Está en la página 1de 47

INTRODUCCIN AL ESTUDIO DE LA CLULA

Silvia Mrquez - Lionel Valenzuela Prez - Gladys Glvez - Luis A. Fernndez - Cecilia Bocchino

NIVELES DE ORGANIZACIN
Fig. 1.1. Niveles de organizacion de la materia
A los seres vivos se los define por sus caractersticas, una de stas es su organizacin. Esta organizacin
biolgica representa el patrn complejo que nos muestra el camino que ha seguido la evolucin, desde formas
sencillas a otras ms complejas.

Los seres vivos estn formados por materia. La materia est


formada por elementos (92 elementos naturales, como el
Cloro, por ejemplo) y se caracteriza por poseer
determinadas propiedades intensivas, tales como el punto de
fusin, punto de ebullicin, conductividad elctrica, etc.
Los elementos estn formados por tomos. Un tomo es la
porcin ms pequea de un elemento que conserva sus
propiedades qumicas. Las investigaciones de los fsicos han
descubierto
un
variado
nmero
de partculas
subatmicas (Nivel Subatmico), para nuestros fines
mencionaremos slo tres : protones, neutrones y electrones.
Los protones son partculas con carga positiva; los
electrones, en cambio, tienen carga negativa y masa muy
pequea; los neutrones son partculas neutras, sin carga, y su
masa es casi idntica a la de los protones; los protones y
neutrones forman casi toda la masa de un tomo y se
localizan en el ncleo atmico. Si combinamos un protn y un
electrn se forma un tomo de Hidrgeno, entidad con
propiedades diferentes a las de un protn y un electrn
(Nivel Atmico). Si combinamos tomos de Hidrgeno entre
s obtenemos Hidrgeno molecular (H 2), que es un gas
incoloro; si, en cambio, combinamos el H 2 con Oxgeno, otro
gas, obtenemos agua, una molcula (Nivel Molecular) cuyas
propiedades todos conocemos y que no son las mismas que las
del H2 y el O2 y que tambin difieren de las propiedades de
las partculas subatmicas y de los tomos que stas forman.
La vida surgi a partir de tomos y molculas.
Si combinamos molculas entre s, formamos grandes y
complejas molculas: las macromolculas, como las protenas
y los cidos nucleicos (Nivel Macromolecular). Estas
macromolculas constituyen la materia prima que forman los
virus (Nivel Prebitico o Supramolecular) y las clulas
(Nivel Celular). En el Nivel Subcelular mltiples molculas
se ensamblan y dan lugar a estructuras especializadas como
los organoides (mitocondrias, cloroplastos, etc). Podemos
decir que la vida aparece como propiedad definitoria en
el Nivel Celular, o de otro modo, la clula es la porcin ms
sencilla de la materia viva que es capaz de realizar todas las funciones imprescindibles para la vida.
En la mayor parte de los individuos pluricelulares, las clulas se organizan de acuerdo a sus caractersticas y
funciones conformandotejidos como el conectivo, muscular, epitelial, nervioso (Nivel Tisular). Los tejidos
estn ordenados en estructuras funcionales, denominadas rganos como el corazn y los pulmones en los
animales, o las hojas y las races en las plantas. Las funciones biolgicas bsicas se llevan a cabo por un sistema
o aparato, que es una asociacin coordinada de tejidos y rganos. Los organismos o individuos pluricelulares
estn formados por sistemas que actan en forma coordinada y rigurosa.
Existen otros niveles de organizacin biolgica, adems de los nombrados anteriormente, donde las propiedades
provienen de la relacin entre los organismos. Por ejemplo, el Nivel de organizacin POBLACIN rene a todos
los individuos de una misma especie que viven en un mismo lugar, en el mismo tiempo, y que comparten el mismo

hbitat. Estas poblaciones interactan de distinta manera con otras poblaciones del lugar constituyendo
una COMUNIDAD, por ejemplo la poblacin de seres humanos de la ciudad de Buenos Aires y el conurbano,
aprovecha para alimentarse a las distintas poblaciones de animales y plantas de la zona y se halla parasitada
por las mismas poblaciones de parsitos intestinales.
Esta comunidad comparte el mismo lugar fsico que presenta caractersticas particulares. La unin de estos
factores fsicos con los factores biolgicos constituyen los ECOSISTEMAS.
Todos los ecosistemas de la Tierra estn relacionados, directa o indirectamente. Es por ello que un cambio
drstico o continuo de alguno de ellos indefectiblemente acarrear cambios en los restantes. Del
mantenimiento de un equilibrio entre los distintos ecosistemas, depende la vida en el planeta.

Tabla 1.1- Niveles de Organizacin

1. Nivel Subatmico

2. Nivel Atmico

3. Nivel Molecular (Monosacridos, Aminocidos, Nucletidos, etc.)

4. Nivel Macromolecular (Polisacridos, Protenas, Acidos nucleicos, Lpidos complejos, etc. )

5. Nivel Prebitico o Supramacromolecular (Virus )

6. Nivel Subcelular (Organoides: Mitocondrias, Cloroplastos, Ribosomas, etc.)

7. NIVEL CELULAR {Clula Procarionte, Clula Eucarionte) Individuos Unicelulares: Bacterias,


Algas unicelulares, Levaduras, Protozoos, etc.

8. Nivel Tisular (Tejidos: Conectivo, Epitelial, Muscular, etc.)

9. Organos (Corazn. Pulmones. Estmago, etc.)

10. Sistemas y Aparatos (Aparato Circulatorio, Sistema digestivo, etc. )

11. Organismos(Individuos Pluricelulares, Animales y Vegetales Superiores).

12. Poblacin

13. Comunidad.

14. Ecosistema

15. Universo

Durante el desarrollo de nuestra materia, nos ocuparemos de los niveles de organizacin ms sencilla y
haremos hincapi en el Nivel Celular de Organizacin.

ORGANIZACIN CELULAR
TEORA CELULAR
La clula es la unidad de vida ms pequea. Es la unidad anatmica y fisiolgica de todos los seres vivos. Dos
cientficos alemanes el botnico Mattias Schleiden (1804-1881) y el zologo Theodor Schwann (1810-1882)
fueron los primeros en sealar que " Los cuerpos de las plantas y de los animales estn compuestos por clulas y
por productos celulares" enunciando el postulado inicial de la Teora Celular
Posteriormente, Rudolph Virchow (1821-1902) amplio la Teora Celular y afirm: " Todas las clulas proceden de
otra preexistente". Por lo tanto, las clulas no surgen por generacin espontnea a partir de materia inanimada.
Otra importante conclusin de la Teora Celular afirma que todas las clulas actuales, tienen un origen comn.
La evidencia ms importante, sobre el origen comn de todas las formas celulares, radica en las similitudes
bsicas de sus estructuras y principalmente de su composicin molecular.

Tabla 1.2 Postulados de la Teora Celular

1- Todos los seres vivos estn formados por clulas y productos celulares (unidad anatmica)

2- Las funciones de un ser vivo son el resultado de la interaccin de las clulas que lo componen
(unidad fisiolgica)

3- Toda clula slo puede tener origen en una clula progenitora.

4- Toda clula tiene la informacin hereditaria de el organismo del cual forma parte, y esta
informacin pasa de una clula progenitora a una clula hija.

CARACTERSTICAS DE LAS CLULAS


Todas las clulas estn cubiertas por una membrana externa, llamada membrana plasmtica, que las separa de
otras clulas y del medio circundante con el cual intercambian materia y energa. Este intercambio esta
altamente regulado y es selectivo. De esta forma la membrana plasmtica debe actuar no slo como limite
celular sino tambin como barrera selectiva. Por lo tanto la clula, mantiene una composicin qumica muy
ordenada y diferente a la del entorno.
Todas las clulas poseen un metabolismo o conjunto de reacciones qumicas, que posibilitan el mantenimiento de
la vida. Este metabolismo para sustentarse necesita de una o ms fuentes de energa. Las clulas, necesitan de
distintivos tipos de molculas energticas:
* Monedas energticas, como el ATP
* Molculas combustibles, como la glucosa o los cidos grasos
* Molculas de reserva de energa, como el glucgeno o el almidn
Dentro de las reacciones para obtener e interconvertir diferentes forma de energa, son muy importantes las
reacciones de oxido-reduccin o reacciones REDOX. En este tipo de reacciones es esencial la participacin de
las coenzimas de oxido-reduccin, como el NAD+ y el FAD.
Todas las clulas, almacenan en forma de ADN, cido desoxirribonucleico, a informacin necesaria para
controlar sus actividades (reproduccin, metabolismo), y para establecer su propia estructura. El ADN, es un
polmero formado por una secuencia lineal, de monmeros, llamados nucletidos. Esta secuencia de nucletidos,
especifica una secuencia de aminocidos (estructura primaria de una protena). La especificidad de la secuencia
de aminocidos determinada por la secuencia de bases del ADN esta regida por el cdigo gentico.
La secuencia de bases del ADN, que codifica una protena, es un GEN. Las protenas, son molculas que llevan
a cabo gran parte de las funciones celulares. Muchas protenas son enzimas, molculas encargadas de dirigir y
regular el metabolismo celular. Las enzimas aceleran las reacciones qumicas, hacindolas compatibles con la
vida. De esta manera las enzimas, dirigen la sntesis y degradacin de todas las molculas biolgicas, incluidos
lpidos, glcidos, protenas y los mismos cidos nucleicos. De esta forma, el ADN al almacenar la estructura de
las enzimas y otras protenas reguladoras, ejerce el control del metabolismo celular.
El ADN utiliza un segundo cido nucleico, el ARN, cido ribonucleico, como intermediario. A partir de la
secuencia de bases del ADN, que codifica una protena, se sintetiza una secuencia de bases de ARN. Este
proceso es llamado transcripcin. EL cido ribonucleico encargado de transportar la informacin, recibe la
denominacin de ARN mensajero. Este ARN mensajero, porta la informacin necesaria para la sntesis de
protenas, proceso llamado traduccin, el cual tiene lugar en el citoplasma con la intervencin de dicho ARNm,
los ribosomas y el ARNt que porta los aminocidos.
Las clulas para perpetuarse necesitan reproducirse. Esto significa que la informacin almacenada en el ADN
debe duplicarse para poder ser transmitida a las clulas hijas. El ADN tiene la excepcional caracterstica de
ser una molcula capaz de autorreplicarse, es decir de generar una copia de si misma. Este proceso es
llamado duplicacin o replicacin.

