02-Conceptos de Biopelicula y Bioensuciamiento

UNIDAD 2
CONCEPTOS DE BIOPELCULA Y BIOENSUCIAMIENTO
Introduccin y Objetivos de la Unidad

Esta Unidad pretende recoger los aspectos relacionados con el proceso de
formacin de las Biopelculas y las consecuencias, positivas y negativas, de su
desarrollo sobre los materiales.
Los objetivos de la Unidad son:
Conocer el concepto de Biopelcula y los actores que intervienen en su

formacin.
Reconocer cada una de las fases en las que puede dividirse el desarrollo
de una Biopelcula.
Comprender la importancia de las Sustancias Polimricas Extracelulares

(EPS) en las propiedades biolgicas y fisicoqumicas de las Biopelculas.
Percibir la seal de qurum como mecanismo de comunicacin entre las

clulas de la Biopelcula.
Entender los fenmenos de intercambio gentico dentro de la

Biopelcula.
Conocer las ventajas del crecimiento microbiano en forma de

Biopelcula.
Distinguir algunos aspectos positivos y negativos del desarrollo de

Biopelculas sobre los materiales
ndice de la Unidad
1. Concepto de Biopelcula
1.1. Definicin de Biopelcula
1.2. Microorganismos formadores de Biopelculas
2. Fases de formacin de la Biopelcula
2.1. Fase de transporte a la superficie
2.2. Fase de adhesin inicial
BIMA-Biodeterioro y Biodegradacin de Materiales. ETSII-UPM. Diego A. Moreno y Ana M. Garca
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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento
2.3. Fase de consolidacin de la adhesin (Fase de Attachment)

2.4. Fase de colonizacin
2.5. Fase de desprendimiento (Fase de Detachment)
3. Las Sustancias Polimricas Extracelulares (EPS, Extracellular Polymeric
Substances)
3.1. Definicin de EPS
3.2. Composicin de las EPS
4. Seal de Qurum o Quorum Sensing
5. Intercambio gentico entre las clulas de la Biopelcula
6. Propiedades de las Biopelculas
7. Consecuencias del desarrollo de Biopelculas
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1. Concepto de Biopelcula
Puede resultar ms o menos familiar el trmino Biopelcula, en ingls biofilm,
pero nuestra vida cotidiana est rodeada de estas estructuras: La placa que se forma en
los dientes, la pelcula que cubre los alimentos cuando no se conservan de forma
adecuada, la capa resbaladiza sobre las piedras de los ros, la capa verde que cubre las
piedras de muchos edificios (Figura 1) y que resulta a veces tan decorativa, Tambin
encontramos Biopelculas en intercambiadores de calor, en tuberas, en los cascos de los
barcos, etc.
Figura 1. Fotografa de una Biopelcula creciendo sobre pared de un edificio de piedra.
1.1. Definicin de Biopelcula

El concepto de Biopelcula se define segn Characklis y Marshall (1990)
como un Conjunto de clulas inmovilizadas en un sustrato y embebidas en una matriz
exopolimrica de origen microbiano que las mantiene unidas junto a otras sustancias
del medio en que se encuentran.
Los biofilms o Biopelculas estn formadas por millones de microorganismos
que se acumulan en las superficies en ambientes hmedos. Estos organismos
formadores de pelculas excretan una sustancia pegajosa, las sustancias polimricas
extracelulares, conocida como EPS (del ingls Extracellular Polymeric Substances),
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que les permite adherirse a los materiales ya sean metales, plsticos, partculas del
suelo, tejidos animales, etc. Y adems los biofilms pueden atrapar partculas del medio
que los rodea como nutrientes, materia orgnica en suspensin, precipitados minerales,
clulas muertas, y microorganismos libres, lo que aumenta el volumen y la diversidad
biolgica del propio biofilm.
1.2. Microorganismos formadores de Biopelculas

Las Biopelculas pueden estar formadas por un nico tipo de microorganismos e
incluso por una nica especie bacteriana, o pueden ser el resultado de la interaccin de
diferentes especies bacterianas o de distintos grupos de organismos, que es lo ms
habitual en la naturaleza. Por ejemplo, si consideramos la Biopelcula que se forma
sobre la superficie sumergida de un barco, se produce una sucesin escalonada de
grupos microbianos que se inicia con microalgas y posteriormente bacterias, que
aportan el sustrato sobre el que se asientan otros organismos superiores como moluscos
y crustceos. Mientras que en las personas afectadas por fibrosis qustica es muy
frecuente encontrar Biopelculas formadas por una nica especie bacteriana,
Pseudomonas aeruginosa, sobre los pulmones de los enfermos.
Los tipos de microorganismos presentes en las Biopelculas dependen del
ambiente que envuelve a dicha Biopelcula, y los factores que caracterizan dicho
ambiente son el tipo y la cantidad de nutrientes presentes, la naturaleza del sustrato
sobre el que se asentar la Biopelcula, la disposicin de la Biopelcula (donde el
transporte de nutrientes y de O2 puede ser limitante), la temperatura, etc. Las algas, por
ejemplo, son componentes importantes de los biofilms que se encuentran expuestos a la
luz, como los que aparecen sobre las rocas en las corrientes de ros, y los hongos
acuticos son los principales colonizadores de estructuras de madera sumergidas. Pero
las bacterias son, sin duda, los colonizadores primarios de las interfases slido-lquido y
normalmente constituyen la parte dominante en la mayora de los biofilms.
2. Fases de formacin de la Biopelcula

Independientemente de cual sea el microorganismo implicado, el proceso de
formacin de una Biopelcula es bastante similar en todos los casos y comienza con la
llegada de las clulas al lugar donde se va a establecer el biofilm. Una vez all, las
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clulas empiezan a colonizar la superficie y forman microcolonias. Mediante la

incorporacin de nuevas clulas del medio (planctnicas) y procesos de divisin celular,
las microcolonias van aumentando de tamao y rodendose de una matriz extracelular
que les permite sostener esta estructura en formacin. Dicha estructura se conoce con el
nombre de macrocolonia, y varias macrocolonias constituyen un biofilm maduro. A
partir de este biofilm maduro se pueden desprender clulas, que recuperan su estado
planctnico haciendo del desarrollo del biofilm un proceso dinmico. En la Figura 2 se
representan de forma esquemtica las 5 fases en que puede dividirse el proceso de
formacin de un biofilm, tal y como describe el Center for Biofilm Engineering de la
Universidad de Montana, en Bozeman (USA).
Figura 2. Esquema del proceso de formacin de una Biopelcula: 1 Fase de transporte a la

superficie, 2 Fase de adhesin inicial, 3 Fase de attachment, 4 Fase de colonizacin, 5 Fase de
dettachment.
2.1. Fase de transporte a la superficie

