ESCUELA DE POSGRADO
MAESTRIA EN TECNOLOGIA DE ALIMENTOS
PROFESORA
ALUMNOS
La Molina, 2012
Evaluacin del Tratamiento Trmico de Alimentos
Introduccin
El tratamiento trmico de los alimentos tiene un doble propsito: en primer lugar para esterilizar el
producto comercialmente y segundo para cocinar a un nivel aceptable. A diferencia de la
esterilizacin, que tiene un objetivo preciso, el trmino de coccin se puede definir de muchas
maneras. Por ejemplo, se puede hacer referencia a la suavizacin de la textura del producto, la
retencin de nutrientes especficos o vitaminas, o una avera en un pigmento de color. Mediante el
tiempo de tratamiento trmico y las temperaturas es que generalmente eligen de modo que se logra
un valor F objetivo, y con frecuencia para lograr una produccin rpida. Sin embargo, hay muchos
productos que requieren los criterios de coccin para ser tenidos en cuenta, por ejemplo, salsas
blancas que se vuelven caf fcilmente si cocinan o no los alimentos que contienen partculas finas
tales como trozos de fruta.
En este estudio se abordan la esterilizacin de un microorganismo que es el B. subtilis y el estudio
del cambio de color en un extracto de espinaca.
I.
Objetivos
II.
Fundamento
Se define el color, como la sensacin producida por los rayos luminosos que impresionan
los rganos visuales y que depende de su longitud de onda si asociamos esta definicin
con los alimentos se tiene que el color de este da la primera impresin y quizs la ms
importante, la que nos lleva a elegirlo o no (Paz, 2004).
Diferencia cromtica CIE-LAB
Segn (Ramrez-Navas, 2010) la llamada Diferencia de color CIE-LAB (E*) numricamente la
diferencia de percepcin de color, para el ojo humano, entre dos muestras del alimento. Garca y
col. (1999) lo como el ndice general de diferencia de color. Una forma de cuantificarlo es medir la
distancia euclidiana E* existente entre dos puntos en un espacio tridimensional. El esquema de la
distancia cromtica euclidiana o pitagrica entre los puntos s y r se presenta en la 2.
En la misma se puede observar que
el
valor
E*representa
la
variacin entre el rojo y el verde del espectro. El parmetro b se refiere a la zona de variacin entre
el amarillo y el azul del espectro. (Vignoni et al., 2006)
(1)
El IC* por sus caractersticas de variacin puede utilizarse como variable de control de la
calidad organolptica de alimentos:
a) Si IC* es negativo (-40 a -20), su valor
relaciona los colores que van desde el azulvioleta al verde profundo.
b) Si IC* es negativo (-20 a -2), su
valor relaciona los colores que van del
verde profundo al verde amarillento.
c) Si IC* est entre -2 a +2, representa el
amarillo verdoso.
d) Si IC* es positivo (+2 a +20), se relaciona
con los colores que van desde el amarillo
plido al naranja intenso.
e) Si IC* es positivo (+20 a +40), se
relaciona con los colores que van desde el
naranja intenso al rojo profundo.
Concentracin (C)
120
100
80
60
40
20
0
0
10
15
tiempo (t)
N = No - kT t
.. (2.1)
Dnde:
N:
No:
es la concentracin inicial
kT :
t :
es el tiempo
2.3.2
Una reaccin de primer orden muestra una curva exponencial en la destruccin o aparicin de un
componente. La concentracin disminuye rpidamente al inicio del tratamiento para luego
disminuir gradualmente hasta mantenerse casi constante En un grfico semilogartmico se puede
obtener una relacin lineal, como se indica en la Figura 3, (Casp Vanaclocha and Abril Requena,
1999) sealan que la prdida de vitaminas, la muerte y desarrollo microbiano, la prdida de color
por oxidacin y la prdida de textura en los tratamientos trmicos, siguen reacciones de primer
orden.
