Articulo 1

principalmente en el bazo, pero

tambin en hgado y mdula sea.
1-El proceso consiste en la ruptura de
la membrana de los hemates y la
fagocitacin de la hemoglobina (Hb)
liberada por parte de los macrfagos.
2-La
Hb
se
degrada
en globinas y grupo
hemo. Las
globinas
se
descomponen
en
aminocidos que entrarn a formar
parte del pool de aminocidos que
se
reutilizar
para
formar
nuevasprotenas.

PRACTICA No.7

CUANTIFICACION DE
BILIRRUBINAS SERICAS

Prerrequisitos

1.- Conocer y describir

metabolismo de las bilirrubinas.

el

La bilirrubina procede
principalmente
(80%)
de
la
destruccin
(hemlisis)
de
los
hemates
viejos
(120
das).
Concretamente
procede
de
la
degradacin de la hemoglobina y, en
particular de su grupo Hemo.
Un porcentaje menor de la
formacin de bilirrubina se genera por
la
destruccin
de
otras
hemoprotenas
(citocromos,
catalasas) en el hgado y de la
eritropoyesis ineficaz en mdula
sea.
El 80% de la bilirrubina procede de la
destruccin de hemates viejos o
frgiles que se da en el sistema
mononuclear
fagoctico
(antes
llamado sistema reticuloendotelial),

3-Sobre
el
grupo hemo acta
la hemo-oxigenasa y
se
descompone en hierro ferroso (Fe+
+) y una protoporfirina: labiliverdina.
* El Fe++ se transforma en
frrico (Fe +++) , se une
transferrina transportndose
mdula sea para contribuir
formacin de nuevos hemates.

hierro
a la
a la
al a

* La parte proporfirnica de hemo se

habr transformado enbiliverdina y
se convertir en bilirrubina no
conjugada (indirecta) por accin de
la biliverdin reductasa.
4-La bilirrubina
no
conjugada
(indirecta) se libera a la sangre
desde el macrfago. Su falta de
hidrosolubilidad
y toxicidad se
soluciona con su unin reversible a
la albmina. Esta unin impide su
paso a travs de la barrera
hematoenceflica y renal.

Articulo 2

5-En el sinusode heptico penetran

en el espacio de Diss y se libera de
la albmina. A continuacin, la
bilirrubina
se
une
a
un
transportador que lo introduce en el
hepatocito
por difusin
facilitada. Una vez est en el interior
se une a unas protenas que impiden
su reflujo al plasma y la trasportan al
reticuloendoplsmico.
6-En el hepatocito la bilirrubina se
conjuga con cido glucurnido por la
accin
de
la UDP-glucuronil
transferasa (UDP-GT) formndose
la bilirrubina conjugada ( o directa).
Si la glucuronidacin se da una vez
se genera el monoglucurnido de
bilirrubina (85%) y si vuelve a
producirse una segunda vez se forma
el diglucurnido
de
bilirrubina (15%). Estas bilirribunas
conjugadas son hidrosolubles.
7-La bilirrubina conjugada (directa)
llega la parte apical de hepatocito y
se
excreta
al canalculo
biliar por transporte
activo
consume energa por una bomba
ATP-asa: el sistema canalicular
trasportador
multiespecfico
de
aniones orgnicos (cMOAT) o
multidrug
resistance-associated
protein 2 (MRP2).
8-Desde los canalculos biliares la
bilirrubina
conjugada
pasa
a
lavescula biliar hasta desembocar
al duodeno intestino delgado. En el

intestino la bilirrubina conjugada se

deconjuga y reduce por accin de las
bacterias
intestinales
transformndose enurobilingeno (o
estercobilingeno) .
a-El
80%
del
urobilingeno
(estercobilingeno) se oxida en el
colon
transformndose
en estercobilina y se elimina por las
heces dndoles su color marrn.
b-El 20% del urobilingeno se
reabsorbe pasivamente en el colon
hacia el sistema portal:
-El 90% de este porcentaje regresa al
hgado y vuelve a excretarse por la
bilis: circulacin enteroheptica.
-El 10% de ese urobilingeno llega al
rin y se filtra, oxidndose en la
orina hasta producir urobilina (da el
color amarillo) por donde se excreta.
90% de la bilirrubina en plasma es no
conjugada (indirecta). Una parte de la
bilirrubina conjugada en plasma se
une a la albmina formando la Deltabilirrubina y no se puede eliminar
por la orina.

Objetivo

Determinar la concentracin de
bilirrubina total y directa por la tcnica
de Van der Berg y las analizar como
una prueba de funcin heptica.