En los primeros momentos de la formacin de la Biopelcula una serie de
molculas son depositadas sobre la superficie donde se desarrollar la misma, de modo
que quedar cubierta por una capa de molculas orgnicas y protenas, agua y sales
disueltas, propias del medio donde se encuentra inmersa. Esta mezcla de agua, iones,
sales y protenas es lo que se denomina el sustrato condicionante en la formacin de la
Biopelcula, y est presente antes de la llegada de los primeros microorganismos.
Los microorganismos planctnicos llegan a la superficie por diferentes motivos:
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movimientos Brownianos, a travs de flagelos, gravedad, por difusin, etc. En algunas

ocasiones los microorganismos llegan en forma de agregados a la superficie que van a
colonizar procedentes, por ejemplo, de fragmentos desprendidos de otras Biopelculas
maduras.
TRANSPORTE A LA SUPERFICIE
Formacin del sustrato condicionante
Llegada de los microorganismos: Gravedad, Difusin, Movimientos
Brownianos, Cilios y Flagelos, Agregados,
En bacterias Gram-negativas (Pseudomonas aeruginosa, Vibrio cholerae,

Escherichia coli, Salmonella enterica) se ha visto que los flagelos y las fimbrias son
importantes para la etapa de adherencia primaria. La motilidad parece que ayuda a la
bacteria a alcanzar la superficie y contrarrestar las repulsiones hidrofbicas. Sin
embargo, aunque la motilidad ayuda al proceso no parece ser un requisito esencial, pues
muchas bacterias Gram-positivas inmviles como estafilococos, estreptococos y
micobacterias son capaces de formar biofilms. En el caso de las bacterias Grampositivas se ha descrito la participacin de protenas de superficie (AtlE, Bap, Esp) en
esta primera etapa.
2.2. Fase de adhesin inicial

El segundo paso se caracteriza por una adhesin reversible de los
microorganismos al sustrato condicionante. La naturaleza de dicho sustrato desempea
un papel muy importante en la adhesin inicial. En general, la adhesin microbiana
aumenta al aumentar la rugosidad de la superficie. El pH y la fuerza inica del medio
tambin afectan a la adhesin al sustrato as como la concentracin de ciertos cationes
(calcio, hierro, magnesio) o nutrientes. Estas interacciones iniciales entre las clulas
microbianas y el sustrato estn dominadas en parte por fuerzas electrostticas, de
manera que la carga total de la superficie bacteriana, que depende de su composicin, es
un factor importante. Tambin juegan un papel interesante las fuerzas hidrofbicas e
hidroflicas de manera que aquellas bacterias con superficies hidrofbicas se unirn
mejor a sustratos hidrofbicos (como el plstico) y las hidroflicas a sustratos
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hidroflicos (como el cristal). Pero hay que tener en cuenta que la superficie bacteriana
no es homognea y que puede presentar zonas de diferente naturaleza y, de la misma
manera, el sustrato puede sufrir modificaciones en sus propiedades qumicas. Si las
condiciones del medio no resultan ptimas para el desarrollo del biofilm, las bacterias
pueden desprenderse y volver al estado planctnico, buscando otros lugares ms
apropiados.
ADHESIN INICIAL
Naturaleza del sustrato
Condiciones del medio: pH, fuerza inica, cationes, nutrientes
Fuerzas Electrostticas: carga total de la superficie bacteriana
Fuerzas Hidrofbicas e Hidroflicas
2.3. Fase de consolidacin de la adhesin (Fase de Attachment)

El tercer paso implica la unin irreversible entre el microorganismo y el
sustrato. Esta unin es ms estable y a travs del eje longitudinal de la clula, y no
mediante un nico polo como la unin reversible. En la transicin de la unin reversible
a irreversible parece que se encuentran implicados varios genes. En Pseudomonas
fluorescens se ha identificado el locus lap (del ingls large adhesin protein) formado
por un conjunto de genes responsables de esta unin irreversible de las clulas al
sustrato.
En esta fase se forman microcolonias que van aumentando su tamao mediante
procesos de multiplicacin de las clulas antiguas y de las que se van incorporando
desde el medio. Las clulas comienzan a segregar Sustancias Polimricas
Extracelulares (EPS) y quedan englobadas en una matriz protectora, dando al conjunto
mayor cohesin y fuerza de unin. Esta matriz contribuye a muchas de las
caractersticas estructurales y funcionales del biofilm maduro.
CONSOLIDACIN DE LA ADHESIN
Multiplicacin de los microorganismos
Secrecin de Sustancias Polimricas Extracelulares
Formacin de Microcolonias
Unin de los microorganismos entre s y con la superficie
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2.4. Fase de colonizacin

Se produce el crecimiento de las microcolonias, formndose macrocolonias, con
mayor nmero de clulas, donde hay mayor heterogeneidad metablica y fisiolgica. La
estructura final de la macrocolonia se describe, en el grupo de las Pseudomonas, como
un champin de bordes bien definidos y el conjunto de championes y los canales
que los separan es lo que se conoce como biofilm maduro (Figura 3).
Agua
Desprendimiento
Macrocolonias
Canales
Figura 3. Biofilm maduro. A, Esquema propuesto por el Center for Biofilm Engineering,
Montana State University, Bozeman (USA). B, Micrografa Electrnica de Barrido de un biofilm
maduro sobre un acero inoxidable inmerso en una piscina de combustible nuclear gastado
(Laboratorio de Biodeterioro-UPM)
Se piensa que los canales son una forma de aumentar el rea superficial del
biofilm para facilitar la captura de nutrientes y eliminar las sustancias de desecho. Una
vez formado, el mantenimiento de este biofilm maduro requiere procesos de
diferenciacin celular que permiten a las clulas organizarse estructuralmente y
distribuir las actividades metablicas entre las distintas clulas que forman el consorcio.
Para ello, los microorganismos ssiles expresan genes que no lo hacan cuando estaban
en estado planctnico.
2.5. Fase de desprendimiento (Fase de Detachment)

En cualquier momento durante la formacin del biofilm, se pueden producir
desprendimientos de microorganismos o de pequeos fragmentos que pasan al medio y
son transportados a otras zonas, fenmeno conocido como desorcin o dettachment.
La liberacin de las bacterias desde el biofilm es el proceso que menos se
conoce. En Actinobacillus actinomicetecomitans se ha descrito una actividad
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enzimtica, denominada dispersina que degrada de forma especfica EPS de la matriz

del
biofilm.
La
presencia
en
distintos
genomas
de
hipotticas
protenas
(endoglucanasas), que podran ser responsables de una funcin similar, sugiere que la
degradacin controlada de EPS puede representar un mecanismo controlado de
liberacin de bacterias del biofilm.
DESPRENDIMIENTO
Liberacin de microorganismos o fragmentos de Biopelcula
Degradacin de la matriz de EPS
En todas estas fases, como veremos ms adelante, es necesario un alto grado de

interaccin celular donde se hayan implicados mecanismos de comunicacin clulaclula a travs de diferentes seales qumicas conocidas como seales de qurum
(Figura 4).
Comunicacin clula-clula
Figura 4. Esquema de la comunicacin entre clulas de un biofilm.

