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Tipos de nutrientes en los microorganismos

Nutrientes universales
El agua
Las bacterias necesitan grandes cantidades de agua. De hecho, salvo excepciones, se pueden
considerar como organismos acuticos. Requieren cierto grado de humedad para crecer. Desde
el punto de vista de sus posibles papeles, el agua es:

El principal constituyente del protoplasto bacteriano;


El medio universal donde ocurren las reacciones biolgicas;
Un reactante en exceso (es decir, un producto resultante de algunas reacciones bioqumicas).

Las fuentes de agua pueden ser:

Endgena: procedente de procesos de oxido-reduccin;


Exgena (la ms importante): procedente del medio, y que difunde a travs de las
membranas.

Ahora bien, no toda el agua de un ambiente est disponible para la bacteria:

Existen determinadas sustancias y superficies que absorben y adsorben


(respectivamente), de modo ms o menos intenso, molculas de agua, dejndolas
inasequibles a la bacteria.
Los solutos disueltos en agua (p. ej. , sales, azcares) tienen afinidad por las molculas de
H2O que los rodean, por lo que stas tampoco estarn a disposicin del microorganismo.

La disponibilidad de agua se mide por un parmetro llamado actividad de agua o potencial de


agua, indicativo del agua libre, y que se expresa como
aW= PS/PW
donde PS es la presin parcial de vapor de agua en la solucin problema y PW es la presin
parcial de vapor del agua destilada.
Cmo medir el potencial de agua de un medio lquido determinado? Se mide la humedad
relativa del aire que hay encima del medio (en frascos), y este valor se refiere al valor de 100,
que es la humedad del aire encima del agua destilada. O sea, la aW = humedad relativa/100).
Las bacterias tienen valores de aW normalmente entre 0.90 y 0.99.

Bacterias de hbitats oligotrficos (como Caulobacter, Spirillum) tienen aW cercanos a 1.


Bacterias como Escherichia y Streptococcus, que viven en sangre y fluidos corporales,
tienen aW de alrededor de 0.995.
Bacterias marinas como ciertos Vibrio y Pseudomonas encuentran valores de 0.980.
Ciertos bacilos Gram-positivos que resisten mejor la sequedad poseen valores de 0.950.

En el extremo de resistencia encontramos ciertas bacterias xerfilas, capaces de vivir a aW muy


bajos (en torno a 0.75). Muchas de estas bacterias viven de hecho en medios acuosos, pero
donde gran parte del agua no est disponible por las razones arriba citadas:

bacterias halfilas extremas, como la arqueobacteria Halobacterium, que habita lagunas


hipersalinas;
bacterias (y sobre todo, ciertos microorganismos eucariticos como levaduras) sacarfilas,
que viven en jugos y zumos con altas concentraciones de azcares.

El anhdrido carbnico (CO2)


El anhdrido carbnico es requerido por todo tipo de bacterias:

Las auttrofas lo requieren como fuente de carbono, y lo reducen usando como fuente de
energa la luz (en el caso de las fotoauttrofas) u oxidaciones de determinadas sustancias
inorgnicas (los quimioautolitotrofos).
Las arqueobacterias metanognicas pueden usar el CO2 como aceptor de los electrones
procedentes de la oxidacin del H2, proceso por el que obtienen su energa:

CO2 + 4H2 ---------> CH4 + 2H2O ( DG'0<0)

Los hetertrofos, aunque no usan el CO2 como fuente de C ni como aceptor de electrones,
necesitan pequeas cantidades para las carboxilaciones en determinadas rutas anablicas
y catablicas.

El origen del CO2 puede ser:

Endgeno: procedente de descarboxilaciones que ocurren al degradar la fuente orgnica


de carbono;
Exgeno: el CO2 de la atmsfera o disuelto en las soluciones acuosas.

