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Reproduccin clonal in vitro de

plantas de Jatropha curcas para


el establecimiento del cultivo en
el CNEABR.

Ing. Carmen Gutierrez Crdoba

Objetivo General

Implementar el protocolo de
micropropagacin de tempate
(Jatropha curcas) e Higuerilla
(Ricinus comunnis).

Objetivos Especficos
Validar el protocolo de reproduccin in vitro de Jatropha
curcas y Ricinus comunnis.
Evaluar diferentes tratamientos en la micropropagacin de
Jatropha curcas y Ricinus comunnis.
Regenerar plantas in vitro a travs de diferentes
explantes.

Aclimatar las plantas cultivadas in vitro.

Metodologa
Fase 0: Seleccin y preparacin de las plantas
madres.

Fase 1: Eleccin de los explantes y su


desinfeccin.
Fase 2: Establecimiento in vitro
Fase 3: Multiplicacin
Fase 4: Regeneracin y enraizamiento
Fase 5: Aclimatacin.

Fase 0: Seleccin y preparacin de las plantas madre

Las semillas de Higuerilla y J. curcas se


colectaron en Gupiles y las plantas
madres fueron tradas de Santa Cruz,
Guanacaste.

Fase 1: Eleccin de los explantes y su desinfeccin.

Desinfeccin

Explantes

1-Lavado con agua y jabn


1-Semilla Sexual
2- Alcohol de 70 por 10 min.
(semilla)

3-Hipoclorito de sodio al 1% por


15 min. (Hoja)

4- Flameado.(Semilla) con alcohol de

Hipoctilo

Hoja embrionaria.
2- Hojas

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Fase 2: Establecimiento in vitro por


medio de semilla

Las semillas se pusieron a


germinar en el medio M.S
completo.
Macronutrientes
micronutrientes
Quelatos de hierro
vitaminas
Ph5.8

Phytagel, azcar

Fase3: Establecimiento in vitro utilizando


explantes de hoja, e hipocotilo.
Los explantes fueron inoculados en tres medio diferentes todos con el
MS completo lo que vario fueron los reguladores:
de crecimiento:
Medio M.S

Tratamiento 1

IBA

2mg/l

BA

3mg/l

2,4D

Tratamiento
2

Tratamiento 3

2mg/l

BAP

2mg/l

AIA

0.5mg/l

Resultados Obtenidos
Produccin de callo embriognico

Resultados obtenidos
1-El medio MS completo dio buenos resultados
para la germinacin de semillas . Algunas
semillas no germinaron debido a que se
presento contaminacin por hongos
principalmente endgenos muchas eran
semillas viejas contaminadas.
Se recomienda utilizar semilla viables de
buena calidad no contaminadas si se va a
realizar una multiplicacin masiva de jatrofa
in vitro, utilizar semillas debidamente
identificadas.

RESULTADOS
OBTENIDOS
2-Los tratamientos 1 y 2 presentaron una
produccin de callo en un 100% en
explantes de hipocotilo y hojas.
Se dio una multiplicacin alta de callo
friable . Se han realizado tres
subcultivos a intervalos de 2 meses
cada uno.
Se puede recomendar estos dos medios
para la reproduccin masiva de callo a
travs de estos explantes en jatrofa,

Callos obtenidos en
explantes de hojas de
jatrofa

Resultados obtenidos
3-El tratamiento 3 es para lograr
la regeneracin de plantas a
travs de callo sin embargo hasta
la fecha los resultados no han
sido positivos todava se
mantiene el callo sin regenerar
plantas. Algunos callos
regeneraron algunas hojas y
races pero se secaron.

Regeneracin de algunos
callos

Multiplicacin de callo a travs de


hojas de jatrofas

Regeneracin

Resultados obtenidos
Se recomienda realizar un mejor
control de las condiciones fsicas en el
cuarto de crecimiento, aqu se tienen
ornamentales, orqudeas y otro tipo
de plantas esto no permite controlar
estas condiciones especificas para
cada cultivo por lo que afecta su
desarrollo. Se tienen 2 aires
acondicionados que no logran
homogenizar la temperatura en el
cuarto de crecimiento

Resultados obtenidos
Se recomienda instalar otro aire
acondicionado en el rea de crecimiento el
ao entrante para mejorar las condiciones
fsicas del rea de trabajo.
Se estn probando cuatro medios nuevos
para regeneracin de plantas a travs de
callo. Los resultados se vern el prximo
ao hasta el momento no se han tenido
resultados. Se recomienda realizar la
compra de reguladores de crecimiento
nuevos para ver si estos medios no dan
resultado porque los reguladores a usarse
estn vencidos.

Medio para regeneracin


de plantas
TRATAMIENTOS

#1 MS
completo

#2 MS
completo

Acido giberelico

0.1ml/l

0.5mg/l

BA

KINETINA

IBA

#3 MS
completo

1.5mg/l

#4 MS
completo

0.5mg/l

0,04mg/l

0.05mg/l

2mg/l

1.5mg/l

La transferencia tecnolgica de estos


resultados se realizara incorporando
este protocolo en el curso auxiliar de
laboratorio para la micropropagacin
de plantas , tambin impartiendo
charlas a instituciones o personas
interesadas reproducir jatrofa e
higuerilla in vitro
Publicacin del protocolo en el
boletn del ncleo agropecuario.