(Center for Biofilm Engineering, Montana State University,
Bozeman (USA))
El siguiente enlace da acceso al Center for Biofilm Engineering de la

Universidad de Montana, en el que se pueden encontrar videos muy interesantes sobre
la formacin de Biopelculas:
http://www.erc.montana.edu/Res-Lib99-SW/Movies/Database/MD_DisplayScript.asp
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3. Las Sustancias Polimricas Extracelulares (EPS, Extracellular

Polymeric Substances)
3.1. Definicin de EPS
Uno de los factores clave en la estructura de la Biopelcula son las Sustancias
Polimricas Extracelulares (EPS). stas proporcionan una matriz viscosa en la que se
localizan las clulas y actan como una capa protectora frente a agentes potencialmente
peligrosos, as como una fuente de carbono y energa en condiciones limitantes (Figura
5). Son consideradas las principales responsables de las propiedades biolgicas y
fisicoqumicas de los biofilms. Su proporcin en los biofilms puede variar entre el 50%
y el 90% del contenido total en materia orgnica.
Figura 5. Biopelcula microbiana sobre acero inoxidable,

Microscopa de Epifluorescencia, LIVE/DEAD Bacterial
Viability Kit (Laboratorio de Biodeterioro-UPM)
La produccin de EPS es una propiedad general de los microorganismos tanto

procariotas (bacterias) como eucariotas (algas y hongos) en ambientes naturales. Los
EPS son polmeros biosintticos o biopolmeros. Fueron definidos por Geesey (1982)
como sustancias polimricas extracelulares de origen biolgico que participan en la
formacin de agregados microbianos. Otra definicin dada por Characklis y Wilderer
(1989) los considera polmeros orgnicos de origen microbiano y que, en los biofilms,
son responsables de la cohesin entre las clulas y otras partculas del medio as como
de la unin de esta estructura al sustrato.
Los primeros estudios sobre la estructura de los biofilms mostraron a los
polisacridos como los componentes mayoritarios de las EPS, pero hoy da se sabe que
las protenas y los cidos nucleicos as como los fosfolpidos son componentes
importantes e incluso a veces predominantes en las EPS de muchos biofilms. Adems la
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composicin de la matriz de EPS es dinmica y depende de varios parmetros. Bajo

determinadas circunstancias las clulas van a reaccionar e influir en el ambiente fsico y
qumico que las rodea secretando macromolculas biolgicas especficas. Por otro lado,
el propio ambiente va a contener componentes de origen abitico y molculas
biolgicas derivadas de la lisis de clulas que pueden entrar a formar parte de la matriz.
Las EPS son macromolculas formadas por la polimerizacin de unidades
idnticas o similares que se repiten dentro de la molcula y que adems pueden contener
sustituyentes no polimricos de bajo peso molecular que alteran su estructura y
propiedades fsicoqumicas. Por definicin las EPS se localizan sobre o fuera de la
superficie celular independientemente de cual sea su origen, es decir, pueden ser
sintetizadas en el interior celular y despus ser secretadas activamente al exterior o
como se ha mencionado anteriormente pueden proceder de la lisis de otras clulas
circundantes y adsorcin desde el ambiente exterior. Adems pueden estar sometidas a
la degradacin activa por enzimas y a procesos de condensacin, siendo modificadas.
3.2. Composicin de las EPS

3.2.1. Polisacridos
Los polisacridos son polmeros formados por monosacridos que se unen
repetidamente mediante enlaces glucosdicos formando cadenas lineales o ramificadas.
Existen diversas clasificaciones de los polisacridos atendiendo a su qumica y
estructura. Los homopolisacridos estn constituidos por la repeticin del mismo
monosacrido, como la celulosa, formada por la repeticin sucesiva de molculas de
glucosa, mientras que los heteropolisacridos estn formados por diferentes
monosacridos o derivados de los mismos. Tambin pueden contener sustituyentes
orgnicos como piruvato y acetato, e inorgnicos, como el sulfato. Tanto la longitud de
la cadena como los patrones de sustitucin pueden variar dependiendo de la cepa
bacteriana y las condiciones de crecimiento. Basndose en la composicin qumica, la
especificidad antignica y la biosntesis, los polisacridos bacterianos se han dividido en
dos grupos, denominados polisacridos especficos y no-especficos. Los primeros son
polisacridos especiales tambin llamados antignicos porque poseen propiedades
inmunolgicas y son especficos de ciertas cepas bacterianas. Los constituyentes tpicos
de estos polisacridos son azcares habituales en la naturaleza como la glucosa,
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galactosa, manosa, N-acetil-glucosamina, cido glucurnico y galacturnico. La

especificidad de estos polisacridos reside no en los monosacridos que lo forman, sino
en la posicin y configuracin de las uniones glucosdicas. Los polisacridos noespecficos se encuentran en gran variedad de cepas bacterianas y son, por regla general,
estructuralmente diferentes y ms simples que los polisacridos especficos.
La forma de los polisacridos puede influir de manera muy importante en las
propiedades fsicas del biofilm. Existen tres conformaciones bsicas: esferas, en forma
de barra rgida (stiff rod) y hebras al azar (random coil). A estas formas bsicas hay que
aadir las formas de transicin. En el caso de las formas al azar se trata de hebras
simples que se enrollan de forma aleatoria. Sin embargo, las barras rgidas forman
cadenas y dobles hlices debido a la presencia de fuerzas electrostticas de repulsin
entre grupos cargados presentes a lo largo de la cadena, que dan lugar a una solucin
acuosa viscosa con propiedades de gel. Cambios en la composicin del solvente, en el
pH, en la temperatura, o en la adicin de sales inorgnicas pueden inducir la transicin
conformacional del polisacrido, y alterar las propiedades fsicas de la molcula. En
algunos casos, cationes como el calcio y el magnesio, pueden facilitar la gelacin
actuando como puentes inicos entre las hebras de polisacrido. La temperatura tambin
influye en la formacin de este gel, siendo las bajas temperaturas ms favorables para su
estabilizacin. Las propiedades fsicas de este gel son las responsables de muchos de los
fenmenos observados en las Biopelculas, debido a que esta estructura les confiere un
comportamiento viscoelstico.
Los alginatos constituyen un ejemplo de exopoliscaridos que se han estudiado
en profundidad debido a su relevancia como factor de virulencia en infecciones en
plantas, animales y en el hombre, as como por su potencial explotacin comercial.
Concretamente los alginatos producidos por la bacteria Pseudomonas aeruginosa se
conocen con gran precisin debido a que constituyen un factor de virulencia muy
importante en las infecciones crnicas de pulmn de pacientes afectados por fibrosis
qustica. Las bacterias inmersas en la matriz de alginato quedan protegidas de la defensa
inmune del husped provocando la destruccin del pulmn y finalmente la muerte del
enfermo.
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3.2.2. Protenas
Las protenas son otro componente importante de las EPS, pudiendo proceder de
clulas vivas o muertas. Entre las protenas que pueden desempear una funcin
importante en el biofilm destacan las lectinas y las liasas/polisacarasas. Las lectinas son
protenas que se unen irreversiblemente a estructuras especficas de los hidratos de
carbono mediante puentes de hidrgeno e interacciones hidrofbicas y aparecen con
frecuencia en animales, plantas y microorganismos. En las bacterias, muchas de ellas
parecen estar implicadas en la patognesis mediando en la adhesin especfica a la
clula del husped. En el biofilm, una funcin para estas protenas sera mediar la
adhesin de la clula a la matriz de EPS o a otras clulas de la comunidad del biofilm,
ya que estas molculas proteicas provocan la agregacin de clulas planctnicas. De
esta manera podran garantizar la proximidad fsica de una especie determinada
facilitando las interacciones metablicas entre diversos microorganismos.
Las liasas y polisacarasas tienen la capacidad de romper polisacridos para
originar oligosacridos de 2-5 unidades y estn implicadas en la biosntesis y utilizacin
de estos compuestos. En el contexto del biofilm se han propuesto varias funciones para
estas enzimas. Por ejemplo, la combinacin de varias liasas permitira la degradacin
completa de los exopolisacridos de la matriz de EPS proporcionando una fuente de
nutrientes a los microorganismos. Esta degradacin colectiva de polisacridos podra a
su vez modular el desprendimiento de las bacterias de la Biopelcula. Estas enzimas
tambin podran modificar las propiedades qumicas y fsicas de los polisacridos,
hacindolos por ejemplo ms hidrofbicos.
3.2.3. cidos Nucleicos