4.5
4
3.5
Log C
3
2.5
2
1.5
1
0.5
0
0
10
15
tiempo (minutos)
0.2
0.1
0
Log k
-0.1
-0.2
-0.3
-0.4
-0.5
-0.6
0.001405 0.00141 0.001415 0.00142 0.001425 0.00143
1/T
4.5
Log N (Concentracin de
microorganismos)
4
3.5
2.5
2
D=3,1
1.5
1
0.5
0
0
5
10
tiempo (minutos)
15
1.6
1.4
1.2
Log D
1
0.8
0.6
0.4
0.2
z = 10C
0
-0.2
95
100
105
110
115
120
Temperatura (C)
Microorganismo
D (min)
Bacillus coagulans
250
121.1
0.07
18
10
Bacillus polymyxa
212
100
0.50
16
Clostridium pasteurianum
212
100
0.50
16
Mycobacterium tuberculosis
180
82.2
0.0003
10
Salmonella spp.
180
82.2
0.0032
12
Staphylococcus spp.
180
82.2
0.0063
12
Lactobacillus spp.
180
82.2
0.0095
12
Hongos y levaduras
180
82.2
0.0095
12
180
82.2
2.5
16
Sustrato
Orden
Degradacin de Tiamina
Carnes
Degradacin de caroteno
Hgado
Degradacin Vitamina C
D (min)
z (C)
121,1
158
31
121,1
43,6
25,5
Arvejas
121,1
246
50,5
Leche
121,1
12,5
26
Degradacin de clorofila
Arvejas
121,1
13,2
38,3
Varios
121,1
5 - 500
26
Oscurecimiento no enzimtico
Temp. (C)
Materiales y Mtodos
Material Biolgico
Cepas obtenidas por estudios realizados al cultivo y procesamiento de esprragos para exportacin
en una empresa agroindustrial localizada en Trujillo Per
Procedencia de la cepa
Similaridad (%)
basada en el gen
rRNA 16S
2M2CE
Control de esterilidad
B. subtilis subsp.
con un proceso
spizizonii
trmico fallido.
NRRL B-23049T
99.93
3.1.2
Produccin de esporas
Materiales
Cultivos frescos
Procedimiento
Sembrar los cultivos de cepas B. subtilis subsp. Spizizenii., por estria sobre la placa Pertri con
medio de esporulacin (Figura 2 y 3). Las placas invertidas sern incubadas en estufa a 35 +/- 1C
por por 72h.
3.1.3
Materiales
Microscopio
Mechero de Bunsen
Lminas portaobjetos
Asas de Kolle
Pinzas de Madera
Verde de malaquita 5%
Agua destilada
Aceite de inmersin
Procedimiento
a. Fijacin de la muestra
b. Coloracin de la muestra
Agregar el colorante verde de malaquita 5% hasta cubrir toda la lmina.
Calentar la lmina hasta la emisin de vapores, repetir dicho calentamiento por tres veces (evitar
que hierva o que se seque el colorante. En caso de riesgo de secado, agregar colorante sobre el
prexistente, hasta cubrirlo nuevamente.)
Enjuagar con agua destilada
Agregar safranina y dejar actuar por 30 segundos
Lavar la lmina con abundante agua corriente
Una vez que la preparacin est totalmente seca, colocar una gota de aceite de inmersin y observar
en el microscopio
3.1.4
Materiales
Centrfuga de mesa
Espectrofotmetro a 600 nm
Vortex
Procedimiento
Aadir a cada placa 2 mL de agua destilada estril y con la ayuda de una pipeta estril trasladar
la suspensin de esporas a un tubo de centrfuga.
Lavar el pellet con agua estril por tres veces, hasta eliminar el medio de cultivo residual,
separndolo por centrifugacin y decantacin.
3.1.5
Materiales
Supensin de esporas
Estufa de incubacin
Vrtex
Cabina de bioseguridad
Agua destilada
Tubos Eppendorf
Agar TSA
Procedimiento
a. A condiciones del inculo
Homogenizar los tubos conteniendo las esporas durante un minuto aproximadamente utilizando el
vrtex. Someter a un shock trmico en agua caliente por 30 minutos a 80C para destruir cualquier
remanente de clulas vegetativas (Jin et al., 2007; APHA, 1972)
3.2.1
Materia Prima:
Espinaca.
3.2.2
Equipos
Colorimetro
Bao Termostatito
3.2.3
Materiales
Tubos de ensayo
Pipetas volumtricas de 1, 2, 10 y 20 ml
Beakers de 100 y 50 ml
Embudo
Varilla de vidrio
Tablas de picar
Cuchillo
Licuadora
3.2.4
Reactivos
3.2.5
1. Se tom muestras del licuado 1:1 de agua de 10 ml y se diluye hasta 1:12 (muestra:agua)
2. Las muestras sern sometidas a 70C
Los tiempos sern de 5, 10, 15, 20, 25 y 30 minutos.
