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Universidad de Puerto Rico Departamento de Biología Biología Organismal Vegetal

LABORATORIO 10. LA CÉLULA VEGETAL Y TEJIDOS VEGETALES

OBJETIVOS Después de finalizado el trabajo en el laboratorio los estudiantes estarán preparados para realizar las siguientes tareas:

Describir y explicar la Teoría Celular y su importancia en Botánica.

Describir y explicar las funciones de los principales organelos en una

célula vegetal tales como: núcleo, membrana celular, pared celular, mitocondria, membrana nuclear, complejo de Golgi, plasmodesmata, vacuolas, cristales, granos de almidón y cloroplastos entre otros. Distinguir entre una célula vegetal y una célula animal tomando en

consideración los organelos principales. Identificar los organelos principales basándose en los procedimientos

histológicos básicos que realizarán en el laboratorio. Preparar cortes de tejidos vegetales y montajes húmedos para ser

estudiados bajo el microscopio. Identificar las células y tipos de tejidos vegetales.

Conocer la función de los diferentes tejidos vegetales.

Diferenciar morfológica e histológicamente los diferentes tejidos vegetales.

ESPECIMENES A EXAMINAR

Tipo de Material

Especimenes y/o Reactivos

Microscopio Compuesto

 

Microscopio de Disección

 

Laminillas

 

Cubreobjetos

 

Papel de Lente

 

Equipo de Disección

 

Tintes

Safranina, Rojo Neutral, Lugol (I 2 KI), Janus Green B,

Reactivos

Agua destilada, Solución de sucrosa al 7%,

Material Vegetal Fresco

Elodea canadiensis (Elodea), Rhoeo Allium (cebolla) Solanum (papa) Capsicum (pimiento) Lycospergicum (tomate)

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Anana (piña), Begonia (begonia) Tillandsia (nido de gungulen), Apium (Apio - Celery), Pyrus (Pera), Rhoeo, Ananas sativus (Piña), Podocarpus, Ficus, Miramelinda Coleus, Commelina elegans (cohítre),

Laminillas preparadas

Medicago (Alfalfa), Cucúrbita, Tilia, Tricomas Tallo de monocotiledónea y dicotiledónea, Escléridas (sclerids)

REFERENCIA ADICIONAL

Texto

Raven P.H., Evert R.F. & S.E Eichhorn. 2005. Biology of Plants 7 th Edition. Worth Publishers New York, New York

Van De Graaff, K., S.R. Rushforth, J.L. Crawley 2004. A Photographic Atlas for the Botany Laboratory, 3rd Edition, Morton Publishing Co, USA

Stern, K. R. 2000. Introductory Plant Biology: Laboratory Manual. 9 th Ed. McGraw-Hill Company. USA

Evert, R., S.E. Eichhorn, J.B.Perry. 2005. Laboratory Topics in Botany. Worth Publishers New York, New York

http://www.cellsalive.com/cells/plntcell.htm

http://micro.magnet.fsu.edu/cells/plantcell.html

http://biodidac.bio.uottawa.ca/

http://www.cas.muohio.edu/~mbi-

ws/microscopes/microscopeparts.html

http://shs.westport.k12.ct.us/mjvl/biology/microscope/microscope.htm

http://biologycorner.com/microquiz/

LA CÉLULA VEGETAL: ESTRUCTURA Y FUNCION

La célula es la unidad básica de la que están compuestos todos los organismos vivos. La célula posee una membrana que contiene el protoplasma o material vivo. El protoplasma consiste del núcleo, con su material genético y el citoplasma con una variedad de organelos. La teoría celular establece que:

todos los organismos vivos están compuestos de células;

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la célula es la unidad viviente básica; todas las células provienen de células pre-existentes.

Se conocen dos tipos de células: procariotas y eucariotas. Las procariotas son aquellas carecen de un núcleo verdadero y organelos endomembranosos, son simples en su organización y en el sentido evolutivo son más primitivas. Entre los organismos procariotas se pueden mencionar las bacterias y eubacterias. Por el contrario, las eucariotas poseen núcleo, organelos endomembranosos e incluyen organismos tales como protistas, hongos, plantas y animales.

