 cm
2 cm

4 cm

3,5 cm
2,5 cm

3,5 cm
2 cm

3 cm
2,5 cm

18
0,5 cm
4 cm
3 cm
19
3 cm
20
PROM
1,47
1,93
2,49
49,3
2,26
2,00 3,59
3,03
2,64
2,59
EDIO
DESVI 0,722 1,128 0,667 0,9234 0,5337 0,46 1,020 0,6745 0,7632 0,5372
ACION 84161 79662 27913 4385
8504
291
1103 85324 2758
1778
ESTAN
DAR
PORCENTAJE DE INHIBICION EN LA DEL CRECIMIENTO DE LA RADCULA Y DEL
HIPOCOTILO
%Inhibicin radcula
R1

12942,9%

R2

134,6%

R3

117,5%
%Inhibicin hipocotleo

R1

84,3%

R2

73,4%

R3

72,02%

PROMEDIO DE INHIBICIN EN LA GERMINACIN


MUESTRA CONTAMINADA
VARIABLE
NUMEROS DE
SEMILLAS
GERMINADAS

M-R1

M-R2

M-R3

18

19

17

PROMEDIO SG

CONTROL NEGATIVO

18

PORCENTAJE DE INHIBICION DE LA GERMINACION


% Inhibicin
germinacin
M-R1
M-R2
M-R3

163,6363636
172,7272727
154,5454545

CONTROL POSITIVO
11

10

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ANALISIS DE RESULTADOS

Observando los resultados podemos ver que el porcentaje de germinacin para el control
positivo fue de un 45%, para el control negativo fue de un 55%, para la muestra R1 es de un
90%, para la R2 es de un 95% y para la R3 es de un 85% con un promedio de germinacin del
74%, lo que permite evaluar la fitotoxicidad existente en el control positivo por la presencia de la
sal, las muestras que se escogieron se dio ms la germinacin de la semilla de la lechuga.
A pesar que el agua que se escogi para el estudio aunque no es apta para el consumo
humano puede que haya gran presencia de micronutrientes por lo que se produce una gran
germinacin mucho mejor que en el control negativo.

CONCLUSIONES

Se reconoci los tipos de bioensayo y bioindicadores


Se observ que a pesar que el agua que se escogi para el estudio aunque no es apta para
el consumo humano puede que haya gran presencia de micronutrientes por lo que se
produce una gran germinacin mucho mejor que en el control negativo
Se observ la fitotoxicidad existente en el control positivo por la presencia de la sal.

BIBLIOGRAFIA

Camelo, E. (2011). Mdulo de toxicologa ambiental. Bogot. Escuela de Ciencias


Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente ECAPMA, Universidad Nacional Abierta y a
Distancia.
Ramrez, P. y Mendoza, A. (Compiladoras). (2008). Ensayo de toxicidad aguda con semillas
de lechuga Lactuca sativa L. Ensayos toxicolgicos para la evaluacin de sustancias
qumicas en agua y suelo La experiencia en Mxico. 17 57. Instituto Nacional de Ecologa.
Mxico.

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ANEXO
TOMA DE LA MUESTRA

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