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CONTROL QUIMICO DEL CRECIMIENTO BACTERIANO

Como producto de las investigaciones orientadas a controlar el crecimiento


microbiano se han descubierto una serie de sustancias qumicas inorgnicas y
orgnicas que son txicos para los microorganismos. Estos agentes qumicos pueden
inhibir el desarrollo de las actividades y del crecimiento bacteriano o pueden matar a
los microbios. Las sustancias inhibidoras generalmente usadas para la limpieza de la
piel son llamadas antispticos. Los desinfectantes se usan sobre objetos inanimados,
los antispticos no son txicos para los tejidos vivos. Los agentes bacteriostticos
inhiben el crecimiento sin eliminar por completo las formas bacterianas, mientras que
los desinfectantes son bactericidas (eliminan a las bacterias), pudiendo ser los
alcoholes, aldehdos, fenoles, complejos de metales pesados o compuestos de amonio
cuaternario y antibiticos. Los alcoholes coagulan las protenas esenciales, los metales
pesados tales como el mercurio y la plata inhiben las enzimas. Los fenoles y los
compuestos cuaternarios de amonio desorganizan la membrana plasmtica. Muchos
de estos agentes no tienen efectividad en presencia de altas concentraciones de
materia orgnica, jabones o detergentes.
Varios colorantes empleados para teir microorganismos son antispticos. Estos
colorantes son de gran utilidad para ajustar las condiciones de los medios
bacteriolgicos de tal manera que supriman el crecimiento de ciertas especies. El
colorante mayormente usado es el cristal violeta, este colorante a concentraciones
relativamente altas inhibe el crecimiento da gram (+), mas no gram(-). Si la
concentracin se reduce se alcanza un nivel de tolerancia para ambos tipos de
bacterias. Otros colorantes como el verde brillante y el verde malaquita inhiben
tambin a los gram positivos.
Objetivos
-

Determinar el efecto bactericida o bacteriosttico de algunos agentes qumicos


como colorantes bsicos, desinfectantes, metales pesados, antibiticos

Demostrar que los microorganismos tienen diferentes rangos de tolerancia frente a


los agentes qumicos

Adquirir experiencia en la tcnica de evaluacin de efecto antibacteriano de los


agentes qumicos.

Materiales
Materiales y reactivos
-

Bacillus subtullis.

E. coli

Staphylococcus sp.

Tintura de yodo

Enterobacter sp.

Alcohol de 96 y alcohol 70

Cultivo mixto de piel

Leja a concentraciones de 100%,

Agar Tripticasa de Soya

Soluciones de cristal violeta: 5; 2,5 y


1,25 mg/mL

50% y 25%.

Procedimiento
1. Preparar el Agar Tripticasa de Soya, autoclavar y plaquear.
2. Sembrar por extensin 0,1mL de cultivo joven sobre las placas con Agar tripticaso
de Soya.
3. En condiciones aspticas, coger un disco de papel filtro con una pinza e
impregnado totalmente con las soluciones.
4. Colocar el disco sobre el agar.
5. Repetir el procedimiento 4 para cada uno de los agentes.
6. Incubar las placas a 37 C por 24 horas. Observar los resultados, medir los halos de
inhibicin, completar el cuadro con todos los agentes qumicos y concluir.

Agente qumico

Concentracin

1,25mg/mL
Cristal violeta

2,5 mg/mL
5 mg/mL
25%

Leja

50%
100%

Tintura de yodo
Alcohol

70
96

Microorganismo (dimetro del halo de inhibicin en mm)

Hacer los grficos de halo de inhibicin, concentracin y bacteria


Cristal violeta

Leja

Tintura de yodo y etanol

Conclusiones

Indicar leyenda de bacterias

Nombre

Nombre

Nombre

Nombre

Cuestionario
1. Mencione los nombres de algunos compuestos bactericidas y funguicidas.
2. Cmo podra explicar el no crecimiento de bacterias alrededor de los discos?
3. Qu es un antibiograma y cul es su utilidad?
4. En casos podra aplicar esta tcnica en su carrera?

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