La célula vegetal se diferencia de la animal principalmente por la presencia de pared celular, vacuola y plastidios. La pared celular se compone de celulosa y entre sus funciones se encuentran las de brindar protección y dar forma a la célula. La vacuola es el centro de almacenamiento de los desechos de la célula. También puede contener un pigmento llamado antocianina que son los que le dan el color azul, violeta o rojo a algunas partes de la planta (Ej. Uvas). Los plasmidios son un grupo de organelos entre los que se encuentran los cloroplastos, cromoplastos y leucoplastos. Cada uno tiene funciones específicas y se caracterizan por tener diferentes pigmentos o ninguno. En los cloroplastos se lleva a cabo la fotosíntesis y se encuentra el pigmento clorofila que le da el color verde a las plantas. En los cromoplastos se encuentran los pigmentos carotenoides que le dan el color amarillo, anaranjado o rojo a algunas partes de la planta (Ej. fruta de la planta de pimiento, zanahoria, etc.). Los leucoplastos no poseen pigmentos pero en estos se lleva a cabo síntesis de carbohidratos, lípidos y proteínas.

EJERCICIO A – ORGANELOS CELULARES Y CICLOSIS

1. Con ayuda de un pinza, obtenga una hoja de la planta acuática Elodea que haya sido previamente tratada con el tinte vital Janus Green B y que haya estado reposando al sol o cerca de una fuente de luz por aproximadamente 15 minutos. Coloque la hoja de la Elodea con una gota de agua en la laminilla y cubra con un cubreobjetos. Observe los cloroplastos, núcleo, pared celular y el proceso de ciclosis.

En el montaje húmedo que usted acaba de realizar se observan líneas oscuras alrededor de las células; estas líneas se llaman espacio intercelular que generalmente contiene aire y justo ahí se encuentra la lamela media.

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Célula vegetal y Tejidos Vegetales ©UPR-RP 2010 Página 4 Identifique: pared celular, vacuola central, cloroplastos,

Identifique: pared celular, vacuola central, cloroplastos, núcleo. ¿Mencione el nombre del movimiento que llevan a cabo los cloroplastos alrededor del borde interno de la célula?

EJERCICIO B – CÉLULAS DE CEBOLLA

1. Corte una cebolla roja en cuartos y remueva una de las hojas internas. Coloque este tejido epidermal en una laminilla, añada una gota de agua y colóquele un cubreobjetos. Observe por el microscopio. Tiña las células de la cebolla colocando una gota de 0.1% de rojo neutral en el borde del cubreobjetos y permita que se difunda sobre la cebolla. Deje teñir por 10 minutos. Cuidadosamente observe e identifique la vacuola central y el citoplasma.

2. En una laminilla limpia mezcle 2 gotas de Janus Green B con una gota de sucrosa al 7%. Prepare una pieza fina de la epidermis de la cebolla y colóquela sobre la solución. Colóquele el cubre objetos. Observe la periferia de la célula para localizar las mitocondrias teñidas, estas aparecerán como esferas azules de 1µm de diámetro.

estas aparecerán como esferas azules de 1µm de diámetro. Identifique las estructuras que se observan con

Identifique las estructuras que se observan con cada uno de los tintes utilizados.

3. Prepare otro montaje húmedo con tejido epidermal de cebolla, tíñala con safranina, observe el núcleo y pared celular.

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EJERCICIO C – PARED CELULAR

1. Prepare un montaje húmedo de cutícula de tomate y examine la pared primaria. Observe que la misma está altamente engrosada. Localice la lamela media, que se observa como una línea opaca entre las paredes celulares. Identifique las plasmodesmatas, estas son líneas que ocurren perpendiculares a la lamela media y conectan los protoplastos de células adyacentes.

plasmodesmata
plasmodesmata

plasmodesmata

EJERCICIO D- CÉLULAS PARENQUIMÁTICAS DE PAPA Y LEUCOPLASTOS

1. Utilizando una navaja haga un corte fino de papa y estudie en el microscopio.

Agregue I 2 KI (o Lugol) y con un pedazo de papel toalla a un lado del cubreobjeto (opuesto al lugar donde añadió el I 2 KI) remueva agua tal que el I 2 KI substituya en agua debajo del cubreobjetos. Observe los granos de almidón antes y después de teñir y con polaroids. ¿Cómo cambia la apariencia del almidón al añadirle I 2 KI?

Papa teñida con Lugol mostrando gránulos de almidón y cromoplastos de pimiento
Papa teñida con Lugol mostrando gránulos de almidón y cromoplastos de pimiento

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EJERCICIO E - CROMOPLASTOS

1. Utilizando una navaja prepare un corte fino de pimiento rojo. Colóquelo en una laminilla, añada una gota de agua, cubra con un cubreobjetos y observe en el microscopio. Examine la estructura celular y localice los cromoplastos. Determine la forma, tamaño y color de los mismos.