DIMENSIONES DE LAS CLULAS


Por qu son tan pequeas las clulas? Las clulas deben captar alimento y otros materiales a travs de su
membrana plasmtica y deben eliminar los productos de desecho, generados en las distintas reacciones
metablicas rpidamente antes de que estos se acumulen hasta niveles txicos para la supervivencia celular.
Por lo tanto, las clulas son pequeas, de modo que en ellas las molculas recorren distancias cortas, lo que
acelera las actividades celulares.
Adems, a mayor superficie celular, mayor es el transporte de molculas a travs de la membrana, siendo
importante para la continuidad de los procesos metablicos la proporcin superficie celular sobre volumen
celular. Supongamos una clula de forma cbica, cuanto ms grande es, su superficie crece proporcionalmente
lado x lado, es decir a la segunda potencia de la longitud de un lado, en cambio el volumen celular aumenta
proporcionalmente a la tercera potencia. Por lo tanto, el volumen celular aumenta ms que su superficie a
medida que la clula crece, determinando el limite superior al tamao de la clula en cuestin. Est clula slo
podr iniciar el proceso de divisin celular (previa duplicacin de su ADN) o perecer.
Por otra parte, debemos recordar que en las clulas el material Gentico (localizado en el ncleo, en clulas
eucariontes), posee un rea limitada de influencia sobre el citoplasma circundante, que es el que incrementa
marcadamente su tamao durante el crecimiento celular, siendo otra limitante del tamao celular la relacin
ncleo/citoplasma.

CLULAS EUCARIOTAS Y PROCARIOTAS


CARACTERSTICAS PRINCIPALES
Todas las clulas se parecen y responden a un patrn comn por ms diversas que sean. Las clulas de
organismos pluricelulares son diferentes en su funcin, por ser distintas estructuralmente, pero todas
concuerdan con un patrn comn. Por ejemplo, aquellas especializadas en la sntesis de lpidos, tendrn mayor
desarrollo del retculo endoplasmtico liso y sern distintas de las neuronas especializadas en la transmisin
del impulso nervioso, cuya especializacin es tan grande que pierden su capacidad de reproducirse.
A pesar de las semejanzas y diferencias entre las clulas y que todas cumplen con los postulados de la Teora
Celular, se distinguen dos grandes tipos de clulas:

PROCARIOTAS (sin ncleo verdadero) y EUCARIOTAS (con ncleo).

Tabla 1.3- Principales caractersticas comunes entre clulas eucariotas y procariotas

1- En ambos tipos celulares el ADN es el material gentico.

2- Ambos tipos celulares poseen membranas plasmticas como lmite celular.

3- Poseen ribosomas para la sntesis proteica.

4- Poseen un metabolismo bsico similar

5- Ambos tipos celulares son muy diversos en formas y estructuras.

Los eucariontes son organismos cuyas clulas poseen un sistema de endomembranas (membranas internas) muy
desarrollado. Estas membranas internas forman y delimitan organelos donde se llevan a cabo numerosos
procesos celulares. De hecho l ms sobresaliente de estos organelos es el ncleo, donde se localiza el ADN.
Justamente, el trmino eucarionte, significa ncleo verdadero (eu: verdadero, carion: ncleo). Por lo tanto, las
clulas eucariontes, poseen diversos compartimentos internos, rodeados por membranas. De esta forma es ms
eficiente reunir a los sustratos y sus enzimas, en una pequea parte del volumen celular total. Adems de
conseguirse una mayor velocidad, las membranas favorecen la aparicin de estructuras reguladoras que
orientan el flujo de molculas y su posterior conversin en otros productos. Ciertos procesos como la
fotosntesis y la cadena respiratoria estn altamente organizados gracias a la localizacin de las enzimas en
diferentes estructuras de membrana. Por otra parte, las membranas tambin impiden la aparicin de sustratos
en forma inespecfica en distintas regiones de la clula, ya que actan como barrera selectiva. En cuanto al
tamao, podemos decir que en promedio una clula eucarionte es diez veces mayor que una clula procarionte.
En cuanto al material gentico, podemos decir que el ADN eucariota posee una organizacin mucho ms
compleja que el ADN procarionte.
Las clulas procariontes carecen de ncleo y generalmente son mucho menores que las clulas eucariontes. El
ADN de las clulas procariontes no est rodeado por una membrana, pero puede estar limitado a determinadas
regiones denominadas nucleoides. Las clulas procariontes, al igual que las clulas eucariontes, poseen una
membrana plasmtica, pero carecen de membranas internas, que formen organelos. Sin embargo, debemos
precisar que en algunas clulas procariontes, la membrana plasmtica forma laminillas fotosintticas.
Las clulas procariontes poseen una caracterstica nica, una pared de peptidoglicanos, un gran polmero de
glcidos y aminocidos.

Tabla 1.4- Caractersticas Diferenciales entre el Modelo Celular Procaritico y Eucaritico

Caracterstica

Clula Procaritica

Clula Eucaritica

Ncleo

No posee membrana nuclear

Posee membrana nuclear

Cromosomas

Un nico cromosoma circular y


desnudo

Posee uno o ms cromosomas


lineales unidos a protenas
(cromatina)

ADN extracromosmico

Puede estar presente como


plsmidos

Presente en organelas

Organelas citoplasmticas

No posee

Membrana plasmtica

Contiene las enzimas de la cadena Semipermeable, sin las funciones


respiratoria, tambin puede
de la membrana procaritica
poseer los pigmentos
fotosintticos

Sistema de endomembranas

No posee

Presenta REG, REL, Golgi,


lisosomas, vacuolas y vesculas.

Pared celular

Capa rgida de peptidoglucano


(excepto micoplasmas)

No poseen pared de
peptidoglucano. Pueden poseer una
pared de celulosa o quitina

Esteroles

Ausentes (excepto micoplasmas)

Generalmente presentes

Citoesqueleto

Ausente

Presente. Formado por filamentos


proteicos.

Exocitosis y Endocitosis

Ausente

Presente

Ribosomas

70 S en el citoplasma

80 S en el retculo endoplsmico y
en el citosol

Divisin

Fisin Binaria (amitosis)

Mitosis - Meiosis

Tamao

0,2 a 10 mm

Siempre superior a 6 mm

ESTRUCTURA DE LAS CLULAS PROCARITICAS

Mitocondrias y cloroplastos, (los


cloroplastos presentes slo en
clulas vegetales)

Fig. 1.2- Esquema de una ultraescructura de una bacteria idealizada

BACTERIAS, MICOPLASMAS Y ALGAS CIANOFCEAS

Cuadro 1.1- Estructura de una Clula procarita


Las bacterias pueden definirse como organismos unicelulares procariontes que se reproducen
por fisin binaria. Contienen toda su informacin gentica en un nico cromosoma bacteriano circular. Tambin
poseen sistemas productores de energa y biosintticos necesarios para el crecimiento y la reproduccin.
Poseen como caracterstica particular una pared rgida de peptidoglicanos. Son generalmente de vida libre y
poseen ADN extracromosmico en forma de plsmidos, estos codifican genes de resistencia a antibiticos o
factores "sexuales" como los pili.
Los micoplasmas son las bacterias mas pequeas de vida independiente. Son muy flexibles y deformables por lo
que atraviesan los filtros de esterilizacin. Entre sus caractersticas principales se encuentran: a) carecen de
pared celular, b) en su membrana plasmtica poseen esteroles, que no son sintetizados por la bacteria sino que
son absorbidos del medio de cultivo o del tejido donde se desarrolla.. Los micoplasmas son resistentes a la
penicilina (carecen de pared de peptidoglucano) y por la misma razn no toman la coloracin de Gram.
Las cianobacterias, anteriormente llamadas algas cianofceas (azulverdosas), son bacterias Gramnegativas. Se
encuentran presentes en estanques, lagos, suelo hmedo, cortezas de rboles, ocanos y algunas en fuentes
termales. La mayor parte de las cianobacterias son auttrofos fotosintticos. Contienen clorofila a, que
tambin se encuentra en plantas y algas. La clorofila a y pigmentos accesorios se localizan en membranas

fotosintticas, llamadas laminas internas o laminillas fotosintticas. Muchas especies de cianobacterias fijan
nitrgeno, este proceso enriquece el suelo.
En la Tabla 1.4 se aprecian las diferencias ms importantes entre las clulas procariotas (bacterias) y
eucariotas
PLSMIDOS
Un plsmido es una molcula de ADN extracromosmico que se replica en forma autnoma, por lo que al igual
que el cromosoma es un replicn. Puede haber hasta 50 copias de un plsmido en una bacteria. Funcionalmente
los plsmidos son elementos genticos accesorios, es decir que la bacteria puede vivir sin ellos. Sin embargo, la
informacin que contienen puede contribuir a la adaptacin de la bacteria al medio y a la evolucin de la misma.
Los plsmidos pueden contener genes que codifican factores de resistencia a antibiticos (los plsmidos R) y
factores de patogenicidad como exotoxinas. La evolucin bacteriana a travs de los plsmidos es factible, ya
que pueden ser intercambiados entre distintas bacterias (por ejemplo, el plsmido F). Es decir que ciertos
genes pueden transferirse de una bacteria otra mediante el pasaje de plsmidos, a este mecanismo se lo
denomina conjugacin. Para que la conjugacin pueda llevarse a cabo las dos bacterias deben ponerse en
contacto fsico . Esto es posible debido a que una de las bacterias, posee pili sexuales (pelos) en su envoltura.
Estos pili se encuentran codificados en el mismo plsmido F (plsmido conjugativo). La bacteria que transfiere
el plsmido es la que posee pili y se la denomina F+, la clula receptora es F-.
TRANSPOSONES
Los transposones son elementos genticos movibles, que se encuentran presentes en los procariontes (aunque
tambin en las clulas eucariontes). El descubrimiento de los transposones se lo debemos a Barbara
McClintock. Los transposones son fragmentos de ADN que se mueven de una localizacin a otra del cromosoma.
Esta transposicin es catalizada por una enzima llamada transposasa. El gen de la transposasa esta incluido
dentro del mismo transposn. Los transposones al ser elementos mviles, dentro del genoma, pueden provocar
mutaciones al insertarse en nuevas regiones del ADN.
PARED CELULAR. BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS
Por fuera de la membrana celular, se encuentra una pared celular rgida de peptidoglicano, que esta presente
en todas las bacterias excepto los micoplasmas. La presencia de la pared protege a la bacteria de la diferencia
de presin osmtica entre el medio interno de la bacteria y el medio exterior. De no existir la pared la bacteria
estallara. Adems la pared cumple funciones de proteccin como por ejemplo contra sustancias txicas .
Existen dos tipos de pared bacteriana que pueden diferenciarse por la Tincin de Gram (siglo XIX). El primer
grupo de bacterias son aquellas capaces de retener el colorante cristal violeta luego de la decoloracin con
alcohol-cetona. Estas bacterias son llamadas Grampositivas. El segundo grupo esta conformado por aquellas
bacterias incapaces de retener el colorante luego del tratamiento decolorante, por lo tanto son llamadas
Gramnegativas.
LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAMPOSITIVAS

Fig. 1.3- Esquema de la parecelular de una bacteria Grampositiva


La pared celular de las Grampositivas es ms gruesa que la de los Gramnegativas. Posee peptidoglicano, cidos
teicoicos y lipoteicoicos. El componente fundamental es la murena, un peptidoglicano que solo se encuentra en
los procariontes. La murena consiste en una cadena lineal de dos azcares alternados N-acetilglucosamina y
cido acetilmurmico. A cada residuo de cido murmico se encuentra unido un tetrapptido compuesto de D- y
L- aminocidos. Aproximadamente un tercio de los tetrapptidos presentes participan de la unin lateral entre
cadenas adyacentes de murena. La pared celular es biolgicamente estable, resiste el ataque de las enzimas de
los mamferos, excepto de la lisozima que la degrada. La sntesis de la pared puede ser afectada por
antibiticos como la penicilina. Los cidos teicoicos son el principal determinante antignico de las bacterias
Grampositivas y por lo tanto definen la individualidad inmunolgica de estas bacterias.
LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAMNEGATIVAS

Fig. 1.4- Esquma de la pared celular de una bacteria Gramnegativa


El espesor de la pared celular de una bacteria Gramnegativas es considerablemente menor que el de una
Grampositivas. La cantidad de murena es mucho menor en los Gramnegativas. Los cidos teicoicos no estn
presentes en las bacterias Gramnegativas. A ambos lados de la fina pared de murena se encuentra un gel
periplsmico, que define al llamado periplasma (antes llamado espacio periplasmtico).
Por fuera del periplasma se encuentra una estructura exclusiva de las Gramnegativas, la denominada membrana
externa. Si bien es estructuralmente similar a una bicapa lipdica, su composicin es diferente de la de otras
membranas biolgicas. Esta bicapa es muy asimtrica, la semicapa interna esta compuesta por fosfolpidos,
pero la semicapa externa esta compuesta por lipopolisacridos (LPS), altamente txico para el ser humano
(endotoxina).
Para obtener nutrientes las bacterias Gramnegativas, poseen porinas que son protenas que forman poros en la
membrana externa.
CPSULAS
Por fuera de la membrana externa de las Gramnegativas y de la gruesa pared de las Grampositivas, se
encuentra presente, en algunas bacterias, una cpsula o matriz exopolisacrica, formada por un gel
hidroflico. En general esta cpsula o matriz esta formada por polmeros de azcares. Las cpsulas permiten a
las bacterias evadir los mecanismos de defensa de los organismos pluricelulares, tambin tienen funciones de
adherencia a epitelios permitiendo de esta manera colonizar los tejidos del husped.

ESTRUCTURA DE LAS CLULAS EUCARITICAS

Cuadro 1.2- Estructura de una Clula eucarita

Fig.1.5- Esquema de la ultraestructura tridimencional de una clula animal y sus principales componenetes

Presentan este modelo celular, los organismos de los reinos Protista, Hongos, Plantas y Animales.
Si bien existe una gran diversidad entre estas clulas, el modelo bsico es similar, presentando como
estructura sobresaliente el ncleo celular.
NCLEO CELULAR
Las diversas partes de una clula eucaritica interactan de forma integrada. Esto es posible
porque existe un centro primordial de control: el ncleo celular. Una membrana doble, la envoltura nuclear
(constituida por dos unidades de membrana), controla el transporte, muy selectivo, de sustancias entre el
ncleo y el citoplasma. El pasaje se realiza a travs de los poros nucleares. La envoltura nuclear posee

ribosomas adheridos a la cara citoplasmtica y una estructura proteica en su parte interna llamada lamina
nuclear, que sirve como esqueleto al ncleo.
En el interior del ncleo, se encuentra el material gentico (ADN) asociado a protenas bsicas llamadas
histonas, formando una estructura fibrilar muy enrollada denominada cromatina y el nucleolo, sitio de
ensamblaje de los ribosomas (estructuras esenciales para la sntesis de protenas, formados por ARN
ribosomal y protena). El ARN ribosmico se sintetiza en el nucleolo, y las protenas ribosmicas en el
citoplasma, para pasar despus al ncleo y de all al nucleolo, donde se unen al ARN ribosomal para formar los
ribosomas.

Tabla 1.5- Caractersticas del Ncleo Celular y sus Componentes

Estructura : Ncleo Celular

Descripcin

Funcin

Ncleo

Estructura rodeada por una doble Regular la funcin celular.


membrana con poros. Contiene
Control del metabolismo,
cromatina/cromosomas y nucleolo. reproduccin (ciclo celular) y
diferenciacin celular.

Envoltura Nuclear

Estructura formada por dos


unidades de membrana unidas a
nivel de los poros nucleares.

Continuacin del REG. Posee


poros que regulan el pasaje
entre ncleo y citoplasma

Nucleolo

Cuerpo granular en el ncleo, que


consiste en ARN y protenas.

Sitio de sntesis del RNA


ribosmico y de ensamble de
los ribosomas.

Cromatina

ADN asociado a protenas, tanto


estructurales (histonas) como a
protenas regulatorias. La
cromatina es visible durante la
interfase celular

Empaquetamiento
(plegamiento) de ADN. El ADN
compone los genes. Funciones
regulatorias de la
transcripcin gentica.

Cromosomas

ADN asociado a protenas, en


estado superenrrollado. Visible en
forma de estructuras cilndricas
cuando la clula se divide, ya sea
en mitosis o meiosis.

Contienen los genes que son las


unidades de informacin, que
rigen las funciones y
estructura celular.

Rodeando al ncleo encontramos el CITOPLASMA, coloide donde predominan como constituyentes agua, iones,
enzimas y donde se encuentran incluidos los organelos celulares. El citoplasma se encuentra separado del
ambiente exterior por la membrana plasmtica.
MEMBRANA PLASMTICA
Estructuralmente esta compuesta por una bicapa fosfolipdica. El colesterol esta presente en las clulas
animales, pero esta ausente, en general, en plantas, hongos y procariontes (salvo micoplasmas). La membrana
plasmtica tambin contiene mltiples protenas con diversas funciones. Podemos dividirlas en dos grandes
grupos: a) protenas integrales de membrana y b) protenas perifricas de membrana. Las primeras atraviesan
la membrana de lado a lado, mientras que las segundas estn en contacto con la membrana, pero no la
atraviesan. Algunas son enzimas reguladoras, otras receptores hormonales. Existen tambin protenas
transportadoras y canales reguladoras del movimiento de iones y molculas a travs de la membrana
plasmtica, de all su enorme especificidad. Otra funcin importante de la membrana es la comunicacin
intercelular y el reconocimiento de diversos tipos de molcula (hormonas, virus, anticuerpos, toxinas, etc.) que
interactan con ella. En general esta funcin es llevada acabo por glucoprotenas y glucolpidos, que se
encuentran solo en el lado externo de la membrana plasmtica. Se cree que los glcidos juegan un importante
papel en la adhesin entre clulas. A esta capa, de glucolpidos y glucoprotenas se la denomina glucoclix.
SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS
Este sistema se compone de sistemas membranosos interconectados entre s, como el retculo
endoplalmtico liso o agranular (REL), el retculo endoplasmtico rugoso o granular (REG) y el aparato de Golgi.
Estas estructuras permiten la circulacin de sustancias siempre dentro de formaciones limitadas por
membrana interactuando por medio de vesculas.

Tabla 1.6 - Organizacin del Sistema de endomembranas

Estructura

Descripcin

Retculo endoplasmtico rugoso


(REG)

Membranas internas en forma de Sntesis de Protenas destinadas a


sacos aplanados y tbulos. Con
secrecin(exportacin) o a la
ribosomas adheridos a su
incorporacin de membranas.
superficie externa. La envoltura
nuclear es parte del REG.

Retculo endoplasmtico liso (REL) Membranas internas donde


predominan los tbulos. Sin
ribosomas adheridos.

Aparato de Golgi

Funcin

Sitio de biosntesis de lpidos y


detoxificacin de medicamentos.

Pilas de sacos membranosos


Modificacin de protenas
aplanados (dictiosomas). Funcional (glicosilacin). Empaquetamiento
y estructuralmente polarizado.
de protenas secretadas.
Clasificacin de las protenas que

se distribuyen a membrana
plasmtica, secrecin o lisosomas.

Lisosomas

Vesculas (sacos) membranosas

Contienen enzimas hidrolticas,


que desdoblan materiales
ingeridos, secreciones y
deshechos celulares.

Vacuolas

Sacos membranosos
Transporte de materiales,
principalmente, en plantas, hongos deshechos y agua.
y algas.

ORGANELAS

Tabla 1.7 - Principales organoides membranosos de la clula eucarionte

Estructura

Descripcin

Funcin

Mitocondria

Organelas semiautnomas. Poseen


ADN y ribosomas tipo
procarionte. Una doble membrana
les sirve de envoltura. La
membrana interna forma las
crestas mitocondriales.

Metabolismo aerbico. Sitio


de muchas de las reacciones
de la respiracin celular. All
se realizan el ciclo de Krebs,
la cadena respiratoria y la
fosforilacin oxidativa. Es
decir la transformacin de la
energa de lpidos o glucosa
(molculas combustibles) en
ATP (moneda energtica).

Cloroplasto

Organela semiautnoma. Posee


ADN y ribosomas tipo
procarionte. Una doble membrana
envuelve a los tilacoides. La
clorofila, se encuentra en las
membranas tilacoidales.

La clorofila capta la energa


luminosa para formar ATP y
otros compuestos con gran
cantidad de energa. Estos
compuestos altamente
energticos sirven para
sintetizar, glucosa a partir de
CO2.

Microcuerpos (Peroxisomas)

Vesculas membranosas que

Sitio de muchas reacciones

contienen diversas enzimas


relacionadas con el metabolismo
del oxigeno y el perxido de
hidrogeno. No poseen ADN ni
ribosomas

metablicas. Enzimas que


protegen de la toxicidad del
oxigeno, por ejemplo la
catalasa.

RIBOSOMAS Y POLIRRIBOSOMAS
Son estructuras redondeadas que a diferencia de las anteriores, carecen de unidad de membrana.
Estn constituidos por dos subunidades, mayor y menor separadas entre s. Ambas subunidades se unen cuando
leen una molcula de ARNm. Las subunidades estn formadas por ARNr y protenas, siendo ensambladas en el
nucleolo. Cuando hay varios ribosomas unidos a una molcula de ARNm, lo denominamos polirribosoma.
La funcin de los ribosomas es sintetizar protenas.
CITOESQUELETO
El citoesqueleto es una red de fibras protenicas. Esta red es dinmica encontrndose en constante
cambio. Sus funciones, son esenciales para las clulas eucariontes y abarcan motilidad celular, forma,
diferenciacin, reproduccin, regulacin, etc.

