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ANLISIS DE ALGUNAS ENZIMAS LTICAS EXTRACELULARES DE

Aureobasidium pullulans.
Acosta-Rodrguez, I., Banda Gmez, M., Crdenas Gonzlez J.F., Gutirrez-Gutirrez,
C., Rodrguez Rodrguez, X. y Moctezuma Zrate, M.G.
CIEP. Facultad de Ciencias Qumicas. Universidad Autnoma de San Lus Potos. Av.
Dr. Manuel Nava No. 6. Zona Universitaria. C.P. 78210. Tel: 014448262440. Fax:
014448262372. E-mail: iacosta @uaslp.mx. San Lus Potos, S.L.P., Mxico.
La contaminacin de la naranja por bacterias y hongos filamentosos causa
alteraciones en la calidad del producto, lo que conlleva a prdidas econmicas muy
severas (Diario Oficial de la Federacin, 1995). La mayora de los microorganismos
presentes (en general en verduras y frutas frescas) son saprofitos, como bacterias del
cido lctico, coliformes y Pseudomonas, derivados del suelo, aire y agua. Las
Pseudomonas y el grupo de Klebsiella-enterobacter-Serratia (Enterobacterieceae), son
las bacterias ms frecuentes, mientras que los hongos ms encontrados son
Aureobasidium, Fusarium y Alternaria. Aureobasidium pullulans es un saprobio de
distribucin mundial, ms comn del suelo, hojas y madera de los rboles. Se asla de
cocinas y baos y puede estropear las paredes pintadas. Se ha sugerido, que produce
marchitamiento de las plantas de naranja y tejocote, causando perdidas econmicas
muy severas y de hasta un 90% de la cosecha de naranja en algunas zonas del pas, y
puede penetrar directamente los tejidos de la planta a travs de heridas y diseminarse
como conidios, cuando los residuos de cosecha infectados son acarreados por el agua,
viento o implementos agrcolas, aunque no hay reportes de las actividades enzimticas
producidas por el hongo, cuando infecta a un husped (Bayer y cols., 2004). Adems,
es un buen modelo para estudiar el estrs provocado por las sales y el calor, debido a
que tambin se asla de manera frecuente a partir de medios ambientes marinos
(tierras, agua, sedimentos y animales marinos). (Managbanag y Torzilli, 2002). El
objetivo de este trabajo fue analizar la produccin de algunas enzimas lticas
extracelulares del hongo A. pullulans, aislado de un lote de Naranja Valenciana,
Se determinaron los azucares reductores del hidrolizado por el mtodo de
Somogy modificado por Nelson (1952). La cantidad de protena se determin por el
mtodo de Lowry y cols., (1951) utilizando albmina de suero bovino como estndar. Se
indujo la produccin de poligalacturonasa y xilanasa extracelulares, obteniendo las
condiciones ptimas de induccin, encontrando que la primera tiene un ptimo de
induccin a los 7 das de incubacin con cido glutmico como fuente de nitrgeno, y
es estable a 4oC y 28oC y una temperatura y tiempo ptimos de actividad de 60-80oC y
4 horas, mientras que la xilanasa presenta dos tiempos ptimos de induccin que son a
los 6 y 9 das de incubacin, con cido glutmico como fuente de nitrgeno, y muy
estable a 4oC y 28oC, con temperatura y tiempo ptimos de actividad de 28oC y 8
horas.
Diario Oficial de la Federacin NOM-014-FITO-1995. Cuarentena exterior para prevenir
la introduccin de plagas del algodonero y la produccin de lino europeo por
Aureobasidium sp.
Bayer, E.A., Belaich, J.P., Shoham, Y. and Lamed, R. 2004. The cellulosomes:
Multienzyme machines for degradation of plant cell polysaccharides. Annu. Rev.
Microbiol. 58. June. pp 521-554.

900

90

800

80

700

70

600

60

500

50
400

40

300

30
20

200

10

100

Peso seco (mg)

Azucares reductores (ng de cido


galacturonico/min/mg protena)
(ng de xilosa/min/mg protena)

100

Actividad especifica de
Poligalacturonasa
Actividad especifica de
Xilanasa
Peso seco de
Poligalacturonasa
Peso seco de Xilanasa

0
0

12

15

Tiempo de incubacin (das)

Figura No. 1.- Cintica de induccin de actividad de poligalacturonasa y xilanasa


extracelulares de A. pullulans

Tabla No. 1.- Resumen de la caracterizacin de las actividades de poligalacturonasa y


xilanasa extracelulares de A. pullulans.

Parmetro
Crecimiento (peso seco)
Tiempo de induccin
Fuente de nitrgeno
pH inicial
Estabilidad a 28oC
Estabilidad a 4oC
Temperatura ptima (oC)
Tiempo de incubacin

Poligalacturonasa
15 das
7 das
cido glutmico
5.5
56.7%/5 das
82.5%/5 das
60-80oC
4 horas

Xilanasa
15 das
6 y 9 das
cido glutamico
5.5
100%/5 das
100%/5 das
28oC
8 horas