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Estudio del movimiento Browniano y captura de partculas

utilizando pinzas pticas


Onetto Martin, Crescitelli, A. Maximiliano

Fsica Experimental II Instituto Balseiro


21 de Mayo de 2014

Resumen. Se estudi el movimiento browniano en partculas de 5,3 m en una solucin acuosa. Para observar
esto se descompuso el movimiento en una parte lineal asociada al movimiento del fluido y otra parte
correspondiente al movimiento browniano. Fue posible verificar la proporcionalidad lineal entre el promedio
de los cuadrados de los desplazamientos y el tiempo transcurrido. Adems se mont un sistema de pinzas
pticas con las cuales se manipularon las mismas partculas. Se logr medir una distancia mxima de captura
de (20 1) m con una velocidad promedio de la partcula desde que comienza a ser atrada por el lser hasta
que llega al foco del mismo igual (10 1) m/s

1 INTRODUCCION
1.1 Movimiento Browniano

Quin no tuvo la experiencia de ver la luz que atraviesa una ventana, iluminado partculas de polvo
suspendidas en el aire? El movimiento de estas partculas es un claro ejemplo donde se puede
presenciar el movimiento browniano [1], es decir, un movimiento arbitrario que se observa en
partculas micromtricas inmersas en un fluido. Este es el modelo que describe de manera ms
convincente la realidad del movimiento de las molculas.
Una partcula micromtrica sumergida en un fluido sufre un gran nmero de colisiones dadas por las
molculas del medio que la rodea. Una compensacin incompleta de estos choques resulta en una
fuerza F cuya accin mueve a la partcula.
Adems de la fuerza mencionada, acta tambin la fuerza de Stokes que para una esfera de radio a
puede calcularse con la siguiente ecuacin:

donde

es la viscosidad del fluido y

la velocidad de la esfera.

La ecuacin de movimiento de la partcula, de acuerdo a la segunda ley Newton, queda como se


muestra a continuacin:

donde m es la masa de la partcula, su aceleracin, expresada como la derivada segunda respecto del
tiempo del vector desplazamiento, y su velocidad.
Si se analiza la proyeccin sobre una de las componentes se tiene que:

donde y son ahora la componente x de aceleracin y velocidad respectivamente


Durante los choques entre la partcula y las molculas del fluido se intercambia energa y se llega a
un equilibrio trmico con el medio en donde se mueven. Por sta razn deben coincidir la energa
cintica media del movimiento de traslacin de la partcula con la energa cintica media de las
molculas del fluido [2] que es igual a:

donde k es la constante de Boltzman y T es la temperatura absoluta. As se pude mostrar que el valor


medio del cuadrado del desplazamiento de una partcula browniana en un intervalo de tiempo, est
dado por la ecuacin 5.

donde x es el desplazamiento. Se puede ver que si se toman los desplazamientos proyectados en un


plano tambin existir una relacin de proporcionalidad con el intervalo de tiempo .
En el presente trabajo se pretendi verificar esta proporcionalidad analizando el movimiento de
partculas de 5,3 m en una solucin acuosa.
1.2 Fuerza ptica

La tcnica de manipular objetos micromtricos con luz, conocida como pinzas pticas, fue un hito en
diversas reas de investigacin ya que se puede tener una excelente precisin para la manipulacin los
mismos, logrando as aplicaciones tales como la manipulacin de ADN, modificacin de encimas, etc
[3].
La teora electromagntica muestra que la luz puede transferir momento a los objetos. La fuerza F
resultante depende de la velocidad de la luz en el medio donde sta viaja. Para un solo de rayo de
luz con una potencia P dada se tiene que:

Para estimar la magnitud de la fuerza ejercida por la luz se considera un haz de luz que incide sobre
un espejo. Cada fotn tendr entonces un momento asociado:

donde es la constante de plank y es el vector de onda asociado a la luz. Al reflejarse la luz con el
espejo se le transfiere un momento:

Si se escribe el modulo del momento en funcin de la energa de la onda se tiene:


|

Derivando respecto al tiempo se encuentra la siguiente expresin para la fuerza.