Tabla 1.8 - Organizacin General del citoesqueleto

Estructura

Microtbulos

Filamentos de actina
(microfilamentos)

Filamentos intermedios

Descripcin

Funcin

Sostn estructural,
participan en el movimiento
Tubos huecos compuestos por la
de organelas y la divisin
forma monomrica de la protena
celular (aparato mittico),
tubulina. (monmero globular)
componentes de cilios,
flagelos y centrolos.

Estructura slida en forma de


huso consistente en la protena
actina. (monmero globular)

Sostn estructural,
participan en el movimiento
de la clula y sus organelos y
en la divisin celular.

Protenas filamentosas, en forma Sostn estructural. Forman


de tubos. Compuestas por
redes que conectan la
monmeros fibrosos.
membrana plasmtica con la

envoltura nuclear.

Centrolos

El huso mittico se forma


entre los centrolos durante
Pares de cilindros huecos,
la divisin de clulas
localizados cerca del centro de la
animales, fija y organiza los
clula, formados por microtbulos.
microtbulos. Estn ausentes
en las plantas superiores.

Cilios

Movimiento de algunos
Proyecciones relativamente cortas
organismos unicelulares. Se
que se extienden desde la
utiliza para mover materiales
superficie celular. Compuestas por
en la superficie de algunos
microtbulos.
tejidos.

Flagelos

Proyecciones largas compuestas


por microtbulos. Cubiertos por
membrana plasmtica

Fig. 1.6- Esquema de componentes del citoesqueleto

CLULA EUCARITICA ANIMAL Y VEGETAL

Locomocin celular de
espermatozoides y algunos
organismos unicelulares.

Fig. 1.7- Esquemas de una clula vegetal (izquierda) y tridimencional de un cloroplasto con sus componentes
(derecha)

Cuadro 1.3- Modelos bsicos de clula eucarita


Las clulas eucariontes poseen dos modelos estructurales bsicos: a) clulas auttrofas fotosintticas y b)
clulas hetertrofas.
Las clulas auttrofas son aquellas que sintetizan su propio alimento, es decir sus propias molculas
combustibles. En este caso las clulas eucariontes vegetales son clulas auttrofas fotosintticas, por lo
tanto utilizan la luz solar como fuente de energa. Transforman la energa solar en energa qumica, este
proceso es llamado fotosntesis. La fotosntesis en las clulas vegetales se lleva a cabo en un organelo
membranoso llamado cloroplasto. Dentro del cloroplasto se encuentran sacos membranosos apilados,
denominados tilacoides, en cuyas membranas encontramos el pigmento llamado clorofila, esencial para la
fotosntesis.
Las clulas hetertrofas son aquellas que no sintetizan su propio alimento sino que necesitan una fuente
externa de energa tanto como de materiales de construccin de sus propias molculas. Las clulas animales (y
los hongos), son clulas eucariontes hetertrofas.
Las clulas animales y las clulas vegetales poseen unas organelas membranosas llamadas mitocondrias, donde
se lleva acabo la respiracin celular. En este proceso son rotos los enlaces de alta energa de las molculas
combustibles orgnicas. Esta energa liberada es utilizada para la sntesis de las monedas energticas como el
ATP. El ATP es esencial para las diferentes funciones celulares. Para que este proceso se lleve a cabo dentro
de las mitocondrias es necesaria la presencia de oxigeno.
Por lo tanto en ambos tipos celulares son necesarias las mitocondrias , para obtener energa qumica en forma
de ATP a partir de las molculas combustibles. Pero es diferente el origen

de las molculas orgnicas utilizadas como combustibles. En el caso de las clulas vegetales (auttrofas),
ellas sintetizan sus propias molculas combustibles en los cloroplastos, en el proceso de fotosntesis. En cambio
las clulas animales (hetertrofas), necesitan una fuente externa de molculas energticas que sirvan como
combustible celular.

Tabla 1.9 - Principales diferencias entre clulas animales y clulas vegetales

Estructura

Clula animal

Clula vegetal

Pared celular

Ausente

Pared celular constituida por


celulosa.

Aparato mittico (Huso


acromtico )

Astral

Anastral

Centrolos

Presente

Ausente

Vacuolas

Vacuolas pequeas

Vacuolas grandes, puede ser una


grande central

Metabolismo

Hetertrofo

Auttrofo

Mitocondrias

Presentes

Presentes

Cloroplastos

Ausentes

Presentes

Fig. 1.8- Esquema de la ultraestructura de una clula animal idealizada

Fig. 1.9- Esquema de la ultraestructura de una clula vegetal idealizada

VIRUS
Hacia fines del siglo pasado se formulo la teora de que cada enfermedad era producida por un germen
especfico. Hasta ese momento los patlogos estaban convencidos de que para cada enfermedad seria posible
encontrar el microorganismo responsable, utilizando las siguientes tcnicas: a) observacin del germen con la
ayuda del microscopio, b) cultivo sobre un medio nutritivo y c) retencin por filtros. Sin embargo, en 1892,
Iwanowski (o Ivanovsky?) pudo demostrar que el agente productor de la enfermedad del mosaico de tabaco
pasaba a travs de los filtros para bacterias y no poda ni verse ni cultivarse. Luego en 1898 Beijerinck,
determin que la enfermedad del mosaico del tabaco era provocada por un nuevo agente infeccioso a los que
denomino virus filtrables (virus: palabra de origen latino que significa veneno). Los virus estn ampliamente
distribuidos en la naturaleza y afectan a todo tipo de organismos, tanto del reino animal, vegetal o protista.
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DE LOS VIRUS
La estructura de los virus esta integrada por dos tipos de macromolculas: cidos nucleicos y protenas,
los que forman las partculas virales o viriones. Bsicamente existen dos tipos de partculas virales: partculas
virales simples (virus desnudo) o partculas virales envueltas (virus envuelto). El virus desnudo consta de un
cido nucleico (genoma) asociado a protenas y una cubierta proteica o cpside. Por otra parte los virus
envueltos aaden a esta estructura bsica una envoltura lipoproteica de origen celular. La funcin de la cpside
es de servir al cido nucleico como proteccin y vehculo.
Postulado de Lwoff

"nicamente sern considerados virus aquellos agentes infecciosos cuya partcula elemental contenga un solo
tipo de cido nucleico". Es decir poseen ARN o ADN, pero no ambos tipos de cidos nucleicos funcionales a la
vez. Por lo tanto los virus pueden ser ADN o ARN virus. Debido a la estructura simple de virus, para su
multiplicacin dependen en forma absoluta de la clula husped que infectan. Por lo tanto consideraremos a los
virus como parsitos intracelulares obligados.

REPLICACIN VIRAL
La clula husped, una vez infectada, sintetizar nuevas molculas de cido nucleico viral, ya que el
genoma viral tomara el control de las actividades metablicas de la clula. Bajo este control, tambin se
producirn gran cantidad de protenas virales. De esta manera el ensamblado de nuevas partculas virales
provendr de la asociacin de las nuevas molculas de cido nucleico viral con las protenas. Este proceso es
muy diferente de la reproduccin celular, tanto de los procariontes como de los eucariontes. Por lo tanto es
mas apropiado hablar de REPLICACION VIRAL.
LOS VIRUS COMO PARSITOS INTRACELULARES
Hasta el momento no se ha podido demostrar que ningn virus aislado pueda utilizar o almacenar energa
mediante procesos similares a la respiracin, tampoco pueden sintetizar protenas. Es decir no tienen
metabolismo propio, dependiendo en forma absoluta del medio ambiente celular.
El parasitismo de los virus se ejerce a nivel gentico, ya que el genoma viral dentro de la clula desplaza al
genoma de la clula hospedadora del control celular.
PROVIRUS

Anteriormente hemos explicado que los virus, infectan las clulas y hacen replicas de si mismos. Luego
abandonan la clula husped y pasan a otra, recomenzando su ciclo. Pero tambin puede ocurrir que el genoma
viral se integre al ADN del husped. Cuando el genoma viral se integra al genoma celular y se replica junto con
este se lo denomina PROVIRUS. Un provirus puede activarse espontneamente o bien expuesto a diversos
estmulos, una vez activado puede inducir la produccin de virus completos. Los provirus pueden modificar la
morfologa celular y su metabolismo, esto puede deberse a la produccin de alguna protena viral. Estos cambios
en la estructura celular, generalmente asociados a cambios en la membrana celular, inducidos por un provirus
reciben el nombre de transformacin. En algunos casos estas clulas transformadas por los provirus pueden ser
cancerosas.
LOS VIRUS COMO AGENTES INFECCIOSOS
El parasitismo celular obligado es la causa bsica por la cual un virus puede causar dao. La relacin que
establece un virus y su clula husped es variable. El resultado de la interaccin depende tanto del virus en
cuestin como de la clula husped. Por ejemplo, se denominan virus citocdicos , a los que como resultado de
su multiplicacin, producen una rpida induccin hacia la muerte celular. Por otra parte se encuentran los virus
no citocdicos, que son aquellos que no provocan la muerte celular. Ejemplos de virus no citocdicos serian los
virus moderados y los virus oncognicos. Los virus moderados son aquellos que producen partculas virales y no
producen la muerte celular. Han llegado con la clula husped a un estado de equilibrio ms o menos estable.
Luego estn los virus oncognicos, capaces de estimular la divisin celular, estos cambios pueden ser
irreversibles si la clula pierde la capacidad de regular su ciclo celular. Este estado se denomina
transformacin celular.
Los virus no citocdicos pueden causar dos tipos de infecciones:
1- Las infecciones latentes, donde el virus permanece sin manifestarse, alojado en clulas no productoras.
Ante determinados estmulos, estrs, enfermedades, exposicin a la luz solar, el virus se reactiva,
recomenzando la sntesis de cidos nucleicos y protenas virales. Ejemplos: L Herpes simplex, Varicela zoster.
2- Las infecciones crnicas, donde de una persona enferma siempre es posible obtener virus infeccioso, aun
por periodos muy prolongados de tiempo. Por ejemplo, virus de la hepatitis B, Epstein-Barr, virus de la rubola.