Los cidos nucleicos tambin son un componente importante de la matriz de
EPS, aunque su origen es incierto. Se pensaba que procedan fundamentalmente de
clulas muertas, pero hay estudios que sugieren que el ADN es un componente
estructural de la matriz en los primeros estadios del desarrollo de ciertos biofilms como
el de Pseudomonas aeruginosa (Whitchurch y cols., 2002). Una teora que se baraja,
aunque no est claramente demostrada, es que una gran concentracin de ADN
extracelular en la matriz de EPS junto con una alta densidad celular puede proporcionar
un escenario muy propicio para la transferencia horizontal de genes. En ciertos casos, la
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conjugacin se ha visto incrementada en los biofilms con respecto a poblaciones

planctnicas.
4. Seal de Qurum o Quorum Sensing

La teora de que existe un fenotipo especfico de Biopelcula como resultado
de una regulacin diferencial de los genes cuando las clulas se encuentran formando
parte de una Biopelcula de alta densidad est siendo cada vez ms respaldada. Las
seales celulares que controlan la transicin desde la clula planctnica a la comunidad
microbiana adherida a la superficie de un material deben ser estudiadas en profundidad
para poder comprender el fenotipo del biofilm.
La seal de qurum es un mecanismo de comunicacin clulaclula que se usa
para regular los procesos celulares dentro de una comunidad bacteriana de una forma
que depende de la densidad celular. La formacin del biofilm es un fenmeno regulado
por esta seal de qurum. El Quorum sensing (QS) se refiere a la capacidad de un
microorganismo para percibir la densidad poblacional mediante la generacin de seales
extracelulares, desarrollando como consecuencia una respuesta que tiene como objetivo
el comportamiento social coordinado. Este fenmeno, cuya existencia generalizada en el
mundo microbiano se ha descubierto en la ltima dcada, permite a las bacterias
comportarse como un organismo multicelular.
El trmino multicelular implica estar formado por varias clulas y que el
conjunto de clulas funcione como una entidad en la que se establecen seales entre las
diferentes clulas que forman el grupo para coordinar su actividad en beneficio de ste,
aunque esto suponga un sacrificio celular individual. Esta comunicacin intercelular
puede establecerse mediante un contacto fsico o a travs de seales qumicas. Y la
respuesta a esta comunicacin puede ser igualitaria, en la que todas las clulas
responden de la misma manera, o puede ser diferente de unas clulas a otras. Las
Biopelculas, aunque sean muy distintas, cumplen estas tres caractersticas de
multicelularidad. La primera, que se ha repetido varias veces a lo largo del texto, es que
estn formadas por muchas clulas. Para saber si existe comunicacin intercelular en el
biofilm se han efectuado varios estudios y los anlisis microscpicos han puesto de
manifiesto que las clulas interactan directamente entre ellas de forma fsica y tambin
a travs de la matriz exopolimrica. En lo referente a las seales qumicas se han
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detectado, por ejemplo, en biofilms mixtos de Pseudomonas sp y Burkholderia sp

mecanismos de alimentacin cruzada y tambin se han detectado seales qumicas no
relacionadas con procesos metablicos. Adems la respuesta igualitaria y la de divisin
de tareas ha sido observada en Biopelculas de Pseudomonas aeruginosa, aunque no se
ha comprobado que la divisin de tareas suponga un beneficio para el conjunto del
biofilm. Por tanto, el programa de diferenciacin celular que llevan a cabo las clulas
cuando crecen y proliferan sobre superficies (en las Biopelculas) requiere un alto grado
de interaccin coordinada entre las clulas que lo forman similar al de los organismos
multicelulares. Las pequeas molculas liberadas por algunas clulas modulan la
actividad de otras clulas prximas, regulando actividades colectivas.
Formado por varias clulas

Comunicacin intercelular
Organismo
Multicelular
Fsica
Qumica
BIOPELCULA
Respuesta coordinada
Igualitaria
Diferente
Las bacterias cuentan con sistemas de regulacin que les permiten cambiar la
expresin de ciertos genes en respuesta a cambios en el medio ambiente. Pero adems
algunos de estos sistemas de regulacin detectan cambios en la poblacin bacteriana ya
que promueven la modificacin de la expresin gentica en funcin de la densidad
celular. Estos sistemas detectan cundo se ha llegado a una masa crtica de bacterias
gracias a que cada clula produce de forma constante una pequea cantidad de una
sustancia difusible llamada autoinductor. Cuando el nmero de clulas alcanza un
umbral en el que la cantidad de autoinductor es suficientemente elevada el compuesto
interacciona y activa a un activador transcripcional que cambia el patrn de expresin
gnica.
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Sintasa
de AHL
Activador
Transcripcional
3-oxo-C12-HSL
AUTOINDUCTOR
Figura 6. Esquema de la seal de Qurum en la bacteria Gram-negativa