En experimentos de pinzas pticas las potencias utilizadas son en general de unos pocos miliwatts,
con lo cual la ecuacin anterior predice una fuerza del orden de
. Esta fuerza no puede
explicar el confinamiento ptico de una partcula ya que su efecto sera un desplazamiento en la
direccin incidente del rayo de luz.
Para comprender el fenmeno donde un objeto se ve atrapado por un rayo lser se debe considerar
gradientes de fuerzas que estn presentes cuando a ste se lo focaliza en un punto.
Los gradientes de fuerzas aparecen cuando se consideran las refracciones dadas en la superficie del
objeto. Esto resulta en un cambio de momento de los fotones ya que el vector de onda cambia durante
estos sucesos. As, por conservacin del momento lineal, tambin cambiar el momento del objeto

pero en direccin opuesta. La variacin de momento que aparece en el objeto es la fuerza de inters
para este trabajo.
Se analiza el siguiente caso (ver figura 1). Se consideran dos rayos de un haz de luz convergente
provenientes de un lser (cuya intensidad se distribuye de forma gaussiana respecto a distancia del eje
del mismo). Se toma el rayo 1 como aquel que sale del centro del haz con un vector de onda k1 y el
rayo 2 como el que sale del extremo derecho con un vector de onda k2. Al refractarse, estos vectores
se vern alterados resultando en una fuerza sobre la partcula. Notar que el valor absoluto de la fuerza
dada por el rayo 1 ser mayor que la del rayo 2 ya que su intensidad es mayor. Esto da como resultado
una fuerza neta hacia el centro de convergencia del haz del lser.

Figura 1. Dos haces de luz, con vectores de onda k1 y k2 que provienen de un lser y se refractan sobre una
partcula esfrica. Imagen tomada de referencia [4].

En este trabajo se prepar un experimento para observar el fenmeno de pinzas pticas. Luego se
midieron las velocidades promedio que adquieren las partculas cuando son capturadas y las
distancias respecto del foco del lser a las cuales se pueden capturar.
2 MONTAJE EXPERIMENTAL
2.1 Preparacin de la muestra

Las partculas que se utilizaron en el presente trabajo son esferas de poliestireno de 5,3 m inmersas
en una solucin acuosa. A dicha solucin se la dilua con agua para disminuir la densidad de
partculas y poder observarlas con ms detalle al aplicar pinzas pticas. Luego se pasaban por
ultrasonido, lo cual hace que se separen aquellas que se encuentran aglomeradas.
De la solucin final se tomaba una gota y se la colocaba en un portaobjetos, dentro de un anillo de
Mylar, el cual serva para contener a la solucin y que no se derramara hacia afuera del portaobjetos.
Finalmente, encima del Mylar que ya contena la gota, se colocaba un cubre objetos el cual quedaba
adherido por la misma tensin superficial del agua. En la figura 2 puede verse una muestra terminada
y lista para ser montada en el sistema ptico.

Figura 2. Muestra preparada para ser montada en el sistema ptico. El recipiente que formaba el anillo de
Mylar con el cubre objeto para la solucin de las partculas tena un dimetro de 5 mm y un espesor de 0,1 mm

aproximadamente.
2.2 Sistema ptico

El experimento se puede separar en dos partes. Por un lado se tuvo que armar un sistema para poder
visualizar las partculas y caracterizar su movimiento. En segundo lugar fue necesario montar un lser
para realizar la captura de las partculas concerniente a la parte de las pinzas pticas. El esquema
experimental puede se muestra en la figura 3.

Figura 3. Esquema experimental. Imagen tomada de referencia [5].