Fig. 1.10- Virus del Mosaico del Tabaco (ARN virus) y Bacterifago T4 (ADN virus)
MORFOLOGA VIRAL

Los virus poseen gran variedad de formas y tamaos. Por ejemplo los virus que al microscopio electrnico
aparecen aproximadamente esfricos se denominan isomtricos. En estos virus el cido nucleico esta rodeado
por una cpside (caja) proteica. Las subunidades estructurales que forman la cpside, visibles al microscopio
electrnico, se denominan capsmeros. A su vez los capsmeros estn formados por subunidades proteicas. La
cpside por su naturaleza antignica es la que determina la identidad viral.
El cido nucleico viral no se encuentra desnudo, sino que esta asociado a protenas distintas de las de la
cpside, cuya funcin puede ser estructural (plegado del ADN) o enzimtica (polimerasa). Al conjunto de cido
nucleico y protenas asociadas se lo denomina "core". Por ultimo diremos que los virus donde la cpside rodea
directamente al cido nucleico (es decir que no hay un "core" evidente), el conjunto de cpside y cido nucleico
recibe la denominacin de nucleocpside.
GENOMA VIRAL
El genoma, que puede encontrase en los distintos tipos de virus, puede sistematizarse de acuerdo a
diversos criterios:
1- Tipo de cido nucleico: ADN o ARN
2- Polaridad o sentido: + o - (aplicado principalmente a los ARN virus)
3- Nmero de cadenas: monocatenario o bicatenario
4- Genoma circular o desnudo
5- Genoma entero o fragmentado
Debemos recordar que las cadenas de un cido nucleico de doble cadena, son de polaridad (sentido) opuesto.
Por convencin se considera que si una tiene sentido + la otra ser -.
De acuerdo a este criterio se considera que un virus es + (o cadena +), cuando su genoma monocatenario tiene la
misma polaridad que un ARNm. Es decir el mismo genoma viral, puede actuar dentro de la clula como ARNm y
llevar a cabo directamente la sntesis de protenas virales. Los "virus +", pueden infectar con el cido nucleico
solo, salvo los retrovirus que siendo +, necesitan una transcriptasa reversa asociada al genoma para poder
infectar. Por el contrario, se denomina "virus -" cuando el genoma no puede actuar directamente como
mensajeros. El ARN - puede actuar como molde, para la sntesis de ARN +, el ARNm viral.

Fig. 1.11- Esquema y microfotograa electrnica de un Bacterifago


BACTERIFAGOS
Los Bacterifagos son virus especficos de las bacterias. Bacterifagos, significa que se "alimenta" o multiplica
a expensas de bacterias.
Los Bacterifagos que infectan clulas husped, pueden establecer dos tipos de procesos:
1- Ciclo Ltico: en este tipo de ciclo el virus produce inmediatamente gran cantidad de cidos nucleicos virales
y protenas de la cpside. Estos se ensamblan produciendo nuevas partculas virales que son liberadas al medio
al producirse la lisis celular.
2- Ciclo Lisognico: en este ciclo la relacin entre clula husped y virus, puede prolongase por periodos
variables de tiempo. El virus integra su genoma al cromosoma bacteriano, replicndose conjuntamente el cido
nucleico del parsito y el del husped. Un virus bacteriano integrado al cromosoma se denomina profago. Por lo
tanto el profago se replica junto con el ADN bacteriano. En determinadas circunstancias (por ejemplo ruptura
del ADN bacteriano por luz ultravioleta o agentes qumicos), el profago se activa, y comienza la produccin de
cido nucleico viral y protenas virales, produciendo luego la lisis celular. Las bacterias que portan profagos se
denominan lisognicas. Los Bacterifagos que pueden integrarse como profagos y que no lisan inmediatamente a
las clulas se denominan fagos atenuados.

Fig. 1.12- Esquema del Ciclo Ltico Viral (de multiplicacn) y del Ciclo Lisogenico Viral
LOS VIRUS COMO VECTORES
Los virus pueden servir como vehculos (vectores), para transferir material gentico de una clula a otra.
Este fenmeno se denomina transduccin. Durante el ciclo ltico, el ADN del husped queda fragmentado y
alguno de esos fragmentos puede ser tomado al azar y quedar dentro de la cpside. De esta forma, cuando el
virus infecta una nueva clula, transporta genes de una antigua clula husped a otra nueva.
VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (HIV)
El SIDA (sndrome de inmunodeficiencia humana), es una enfermedad infecciosa crnica producida por el virus
HIV. Esta enfermedad esta caracterizada por una deficiencia inmunolgica progresiva, con la expresin clnica
de infecciones oportunistas y/o tumores.
El HIV es un retrovirus. Los retrovirus son virus cuyo material gentico es ARN. Una vez que el virus ha
penetrado en una clula, una enzima llamada retrotranscriptasa, produce ADN a partir del ARN viral. El ADN
recin sintetizado viaja al ncleo y se integra al ADN cromosmico . En este punto la infeccin se ha hecho
permanente , y la forma integrada del virus se denomina provirus. El HIV es un LENTIVIRUS. Por lo tanto su
ciclo vital intracelular (ciclo de infeccin) puede prolongarse por aos. Sus genomas son complejos y sus
mecanismos regulatorios son solo parcialmente conocidos. Los Lentivirus causan infecciones crnicas.
El sistema inmune del hombre reconoce las protenas del HIV como antgenos y produce anticuerpos contra
ellas. Por lo tanto una persona infectada tendr circulando en sangre anticuerpos contra las protenas del HIV.
En este aspecto se basa el test de diagnstico ms utilizado en la actualidad: el test de ELISA (inmunoensayo
ligado a enzima).

Fig. 1.13- Esquema del Virus de la Inmunideficiencia Hunama (HIV)


El virin del HIV, esta recubierto por una membrana lipdica, por lo tanto se trata de un virus envuelto. De la
membrana sobresalen glicoprotenas: la gp41 y la gp120. La membrana compuesta por lpidos y protenas
recubre el ncleo (core) del virin, formado por las protenas p28 y p24. En el core se encuentran el ARN del
virus y la enzima transcriptasa inversa.

Ciclo Vital Intracelular de un retrovirus


Empieza cuando un virin o partcula vrica , se une a la superficie externa de una clula susceptible. Este
primer estadio del ciclo se lo denomina adsorcin. Luego el virus fusiona su envoltura lipoproteica con la
membrana celular, introduciendo en la clula su nucleocpside junto con el ARN que constituye su dotacin
gentica. En cada partcula viral se encuentran dos cadenas de ARN vrico. A este proceso se lo conoce como
penetracin.
La enzima transcriptasa inversa es una ADN polimerasa que primero produce una copia de ADN simple cadena
que a continuacin se copia a si misma obtenindose ADN doble cadena. Por lo tanto este ADN doble cadena se

obtuvo a partir de ARN. La sntesis del ADN doble cadena ocurre junto con la degradacin del ARN original. El
ADN doble cadena (provirus), emigra hacia el ncleo y se integra en el propio ADN celular. La integracin de
este ADN doble cadena en el cromosoma del husped es necesaria para la sntesis de nuevas molculas de ARN,
por la ARN polimerasa celular, ya que el virus carece completamente de la maquinaria metablica necesaria para
realizar la transcripcin y la sntesis de protenas necesarias para la cpside y la misma transcriptasa reversa.

Fig. 1.14- Esquema del Ciclo Vital Intracelular de un Retrovirus


VIRUS DE LA HEPATITIS B (VHB)
La hepatitis B en si misma, es un problema sanitario grave y muy extendido . Pero encierra una amenaza
peor. El virus que la produce es el carcingeno humano ms importante despus del tabaco. Trescientos
millones de personas , la mayora habitantes con escasos recursos asistenciales, estn crnicamente infectados
con el virus y tienen una probabilidad muy elevada de contraer cncer de hgado. En el tercer mundo, el virus
suele transmitirse de madre a hijo, durante el primer mes de vida, y principalmente durante el nacimiento. Si el
pequeo es nia, se convertir probablemente en portadora crnica y transmitir el virus de la hepatitis B
(VHB) a su descendencia cuando alcance la edad frtil. En cambio en los pases desarrollados su incidencia es
mayor en adultos, que por su profesin tienen contacto directo con la sangre (cirujanos, enfermeras,
dentistas), los receptores de sangre u hemoderivados o personas que reciben tratamientos de dilisis o
drogadictos intravenosos.
El virus de la hepatitis B (VHB) es mucho ms contagioso que el HIV.

EXPERIMENTO DE FRENKEL-CONRAT Y SINGER

Fig. 1.15- Esquema del experimento de Frenkel - Conrat y Singer


Este experimento demostr que el ARN es el material gentico del virus del mosaico del tabaco. Los
resultados del experimento son extensibles a otros tipos de virus con genoma a ADN.
VIROIDES
Los viroides son agentes infecciosos que poseen al igual que los virus un solo tipo de cido nucleico y son
parsitos absolutos, pero y esta es la gran diferencia con los virus, carecen de cpside y envoltura. Por lo tanto
los viroides estn constituidos solo por una secuencia de nucletidos, adems los viroides carecen de
informacin para la sntesis de protenas, en cambio los virus siempre poseen dicha informacin.

PRIONES
Las partculas infecciosas llamadas priones, estn constituidas nicamente por una protena de
aproximadamente 250 aminocidos. Es decir carecen completamente de cidos nucleicos. Es esta la razn por la