Pseudomonas aeruginosa
Entre las bacterias Gram-negativas, la seal de qurum dependiente de AHL (Nacyl-L-Homoserine Lactone) es ampliamente conocida. La participacin de un sistema
de QS en la formacin de biofilm se indic por primera vez por Davies y cols. en 1998
para Pseudomonas aeruginosa (Figura 6). stos detectaron un mutante lasI que formaba
biofilms indiferenciados al ser comparados con los formados por la cepa salvaje, lo que
llev a pensar que el sistema las era necesario para el desarrollo de la arquitectura del
biofilm. El sistema las es uno de los dos sistemas QS mejor caracterizados que se han
descrito en Pseudomonas aeruginosa y consiste en un activador transcripcional LasR y
la sintasa de AHL LasI que dirige la sntesis de N-3-oxo-dodecanoil-homoserina lactona
(3-oxo-C12-HSL). El otro sistema QS denominado rhl est formado por RhlR y RhlI
que dirige la sntesis de N-butanoil-L-homoserina lactona (C4-HSL). El sistema las
regula positivamente la expresin de rhlR y rhlI, por lo que ambos sistemas QS estn
jerrquicamente organizados con el sistema las a la cabeza de la cascada de seales. Se
ha comprobado que estas mismas seales regulan la expresin de genes de virulencia de
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Pseudomonas aeruginosa implicados en la infeccin, dao tisular y generacin de la

respuesta inflamatoria del husped.
5. Intercambio gentico entre las clulas de la Biopelcula

El ambiente microbiano que se genera dentro de una Biopelcula parece un lugar
ideal para que se produzca el intercambio gentico dentro de la misma especie y entre
especies diferentes. Adems se ha comprobado que las clulas que forman Biopelculas
normalmente son expertas en los procesos de intercambio gentico.
Al hablar de intercambio gentico nos estamos refiriendo a la transferencia
horizontal de genes, o lo que es lo mismo fenmenos de parasexualidad, en los que un
organismo adquiere informacin gentica de otro organismo en un proceso
independiente de la reproduccin. Es decir, la informacin gentica se transmite dentro
de la misma generacin y no de una generacin a otra como ocurre en los procesos de
divisin celular. La transferencia horizontal de genes puede ocurrir entre organismos de
la misma especie o de especies diferentes. De hecho, estos procesos parasexuales se
consideran uno de los principales mecanismos implicados en la evolucin microbiana
ya que se puede transferir gran cantidad de informacin gentica de unos
microorganismos a otros provocando la adquisicin de nuevas caractersticas
fenotpicas de forma muy rpida.
Existen tres procesos de transferencia gentica horizontal: transformacin,
conjugacin y transduccin.
La transformacin natural requiere la unin y captura de ADN libre hacia el
interior bacteriano y la expresin de la informacin gentica que contiene. Ello implica
varios pasos: unin del ADN a la clula, transporte hacia el interior celular y todos los
pasos subsiguientes de propagacin y expresin del material gentico. El proceso que
permite la transformacin se denomina competencia, que es un estado transitorio que
precisa que las clulas se encuentren activas metablicamente y capaces de activar un
conjunto de genes especficos. En los biofilms se ha observado el proceso de
transformacin in vitro en dos casos: en la bacteria Gram-positiva Streptococcus mutans
y en la Gram-negativa Acinetobacter sp.
En el caso de las bacterias Gram-positivas la induccin de la competencia ocurre
en la fase exponencial de crecimiento y parece estar asociado a procesos de quorum
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sensing. Como ya se coment en el apartado anterior, el QS implica la secrecin de

molculas seal y su deteccin posterior por las clulas vecinas permitiendo a la
comunidad sentir la densidad celular. En los estreptococos, la competencia est unida
al QS mediante la produccin, exportacin y captura subsiguiente por las clulas
vecinas de un pequeo pptido seal llamado factor de competencia (CF). Cuando el CF
alcanza una cantidad crtica es detectado por una histidina-kinasa unida a membrana que
inicia la induccin de una cascada de genes especficos de competencia. La
transformacin comienza con la unin del ADN de doble hlice al exterior celular de
forma independiente de su secuencia. Se diferencia de los otros dos procesos de
transferencia horizontal en que es un proceso ADNasa sensible, es decir, el ADN queda
expuesto al ambiente donde puede ser degradado por accin de nucleasas. Al poco de
unirse, se producen incisiones en una de las hebras de la doble hlice de ADN por
accin de endonucleasas especficas de transformacin y a partir de estas incisiones se
va degradando la hebra de ADN, de forma que la otra hebra va pasando al interior del
citoplasma. Una vez que ha entrado en la clula, el ADN exgeno recombina con la
zona complementaria del cromosoma bacteriano, previo desplazamiento y posterior
degradacin de la cadena homloga de ste. En el caso de bacterias Gram-negativas, la
transformacin implica la captura de secuencias especficas de ADN de doble hlice que
deben ser reconocidas por la clula receptora. Adems es un proceso que ocurre entre
bacterias de la misma especie o de especies muy prximas durante la fase estacionaria
de crecimiento.
La elevada tasa de transformacin que se ha observado en muchos biofilms
sugiere que la competencia puede ser el estado natural para poblaciones que se adhieren
a superficie. El ADN capturado puede conferir un fenotipo ventajoso como la
resistencia a algn txico o el aumento de la actividad metablica. Pero tambin puede
ser heterlogo o inservible para recombinacin y expresin o incluso puede que, siendo
homlogo y se exprese, no confiera ninguna ventaja al receptor. Podra ser, por tanto,
que este mecanismo de captura fuese simplemente una manera de proporcionar una
fuente de energa a las clulas.
En la conjugacin el material gentico se transfiere desde la bacteria donadora
hasta la bacteria receptora sin pasar por el medio de suspensin. El intercambio de
material gentico depende del contacto directo entre dos clulas y est polarizado, es
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decir, ciertas cepas designadas F+ (fertilidad ms) actan siempre de donadoras y otras,
F- (fertilidad menos) actan como receptoras. Las cepas F+ contienen un plsmido,
llamado plsmido F, que lleva todos los genes que codifican la transferencia gentica
por conjugacin. Tambin se puede producir la conjugacin de ADN cromosmico pero
en este caso las clulas donadoras tienen el factor F integrado en su cromosoma. Y
tambin se pueden transferir transposones y otros elementos genticos incluso entre
especies diferentes. En algunos casos la conjugacin ha sido asociada a fenmenos de
QS y formacin de biofilms. En Escherichia coli se han detectado plsmidos
conjugativos que codifican factores que inducen a las clulas planctnicas a entrar en o
formar Biopelculas.
Por ltimo, la transduccin implica la transferencia del material gentico
empaquetado en unas partculas fagocticas lo que previene su degradacin por
nucleasas. Como la partcula es ms o menos estable la clula donadora y receptora no
necesitan encontrarse en el mismo sitio simultneamente. En este caso la clula
receptora debe tener sitios especficos de unin que sean reconocidos por el fago
atacante. La transduccin puede ser generalizada, cuando cualquier ADN bacteriano es
empaquetado y transferido, o especializada cuando slo algunos genes particulares
pueden ser transferidos. En la transduccin generalizada el ADN del donante se
empaqueta en el fago y luego se inyecta en la clula receptora de manera que si hay
regiones homlogas se integrar en el cromosoma y se expresar. En la transduccin
especializada, se requiere que el fago entre en estado lisognico, donde permanece
dormido en el genoma bacteriano hasta que se activa en respuesta a seales ambientales
concretas. Una vez activado, se libera del cromosoma bacteriano y se replica, se expresa
y el genoma del fago se empaqueta en su cpside proteica. La excisin del genoma del
fago suele hacerse de forma precisa, pero puede ocurrir que parte del ADN del husped
se libere junto con el del fago pasando a formar parte del genoma de ste y por tanto
pudiendo pasar a otras clulas husped.
6. Propiedades de las Biopelculas