Introduccin

Articulo 3

Los trminos de bilirrubina de

reaccin directa y de indirecta se
basa en el mtodo original de van der
Bergh. Este anlisis o una variedad
del mismo, todava se usa en la
mayor parte de los laboratorios de
bioqumica clnica para medir la
bilirrubina srica. En este anlisis, la
bilirrubina se pone en contacto con el
acido diazosulfanilico, y se separa en
dos azopigmentos de dipirrimeteno
bastante estables que tiene una
absorcin mxima a 540nm, lo que
permite su anlisis por fotometra. La
fraccin directa es la que reacciona
con el acido diazosulfanilico sin
necesidad
alguna
sustancia
aceleradora, como el alcohol. Esta
fraccin directa es un ndice
aproximado
de
la
bilirrubina
conjugada del suero. La bilirrubina
srica totales la cantidad de este
pigmento reacciona despus de
aadir alcohol. La fraccin indirecta
es la diferencia entre bilirrubina total y
la fraccin directa y permite calcular
la cantidad de bilirrubina no
conjugada del suero.
La bilirrubina es el producto del
catabolismo
del
grupo
heme,
componentes de protenas como
hemoglobina,
mioglobina
y
citocromos. El heme es convertido a
biliverdina por accin de la heme
oxigenasa y la bilirrubina da origen a
la bilirrubina mediante biliverdina
reductasa. La bilirrubina es un poco
soluble en agua, por lo que circula
unida a albumina en el plasma.

La bilirrubina es un compuesto
potencialmente toxico.
En el hgado la bilirrubina es un
conjugado con acido glucoronico. En
este paso origina la llamada
bilirrubina conjugada directa, que es
soluble, no toxica y que se excreta
fcilmente a travs de la bilis.
La alteracin de la bilirrubina se
manifiesta como ictericia. El umbral
para la deteccin clnica de ictericia
est entre 2 y 3 mg/dl. Cuando la
hiperbilirrubinemia
es
directa
(conjugada),
se
produce
en
eliminacin de la bilirrubina por la
orina, lo que produce un color oscuro
caracterstico, llamado coluria.
Durante el periodo de recuperacin
de un episodio de ictericia prolongada
puede desaparecer la coluria, pero
mantenerse la ictericia, lo que se
explica por la bilirrubina dlta (se une
covalentemente a la albumina). Si
hay una obstruccin completa de la
va biliar o una falla de la excrecin
heptica muy marcada de la
bilirrubina, esta no llega al intestino y
no produce la pigmentacin color caf
de las deposiciones normales. Esto
explica la acolia, que describe la
presencia
de
deposiciones
blanquecinas.
Las causas de la hiperbilirrubinemia
indirecta
es
una
produccin
aumentada
de
bilirrubina,
habitualmente por aumento del
catabolismo de hemoglobina, por
ejemplo en anemias hemolticas. En

Articulo 4

estas enfermedades se encuentran

signos de hemlisis en otros
exmenes de sangre, como anemia,
VCM elevada, LDH elevada y
haptoglobina disminuida. La hemlisis
raramente produce elevaciones de
bilirrubina mayores de 6 mg/dL. Otra
causa
muy
frecuente
de
hiperbilirrubinemia
indirecta
es
el sndrome de Gilbert, que se
caracteriza por una disminucin de la
capacidad heptica de conjugacin
de la bilirrubina.
La hiperbilirrubinemia directa se
asocia a enfermedades hepticas
debido a una insuficiente capacidad
de excrecin. La elevacin de
bilirrubina conjugada en sangre es
uno de los hallazgos caractersticos
de los cuadros colestsicos y se
acompaa de elevacin de fosfatasas
alcalinas y GGT. Su aumento puede
estar dado por varias causas:

Obstruccin de la va biliar
Enfermedades
hepticas
colestasicas
Hepatitis aguda
Cirrosis
Elevaciones
aisladas
de
bilirrubina directa.

Resultados

Equipo #1
Bilirrubina Directa:
Blanco
0.00

Problema
.025

Resultado: mg/dl= .025 x 14= 0.35

Bilirrubina total:
Blanco
0.00

Problema
.170

Resultado: mg/dl= .170 x 10.5= 1.785

Equipo #2
Bilirrubina directa:
Blanco
0.00

Problema
0.018

Resultado: mg/dl= 0.018 x 14= 0.252

Bilirrubina total:
Blanco
0.00

Problema
0.054

Mtodo.

Espectrofotocolorimetrico
.

Resultado: mg/dl= 0.054 x 10.5=

0.567

Articulo 5

Discusin

En esta prctica de la cuantificacin

de bilirrubinas srica se realizo con
suceso ya que salieron los numeros
normales de bilirrubina en sangre de
acuerdo a los valores normales de
bilirrubina total y bilirrubina directa,
los cuales son:

Bilirrubina directa (tambin

llamada conjugada): 0 a 0.3
mg/dL.