Normalmente, las bacterias crecen a la concentracin de CO 2 atmosfrico (0.03%), pero algunas


bacterias (Neisseria, Brucella), cuando se aslan por primera vez, requieren atmsferas
enriquecidas, con 5-10% de CO 2. Ello parece deberse a que poseen alguna enzima con baja
afinidad hacia el CO2; sin embargo, tras varios subcultivos, suelen adaptarse a crecer a tensiones
normales.
Fsforo
Suele requerirse en forma de fosfatos, sea orgnicos o inorgnicos. Las bacterias que pueden
usar los fosfatos orgnicos (merced a la posesin de fosfatasas) no dependen absolutamente de
ellos, ya que pueden recurrir igualmente a los fosfatos inorgnicos. Los fosfatos orgnicos son
hidrolizados por fosfatasas extracelulares o (en las Gram-negativas) periplsmicas (p.ej., la
fosfatasa alcalina).
El fsforo se usa principalmente para la sntesis de los cidos nucleicos y los fosfolpidos, pero
aparece tambin en coenzimas y en protenas.

Sales minerales
Las sales minerales son la fuente de aniones (p. ej. el Cl -) y de cationes para la clula. Los
siguientes cationes, concretamente, se necesitan en cantidades relativamente grandes: K +, Mg++,
Ca++, Fe++.
El in potasio (K+):

El in potasio interviene en la activacin de una variedad de enzimas, incluyendo las que


participan en la sntesis de protenas.
En Gram-positivas est asociado con los cidos teicoicos de la pared.

El in magnesio (Mg++):

estabiliza ribosomas, membranas y cidos nucleicos;


como cofactor en muchas reacciones, especialmente las que implican transferencia de
grupos fosfato. Por ejemplo, en las reacciones que requieren ATP, el Mg ++ puede unir la
enzima al sustrato durante el mecanismo de accin de la primera.
Participa de las clorofilas y bacterioclorofilas de bacterias fotosintticas.

El in calcio (Ca++): es un cofactor de ciertas enzimas, como proteinasas.

El hierro (principalmente como in ferroso, Fe ++) suele estar acomplejado en la naturaleza,


formando sales insolubles. Las bacterias disponen de una serie de molculas,
denominadas siderforos, capaces de captar ese hierro. El hierro:

participa en muchas molculas implicadas en procesos de respiracin, como citocromos y


ferroprotenas no hmicas (protenas con Fe-S);
interviene como cofactor en ciertas enzimas.
forma parte de los magnetosomas, de los cuales depende el comportamiento
magnetotctico capacidad de orientarse en el campo magntico de ciertas bacterias. Se
encuentra bajo la forma de magnetita (xido de hierro ferromagntico) Fe 3O4

Aparte de estos iones que se requieren en cantidades relativamente grandes, las bacterias
necesitan minsculas cantidades de otros elementos (oligoelementos), a los que tambin se
denomina como micronutrientes o elementos traza.

El manganeso (Mn++) es un cofactor de ciertas enzimas, y a veces puede sustituir al Mg ++.


El cobalto (Co++) se requiere casi exclusivamente para la vitamina B12 (de hecho, si
suministramos esta vitamina al medio, la bacteria se vuelve independiente del Co ++libre).
El zinc interviene en la estabilizacin de complejos enzimticos como las ADN- y ARNpolimerasas.
El molibdeno participa en las llamadas molibdoflavoprotenas, implicadas en la asimilacin
de nitratos. Por otro lado, participa como cofactor, junto con el Fe, en el complejo
nitrogenasa de las bacterias fijadoras de N2 atmosfrico.
El nquel participa en hidrogenasas, enzimas que captan o liberan H 2.

NUTRIENTES PARTICULARES | Contenidos


Se trata de elementos que pueden ser cubiertos de modo muy distinto, dependiendo del tipo de
bacteria que consideremos. Concretamente, los elementos N y S (que requieren todos los seres
vivos) pueden ser captados por las bacterias de modos muy distintos, dependiendo de sus
capacidades biosintticas.
Tanto el N como el S se encuentran en la clula en estado reducido:

el radical -NH2 forma parte de los aminocidos (que a su vez son los sillares de las
protenas) y de las bases nitrogenadas (que participan en los cidos nucleicos y en
algunas coenzimas);
el radical -SH interviene en determinados aminocidos y en coenzimas como la CoA.