Las Biopelculas parecen ser una forma de vida muy favorable para los
microorganismos as como una estrategia de supervivencia. En los biofilms se
establecen gradientes de oxgeno y otros aceptores de electrones, as como gradientres
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de diferentes sustratos, de productos y gradientes de pH. Por ello pueden coexistir

ambientes aerobios y anaerobios muy cercanos con el desarrollo de gran variedad de
especies distintas. Esto origina microconsorcios lo que facilita, por ejemplo, la
degradacin de sustancias que no podran ser degradadas por una nica especie.
En las Biopelculas los microorganismos viven continuamente a altas densidades
celulares en poblaciones mixtas, facilitando los procesos de comunicacin entre las
clulas que constituyen el biofilm, lo que slo es posible gracias a la estrecha
proximidad de las bacterias que se mantienen unidas gracias a las EPS.
La transferencia horizontal de genes se ve facilitada por este estrecho contacto
entre los agregados de clulas y la acumulacin de ADN en la matriz de EPS, lo que
puede contribuir a cambios fenotpicos en los microorganismos del biofilm.
El fenmeno de quorum sensing que ya hemos visto tambin puede ocasionar la
expresion de nuevos fenotipos. Las seales qumicas activan la transcripcin de una
serie de genes para que se inicie una respuesta coordinada de la poblacin. Estas seales
de qurum estn implicadas en la adhesin y el mantenimiento del biofilm.
Adems las EPS secuestran nutrientes de la fase acuosa lo cual es muy
interesante en ambientes oligotrficos, y retienen agua lo que previene de la desecacin.
Esta matriz influye en la sorcin de sustratos disueltos y particulados como los
compuestos biodegradables. La unin y acumulacion de cationes como el calcio y el
magnesio por las EPS puede afectar profundamente al comportamiento reolgico y
difusibilidad de los biofilms.
Y una propiedad muy importante que no puede pasar desapercibida es la
resistencia de los biofilms a los agentes antimicrobianos como desinfectantes,
antibiticos y biocidas. Siempre que se discute sobre la resistencia de los
microorganismos a las sustancias antibiticas se busca respuesta en la mutacin
gentica (las bacterias mutan de forma que se hacen resistentes a uno o ms
antibiticos). De forma alternativa, pueden adquirir de otros microorganismos genes
que codifican para protenas que expulsan de la clula o destruyen antibiticos (genes
de resistencia a antibiticos). Pero estos mecanismos se refieren fundamentalmente a
organismos de vida libre en suspensin, es decir, planctnicos. Por el contrario, la
resistencia antimicrobiana de las Biopelculas se explica como consecuencia del paso a
un estado fisiolgico diferente, es decir, las bacterias de la Biopelcula son
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genticamente idnticas a sus homlogas planctnicas, no han adquirido mutaciones o

elementos genticos de otros organismos, y cuando se desprenden de ella y recuperan su
estado planctnico vuelven a ser susceptibles del ataque por tales sustancias
antimicrobianas. Esto es, las bacterias utilizan una serie de mecanismos moleculares
para expresar un fenotipo que puede resultar ventajoso en un ambiente particular.
Clulas Planctnicas
BIOPELCULA
Mutacin gentica
Cambio en la expresin gentica
Adquisicin de genes de
resistencia a antibiticos
Estado fisiolgico REVERSIBLE

(Quorum Sensing)
La forma en que las Biopelculas se hacen resistentes no est del todo clara,
aunque se han propuesto varias teoras, entre las que se barajan la dificultad de la
difusin de los antibiticos o biocidas a travs del biofilm, la activacin de una
respuesta de estrs o el incremento en la expresin de protenas que excretan los
antibiticos.
El grado de proteccin de los biofilms frente a estas sustancias se puede
cuantificar de diferente manera. Por ejemplo, se puede usar una dosis fija de
antimicrobiano y comparar la mortalidad que produce en clulas planctnicas y en el
biofilm o comparar la cantidad de antimicrobiano necesaria para producir una tasa de
mortalidad dada en las clulas planctnicas y en el biofilm. El hecho de que la
resistencia de los biofilms a biocidas y antibiticos se haya observado en la naturaleza y
en condiciones de laboratorio y bajo circunstancias muy diferentes indica que es un
fenmeno que no depende de factores ambientales especficos. Adems el que las
clulas que se desprenden del biofilm recuperen la susceptibilidad a estas sustancias
refleja un estado fenotpico o fsico reversible.
Son muchos los factores que controlan el grado de resistencia de una Biopelcula
a un antimicrobiano entre los que se pueden destacar la concentracin de
antimicrobiano, el grosor de la Biopelcula, la edad de la Biopelcula, la densidad
celular, la composicin de especies y el genotipo. Los biofilms ms gruesos, ms
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maduros y ms densos son, por lo general, menos susceptibles al ataque por

antimicrobianos que los biofilms delgados, jvenes y dispersos. Por ejemplo, Leriche y
Carpentier (1995) observaron que biofilms de cuatro das de edad de Samonella enterica
serovar Typhimurium eran al menos tres veces ms resistentes a la desinfeccin por
hipoclorito que los de slo un da de edad, aunque la densidad celular inicial era muy
similar en los dos biofilms.
En general los biofilms compuestos por varias especies son ms resistentes que
los formados por una nica especie porque en los biofilms mixtos una especie puede
proteger a otra mediante diversos mecanismos y viceversa. Por ejemplo, en biofilms
mixtos de Candida albicans y Staphylococcus epidermidis (muy frecuentes en
infecciones asociadas a catteres endovasculares) se ha observado que la presencia de
Candida albicans protege a Staphylococcus epidermidis de la vancomicina y por su
parte Staphylococcus epidermidis protege a Candida albicans del ataque por azoles.
Aunque existen pocos datos experimentales es probable que la presencia de
partculas abiticas en el biofilm aumente la resistencia a estos agentes antimicrobianos.
Los productos de corrosin, precipitados, fibras, clulas muertas, etc, que forman parte
de los biofilms podran aumentar la proteccin reduciendo la difusin de los
antimicrobianos y/o incrementando la capacidad de sorcin, es decir, pueden obstruir
fsicamente la difusin o pueden unirse al antimicrobiano impidiendo su llegada a las
clulas del biofilm.
Otro aspecto muy importante es la dosis de antimicrobiano y el tiempo de
aplicacin que se emplean para tratar a los biofilms. La regla concentracin-tiempo
supone que la eficacia del tratamiento con el antimicrobiano es proporcional a la
concentracin del mismo y a la duracin del tratamiento. Es decir en principio una dosis
de 50 mg/L durante dos horas tendra el mismo efecto que una dosis de 10 mg/L
aplicada durante diez horas. Sin embargo, en la prctica esto no ocurre y se ha
comprobado que en el tratamiento de Biopelculas funciona mejor una dosis elevada que
una dosis ms baja aplicada durante un periodo prolongado.
Los mecanismos de proteccin que subyacen tras la resistencia de las Biopelculas a
los agentes antimicrobianos podran ser varios: agotamiento del antimicrobiano en el
medio que baa a la Biopelcula mediante reacciones de neutralizacin entre el agente y
los constituyentes de la Biopelcula; lenta penetracin del antimicrobiano en la
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Biopelcula; microambientes qumicos dentro de la Biopelcula donde no hay