Para la primera parte se utiliz un posicionador 3D, que cumpla el rol de sostener una muestra para
poder moverla en cualquier direccin. Para ver las partculas se utiliz un objetivo de microscopio de
60x y una linterna detrs de la muestra. La luz que atravesaba el objetivo, era desviada con el divisor
de haz hacia una cmara CCD con la cual se podan obtener videos en una PC.
Como las partculas estaban en una solucin de agua, se tuvo que introducir aceite para microscopios
entre el cubre objetos y el objetivo, el cual tiene un ndice de refraccin similar al del agua. La
funcin que cumple es mantener los rayos de luz en su direccin una vez que salen del objetivo para
que estos no pasen por aire y se desven a causa de la diferencia en el ndice de refraccin.
Para la segunda parte del experimento concerniente a las pinzas pticas, lo que se hizo fue montar,
sobre la misma gua que se encontraba el posicionador y el objetivo, un lser y dos lentes
convergentes con el fin de concentrar todo el haz del lser en la apertura del objetivo.
Al interponer el divisor de haz entre el lser y el objetivo se logra incidir con este ltimo en la muestra
y luego visualizar esto en la cmara CCD con el haz que vuelve y se desva en el divisor.
3 ANLISIS DE DATOS Y RESULTADOS

Una vez que se obtuvieron todos los videos necesarios con la cmara CCD, se seleccionaron 6
eventos para la caracterizacin de su movimiento y 6 eventos para medir las distancias a las cuales
las partculas son capturadas por las pinzas pticas y la velocidad promedio que estas adquieren.
Los eventos seleccionados se descompusieron en imgenes equiespaciadas en el tiempo con una tasa
de 0,25 segundos entre una imagen y la siguiente.
3.1 Verificacin del movimiento browniano

Como se deseaba evaluar si las partculas tenan un movimiento browniano o no, lo que se buscaba,
segn la ecuacin 5, era verificar si exista una linealidad entre el promedio de los cuadrados de los
desplazamientos y el tiempo que tardaban estos.
Como todas las imgenes de las filmaciones estn tomadas con la misma diferencia temporal, lo que
se hizo para evaluar dicha linealidad fue lo siguiente. Se tom el promedio de la distancia al cuadrado
que recorre la partcula de una imagen a la otra, luego se hizo lo mismo pero cada dos imgenes,
donde el nuevo t es igual a dos veces el anterior, y as sucesivamente.
Graficando los promedios mencionados anteriormente en funcin de los t, si el movimiento es
browniano, debera obtenerse una recta. Para ello se procedi como se explica a continuacin.

Para extraer las coordenadas de la partcula en todas las imgenes y calcular los desplazamientos, se
hizo una rutina en Matlab adaptando un algoritmo que fue brindado por Damin Dellavale.
Lo que se hace con dicha rutina bsicamente es lo siguiente. En la primera imagen se selecciona la
partcula que se desea seguir. Se calcula el centroide de esta seleccin, y luego se va recalculando en
cada imagen. Las coordenadas de estos centroides, en pixeles, son almacenadas en un archivo de texto
para su futuro anlisis.
En la figura 4, se muestra un ejemplo del funcionamiento de esta rutina.

Figure 4. Secuencia de imgenes obtenidas mientras corra la rutina de seguimiento de la partcula. En el


primer recuadro se observa como el usuario selecciona la partcula que desea seguir. En el segundo se ajusta
el centroide, y en los siguientes se observa cmo va recalculndose a medida que se mueve la partcula.
3.1.1 Efecto del fluido en las mediciones

Luego de obtener las tablas de coordenadas para las trayectorias de las partculas en estudio, se
procedi a realizar una grfica con las mismas y se encontr que las partculas seguan una direccin
preferencial, lo cual contradeca al movimiento browniano. En la figura 5, se muestran los datos
obtenidos para la medicin 1. Para las otras 5 mediciones se tuvieron situaciones similares.
Para explicar este tipo de movimiento, se supuso que el movimiento browniano de las partculas
estaba montado encima de un movimiento del fluido en una determinada direccin. Para determinar
cul era esta velocidad del fluido se realiz un ajuste lineal sobre los datos (ver figura 5a), y se tom
la direccin de la recta del ajuste como la direccin de la velocidad del fluido.
Luego lo que se hizo fue proyectar cada vector desplazamiento sobre esta recta y construir un
histograma (ver figura 5b). El valor central del histograma, es el valor que se le atribuy a la
velocidad del fluido.

