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PROBLEMARIO DE FLUOROMETRIA

1. Mediante un procedimiento especfico de fluorescencia se estableci que un


paquete de 25g de sopa de arroz con pollo contena 0.125% de glutamato disdico
(DSG), empleado para realzar el sabor. Cuntos miligramos de DSG habr en el
paquete si con el procedimiento se obtuvo una recuperacin del 91%?
2, En una muestra mineral se determin berilio, un elemento muy txico, por
fusin de 750 mg de la misma. La muestra fundida se disolvi con HCl y se diluy
exactamente a 250 mL. Una alcuota de 10.0 mL de esta dilucin se transfiri a un
matraz volumtrico de 25 mL; se aadieron los agentes inductores de la
fluorescencia y la solucin se diluy hasta ese volumen. Esta muestra y una serie
de estndares se leyeron a 366 y 570 nm. Calcule la concentracin del Be en:
a) El matraz de 25 mL (mg/mL)
b) El matraz de 250 mL (mg/mL)
c) En el mineral (%)
Estndares (mg/mL)
Muestra

Blanco

2.0

5.6

7.8

12.0

Problema

Intensidad

0.00

16.7

46.7

65.0

100.0

87.0

3. Una solucin de 1.2 mg/L de Cu2+ se combin con un agente quelante


fluorescente y dio una intensidad de 15 unidades e intercept en el origen.
Calcular la concentracin de cobre en una solucin que dio una lectura de 85
unidades.

4. Se quiere hacer el anlisis de vitamina B1 en una muestra de 5g de cereal, para


ello se extrajo toda la muestra con HCl, la solucin se purific por intercambio
inico eluyendo con KCl cido, posteriormente se oxid con ferrocianuro de
potasio para dar un pigmento amarillo fluorescente, el tiocromo; a esto sigui una
extraccin con 20.0 mL de isobutanol. Tambin se prepararon una serie de
estndares y un blanco. Con los datos que a continuacin se proporcionan,
calcule:
a) La concentracin de la vitamina en el extracto de isobutanol (mg/mL)
b) Los mg de tiamina por gramo de cereal

Muestra

Concentracin en

Intensidad de

isobutanol (mg/mL)

fluorescencia

Isobutanol

0.00

0.00

Estndar 1

0.05

20.8

Estndar 2

0.12

50.0

Estndar 3

0.24

100.0

Extracto de cereal

-----

42.0

5. El 3,4-benzopireno es un carcingeno potente encontrado con frecuencia en el


aire contaminado. Se determina por fluorometra, en solucin de cido sulfrico.
La longitud de onda de excitacin es de 520 nm y la de emisin es de 548 nm. Se
pasaron 10 L de aire atravs de 10.00 mL de cido sulfrico diluido. Un mililitro de
esta solucin de cido dio una lectura de 33.3 en un fluormetro. Dos soluciones
estndares de 3,4-benzopireno que contenan 0.750 mg y 1.25 mg por cada 10.00
mL de cido sulfrico, dieron lecturas de 24.5 y 38.6 cuando se coloc 1.0 mL en
la misma celda que se us para el problema. Una muestra blanco, sin 3,4benzopireno, dio una lectura de 3.5. Calcule el peso de 3,4-benzopireno en 1 L de
aire.

6. El calcio puede determinarse por su reaccin con la fluorescena, el complejo


formado puede excitarse a 405 nm y fluorescer a una longitud de onda de 520
nm. Considerando los siguientes datos, calcule la concentracin de calcio en una
muestra de suero que presenta una intensidad de fluorescencia de 67.8 unidades.
Concentracin de Ca2+ (mg/dL)

Intensidad de emisin

0.0

0.0

5.0

45.0

7.5

63.5

10.0

79.0

12.5

93.0

15.5

100.0

7. La siguiente figura muestra los resultados preliminares de un mtodo para la


determinacin fluoromtrica de de glicina. En ste, el aminocido se hace
reaccionar con la fluorescamina para formar un producto fluorescente. Los
barridos muestran:
a) La intensidad de emisin relativa en funcin de la longitud de onda de
excitacin (espectro de excitacin).
b) El espectro de emisin y
c) un grfico de la intensidad de emisin en funcin del pH, empleando longitudes
de excitacin y emisin fijas.
Suponiendo que la forma del espectro no vara con el pH, conteste lo siguiente:
A) Para optimizar la sensibilidad del anlisis de la Gly, a qu longitud de onda
debern ajustarse los monocromadores de excitacin y emisin y qu pH
debe tener la disolucin?
B) Para producir el grfico de pH vs Intensidad de emisin, cuntas especies
deben estar presentes y cuntas son fluorescentes?

8. La quinina es una de las molculas fluorescentes mejor conocidas y las


sensibilidades de los fluormetros a menudo se especifican en trminos del lmite
de deteccin para esta molcula. A continuacin se muestra la estructura de la
quinina; a partir de sta, prediga qu parte de la molcula tiene la mayor
probabilidad de comportarse como cromforo y como centro fluorescente.
Argumente su respuesta.

9. En qu disolvente se esperara mayor fluorescencia del naftaleno: 1cloropropano, -bromopropano 1-yodopropano. Explique su respuesta.

10. La forma reducida el dinuclotido de nicotinamida (NADH) es una importante


coenzima con una alta capacidad de fluorescer. Presenta un mximo de absorcin
a 340 nm y un mximo de emisin a 465. Unas diluciones patrn de NADH
dieron las siguientes intensidades de fluorescencia.

Concentracin de NADH
(mol/L)

Intensidad relativa, I

0.100
0.200
0.300
0.400
0.500
0.600
0.700
0.800

2.24
4.74
6.59
8.98
10.93
14.01
15.49
18.02

a) Construir la curva de calibracin para el NADH


b) Escribir los parmetros de regresin para la ecuacin de la recta para la
representacin grfica anterior.
c) Si al analizar una disolucin problema se obtuvo un resultado de 12.16
unidades de intensidad (I),calcular la concentracin de NADH

11. A cuatro alcuotas de 10.0 mL de una muestra de agua se adicionaron 0.00;


1.50; 3.00 y 4.50 mL de una disolucin patrn de NaF que contena 10.0 ppb de F-.
A cada una se adicionaron 5.00 mL exactos de una disolucin que contena un
exceso del complejo de Al con el granate de Alzarina R, que es un complejo
fuertemente fluorescente. Las soluciones se diluyeron a 50.0 mL. Se midi la
intensidad de fluorescencia de stas, una de ellas el blanco, y los valores fueron los
siguientes:

a)
b)
c)
d)

mL de muestra

mL de F- patrn

Intensidad de fluorescencia

5.0

0.00

66..3

5.0

1.50

53.7

5.0

3.00

39.0

5.0

4.50

26.4

Explicar el fundamento qumico del mtodo analtico


Representar grficamente los datos
Calcular los parmetros de regresin del grfico anterior
Calcular la concentracin de F- en ppb, que tiene la muestra

OH
OH

HO
N

SO3Na
Granate de Alzarina R