En qu formas qumicas entran N y S a las bacterias?


La mayora de bacterias fotosintticas y muchas heterotrofas asimilan estos elementos en forma
combinada inorgnica oxidada:

Como NO3--, merced a la actuacin secuencial de nitrato- reductasas y nitrito- reductasas


asimilatorias
Como SO4=. Este sulfato se activa con ATP, y luego se reduce hasta sulfito y finalmente
sulfhdrico, que ya tiene el estado de reduccin adecuado para la incorporacin del S.

Muchas bacterias hetertrofas pueden usar alguna forma reducida:

De
De
De
De

N inorgnico: amonio (NH4+)


S inorgnico: sulfuros (S=, SH-)
N orgnico: aminocidos, pptidos
S orgnico: cistena.

Muchas de las bacterias que pueden usar amonio como nica fuente de nitrgeno tambin
pueden usar nitratos.
Factores de Crecimiento Microbiano
Los requisitos para el crecimiento microbiano incluyen factores fsicos y qumicos. Entre los factores
fsicos tenemos la temperatura, el pH y la presin osmtica. Los factores qumicos necesarios para
el crecimiento bacterial son diversos elementos constitutivos de las clulas
Requisitos Fisicos
Temperatura
El patrn de crecimiento bacterial se ve profundamente influenciado por la temperatura. La
temperatura a crecimiento ptimo permite el crecimiento ms rpido de las bacterias durante un
perodo de tiempo, usualmente entre 12 y 14 horas. La temperatura mnima de crecimiento es
aquella temperatura menor a la cual la especie puede crecer. La Temperatura de crecimiento

mximo es la temperatura mayor en la cual el crecimiento es posible. Los microorganismos se


dividen en 3 grandes grupos en base a su preferencia de rango de temperatura.
Sicrfilos son capaces de crecer a 0C menos, pero crecen mejor a una temperatura mayor. Estas
bacterias son capaces de crecer a 0C, pero tienen una temperatura ptima de 15C menos y una
mxima de aproximadamente 20C. Los sicrfilos estrictos mueren si se exponen a la temperatura
de saln. Un ejemplo de sicrfilos estrictos son las bacterias que crecen en la Antrtica. An a una
temperatura ptima estas bacterias se tardan en crecer de 2 a 3 semanas. Los sicrfilos facultativos
o sicrotrofos son aquellos organismos que pueden crecer a 0C, pero crecen mejor a una
temperatura de entre 20 a 30C. Los mesfilos crecen mejor a temperaturas que fluctan de entre
25C a 40C. Aqu encontramos los patgenos de humanos y animales de sangre caliente, stos
crecen mejor a 37C. Los termfilos son bacterias que crecen a una temperatura ptima sobre los
45C. La regin de crecimiento de muchos termfilos se extiende a la regin de los mesfilos. Estas
se conocen como termfilos facultativos. La temperatura ptima de crecimiento para estos ltimos
microorganismos es entre 50 a 60C. Los termfilos extremos crecen a una temperatura mayor de
90C. Es muy importante sealar que una bacteria no manifiesta las mismas caractersticas de
cultivo
cuando se crece a diferentes temperaturas, un ejemplo lo observamos en Serratia
marcescens, esta bacteria produce un pigmento rojo solamente a cierta temperatura de cultivo.
pH
En la mayora de las bacterias el crecimiento ptimo es entre 6.5 y 7.5. Muy pocas bacterias crecen
a un pH menor de 4.0. Sin embargo, las bacterias clasificadas como acidfilos son tolerantes a la
acidez, un ejemplo es Thiobacillus thiodans que crece a un pH ptimo de entre 2.0 a 3.5.
Presin osmtica
Los microorganismos requieren agua para su crecimiento, adems para obtener nutrientes de sta.
Una presin osmtica alta causa prdida de agua y plasmlisis de la clula, por lo que se utiliza este
fenmeno para conservar los alimentos ya sea aadiendo sal o azcar, lo que previene el
crecimiento bacterial. Sin embargo algunas bacterias se han adaptado a altas concentraciones de
sal, a stas se les conoce como halfilos extremos. Por otro lado, los halfilos facultativos no
requieren una alta concentracin de sal, pero pueden crecer hasta una concentracin de 2%. Otras
bacterias pueden tolerar hasta un 15% de sal.
Requisitos Qumicos
Carbno (C) todos los organismos requieren C para sintetizar los componentes celulares.
Nitrgeno, azufre.y fsforo. Estos elementos se requieren para la sntesis de DNA, RNA, protenas y
ATP. Las bacterias pueden obtener nitrgeno (N) ya sea fijndolo directamente de la atmsfera,
como por ejemplo el gnero bacteriano Rhizobium. Tambin pueden obtener este elemento de
compuestos inorgnicos que contengan N como nitritos, nitratos, sales de amonia o amino cidos.
Las bacterias pueden obtener azufre de iones de sulfato, sulfito de hidrgeno y amino cidos con
azufre. El fsforo es esencial para la sntesis de cidos nucleicos y membranas celulares. Una
fuente para obtener fsforo son los iones de fosfato y el ATP.
Elementos trazas. Otros elementos como hierro, cobre, molibdeno y zinc son requeridos por los
microorganismos en pequeas cantidades. Usualmente tienen funcin de cofactores.