Figura 5. a) Ajuste lineal aplicado sobre la trayectoria de la partcula de la medicin 1. b) Histograma de las
proyecciones de los vectores la recta obtenida en el ajuste lineal.

Para tener un argumento mas fuerte en suponer que se tena un movimiento browniano montado sobre
un fludo en movimiento se realizaron simulaciones en computadora. Para esto se program en
Octave una rutina que simulara un movimiento totalmente aleatorio (browniano) en dos dimensiones
y a este movimiento se le sumaba una componente de desplazamiento adicional dado por la velocidad
obtenida anteriormente.
Para que las simulaciones fueran comparables con los datos originales se tuvieron en cuenta todos los
parmetros de los mismos. La misma consideraba la velocidad y direccin obtenidas del ajuste lineal,
las coordenadas iniciales de la partcula, la cantidad de puntos, y el mximo desplazamiento posible
para un .
Si bien el movimiento browniano considera los
constantes, en este trabajo las mediciones se
realizaron todas en una plano, por lo tanto las proyecciones en un plano de los desplazamientos
tridimensionales no sern constantes. Por esta razn se consideran desplazamientos de mdulo
aleatorio en las simulaciones para representar a los datos originales.
En la figura 6 puede observarse el resultado obtenido de la simulacin para la medicin 1 (la misma
que se muestra anteriormente). Puede observarse que habiendo supuesto el montaje sobre el
movimiento del fluido los datos de la simulacin dan muy similares a los datos originales. Por lo tanto
se asume este hecho y se decide restar a cada una de las mediciones originales la componente de
desplazamiento que se obtiene de los ajustes lineales explicados anteriormente.
Finalmente con los datos obtenidos ya sin la componente de desplazamiento del fluido procedi a
verificarse la ecuacin 5 para el movimiento browniano.

Figura 6. Simulacin de un movimiento browniano montado sobre un fluido movindose en una direccin
preferencial. a) Trayectoria de la partcula. b) Histograma con las proyecciones de los vectores
desplazamiento sobre la direccin de la recta obtenida en el ajuste lineal de la medicin original.

3.1.2 Resultados de la componente de movimiento browniana

Con los datos corregidos por el mtodo explicado en la seccin 3.2.1 se procedi a calcular los
para todos los
distintos
existentes en cada medicin. Luego se hicieron grficas para
verificar la existencia o no de la linealidad. En la figura 7 se muestran los resultados para los primeros
4 eventos. Los otros dos se dan resultados muy similares.

Figure 7. Promedio de los cuadrados de los desplazamientos en funcin del tiempo para los primeros 4 eventos

De las grficas anteriores cabe notar dos cosas. Por un lado, se encontr que el error de los datos fue
sobreestimado al no tener en cuenta la correlacin de los datos en su clculo, lo cual hubiera
ocasionado que estos disminuyan considerablemente.
Por otro lado tambin cabe aclarar que a medida que se toman
grandes, la cantidad de datos que se
promedian es menor, por lo cual aumenta la probabilidad de error. Por lo tanto es aconsejable tomar
solo el primer 20% de las curvas. En tal caso, si observa la primera parte de cada curva, puede
verificarse la linealidad.
3.2 Pinzas pticas

En el caso de pinzas pticas lo que se hizo para medir distancias y velocidades fue utilizar el software
ImageJ sobre las imgenes.
Para un determinado evento se tomaba una imagen en el instante antes de que la partcula en estudio
fuese atrapada y luego. Luego se meda, con el software mencionado, la distancia en pixeles desde el

centro de la partcula hasta el centro del haz del lser, que es donde la partcula terminaba luego de ser
capturada. En la figura 8 puede observarse un ejemplo de esta medicin.
Para la conversin de unidades de pixeles a m se utiliz el dimetro de 5,3m, ya conocido, de las
partculas. Simplemente se tuvo que multiplicar a cualquier distancia medida en pixeles por el
cociente entre 5,3m y el dimetro en pixeles que tena la partcula en la imagen. Esto debi
realizarse para cada evento por separado ya que a veces el zoom utilizado en la cmara se variaba y
por lo tanto la relacin de pixeles con el dimetro de las partculas.
Teniendo la distancia que recorri la partcula y conociendo el tiempo transcurrido (ya que las
imgenes se tomaron con la misma tasa temporal), se calcul la velocidad promedio.