Bilirrubina total: 0.3 a 1.9

mg/dL.

Ya que nos sali en mi equipo, el

equipo #1 valores de bilirrubina
directa de 0.35 mg/dl y de bilirrubina
total de 1.75 mg/dl.
Esto nos lleva a dar una investigacin
sobre el metabolismo de la bilirrubina
que comienza con la descomposicin
de los glbulos rojos en muchas
partes del cuerpo. Los glbulos rojos
contienen hemoglobina, la cual se
descompone en hem y globina; el
hem se transforma en bilirrubina, la
cual luego es transportada por
la albmina en la sangre hasta el
hgado.
En el hgado, la mayor parte de la
bilirrubina se adhiere qumicamente a
otra molcula antes de ser liberada
en
la
bilis.
Esta
bilirrubina
"conjugada" (adherida) se denomina
bilirrubina directa; mientras que la
bilirrubina no conjugada se llama

bilirrubina indirecta. La bilirrubina total

en el suero equivale a la bilirrubina
directa ms la bilirrubina indirecta.
La bilirrubina se convierte en
azobilirrubina mediante el cido
sulfanlico
diazotado
midindose
fotomtricamente.
De
las
dos
fracciones presentes en
suero,
bilirrubin-glucurnido
y
bilirrubina libre ligada a la albmina,
slo la primera reacciona en medio
acuoso
(bilirrubina
directa)
precisando
la
segunda
la
solubilizacin con dimetilsulfxido
(DMSO)
para
que
reaccione
(bilirrubina
indirecta).
En
la
determinacin de la bilirrubina
indirecta se determina tambin la
directa, correspondiendo el resultado
a la bilirrubina total.
Y esto nos lleva a saber que las
grandes cantidades de bilirrubina en
la sangre pueden presentarse
ictericia, que como ya se comento en
la introduccin es una coloracin
amarillenta en la piel, en las
membranas mucosas o los ojos.
Los trminos directa y total se
refieren a las caractersticas de
reaccin en presencia o ausencia de
solubilizantes
(aceleradores).
La
bilirrubina directa e indirecta
equivale slo de forma aproximada a
las fracciones conjugada y no
conjugada.

Articulo 6

Conclusin

Se concluye que se aprendi el

conocimiento de los valores normales
de las bilirrubinas, as como los
signos que van de la mano con sus
alteraciones
que
son
muy
caractersticos por lo que se puede
deducir una patologa, que por lo
general son a nivel de la vescula por
obstruccin y hepticas.
Importante saber esto porque la
hiperbilirrubinemia
conjugada
se
asocia a una disminucin en la
excrecin de la bilis debida a
enfermedades
hepticas
como
hepatitis o cirrosis o bien una
colestasis intra o extrahepatica.
Y la manifestacin clnica de
hiperbilirrubinemia es la ictericia.
Se concluye que la bilirrubina es un
producto de desecho por lo que es
una sustancia toxica para nuestro
organismo por lo que debe ser
excretada.

bilis, un lquido producido por el

hgado.
Una pequea cantidad de glbulos
rojos viejos es reemplazada por
nuevos glbulos cada da. La
bilirrubina queda despus de eliminar
estos glbulos viejos. El hgado
ayuda a descomponer la bilirrubina
para que el cuerpo la pueda eliminar
en las heces.

2.- Que enfermedades producen

alteraciones de urobilingeno en
orina y heces:

Anemia hemoltica
Anemia perniciosa
Malaria
Hepatitis toxica
Cirrosis portal
Fallo cardiaco congestivo
Mononucleosis infecciosa
Colelitiasis
Enfermedades
inflamatorias
graves
Enfermedades neoclsicas

3.- Explique los siguientes tipos de

ictericia:

CUESTIONARIO
1.- Porque se dice que la prueba de
la bilirrubina plasmtica es poco
sensible de enfermedad heptica.
La bilirrubina es un pigmento
amarillento que se encuentra en la

Ictericia preheptica: Se aprecia un

aumento de la bilirrubina no
conjugada
estando
la
funcin
heptica conservada.
Las causas de ictericia prehepatica
nos
encontramos:
la
anemia
drepanocitica, talasemia, carencia de
glucosa 6-fosfato deshidrogenada,
hemoglobinuria paroxstica nocturna,

Articulo 7

incompatibilidad de grupo sanguneo

ABO o frmacos.

(molculas) en la superficie de las

clulas sanguneas.

Ictericia heptica: puede ser de

origen agudo o crnico. En estos
pacientes se dan diferentes formas
de presentacin clnica y diferentes
alteraciones de los marcadores de
funcin heptica. Los niveles de
hiperbilirrubinemiasobre
pueden
variar mucho entre unos cuadros y
otros.