Oxgeno No todos los microorganismos necesitan 02, sin embargo, muchas formas de vida
requieren oxgeno para llevar a cabo respiracin aerbica. Los microorganismos que utilizan oxgeno
molecular son llamados aerbicos. Estos se clasifican en aerbicos obligados que son los que
requieren oxgenos molecular para vivir, y los aerbicos facultativos los cuales utilizan el oxgeno
molecular cuando est presente, pero en su ausencia continan su crecimiento por la va de
fermentacin o respiracin anaerbica, un ejemplo es Escherichia coli. Por otro lado tenemos los
anaerbico obligados que necesitan ausencia de oxgeno molecular para crecer y donde este
generalmente es txico, un ejemplo es el gnero Clostridium. Estos microorganismos obtienen el
tomo de oxgeno molecular del agua. Tambin se observan microorganismos anaerbicos
aerotolerantes los cuales no utilizan el oxgenos molecular para su crecimiento, pero pueden
tolerarlo. Los microaeroflicos slo pueden crecer en concentraciones de oxgeno molecular menor a
las encontradas en el aire.
Factores orgnicos de crecimiento Estos son compuestos orgnicos esenciales que el organismo no
puede sintetizar, aqu se incluyen las vitaminas, los amino cidos, las purinas y las pirimidinas.
Medios de cultivo
Es un material nutriente preparado para el crecimiento de microorganismos en el laboratorio. Un
medio quimicamente definido es aquel donde su composicin qumica exacta es conocida. Un medio
compleio es aquel donde su composicin exacta vara de un lote a otro, ya que este medio esta
hecho de nutrientes como extractos de levaduras, carne, partes de plantas o protenas digeridas.
Hay medios especficos para crecer anaerbicos, es estos se utiliza un ingrdiente reductor como
tioglicolato de sodio, que se combina con el oxgeno molecular disuelto para eliminarlo del medio.
Tambin hay medios selectivos, stos medios en particular proveen nutrientes que ayudan al
crecimiento y predominancia de un tipo particular de bacterias, y a su vez inhibe que otros tipos de
microorganismos estn presentes, un ejemplo de estos es el medio para crecer la bacteria Neisseria
gonorrhoeae. El Medio diferencial nos permite diferenciar entre varios tipos de bacterias al incorporar
a ste ciertas substancias como sangre, sal, tintes y otros. Si inoculamos el medio con bacterias que
destruyen las clulas rojas mientras que otras bacterias no destruyen este tipo de clulas, podemos
diferenciar unas de otras en el mismo medio.
En la siguiente tabla se muestran algunas de las vitaminas y cofactores requeridos por algunas
bacterias:
Factor o vitamina

funciones principales

p-aminobenzoico (PABA)

precursor del cido flico

Acido flico

metabolismo de compuestos C1, transferencia


de grupos metilo

Biotina

biosntesis de cidos grasos; fijacin de CO2

Cobalamina (vitamina B12)

reduccin y transferencia de compuestos C 1;


sntesis de desoxirribosa

Niacina (cido nicotnico)

precursor del NAD; transferencia de electrones


en reacciones redox

Riboflavina

precursor de FAD y FMN

cido pantotnico

precursor de la CoA

Tiamina (vitamina B1)

descarboxilaciones; transcetolasas.