Figure 8. Metodologa utilizada para medir distancias en el experimento de pinzas pticas. En la grfica de
intensidades en funcin de la distancia la partcula se encuentra en el cero, y luego se avanza en la direccin
del lser.

Con la metodologa explicada anteriormente se procedi a medir en 6 eventos distintos la distancia a


la cual el lser poda capturar las partculas. Luego dividiendo por el tiempo transcurrido se
obtuvieron las velocidades promedio. En la figura 9 se puede ver una captura del lser.

Figure 9. Secuencia de imgenes tomadas cada 0,25 s donde se observa la captura de una partcula con el lser

De los 6 eventos seleccionados, la mayor distancia que se logr medir para la cual el lser lograba
atrapar a la partcula fue de (20 1)m.
La mayor velocidad promedio que se registr, medida desde que la partcula comienza a ser atrada
por el lser hasta que llega al foco, fue de (10 1)m/s.
Se calucl la velocidad lmite que puede adquirir la partcula en un medio viscoso debido a la fuerza
ptica [6] con la siguiente ecuacin:

donde q es la fraccin de luz reflejada, P es la potencia del lser, r el radio de la esfera, c la velocidad
de la luz,
es el ancho de la cintura del lser y la viscosidad del fluido. El valor obtenido fue vlim =
(50 5) m/s.
Puede verse claramente que las velocidades medidas se encuentran debajo de esta cota.
Se intent desplazar partculas capturadas con el lser. Esto se pudo hacer pero fue imposible
cuantificar el movimiento debido a la sensibilidad del posicionador, por lo que se recomienda utilizar
un instrumento de mayor precisin para realizar dicha tarea.
5. CONCLUSIONES

Para el movimiento browniano, se desarrollaron las herramientas de software necesarias para poder
trazar las trayectorias de un objeto en movimiento y realizar simulaciones de los datos medidos.
Se logr de manera satisfactoria descomponer el movimiento de las partculas en dos partes, una
atribuida al movimiento del fluido y otra correspondiente al movimiento browniano.
Se pudieron obtener los promedios de los cuadrados de las distancias en funcin del tiempo y,
considerando la primera parte de cada grfica, donde se encuentran los promedios con la mayor
cantidad de datos pudo observarse la linealidad en los mismos, y por lo tanto la verificacin del
movimiento browniano.
Se propone realizar la prctica analizando lo que pasa cuando se colocan las partculas en diferentes
fluidos. Adems deber considerarse la correlacin de los datos en el clculo de los errores.
En el segundo experimento pudo observarse el efecto de pinzas pticas y se lograron medir distancias
y velocidades que adquieren las partculas al ser capturadas por el lser.
No se lograron obtener datos cuantitativos al intentar mover partculas atrapadas con el lser debido a
la sensibilidad del posicionador.
Como trabajo futuro se propone realizar la experiencia con un posicionador de mayor resolucin para
poder manipular las partculas de forma precisa.
5 REFERENCIAS
[1] BERNARD H. LAVENDA. (1985): El movimiento Browniano, Investigacin y Ciencia n 103, Espaa.
[2] I. KIKOIN, A. KIKOIN. (1971): Fsica Molecular, 1st Edition, MIR, Rusia.
[3] M. D. WANG, H. YIN, R. LANDICK. (1997): Streching DNA with optical tweezers, Biophysical Journal
[4] M. S. ROCHA (2009): Optical Tweezers for undergraduates: Theoretical analysis and experiments.
American Association of Physics Teachers.
[5] MORHELL, M. N. (2003): Observacin del movimiento Browniano y manipulacin de partculas
microscpicas con un sistema de pinas pticas. Fsica Experimental I, Instituto Balseiro.
[6] A. ASHKIN. (1970): Acceleration and trapping of particles by radiation pressure, Physical Review Letter
vol 24, n 4. US.