cual fue resistida durante mucho tiempo, la hiptesis de que las protenas por si solas podan ser la causa de
enfermedades infecciosas. De acuerdo al dogma imperante hasta 1980, las enfermedades transmisibles
(infecciosas) necesitaban material gentico, para que la infeccin se asentara en el husped. Hasta ese
momento eran los virus los agentes infecciosos ms pequeos conocidos, y todos ellos poseen ADN o ARN como
material gentico necesario para codificar sus protenas y dirigir la replicacin viral en el husped.
Pero ahora sabemos que las partculas protenicas infecciosas (priones), pueden ser el sustrato de diversas
enfermedades, hereditarias o contagiosas. Este comportamiento dual tanto infeccioso como hereditario era
desconocido. Posteriormente se descubri que los priones se multiplican por una va increble y desconocida
hasta ese momento: convierten protenas normales en MOLECULAS INFECCIOSAS, con solo alterar la
estructura proteica.
Las encefalopatas espongiformes transmisibles (EET), son las enfermedades degenerativas del sistema
nervioso central que afectan a animales y seres humanos causadas por los priones. Se denominan espongiformes
ya que el cerebro adquiere un aspecto parecido al de una esponja. Las EET que sufren los seres humanos son el
Kuru (o muerte de la risa), la enfermedad de Creutzfeldt -Jakob (ECJ), el sndrome de Gerstman-StrausslerScheinker (GSS) y el insomnio Familiar Fatal (IFF); las EET de animales, incluyen el scrapie (del ingles to
scrape, raspar, por la tendencia de los animales infectados a rasparse contra postes , troncos o cercas para
combatir la picazn) de ovejas y cabras, la enfermedad de agotamiento crnico de mulas y ciervos en cautiverio
y la encefalitis espongiforme bovina (EEB), o enfermedad de la vaca loca.
Las EET se caracterizan por su prolongado periodo de incubacin (en el hombre puede tener un periodo de
incubacin de 30 o mas aos), generalmente asociadas a declives progresivos de las funciones motoras y
cognitivas (enfermedad activa), y por su evolucin inevitablemente fatal. Las EET en el ser humano
generalmente aparecen en personas de edad avanzada.
Aparentemente todas las EET son causadas por el cambio en la estructura de una protena normalmente
presente en las membranas celulares, denominada protena prinica (PrP). La forma anormal de la PrP se designa
PrPsc (scrapie), para diferenciarla de la forma normal llamada PrP c (celular). La secuencia de aminocidos
(estructura primaria) de la PrPc y la PrPsc es idntica lo que varia es su conformacin (plegamiento en el
espacio). De acuerdo a esta teora la protena alterada (PrP sc), puede unirse a la protena normal (PrP c) y
cambiar su conformacin, transformndola a su vez en una protena alterada. De esta forma se propagara la
enfermedad y se generaran nuevas protenas infecciosas. De esta forma el pasaje de la forma normal a la
patolgica es catalizada por el mismo prin (PrP sc), por lo tanto solo hace falta una pequea cantidad de este
para provocar la transformacin de toda la protena normal, ya que se trata de un fenmeno de crecimiento
exponencial.
Recientemente , se ha aceptado que los priones pueden ser transmitidos, posiblemente por comida, inoculacin
directa en el cerebro, piel, msculo o estmago. Por esto la epidemia de EEB, ocurrida en Gran Bretaa provoco
un enorme inters en todo el mundo. Desafortunadamente han aparecido en ese pas una nueva variedad de la
ECJ (casos en personas mucho mas jvenes que lo usual), lo que probara una relacin causal entre la EEB y los
casos seres humanos. El gobierno britnico tuvo que admitir la posibilidad de que la aparicin de estos extraos
casos de la ECJ hubieran sido provocados al ingerirse carne vacuna infectada (tejido nervioso).
Al principio habamos hablado de la dualidad de los priones, por un lado partculas infecciosas y por el otro
responsables de enfermedades hereditarias. Esto es naturalmente confuso. Por ejemplo, ciertas enfermedades
prinicas como la GSS, son hereditarias. Esta enfermedad tiene una herencia autosomal y dominante, lo cual
significa que si un padre desarrolla la enfermedad , los hijos tienen un 50 por ciento de probabilidades de
desarrollarla. La explicacin a estos hechos vino dado por el descubrimiento de mutaciones gnicas puntuales
en la secuencia de nucletidos del gen que codifica la PrP . Estos genes mutados provocan cambios en la
secuencia de aminocidos de la protena PrP. Estos cambios podran incrementar la probabilidad de la

transformacin de la protena PrP mutante de una forma normal a una anormal patgena. Diferentes mutaciones
en el gen provocaran diferentes protenas mutantes, con mayor o menor tendencia a transformarse en la
forma aberrante patgena. Esto explica tambin las distintas enfermedades prinicas hereditarias, la ECJ
espordica , un 15 por ciento de los casos hereditaria y la GSS autosomal dominante.

Tabla 1.10- Principales Enfermedades causadas por Priones

Enfermedad

Sntomas tpicos

Va de Propagacin

Distribucin

Kuru

Prdida de coordinacin, Infeccin, probablemente Nueva Guinea


demencia
por canibalismo
2600 casos

ECJ

Demencia, prdida de
coordinacin

De ordinario desconocida 1 persona por milln en


(espordica)
todo el mundo
En un 15 por ciento de los 100 familias identificadas
casos hereditaria, por
(forma heredada)
mutacin del gen que
determina la protena PrP Forma infecciosa 80
casos
Raramente por infeccin
(por ejemplo por un
transplante u otro
tratamiento medico)

EGSS

Prdida de coordinacin, Herencia de una mutacin 50 familias identificadas


demencia
en gen de la PrP

IFF

Trastornos del Sueo,


insomnio demencia

Herencia en una mutacin 9 familias identificadas


del gen de la PrP

TCNICAS DE ESTUDIO DE LA CELULA


UNA COMBINACIN DE MTODOS AYUDA AL ESTUDIO DE LA CLULA
El desarrollo de la biologa celular y molecular se produce en forma paralela a la invencin de
instrumentos y tcnicas biofsicas y bioqumicas que extienden los sentidos a nuevos lmites y acrecientan el
conocimiento de la estructura y funcionamiento de la clula. El acceso a este tipo de conocimiento resulta
dificultoso pues las clulas son pequeas y transparentes. El ojo humano slo puede discriminar dos puntos
separados por ms de 0,1 mm 100 micrmetros (mm). La mayora de las clulas son mucho ms pequeas y se
necesita del microscopio ptico cuyo lmite de resolucin es de 0,2 mm. Para estructuras ms pequeas, que

midan entre 0,4 y 200 nanmetros (nm), se requiere del microscopio electrnico. Para mayores detalles,
consulte la Tabla 1a.2
Como se aprecia, las principales unidades de medida que se emplean corrientemente en microscopia no son las
de uso cotidiano. En la siguiente tabla se expresan aquellas unidades y sus equivalencias:

Tabla 1.11-Medidas utilizadas en microscopia

Unidad

Smbolo

Equivalencia en metro (m) Utilizacin principal en citologa

Centmetro

cm

0,01 metro

Objetos macroscpicos
Huevos grandes.

simple

vista.

Milmetro

mm

0,001m

Objetos macroscpicos
Clulas muy grandes.

simple

vista.

Micrmetro

mm

10-6 m

Microscopia de luz (ptica)


Casi todas las clulas y organelos grandes.

Nanmetro

nm

10-9 m

Microscopia electrnica.
Organelas
grandes.

Angstrom

10-10 m

pequeas,

macromolculas

Microscopia
electrnica.
Mtodos
de
difraccin de rayos X. Molculas y tomos.

Por lo tanto: 1m=102 cm=102 mm=103 mm=106 nm=109


Por otra parte, la mayora de los componentes de la clula viva son transparentes debido a su alto contenido de
agua. Al disecarla no presenta un significativo contraste. Entonces la tincin selectiva de ciertos componentes
celulares resuelve el problema del contraste. Sin embargo la mayora de estas tcnicas conduce a la muerte de
la clula y an ms, a cambios qumicos y morfolgicos que no se encuentran en las clulas activas y en la matriz
extracelular.
Cabe destacar que algunos pigmentos del citoplasma y de organoides vegetales pueden absorber determinadas
longitudes de onda (l) [1] y no necesitan de previo tratamiento para su observacin al microscopio ptico.
Para el estudio de la clula viva se emplean tcnicas pticas especiales como, por ejemplo, la microscopia de
contraste de fase o la de interferencia.

Fig. 1.16 Cuadro comparativo de distintos ejemplos de niveles de organizacin a nivel microscpico.

En el nivel macromolecular, la difraccin de rayos X resulta ser la tcnica ms adecuada para estudiar la
configuracin molecular de protenas, de cidos nucleicos y de algunos entes prebiticos tales como los virus.
Los compuestos qumicos que constituyen la clula pueden ser detectados, descriptos y localizados dentro y
fuera de la clula mediante mtodos adaptados de la Qumica Analtica.
Las tcnicas aislamiento y separacin especfica de clulas, organelas y macromolculas y el preparado de
cultivos celulares para el estudio detallado son herramientas invalorables para el avance de la biologa celular y
molecular.
LOS MICROSCOPIOS PROVEEN VENTANAS PARA EL MUNDO DE LA CLULA

Fig. 1.17- Esquema de un Microscopio ptico


El descubrimiento y estudio temprano progres con la invencin y mejora de los microscopios en el siglo XVII.
Los microscopios de varios tipos son an herramientas indispensables para el estudio de las clulas.
Los microscopios primeramente usados en el Renacimiento tanto como los que son utilizados en los laboratorios
hoy, son microscopios pticos. La luz visible pasa a travs de la muestra y de las lentes de vidrio por donde la
luz es refractada (doblada) de tal manera, que la imagen del espcimen es amplificada cuando se proyecta en
el ojo.
Dos valores importantes en microscopia son el aumento y el poder de resolucin . Entendemos por aumento a
las dimensiones aparentes de los objetos comparados con su tamao real. El poder de resolucin es la medida
de la nitidez de la imagen; es la capacidad del instrumento para brindar imgenes distintas de dos puntos
cercanos.
El microscopio ptico nunca puede resolver detalles menores a 0,2mm, la medida de una pequea bacteria. Esta
resolucin es limitada por la longitud de onda de la luz visible usada para iluminar la muestra. Los microscopios
pticos o de luz pueden aumentar efectivamente alrededor de 1000 a 1500 veces el tamao de la muestra real;
si se incrementase el aumento la imagen proyectada sera borrosa. La mayora de las mejoras en microscopia de
luz del comienzo de este siglo ha involucrado nuevos mtodos para aumentar el contraste. Sin estas tcnicas
sera imposible para el ojo humano el conocimiento del mundo celular.

La mayora de las organelas son demasiado pequeas para ser visualizadas por la microscopia de luz. La Biologa
Celular avanz rpidamente hace un poco ms de cincuenta aos con la introduccin del microscopio electrnico.
En lugar de luz visible, el microscopio electrnico utiliz un haz de electrones [2] a travs de la muestra. El
poder de resolucin est inversamente relacionado con la longitud de onda (l) de la radiacin que un microscopio
usa y un haz de electrones tiene longitudes de onda mucho ms cortas que la luz visible. Para mayores
precisiones al respecto, consulte el cuadro 1.4

Cuadro 1.4- Poder de resolucin del Microscopio

En cualquier tipo de microscopio, el poder de resolucin depende de la longitud de onda (l) y de


la apertura numrica (AN) del objetivo (la capacidad de colectar la luz). As, el lmite de resolucin, que
es la distancia mnima que debe existir entre dos puntos para que puedan ser discriminados como tales, y
responde a la siguiente ecuacin:
Lmite de resolucin=0,61 l /AN
A su vez,
AN = n . seno a
donde, n es el ndice de refraccin del medio que atraviesa el haz y a es el ngulo de apertura
Ntese que el lmite de resolucin es inversamente proporcional al poder resolutivo del instrumento, de
modo tal que cuanto mayor sea ste, menor ser el lmite de resolucin conseguido.

Fig. 1.18- Comparacin entre un Microscopio ptico y Electrnico


La mayora de los microscopios electrnicos modernos pueden lograr una resolucin de 0,2 nm, unas 1000 veces
mejor que la obtenida con el microscopio ptico.