Complejo
piridoxamina)

B6 (piridoxal, transformaciones de aminocidos y cetocidos

Grupo Vitamina K, quinonas

transportadores de electrones (ubiquinonas,


menaquinonas, etc.)

Captacin celular de nutrientes


Los microorganismos utilizan varios sistemas de transporte diferentes.
Los ms importantes son:
1.
2.
3.
4.

Difusin simple
Difusin facilitada
Transporte activo
Traslocacin de grupo.

Difucion simple
Depende de la diferencia de gradiente de concentracin entre el exterior y el interior de la clula, y
de la permeabilidad de la membrana. La concentracin externa del nutriente debe ser alta. Solo
molculas pequeas pueden atravesar la membrana: H2O, O2, CO2, glicerol.
Difucion facilitada
Permite el transporte de molculas en contra de un gradiente de concentracin, con gasto de
energa.
El complejo proteico de membrana tiene varias subunidades: poro
La fuente de energa puede ser: ATP, compuestos de fosfato de alta energa, fuerza protn motriz.
Transporte por gradiente
SIMPORTE: transporte combinado de dos sustancias en la misma direccin
+
Ej. Simporte de H : La energa almacenada en el protn facilita el transporte del soluto. Se utiliza
para captar aminocidos y cidos orgnicos
ANTIPORTE: Sistema combinado de transporte por el que las sustancias se desplazan en
direcciones opuestas.

+
+
Ej. Como respuesta al ingreso de H se bombean iones Na al exterior. El gradiente de sodio
generado dirige la captacin de azcares y aminocido
Traslocacion de grupo:
Una molcula es transportada al interior celular despus de alterarse qumicamente
Ej. Sistema Fosfoenolpiruvato-Fosfotransferasa de azcares
PEP + azcar (exterior) / piruvato + azcar-P (interior)
Captacin de Fe: La captacin de Fe es difcil debido a la insolubilidad del ion Fe 3+
Los siderforos son molculas de bajo PM capaces de formar complejos de Fe 3+ y aportarlos a la
clula
Los mo secretan siderforos cuando hay poco Fe disponible. E complejo Fe-siderof se une a la prot
receptora del siderforo. Dentro de la clula el Fe se reduce a Fe 2

Requerimientos nutricionales
Los requerimientos nutricionales estn determinados por el tipo de metabolismo celular, ya sea
autotrfico, que corresponde a los microorganismos que obtienen el carbono del CO 2 como las algas
y algunas bacterias, heterotrfico que lo poseen organismos que necesitan compuestos orgnicos
como fuente de carbono. Otro factor esencial esta determinado por las condiciones del cultivo, si es
aerobio o anaerobio. E1 O2 es el oxidante mas comn en el metabolismo energtico. En la ausencia
de ste, el NO3-- SO42- son utilizados como aceptores de electrones por algunas bacterias. Otras
protistas obtienen su energa, en condiciones anaerobias por reaccin de oxido-reduccin realizadas
sobre compuestos orgnicos. Las fuentes de carbono cumplen tambin el rol de ser fuente de
energa.
Otro requerimiento nutricional esta constituido por las fuentes de nitrgeno que pueden ser de
naturaleza inorgnica u orgnica. E] nitrgeno es utilizado para la biosntesis de protenas, cidos
nucleicos y polmeros de la pared celular. Para la sntesis de protena se requieren en general Laminoacidos, aunque tambin son necesarios algunos aminocidos de la serie D como D-alanina y
D-asprtico para su incorporacin a la pared de la clulas. En algunos casos se requieren tambin
peptidos de histidina.
Los requerimientos de otros macronutrientes como el P y el S son suministrados en forma de
fosfatos y sulfatos ( aminocidos azufrados). E1 fsforo se incorpora en cidos nucleicos, y
polmeros celulares. El S es asimilado para la sntesis de aminocidos azufrados, y adems se
necesita para la biotina, coenzima A, tiamina y otros componentes.
Los requerimientos de K y Mg son tambin esenciales. Una parte importante del primero esta unida
al RNA de manera que los requerimientos de K aumentan con los factores que influyen en el
aumento del RNA de las clulas, como la velocidad de crecimiento. El ion K acta como coenzima y
probablemente acta como catin en la estructura aninica de varios componentes celulares. El ion