EJERCICIO F- CRISTALES (RAFIDESO Y DRUSAS) 1. Tome una muestra de piña macerada espárzala sobre una laminilla y añada una gota de agua. Observe en el microscopio e identifique cristales en forma de aguja, rafideos. Estos cristales están hechos de oxalato de calcio. Repita el procedimiento con cáscara de guineo y con el tallo de Begonia.

Rafideos y Drusas
Rafideos y Drusas
Rafideos y Drusas

Rafideos y Drusas

EJERCICIO G- ESTOMAS Y ANTOCIANINAS 1. Prepare un montaje húmedo con la epidermis inferior (parte color violeta) de la hoja de Rhoeo y observe los estomas con cloroplastos, vacuola teñida con antocianinas, y ciclosis.

Estoma en montaje de Rhoeo
Estoma en montaje de Rhoeo

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TEJIDOS VEGETALES

INTRODUCCIÓN

En organismos multicelulares, las células forman tejidos, los cuales consisten de agregaciones de células que llevan a cabo una función específica. Cuando los tejidos de las plantas están compuestos por un solo tipo de células se conocen como tejidos simples (Tabla 1), ejemplo de esto es el tejido de parénquima que está compuesto de células parenquimatosas solamente. Cuando existen varios tipos de células interactuando entre si se consideran tejidos complejos; por ejemplo el tejido del xilema. Este está compuesto de elementos traquearios (vasos y traqueidos); parénquimas (almacenan diversas sustancias); fibras (pueden estar vivas en la madurez y servir la función de almacenamiento y soporte); y esclereidas (soporte). En el cuerpo de una planta, encontramos los siguientes tipos de sistemas de tejidos:

SISTEMAS DE TEJIDOS EN LAS PLANTAS

a. tejido fundamental: estos tejidos proveen soporte, capacidad de regeneración y reparación de tejidos, almacenaje, fotosíntesis y respiración;

b. tejido vascular: encargado de transportar agua, nutrientes y azúcares a través del cuerpo de la planta;

c. tejido dermal: provee protección a la planta contra desecación y patógenos.

Tabla 1: CÉLULAS QUE COMPONEN TEJIDOS EN EL CUERPO VEGETATIVO

TIPO DE

CARACTERÍSTICAS

LOCALIZACIÓN

FUNCIÓN

CÉLULA

PARÉNQUIMA

Forma:

Toda la planta :

Fotosíntesis. Almacenamiento de productos metabólicos; transporte, síntesis, Secreción:

poliédrica(varios lados)

corteza, médula,

y

variables

xilema, floema, semillas, frutos y rayos de xilema

Pared: Primaria, y en algunos casos primaria

y

secundaria

secundario.

Vivas en su madurez

regeneración de

tejido.

COLÉNQUIMA

Forma: elongada Pared primaria no

Debajo de la epidermis en tallos jóvenes en elongación. En las

Soporte de partes jóvenes de la planta

lignificada con engrosamiento irregular

y

con alto contenido de

venas de algunas hojas como un tejido cilíndrico. Pecíolo de hojas y flores.

 

pectina

Vivas en su madurez

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ESCLERÉNQUIMA

     

Fibras

Forma: muy largas Pared: primaria secundaria engrosada, pared secundaria lignificada. Casi siempre muertas en su madurez

Algunas veces en la corteza de tallos, mayormente asociadas con xilema y floema, en hojas de monocotiledóneas

Soporte y almacenamiento

Esclereidas

Forma: variable y más cortas que las fibras forma la cáscara de muchas semillas y pueden darle a ciertas frutas su textura característica. Por ejemplo las peras Pared: primaria secundaria engrosada, pared secundaria lignificada Vivas o muertas en su madurez

En toda la planta

Mecánica y

protección

EJERCICIO A- SISTEMAS DE TEJIDOS VEGETALES

1. Realice un corte transversal fino del tallo de Coleus. Coloque el corte en una placa Petri con alcohol al 50% por 5 minutos. Después, pase la muestra a otra placa Petri con Azul de Toludieno y déjela reposar allí por 2 minutos. Posteriormente lave su muestra con agua destilada. Para montar la laminilla, coloque una gota de solución de glicerina (glicerol); añada el corte teñido y luego cubra con un cubreobjetos. Observe en el microscopio e identifique el tejido dermal (epidermis); tejido vascular (xilema y floema) y tejido fundamental (corteza, médula). Identifique los tejidos utilizando los diagramas que aparecen en su libro de texto y manual del laboratorio (Atlas). Repita el procedimiento con el tallo de Commelina elegans (cohítre). Compare ambos tallos, realice los diagramas e identifique las estructuras en una hoja de papel suelta, la cual entregará a su instructor con las laminillas.