Los bilogos usan el trmino ultraestructura celular para referirse a la anatoma celular cuando se resuelve por
un microscopio electrnico.
Hay dos tipos de microscopio electrnico: el microscopio electrnico de transmisin (MET) y el microscopio
electrnico de barrido (MEB):
El MET permite develar la ultraestructura de las clulas y de la matriz extracelular. El haz de electrones
es desviado por un campo electromagntico (que actuara como lente). En este tipo de microscopia se requiere
que las muestras tengan un grosor de 100 nm.
El MEB es especialmente til para estudios de superficie del espcimen. El haz de electrones explora la
superficie de la muestra la que usualmente se recubre con una pelcula de oro. El haz excita a los electrones
sobre la superficie de la misma muestra y estos electrones secundarios se recolectan y enfocan sobre una
pantalla. Esto forma una imagen de la topografa del espcimen. Un importante atributo del MEB es su gran
profundidad de campo, la cual resulta en una imagen tridimensional.
El ME revela muchas organelas que son imposibles de resolver con MO. Pero el MO ofrece muchas ventajas
especialmente para el estudio de la clula viva. Una desventaja de ME es que los mtodos qumicos y fsicos
usados para preparar la muestra, no slo matan a las clulas sino que puedan introducir artefactos, estructuras
peculiares vistas en micrografas que no existe en una clula viva.
La preparacin de la muestra para el MO y el ME resulta similar si se trabaja con las clulas muertas.
En la tabla 1.9 se comparan los pasos a seguir en ambos tipos de microscopia para la preparacin de la muestra:

Tabla 1.12 -Tcnicas para Preparar una Muestra en Microscopia ptica y Electrnica

Paso

Microscopia ptica

Microscopia Electrnica

OBTENCIN: Se hace
cuidadosamente con instrumental
adecuado.

FIJACIN: se destina a impedir


la autodegradacin enzimtica
(autlisis)de las clulas tratando
de evitar, en lo posible, la
alteracin de las estructuras
originales y su autodigestin.

Pueden usarse fijadores qumicos Se realiza con paraformaldehido,


(formol, etanol, metanol o
con tetrxido de osmio o,
mezclas fijadoras). Tambin se ltimamente, con glutaraldehido,
utilizan mtodos fsicos como la en soluciones acuosas de pH
desecacin, el calor seco, el fro neutro y concentracin salina
o la congelacin.
semejante al medio. Luego se lava
la pieza y se post-fija con
tetrxido de osmio durante una
hora; el osmio se une a
estructuras lipoproteicas
(membranas celulares)
ofreciendo mayor contraste en la
imagen. Esto se conoce

como coloracin o contrastado.

DESHIDRATACIN: retira
el Pasajes sucesivos por alcoholes
agua de las piezas fijadas, para de concentracin creciente.
que luego puedan ser incluidas en
un elemento que es insolubles en
solventes acuosos.

Baos con alcohol o acetona.

ACLARACIN

Se realiza para eliminar de la


No requiere
muestra restos de alcohol y toda
sustancia hidrosoluble. Se
impregna la muestra con un
solvente no acuoso, orgnico y
soluble en parafina, como xileno,
tolueno o benceno.

INCLUSIN

Se incluye el material en parafina Se utilizan resinas sintticas tipo


o celoidina previamente
epoxi que luego de secarse se
calentada, la que al solidificarse transforman en un material muy
sirve de sostn de la muestra y duro, apto para que se le
posibilita su corte. Se forma
efecten cortes
el taco.
extremadamente delgados.

CORTE

Es lo suficientemente delgado
como para ser atravesado por la
luz. Esto se logra utilizando
elmicrtomo con el que se realiza
cortes uniformes del tejido a un
dado espesor.

REHIDRATACIN

Se retira la parafina con xilol y


se lava con alcoholes de
concentracin creciente. Al ser
los colorantes solubles en agua
resulta indispensable rehidratar

COLORACIN

Las clulas y los tejidos son


coloreados para lograr mayores
contrastes facilitando la
observacin. La coloracin de
hematoxilina-eosina es una de las
ms comnmente utilizadas. Tie

Debe obtenerse un corte de la


muestra tal que el haz de
electrones logre atravesarla.
Elultramicrtomo realiza cortes
de 20 a 100 nm de espesor con
cuchillas de vidrio o diamante.

el ncleo de azul y el citoplasma


de rosa.

MONTAJE

El corte se monta sobre un


Estas muestras se montan en
portaobjetos. El cubreobjetos
pequeas grillas de cobre
El corte se coloca sobre ciertas puede colocarse por encima para
clases de estructuras.
proteger el preparado. Este
puede conservarse durante
dcadas si el cubreobjetos se
sella.

CONTRASTADO

La pieza se impregna en acetato


de uranilo, citrato de plomo u
otras sustancias.

Las diferencias ms notables de los principales componentes del MO y del ME y sus caractersticas
singulares se especifican en la siguiente tabla.

Tabla 1.13 - Diferencias entre el MO y ME

MICROSCOPIO PTICO

CARACTERSTICA

MICROSCOPIO ELECTRNICO

De interferencia de rayos
luminosos

1) IMAGEN DADA POR


MECANISMO:

De dispersin de electrones

Simple con aire

2) TUBO

Al vaco con gran diferencia de


potencial

Luz (fotones)

3) FUENTE

Filamento de tungsteno
(electrones)

Lentes: Ocular, objetivo y


condensador

4) ELEMENTOS

Bobinas electromagnticas

Clulas vivas o muertas

5) ESTUDIAN

Clulas muertas

Coloreadas o no

6) OBSERVACIN DE LA IMAGEN Distintas tonalidades de gris. En


la actualidad se ven imgenes
"sombreadas" electrnicamente.

0,25m

7) LIMITE DE RESOLUCIN

3 a 5 (terico)
10 (en la prctica)

5.500 (trmino medio)

8) LONGITUD DE ONDA

0,056

500 X a 1500 X

9) AUMENTO (el signo X significa


aumento)

30.000 X a 1.000.000 X

Carnoy u otros fijadores

10) FIJACIN

Bicromato de potasio, tetrxido


de osmio, formaldehdo.

Parafina o coloidina

11) INCLUSIN

Acrlicos o resinas de epoxi.

Con el micrtomo. (cuchilla


de acero). Cortes de 10m

12) CORTES

Con ultramicrtomo. (cuchilla de


diamante o vidrio) Cortes de 100 a
500 .

De vidrio

13) PORTAOBJETO

Placas de Colodion, aluminio o


berilio.

Nivel microscpico:

14) NIVEL DE OBSERVACIN

Nivel submicroscpico:

ESTRUCTURA

ULTRAESTRUCTURA

LAS CLULAS VIVAS PUEDEN SER OBSERVADAS A TRAVS DEL MICROSCOPIO


Se pueden utilizar ingeniosamente las propiedades ondulatorias de la luz aumentando el contraste de las
estructuras transparentes. As surgieron varias clases de microscopios pticos convirtindose en herramientas
destacadas en el estudio de la clula. Ms an, si se considera la posibilidad de que algunos componentes de la
clula puedan perderse o distorsionarse durante la preparacin de la muestra. En consecuencia, el examen de la
clula viva (sin fijacin ni congelacin) resulta til.

Los microscopio de contraste de fase y de interferencia son sistemas pticos especiales que logran intensificar
la escasa interferencia [3] y proporcionan mayor contraste que el obtenido con un MO comn.
En el microscopio de campo oscuro, el haz luminoso se proyecta oblicuamente y los sistemas de lentes detectan
la luz reflejada por la muestra que se ve como un objeto brillante contra un fondo oscuro, logrndose un gran
relieve de rasgos de la clula que son invisibles en el MO.
El microscopio de luz polarizada puede proveer datos sobre la estructura a nivel molecular de las clulas y los
tejidos no slo en las clulas vivas sino en preparados post-mortem. Ciertos componentes celulares y tisulares
se comportan peculiarmente cuando la luz polarizada (luz que gira nicamente en un plano) los atraviesa.
LAS ORGANELAS PUEDEN AISLARSE PARA ESTUDIARLAS MS PROFUNDAMENTE
La descripcin de las diversas organelas dentro de la clula revela poco acerca de su funcin. La Biologa Celular
actual desarrolla la integracin de la Citologa con la Bioqumica, es decir el estudio de la estructura celular
junto con el anlisis de los procesos qumicos de la vida (metabolismo). El fraccionamiento celular ha sido
particularmente importante en esta ciencia.
El objetivo del fraccionamiento celular es disgregar las clulas separando las organelas principales de modo
que, sus funciones individuales puedan ser estudiadas. El instrumento usado para fraccionar las clulas es la
centrfuga capaz de girar a diversas velocidades. La ms poderosa, llamada ultracentrfuga puede dar vueltas
tan rpidamente como 80000 revoluciones por minuto (RPM) y aplicar fuerzas sobre las partculas de 500000
veces mayores que la fuerza de la gravedad (500000g).

Fig. 1.19- Esquema del Proceso de Fraccionamiento Celular

El fraccionamiento celular comienza con la homogeneizacin, o sea la ruptura de la clula. El objetivo es romper
las clulas sin daar severamente sus organelas. El homogenato se centrifuga logrndose la separacin de las
partes de la clula en dos fracciones: el pellet que consiste en las estructuras ms grandes depositadas en el
fondo del tubo y el sobrenadante constituido de partes ms pequeas suspendidas en el lquido por encima del
pellet. El sobrenadante es transvasado a otro tubo y centrifugado otra vez. El proceso es repetido
incrementando la velocidad en cada paso. De esta manera se consigue recolectar componentes ms pequeos de
los sucesivos pellets.
Los detalles de esta marcha se aprecian en la Fig.1.19.
El fraccionamiento celular permite preparar los componentes especficos de la clula tanto cualitativa
como cuantitativamente.
LAS POBLACIONES CELULARES PUEDEN SER SEPARADAS POR EL CITMETRO DE FLUJO
Este instrumento posee un tubo muy delgado por donde se hacen pasar a las clulas una tras otra. Un
determinado tipo celular emitir fluorescencia, previo tratamiento con fluorocromo(pigmento fluorescente).
Esto permite la discriminacin y, por lo tanto, la separacin de las clulas as tratadas de acuerdo a la
fluorescencia que emitan.
LAS CLULAS VIVAS PUEDEN SER ESTUDIADAS MEDIANTE EL CULTIVO CELULAR
Con el objetivo de preservar toda la informacin que sea posible sobre todos los tipos celulares, se han
desarrollado tcnicas de disociacin de las clulas.
En los primeros tiempos, la tcnica consista en colocar un explante de un pequeo trozo de tejido en un medio
compuesto por suero sanguneo, extracto de embriones y solucin salina. Hoy se conocen los requerimientos
nutricios de las clulas eucariontes. Se las mantienen y hacen crecer en un medio sinttico enriquecido de
suero. Se distinguen tres tipos de cultivos:
Cultivos Primarios se obtienen de los animales o vegetales. El tejido se separa en condiciones aspticas y se
corta en pequeos trozos y se los trata con tripsina (enzima proteoltica) que disocia los agregados celulares y
genera una suspensin de clulas libres que se cultivan en un medio apropiado.
Cultivos Secundarios se obtienen mediante el tratamiento con tripsina de un cultivo primario, seguido de un
nuevo cultivo en una caja de Petri.
Cultivos de lneas establecidas cuyo crecimiento se prolonga debido a las condiciones cancerosas de las
clulas. Entre las ms usadas se encuentran las clulas HeLa. A pesar de tales anomalas son muy tiles para el
estudio del cncer.
LAS MOLCULAS ORGNICAS SON ESTUDIADAS DENTRO Y FUERA DE LA CLULA
A nivel molecular, los organismos estn formados por relativamente pocos tipos de compuestos. El agua
constituye alrededor del 70% de la mayora de los seres vivos. De los dems compuestos, los principales son
los glcidos, los lpidos, las protenas y los nucletidos, muchos de ellos combinados para formar los cidos
nucleicos, cido ribonucleicos (ARN) y cido desoxirribonucleico(ADN). Aunque hay muchos otros compuestos
presentes, estas cuatro categoras constituyen la mayora de las molculas orgnicas de los seres vivos y son
los actores de los procesos metablicos. Por lo tanto, su localizacin y funcin dentro de la clula como un
estudio ms detallado fuera de ella se hace necesario.