Enfriar en bao con hielo
3. Medir el color con el Colormetro. Realizar dos repeticiones.
IV.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
4.1 Cintica de destruccin trmica de esporas de Bacillus
Los resultados experimentales de la reduccin decimal del Bacillus subtilis se muestran en la figura
Log N
8.2
7.8
7.4
7
6.6
0
10
15
20
tiempo
25
30
Figura 9: Reduccin decimal del Bacillus subtilis durante la cintica de tratamiento trmico.
]
[
(
]
(
(
)
)
De la grfica:
Calculo de K
Calculo de
El valor D de orden uno el cual analizamos y nos reporta el tiempo requerido para reducir en un
90% la poblacin microbiana es 1/0.078 el cual nos arroja 12.8805 minutos necesarios para este
efecto, el cual (Toledo, 1975) citado por (Jay et al., 2005) reporta un valor de 7.3 minutos, sin
embargo Wang et al. (1964) citado por (ALARCON, 2008) reporta un valor de D de 21,9 segundos
a 121C, (Holdsworth and Simpson, 2008) reporta 0.6 minutos a 121.1C, sin embargo (Tucker and
Featherstone, 2011) reporta un
As mismo (Setlow, 2006) Menciona que la resistencia trmica del B. Subtilis se da por el bajo
contenido de agua que es el principal factor en la resistencia de esporas de calor hmedo, pero no se
conoce: (i) cmo se logra ese bajo contenido de agua, (ii) el nivel de agua libre, en su caso, en el
nucleo, (iii) el grado de hidratacin de las protenas del ncleo, y (iv) cmo un contenido bsico de
baja cantidad de agua ofrece resistencia al calor hmedo.
a*
0.1396
0.274
b*
0.0374
0.3321
70
y = 0.1396x + 54.2
R = 0.274
60
Parametro
DE*
IC*
-0.0052
-0.0508
0.0006
0.0009
0.3315
0.0666
50
L*
40
a*
b*
30
y = -0.0052x + 13.294
R = 0.0009
20
Linear (a*)
10
0
-10
Linear (L*)
10
20
tiempo
y = 0.0374x - 4.1589
R = 0.3321
30
40
Linear (b*)
Parametro
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
-1 0
y = -0.0508x + 8.589
R = 0.3315
DE
IC*
Linear (DE)
Linear (IC*)
y = 0.0006x - 0.1507
R = 0.0666
10
20
tiempo
30
40
En las plantas superiores, por lo general se encuentran asociados con la clorofila dos pigmentos
amarillos, el caroteno y la xantofila, pero su presencia es encubierta por la clorofila, que es ms
abundante, este caroteno es el nombre de varios compuestos que tienen una relacin estrecha entre
s, teniendo todos la frmula C40H56, pero difieren ligeramente en la disposicin de los tomos en
la molcula.
En el caso del estudio de la espinaca, en la prctica se observ una coloracin verde; sin embargo,
Alvares (2011) deduce que la clorofila siempre va acompaada por uno o ms pigmentos asociados
que no son verdes. Segn Meiry (2008) el inters de la clorofila en la tecnologa alimentaria
no estriba en su uso como aditivo, sino en evitar que se degrade durante el procesado y
almacenamiento. El calentamiento hace que las clorofilas pierdan el magnesio
transformndose en otras sustancias llamadas feofitinas y cambiando su color verde
caracterstico a un color pardo olivceo mucho menos atractivos.
Evaluacin del Tratamiento Trmico de Alimentos
V.
CONCLUSIONES
Que
No se puede concluir que hubo una cintica de degradacin del color ya que la mayor
variacin de color fue con un R-cuadrado de 0.3321 en el atributo a* (rojo-verde) y segn
el ndice de color de (Vignoni et al., 2006) los extractos estn en un verde amarillento.
VI.
RECOMENDACIONES
Estudiar a diferentes temperaturas la reduccin decimal para encontrar un DT que pueda ser
ms reproducible as como hallar el Z y F.
Encontrar una mejor metodologa para el anlisis de cambio de color en la que no interfiera
la precipitacin de la muestra.
VII.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Anexos
8.1 Reduccin decimal B. subtilis