crecimiento de clulas o hay un crecimiento muy lento; respuestas adaptativas al estrs.
Parece que ninguno de estos mecanismos podra explicar por s solo la resistencia a
biocidas y antibiticos y que lo que ocurre es una combinacin de varios de ellos de
forma coordinada para hacer frente al ataque de tales agentes. Adems se ha
comprobado que estos mecanismos de resistencia son defensas multicelulares. Cuando
un agente antimicrobiano no penetra en el biofilm es porque se neutraliza mientras
difunde por un cluster de clulas y este mecanismo slo puede manifestarse cuando los
microorganismos estn agregados y realizan la actividad neutralizante de forma
colectiva. Una nica clula flotando en un ocano de antimicrobiano no puede
reaccionar lo suficientemente rpido para contrarrestar el efecto del antimicrobiano. Sin
embargo, en un biofilm las clulas pueden liberar enzimas para destruir el
antimicrobiano y generar gradientes de concentracin de forma que, aunque las clulas
de la superficie del biofilm se vean afectadas por el agente antimicrobiano, las clulas
ms internas queden protegidas.
Algunos de los miroorganismos en los que se ha estudiado y confirmado esta
resistencia figuran en la Tabla 1 y se encuentran desde bacterias a levaduras y desde
organismos estrictamente aerobios hasta anaerobios pasando por bacterias reductoras de
sulfato. Las sustancias antimicrobianas a las que muestran resistencia los
microorganismos que constituyen los biofilms tambin son muchas y muy heterogneas
desde oxidantes de amplio espectro como el cloro hasta antibiticos con dianas muy
especficas (Tabla 2).
Tabla 1. Microorganismos con susceptibilidad antimicrobiana reducida cuando forman Biopelculas
Actinobacillus
Bacillus
Campilobacter
Candida
Citrobacter
Corynebacterium
Desulfovibrio
Enterobacter
Enterococcus
Escherichia
Gardnerella
Lactobacillus
Legionella
Listeria
Mycobacterium
Porphyromonas
Proteus
Pseudomonas
Salmonella
Staphylococus
Streptococcus
Vibrio
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Tabla 2. Agentes antimicrobianos con escasa actividad frente a microorganismos formadores de Biopelculas
Biocidas
2,2-Dibromo-3-nitrolopropionamida
2-Bromo-2-nitro-1,3-propanodiol
cido peractico
Clorhexidina
Cloro
Clorosulfamato
Cloruro de benzalconio
Cloruro de cetilpiridinio
Dixido de cloro
Formaldehdo
Glutaraldehdo
Isotiazolona
Monocloramina
Monopersulfato de potasio
Ozono
Perxido de hidrgeno
Polihexametileno biguanida
Povidona yodada
Surfactantes anfotricos
Triclosn
Yodo
Antibioticos
Amikacina
Anfotericina B
Ampicilina
Aztreonam
Cefazolina
Ceftazidima
Cefuroxima
Ciprofloxacino
Clindamina
Eritromicina
Fluconazol
Fosfomicina
Gentamicina
Metronidazol
Novobiocina
Ofloxacina
Piperacilina
Rifampicina
Tetraciclina
Tobramicina
Trimetoprim-sulfametoxazol
Vancomicina
7. Consecuencias del desarrollo de Biopelculas

Una vez adheridos a la superficie, los microorganismos de la Biopelcula llevan
a cabo una serie de reacciones propias de su metabolismo que pueden resultar
beneficiosas o perjudiciales dependiendo de las circunstancias. Algunos problemas
relacionados con la formacin de biofilms son el bioensuciamiento (o biofouling) y la
corrosin microbiana (conocida como MIC, del ingls Microbiologically Influenced
Corrosion) que son especialmente importantes en la industria, causando la prdida de
millones de euros anuales a las empresas como consecuencia del dao a equipos y
productos.
El concepto Bioensuciamiento (o biofouling) implica el ensuciamiento o
contaminacin de la superficie de materiales asociado a actividad microbiana, es decir,
la acumulacin sobre una superficie de microorganismos y/o macroorganismos y sus
productos metablicos. Y muy relacionado con el concepto de Bioensuciamiento est el
de Biodeterioro, que se refiere al cambio indeseable en las propiedades de un material
causado por la accin de un organismo vivo.
Desde el punto de vista cultural hay que destacar edificios, esculturas, pinturas,
libros y documentos, muebles y dems obras de arte que sufren Biodeterioro como
consecuencia del desarrollo de biofilms sobre su superficie. Los efectos producidos por
el desarrollo de las Biopelculas en monumentos histricos y bienes culturales no son
objeto de esta Unidad y sern discutidos ms adelante. Como pequea introduccin se
puede indicar que los soportes ptreos de edificios y esculturas pueden verse afectados
por bacterias, hongos, lquenes y algas que producen pigmentaciones, fisuras,
descamaciones, eflorescencias, etc. El papel de libros y documentos sufre
fundamentalmente la accin de hongos que degradan enzimticamente la lignina y la
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celulosa. El ataque bacteriano es menos frecuente pero se da en condiciones de