Cuando las personas que tienen un

tipo de sangre reciben sangre de
alguien con un tipo de sangre
diferente, esto puede provocar una
reaccin del sistema inmunitario, lo
cual se denomina incompatibilidad
ABO.

Ictericia
postheptica:
ocurre
cuando el flujo de bilis a travs de la
va biliar extrahepatica, est impedida
generalmente por una obstruccin
mecnica por litiasis o por un tumor.
La colestiasis intrahepatica refleja el
fallo de los hepatocitos para excretar
de modo efectivo la bilirrubina
conjugada. Ello puede estar generado
por un frmaco, hepatitis vrica y
ciertas
enfermedades
crnicas,
(colangitis esclerosarte primaria y
cirrosis biliar primaria etc.)
4.- Describa enfermedad hemoltica
del recin nacido / Incompatibilidad
Rh (D) / Eritroblastosis fetal:
Es un trastorno sanguneo en un feto
o en un beb recin nacido. En
algunos
bebs,
puede
ser
potencialmente mortal.
Incompatibilidad ABO
A, B, AB y O son los cuatro
principales tipos de sangre. Los tipos
se basan en pequeas sustancias

Tipo A

Tipo B

Tipo AB

Tipo O

Las personas que tienen un tipo de

sangre pueden formar protenas
(anticuerpos) que hacen que el
sistema inmunitario reaccione contra
uno o ms de los otros tipos de
sangre.
El hecho de estar expuesto a otro tipo
de sangre puede causar una
reaccin. Esto es importante cuando
un paciente necesita recibir un
trasplante de un rgano o sangre
(transfusin). Los tipos de sangre
deben ser compatibles para evitar
una reaccin por la incompatibilidad
ABO.
Por ejemplo:

Un paciente con tipo de sangre

A reaccionar contra el tipo de
sangre B o AB.

Articulo 8

Un paciente con tipo de sangre

B reaccionar contra el tipo de
sangre A o AB.

sangre Rh negativa y el beb que

lleva en su vientre tiene sangre Rh
positiva.

Un paciente con tipo de sangre

O reaccionar contra los tipos
de sangre A, B o AB.

Causas:

Un paciente con tipo de sangre

AB NO reaccionar contra los
tipos de sangre A, B, AB o el
tipo O

El tipo de sangre O no ocasiona una

respuesta inmunitaria cuando la
reciben personas con tipo de sangre
A, B o AB. Esta es la razn por la cual
las clulas sanguneas tipo O se les
pueden dar a pacientes de cualquier
tipo de sangre. A las personas con
tipo de sangre O se las llama
donantes universales. Sin embargo,
las personas con este tipo de sangre
slo pueden recibir sangre tipo O.
Las transfusiones tanto de plasma
como de sangre se deben cotejar
para evitar una reaccin inmunitaria.
Antes de que cualquier persona
reciba sangre, tanto la sangre como
la persona que la recibe se evalan
cuidadosamente para evitar una
reaccin. Una reaccin por lo regular
se presenta debido a un error de
escritura que hace que un paciente
reciba sangre incompatible.

Durante el embarazo, los glbulos

rojos del feto pueden pasar al torrente
sanguneo de la madre a travs de la
placenta.
Si la madre es Rh negativo, su
sistema inmunitario trata a las clulas
fetales Rh positivas como si fuesen
una
sustancia
extraa
y
crea anticuerpos contra
dichas
clulas sanguneas fetales. Estos
anticuerpos anti-Rh pueden pasar de
nuevo a travs de la placenta hacia el
feto y destruir los glbulos rojos
circulantes de ste.
Cuando los glbulos rojos se
descomponen, producen bilirrubina,
la cual hace que el beb se ponga
amarillo (ictericia). El nivel de
bilirrubina en el torrente sanguneo
del beb puede variar desde leve
hasta altamente peligroso.

Incompatibilidad RH

Debido a que toma tiempo para que

la madre desarrolle anticuerpos, con
frecuencia, los primeros bebs no se
ven afectados, a menos que la madre
haya tenido embarazos interrumpidos
o abortos espontneos anteriormente
que
sensibilizaron
su
sistema
inmunitario. Sin embargo, todos los
hijos que ella tenga despus de esto
que tambin sean Rh positivos
pueden resultar afectados.

Es una afeccin que se desarrolla

cuando una mujer embarazada tiene

La incompatibilidad Rh se presenta
slo cuando la madre es Rh negativo

Articulo 9

y el beb es Rh positivo. Gracias al

uso de inmunoglobulinas especiales,
llamadas RhoGAM, este problema se
ha vuelto infrecuente en los lugares
que brindan acceso a buenos
cuidados prenatales.
5.- Esquematice los pasos que sigue
la formacin de bilirrubina:

Werner
Muller
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Articulo 10