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Extraccin en Fase Slida

La Extraccin en Fase Slida (SPE) es una potente y simple tcnica de limpieza de muestras que es, al mismo
tiempo, rpida y econmica. Una columna SPE consiste en un lecho de adsorbente de partculas gruesas
mantenido entre dos discos porosos en un tubo desechable. SPE permite la preconcentracin de la muestra con
un riesgo mnimo de prdida o contaminacin de la misma. El componente de inters resulta retenido en una
fase slida mientras que los contaminantes de la matriz se eluyen.

Fig. 1 Adsorbentes y sistemas de extraccin a vaco empleados en SPE

ETAPAS DE LA EXTRACCIN EN FASE SLIDA


1. Activacin. El primer paso es la activacin (A) en la que se utiliza un solvente orgnico para "humidificar" la
fase.
2. Acondicionamiento. La fase estacionaria SPE se acondiciona (K) con el mismo solvente de la matriz, por
ejemplo, con matrices acuosas el solvente es agua. El acondicionamiento permite "alinear" la fase estacionaria
lejos de la superficie de la slice, permitiendo la interaccin entre el analito y la fase estacionaria. Cualquier
solvente orgnico residual se elimina en esta etapa, asegurando que los componentes de inters sean retenidos
en la parte superior de la columna.
3. Retencin. Las interacciones entre las molculas de la muestra y la fase estacionaria controlan la retencin
en el adsorbente de SPE. Para maximizar las interacciones la muestra (A=analitos + M=matriz) deben cargarse
en el adsorbente de SPE a aproximadamente 3 ml/min. Este caudal puede controlarse mediante una vlvula en
la estacin de vaco. Los componentes de inters han de retenerse en el adsorbente de SPE mientras que la
matriz y los contaminantes deben eluirse y descartarse.
Durante la etapas 1-3 el adsorbente SPE ha de mantenerse hmedo siempre, puesto que el secado del mismo
puede acarrear una prdida de muestra.

4. Eliminar interferencias. Usando un solvente o una serie de solventes de fuerza creciente los
contaminantes pueden eliminarse del adsorbente de SPE hasta que solo los analitos de inters queden
atrapados.
Por ejemplo, al retener compuestos hidrofbicos en C18 la contaminacin puede eliminarse con un lavado de
agua:metanol 50:50 puesto que los compuestos de inters no se eluyen del adsorbente de SPE hasta que no se
use un mayor porcentaje de solvente orgnico. Con un lavado adecuado (M) las impurezas se eliminan con un
adecuado eluyente de lavado (W). El adsorbente de SPE se deja secar generalmente con nitrgeno. El secado
es esencial si el eluyente de lavado no es miscible con el solvente de elucin final.
5. Elucin. La elucin de los analitos (A) se efecta mediante un eluyente adecuado (E) y a un caudal de 1
ml/min. El adsorbente de SPE y las interacciones analito-adsorbente determinan el eluyente final de elucin.