Algunos ejemplos de tcnicas para el estudio, la ubicacin y la cuantificacin de molculas orgnicas se


mencionan a continuacin:
RECONSTRUCCIN DE IMGENES A PARTIR DE ELECTROMICROGRAFAS
Las microfotografas electrnicas poco claras de cristales de molculas o estructuras supramoleculares
se colocan en la trayectoria de un haz de rayos lser para obtener un diagrama de difraccin ptica. Este
diagrama es procesado por un programa de computacin consiguiendo la reconstruccin de las molculas
individuales en las fases y amplitudes correspondientes a un rea de la microfotografa.
DIFRACCIN DE RAYOS X
Este mtodo consiste en el bombardeo de la molcula por un delgado haz de rayos X y provoca la
dispersin (difraccin) de la radiacin a travs de los electrones de los tomos de la muestra. Este haz
disperso debe alcanzar una placa fotogrfica. La estructura molecular tridimensional se deduce de las
posiciones y las intensidades de las manchas registradas en la placa fotogrfica.
LOS MTODOS CITOQUMICOS
Los compuestos qumicos se identifican "in situ" por medio de mtodos citoqumicos.
Este objetivo es cualitativo y cuantitativo y muchas veces persigue el estudio de los cambios dinmicos
producidos en el contenido qumico celular en las distintas etapas del metabolismo.
Para ello, el compuesto qumico debe ser:
a) inmovilizado en posicin original e,
b) identificado por un procedimiento especfico para el compuesto o para un grupo qumico caracterstico que
posea.
Los mtodos fsicos y reacciones qumicas similares a las implementadas en Qumica Analtica pero adaptadas a
tejidos se usan para llevar a cabo este tipo de identificacin.
LAS DIVERSAS MOLCULAS DE LA CLULA PUEDEN LOCALIZARSE POR LAS TCNICAS
INMUNOHISTOQUMICAS
Cuando los vertebrados superiores, los animales e incluso el hombre, son expuestos a la actividad de los
microorganismos o a molculas ajenas a sus ultraestructuras, ya sea naturalmente o por inyeccin, aquellos
sintetizan anticuerpos. Estos son protenas que pueden fijarse selectivamente a los materiales extraos que
desencadenaron su sntesis. Por lo tanto, el organismo produce tantos anticuerpos como partculas extraas
(antgenos) son reconocidas. As, se puede obtener una gran variedad de anticuerpos.
Los anticuerpos son herramientas experimentales muy verstiles para reconocer y manipular clulas y
molculas. Si un animal de una especie determinada es inyectado con un componente celular o molecular de otra
especie, el primero logra fabricar anticuerpos capaces de reconocer y fijar fuertemente aquel componente (el
del segundo animal). A estos anticuerpos se acoplan colorantes fluorescentes que son visibles al MO. De modo
similar, con el M.E. se pueden detectar molculas trazadoras acopladas en anticuerpos. De esta manera, los
componentes celulares y moleculares quedan teidos en forma diferencial por los anticuerpos que se fijan a
ellos.

Como todava no se han presentado los aspectos fundamentales de las molculas orgnicas, otros mtodos
fisicoqumicos de ms fina determinacin, purificacin y cuantificacin de las biomolculas se mencionarn en
las prximas unidades. Como se ver, dichas tcnicas son de uso corriente en el diagnstico mdico rutinario.
CUESTIONARIO DE AUTOEVALUCIN
1.

Cul de los siguientes organoides no forman parte del Sistema de Endomembranas?:

a.

envoltura nuclear

b.

cloroplasto

c.

aparato de Golgi

d.

retculo endoplasmtico

2. Un determinado veneno destruye el citoesqueleto. Cul de las siguientes funciones sera afectada
directamente?:
a.

la divisin celular

b.

la respiracin celular

c.

la fotosntesis

d.

la sntesis de protenas

3.

Cul de las siguientes organelas est presente en la clula animal y vegetal?:

a.

cloroplasto

b.

pared celular

c.

mitocondria

d.

centrolos.

4.

Qu organela est presente en una clula procarionte?:

a.

mitocondria

b.

ribosoma

c.

cloroplasto

d.

retculo endoplasmtico

5.

En qu parte de la mitocondria aparecen las crestas?

6.

Qu organela carece de membrana?

7.

En qu parte de la bacteria se realiza la respiracin?

8. Si Ud. tuviera que argumentar acerca de que los virus son organismos vivos, qu caractersticas
estructurales y funcionales del virus podra utilizar para apoyar su argumentacin?
9. Qu tipo de clulas pensara Ud. que alcanzaran el mayor tamao: una clula muy aplanada o una esfrica?
Por qu?
10. Por qu casi todas las clulas casi siempre son microscpicas?
11. Cules son las propiedades fundamentales que comparten todas las clulas? Describa la importancia de
cada una de ellas.
12. Compare en un cuadro las diferencias estructurales, funcionales y metablicas entre las clulas
procariontes y eucariontes.
13. Qu propiedades distinguen a un virus de una bacteria?
14. Enumere los pasos de la infeccin viral, y describa brevemente cada paso.
15. Utilizando el Sistema Mtrico Decimal resuelva las equivalencias en metros de: a) 1 nm; b) 1 mm.
16. Indique el poder de resolucin del: a) M.O.; b)M.E.T.; c)M.E.B.
17. Cuntas veces son mayores los aumentos del M.E. en relacin a los del M.O.?
18. A qu es igual el poder de resolucin?:
a.

AN / 0.61 x l

b.

0.61 x l / AN

c.

0.61 / AN x l

d.

0.61 x AN /l.

19. Qu compuesto se usa como fijador en microscopia electrnica? Y en microscopia ptica?


20. Explique qu tcnicas utilizara para crear suficiente contraste cuando se usa el M.O. y el M.E.
21. Qu tipo de microscopios se usan para la observacin de la clulas vivas?
22. Cules son las ventajas de estudiar las clulas con el M.E.T. y el M.E.B.?
23. Cundo utilizara la microscopia de contraste de fase? Por qu?
24. Para qu se utiliza la tcnica de fraccionamiento celular? Qu se obtiene en cada paso?
25. Qu es un anticuerpo? Por qu es una herramienta til en la investigacin biolgica?
26. Para qu se utiliza la difraccin de rayos X?

27. Cuando una clula de forma esfrica crece, los mm2 de superficie de la membrana plasmtica por mm 3 del
volumen celular:
a.

decrece

b.

aumenta

c.

se mantiene constante

d.

se vuelve ms delgada

28. El microscopio de interferencia es:


a.

una variante del M.O.

b.

una variante del M.E.

c.

til cuando se colorea la muestra

d.

utilizado para visualizar tomos

29. La ultracentrfuga se emplea en:


a.

citometra de flujo

b.

b) microscopia electrnica

c.

fraccionamiento celular

d.

difraccin de rayos

30. Las muestras de clulas vivas o preparados fijados se pueden estudiar indistintamente con:
a.

microscopia electrnica

b.

microscopia de interferencia

c.

microscopia de luz polarizada

d.

difraccin de rayos X.

BIBLIOGRAFA

Alberts, B et al; (1996) Biologa Molecular de la Clula. 3ra Edicin. Ediciones Omega S.A. Barcelona.

Brock, T; (1997) Biology the Microorganisms. 8th Edition. Prentice Hall. NY

Campbell, N; (1997) Biology. 4th Edition. the Benjamin Cummings Publishing Company. Inc. California

Castieira de Dios L. y col. (1999). Cuadernillos de Biologa e Introduccin a la Biologa Celular N 2. Bs.As.
Ediciones CCC-Educando.

Curtis y Barnes (1992). Biologa. 5 Ed. Bs.As. Editorial Mdica Panamericana.

De Robertis(h); Hib; Ponzio. (1996).Biologa Celular y Molecular de De Robertis. 12 Edicin. El Ateneo.


Bs.As.

De Robertis, E.; Hib, J.; (1998) .Fundamentos de Biologa Celular y Molecular. El Ateneo. Bs.As.

Freidfelder, D. (1982) Physical Biochemestry. 2 Ed. W.H. Freeman and Co.

Holtzman, E. y Novikoff, A.B.(1986). Estructura y Dinmica Celular. 3 Ed. Mxico. Interamericana.

Karp, G.; (1998) Biologa Celular y Molecular. Ed. Mc Graw Hill Interamericana. Mxico.

Moreno Azorero, R. y Schwartzman, G.; (1986). Principios de Biologa Celular. El Ateneo. Bs.As.

Smith and Wood; (1997) . Molculas Biolgicas. Ed.Addison-Wesley, Iberoamericana S.A.

Solomon y col. (1998) . Biologa de Villee. 4. Ed. Mex. McGraw-Hill. Interamericana

[1] La longitud de onda (l) es la distancia entre dos puntos consecutivos que vibran en fase. Siempre que dos
puntos estn separados por una distancia igual a la que recorre la onda en un perodo, o a un mltiplo de ella, los
dos puntos vibrarn en fase.
[2] Los electrones pueden considerarse como una variedad de radiacin de pequea longitud de onda.
[3] Interferencia: Es un fenmeno fsico producido entre ondas cuyos "picos" y "valles" no coinciden, es decir
no estn en fase.