Mg es esencial para la estabilidad de los ribosomas y acta como cofactor en numerosas reacciones
del metabolismo. Tanto el K como el Mg se incorporan a los medios en forma de sales como fosfato
y sulfato.

Con respecto a los micronutrientes se distinguen 2 categoras: a) Los que son frecuentemente
esenciales para el crecimiento como Ca, Mn, Fe, Co, Cu y Zn y b) los que son raramente esenciales
como B, Na, Al, Si, Cl, V, Cr, Ni, As, Se, Mo, etc.. En general los requerimientos de trazas de
elementos son conocidas cualitativamente. A veces es difcil demostrar un requerimiento de un
micronutriente porque generalmente est presente en suficiente cantidad como impureza de los
componentes principales. Los requerimientos de estos compuestos pueden aumentar varias veces
cuando el cultivo ha estado sujeto a "strees", como por ejemplo por aumento de temperatura por
encima de un valor ptimo.
Los requerimientos de factores de crecimiento comprenden ciertos aminocidos y vitaminas del
grupo B como tiamina, riboflavina, cido pantotetico, niacina, etc., que representan para muchas
bacterias y levaduras factores esenciales en los medios sin los cuales no se produce crecimiento
celular. La mayor parte de las vitaminas son constituyentes de co-enzimas. Otros factores de
crecimiento son las purinas, poliaminas, putrescinas, etc..
En algunos procesos existe la necesidad de efectuar otros agregados, aparte de los nutrientes
requeridos por los microorganismos y que representan los requerimientos especficos del proceso
considerado.
Un ejemplo es el caso de los precursores que constituye la base de una molcula que debe ser
sintetizada por el microorganismo, como el cido fenil actico para la produccin de penicilina. Otro
ejemplo es el agregado de cloruros o bromuros en el caso de algunos antibiticos como cloro y
bromotetraciclinas producidas por el Streptomyces aureofaciens. El agregado de sulfito, en el
proceso de fermentacin alcohlica, que favorece la formacin de glicerol, es otro ejemplo de un
requerimiento especifico.
El diseo correcto tiene que ver con las caractersticas bioqumicas propias y evolucin de los
parmetros de cada proceso. Por ejemplo, un proceso caracterizado por un descenso continuo de
pH, debido al uso de una sal de amonio como fuente de nitrgeno, obliga a considerar en su diseo
algn agregado que no corresponda a una exigencia nutricional, como es el caso del control de pH
del mismo. Este puede efectuarse por agregados al medio de agentes "buffer" como mezclas de
fosfatos o de carbonato de calcio o como mas generalmente se hace, con agregados peridicos de
soluciones alcalinas que pueden efectuarse en forma mas conveniente mediante un control
automtico de pH. El diseo de un medio especifico para la produccin de cido ctrico debe
considerar la influencia negativa que para el proceso tiene un exceso de hierro en su composicin;
por lo tanto dicho medio debe disearse de manera tal que su preparacin (a partir de diversas
materias primas) considere una eliminacin total del hierro y posterior agregado del mismo en
cantidades controladas.
Bibliografia:

Prescott, L. M., Harley, J. P., y Klein, D. A. Microbiologa. 4 edicin. McGraw-Hill


Interamericana, 1999.

Madigan, M. T., Martinko, J. M., y Parker, J. Brock Biologa de los Microorganismos. 10


edicin. Prentice-Hall. Madrid, 2003.