EtOH 50% Azul de Toludieno H 2 O
EtOH 50%
Azul de
Toludieno
H 2 O

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EJERCICIO B- TIPOS DE TEJIDOS Y LAS CÉLULAS QUE LOS COMPONEN

1. Epidermis. Utilizando las laminillas (preparadas y recién realizadas) de Impatiens (Míramelinda) y Medicago (alfalfa); observe la epidermis, cutícula, estomas y células guardianas.

2. Prepare dos montajes húmedos utilizando cortes transversales de hojas de Ficus. Identifique las células de xilema y floema. A una laminilla añadale una gota de xyleno (solicite al instructor) y luego tiña con Safranina, a la otra laminilla añadale Sudan IV. Observe la cutícula y la epidermis.

3. Estomas. Prepare una laminilla con la epidermis inferior de la hoja de Rhoeo y observe las estomas. Haga otra laminilla con la epidermis superior y compare el número de estomas, posición, distribución y arreglo especial si alguno.

4. Tricomas. Prepare una laminilla de tricomas (células alargadas, modificación de la epidermis) e identifique las mismas. Tome una hoja de Tillansia y raspe la superficie con un bisturí, añada una gota de agua, coloque el cubre objeto y observe. ¿Qué función llevarán a cabo estas células?; ¿Cómo se diferencian de las otras células que conforman otros tejidos vegetales? Mencione dos organismos que posean estas células.

5. Colenquima y parenquima. Prepare una laminilla del pecíolo de Apium (Apio- Celery) y tiña con azul de Metileno; lave la muestra con agua y haga un montaje húmedo similar al que realizó en el ejercicio I con el tallo de Impatiens o Coleus. Identifique las células de colénquima y parénquima.

6. Aerénquima. Haga un montaje húmedo utilizando un corte transversal de la hoja de piña. Identifique las células de aerénquima.

7. Esclerenquima.

Prepare una laminilla de la pulpa macerada del fruto de Pyrus (Pera) y observe las esclereidas (Esclerénquima) (Puede teñir con floroglucinol). Compare con la laminilla preparada de escléridas (sclerids). ¿Qué forma tienen estas células?; ¿En qué otras partes de la planta se pueden encontrar?; ¿Qué función llevan a cabo en la planta y/o en el fruto?; ¿Cómo se diferencian de las otras células?

En adición observe las fibras en la laminilla preparada de Tilia.

Realice un corte transversal de la hoja de Podocarpus y tiña con azul de metileno para observar las esclereidas, las cuales se encuentran en una posición subepidermal.

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8. Tejido Vascular. En la laminilla preparada de Cucurbita, observe el floema bicolateral y los elementos del vaso. ¿Cómo compara el xilema y floema del tallo de Impatiens con el observado en Cucurbita? Localice e identifique los tubos cribosos (en algunas laminillas se pueden observar las células acompañantes de un color más oscuro) y los engrosamientos de la pared de los vasos del xilema. ¿Cómo comparan los elementos del vaso y el floema bicolateral con otros elementos de los tejidos vegetativos como por ejemplo el xilema, esclereídas, etc.?

9. Prepare dos montajes húmedos utilizando cortes transversales de hojas de Ficus. Identifique las células de xilema y floema. A una laminilla añádale una gota de xyleno (solicite al instructor) y luego tiña con Safranina, a la otra laminilla añádale Sudan IV. Observe la cutícula y la epidermis.

TÉRMINOS IMPORTANTES

Ciclosis (Elodea, Rhoeo, Tradescantia) Vacuolas (Rhoeo) Estomas (Rhoeo) Pared celular (Elodea, Allium) Núcleo (Elodea, Allium) Parénquima (Solanum, Capsicum, Daucus)

Plastidios Leucoplastos (Solanum) Cromoplastos (Daucus, Capsicum) Cloroplastos (Elodea, Rhoeo) Antocianinas Carotenoides Clorofila

SISTEMA DE TEJIDO

TIPO DE TEJIDOS

CÉLULAS

Tejido dermal

Epidermis Cutícula Estomas Células guardianas Tricomas

 

Tejido fundamental

Parénquima

 

Colénquima

Esclerénquima

Aerénquima

Esclereidas

Fibras

Tejido vascular

Xilema

Elementos del vaso Traqueadas

Floema

Elementos del tubo criboso o Células del tubo criboso Células acompañantes

Procambium Cambium vascular