humedad alta y las especies implicadas suelen ser Cytophaga, Cellvibrio y
Cellfalcicula. En la madera y tambin por accin de los hongos se producen
ablandamientos, fisuraciones, cambios de color y cambio de sus caractersticas
mecnicas. Las pinturas sufren procesos de Biodeterioro relacionados, en muchos casos,
con la degradacin del aglutinante presente en la composicin del pigmento (gelatinas,
sacarosas, aceites, protenas, almidones, gomas, celulosas, ). Debido a la variedad de
elementos susceptibles de ser atacados, los hongos y bacterias que actan sobre estos
soportes es muy elevado. Los efectos ms frecuentes son cambios de color,
descamaciones y roturas.
En el ambiente clnico se ha calculado que los gastos asociados a los problemas
ocasionados por el desarrollo de estas comunidades alcanzan la cifra de billones de
euros anualmente. Los biofilms son responsables de enfermedades como la otitis media,
que es de las ms frecuentes entre los nios pequeos, la endocarditis, que consiste en la
infeccin de la superficie interna del corazn y sus vlvulas, la fibrosis qustica, y la
infeccin respiratoria aguda causada por Legionella, como consecuencia de los biofilms
que crecen en las instalaciones de aire acondicionado. Adems los biofilms pueden ser
responsables de una gran cantidad de infecciones nosocomiales (las que se adquieren en
los hospitales). Como ejemplo de este tipo de infecciones se pueden citar la
colonizacin de catteres, prtesis, vendajes, y otros tipos de instrumental mdico, por
diversos microorganismos. Tambin se ha comentado ya que las bacterias que crecen
sobre la superficie de los dientes formando Biopelculas son responsables de la placa
dental y en ltimo trmino de la caries.
Por otro lado, los biofilms colonizan la superficie de fregaderos, inodoros y
encimeras sobre todo, en baos y cocinas, por lo que unas prcticas pobres de limpieza
y desinfeccin en el hogar pueden incrementar la incidencia de enfermedades
provocadas por organismos patgenos.
Los mtodos tradicionales para acabar con las bacterias como los antibiticos y
los desinfectantes no suelen ser eficaces en el tratamiento de los biofilms. Las dosis
requeridas para eliminar las Biopelculas son muy elevadas y/o requieren largos
periodos de aplicacin, por lo que pueden resultar indeseables desde el punto de vista
medioambiental, y seguramente tambin prohibidas por la legislacin, y no ser prcticas
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desde el punto de vista mdico ya que podran acabar antes con el paciente que con la
propia Biopelcula. Por ello es necesario el desarrollo de nuevas estrategias para la
eliminacin de estos biofilms, teniendo en cuenta la forma en que las bacterias se
adhieren a la superficie de los materiales, crecen, y se desprenden de los mismos.
Sin embargo, el desarrollo de Biopelculas no implica siempre efectos negativos.
Las bacterias del biofilm pueden romper/degradar contaminantes del suelo y del agua,
en un proceso conocido como Biorremediacin para disminuir la concentracin de tales
sustancias o incluso llegar a eliminarlas. La biotecnologa, por ejemplo, trata de
aprovechar esta capacidad microbiana mediante el desarrollo de biofilms en
biorreactores adecuados para el tratamiento de aguas residuales urbanas e industriales.
Y de la misma forma los biofilms pueden ser utilizados para la produccin a gran
escala de una amplia variedad de sustancias qumicas tales como enzimas, aditivos y
antibiticos.
Adems el desarrollo de ciertos biofilms sobre la superficie de las races de
plantas puede facilitar su crecimiento incrementando la productividad agrcola.
La flora microbiana que se desarrolla sobre la piel y las mucosas del cuerpo y
que constituyen la primera barrera al ataque de otros microorganismos patgenos y los
microorganismos que crecen en el tubo digestivo y ayudan a la digestin de ciertos
compuestos que no sera posible degradar por la accin de las propias clulas son otros
ejemplos de aspectos positivos de las Biopelculas.
Bibliografa
Libros:
Characklis, W.C., Marshall, K.C. 1990. Biofilms. John Wiley & Sons, Inc., New York,
N.Y.
Characklis, W.C., Wilderer, P.A. 1989. Structure and Function of Biofilms. Wiley,
Chichester.
Wingender, J., Neu, T.R., Flemming, H.-C. 1999. Microbial Extracellular Polymeric
Substances. Characterization, Structure and Function. Springer-Verlag Berlin
Heidelberg New York.
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Artculos:
Davies, D.G., Parsek, M.R., Pearseon, J.C., Iglewski, B.H., Costerton, J.W., Greenberg,
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biofilm. Science, 280(5361):295-298.
Geesey, G.G. 1982. Microbial exopolymers: ecological and economic considerations.
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Leriche, V., Carpentier, B. 1995. Viable but nonculturable Salmonella typhimurium in
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Biofilms online. Center for Biofilm Engineering
http://www.biofilmsonline.com/cgi-bin/biofilmsonline/index.html
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http://www.personal.psu.edu/faculty/j/e/jel5/biofilms/index.html
The Biofilm Club
http://www.biofilmclub.co.uk/
The CBE Image Library. Center for Biofilm Engineering
http://www.erc.montana.edu/Res-Lib99-SW/Image_Library/default.htm
Pg. 27 de 27

02-Conceptos de Biopelicula y Bioensuciamiento

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UNIDAD 2

CONCEPTOS DE BIOPELCULA Y BIOENSUCIAMIENTO

Introduccin y Objetivos de la Unidad

Conocer el concepto de Biopelcula y los actores que intervienen en su

Comprender la importancia de las Sustancias Polimricas Extracelulares

Percibir la seal de qurum como mecanismo de comunicacin entre las

Entender los fenmenos de intercambio gentico dentro de la

Conocer las ventajas del crecimiento microbiano en forma de

Distinguir algunos aspectos positivos y negativos del desarrollo de

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

2.3. Fase de consolidacin de la adhesin (Fase de Attachment)

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

Figura 1. Fotografa de una Biopelcula creciendo sobre pared de un edificio de piedra.

1.1. Definicin de Biopelcula

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

1.2. Microorganismos formadores de Biopelculas

2. Fases de formacin de la Biopelcula

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

clulas empiezan a colonizar la superficie y forman microcolonias. Mediante la

Figura 2. Esquema del proceso de formacin de una Biopelcula: 1 Fase de transporte a la

2.1. Fase de transporte a la superficie

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

movimientos Brownianos, a travs de flagelos, gravedad, por difusin, etc. En algunas

En bacterias Gram-negativas (Pseudomonas aeruginosa, Vibrio cholerae,

2.2. Fase de adhesin inicial

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

2.3. Fase de consolidacin de la adhesin (Fase de Attachment)

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

2.4. Fase de colonizacin

2.5. Fase de desprendimiento (Fase de Detachment)

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

enzimtica, denominada dispersina que degrada de forma especfica EPS de la matriz

En todas estas fases, como veremos ms adelante, es necesario un alto grado de

Figura 4. Esquema de la comunicacin entre clulas de un biofilm.

El siguiente enlace da acceso al Center for Biofilm Engineering de la

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

3. Las Sustancias Polimricas Extracelulares (EPS, Extracellular

Figura 5. Biopelcula microbiana sobre acero inoxidable,

La produccin de EPS es una propiedad general de los microorganismos tanto

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composicin de la matriz de EPS es dinmica y depende de varios parmetros. Bajo

3.2. Composicin de las EPS

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

galactosa, manosa, N-acetil-glucosamina, cido glucurnico y galacturnico. La

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

3.2.3. cidos Nucleicos

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento

conjugacin se ha visto incrementada en los biofilms con respecto a poblaciones

4. Seal de Qurum o Quorum Sensing

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Unidad 2. Concepto de Biopelcula y Bioensuciamiento