Microorganismos

sobrevivientes, asociados a
las naves espaciales, bajo
simulacion de radiacin
UV de Marte
Lorraine D. Rodrguez
Curso Biol 4909:
Problemas Especiales en Geomicrobiologa

Kasthuri Venkateswaran
Experiencia Investigativa y Profesional
1998- Presidente del Biotechnology Planetary
Protection Group, Jet Propulsion Laboratory

Trabaj en Mars Exploration Technology

(MET) encargado de la limpieza esterilizacin
y validacin de los componentes de las naves
espaciales.
Monitoreo Microbiano en la Estacin
Espacial Internacional del agua potable y las
facilidades de ensamblaje de las nave
espaciales.

Kasthuri Venkateswaran

1998 -1999 Senior Scientist,

Astrobiologa, Jet Propulsion Laboratory.
Interface con astrobiologa del JPL
y grupos de Biotecnologa &
Proteccin Planetaria.
1990 1993 Senior Scientist, Instituto de
Biotecnologa Marina. Ministro de
Comercio e Industria en Japn.
1986 1990 Universidad de Hiroshima,
Japn.
1977 - 1981 Universidad de Annamalai,
India.

Experiencia en la Enseanza

Cursos subgraduados y graduados que ha

ofrecido:

Microbiologa, Ecologa Microbiana, Microbiologa

de alimentos y Microbiologa Ambiental

Mentor y supervisor de estudiantes graduados.

California Institute of Technology SURF,
MURF, desde 1998

Intereses de Investigacin

Deteccin Microbiana
Microbiologa de alimentos
Diversidad Molecular Microbiana
Diversidad
Extremfilos

endosporas
Qu es una endospora?

Las bacterias gram-positivas pueden formar una estructura especial

resistente llamada endospora.
Estas estructuras son extraordinariamente resistentes a estrs en el
ambiente como calor, radiacin UV, desecacin y limitacin de
nutrientes.
Se desarrollan dentro de clulas vegetativas.
Los gneros involucrados Bacillus y Clostridium (bacilos),
Sporosarcina (cocos).
Las endosporas se pueden formar en horas de una forma muy
organizada.
Las endosporas son impermeables a la mayora de los tintes:
Metileno azul (centro no tie).
Schaeffer-Fulton (verde de malaquita para la endospora y
safranina para la clula vegetativa)

Partes de la endospora

Exosporio-cubierta fina y delicada,

parte ms externa.
Cubierta de la espora(spore coat)

Corteza

Ocupa ms de la mitad del volumen de la

endospora
Hecha de peptidoglican menos entrecruzado
que las clulas vegetativas.

Pared de la espora

varias capas, bastante gruesa

hecha de protenas
impermeable, responsable de su
resistencia a qumicos

rodea el protoplasto

Protoplasto- tiene ribosomas y material

gentico

Mecanismos que hacen resistente a

la endospora:

Acido dipicolinico- dipicolinato clcico

Estabiliza los cidos nucleicos (DNA), protege del

calor

La deshidratacin del protoplasto ocurre por

osmsis con ayuda de la corteza

Esto la protege del calor y del dao por radiacin

Radiacin UV y el Espectro
Electromagntico

En el espectro electromagntico los rayos UV se encuentran

de 200-400 nm.

UVA (315nm-400nm)
UVA+B (280nm-400nm)
UVC (200nm-400nm)

Espacios entre las crestas son los largos de onda. Mientras el

largo de onda disminuye la energa aumenta.

La Radiacin UV

Los rayos UV pueden

daar los sistemas vivientes.
Se utiliza para esterilizar el
aire, ciertas superficies y
capas finas de agua.
El ms comnmente
absorbido por el DNA es
260 nm.

Se forman dmeros de timina,

inhibiendo la replicacin y las
funciones del DNA

Marte
Tiene una fina capa de atmsfera.
Ocurren tormentas de polvo.
Tiene capas de hielo polares. (CO2)
Tiene coloracin rojiza por el oxido de hierro presente.
La atmsfera se compone de:
95% Dixido de Carbono
2.7% Nitrgeno
1.6% Argn
0.7% Oxgeno, Monxido de Carbono

Marte

La cantidad de luz UV que incide sobre la

superficie es afectada por varios factores:
Se reduce dicha cantidad por el polvo y los gases
presentes en la superficie.
El ngulo en que inciden dichos rayos en referencia
con el zenit solar.

Propsito

Conociendo las condiciones en las cuales las

endosporas pueden sobrevivir, usando como
referencia los viajes de naves espaciales fuera del
planeta, se realiz este experimento. El
propsito fue conocer cuales poblaciones de
esporas halladas en las naves espaciales as como
de la Estacin Espacial Internacional, fueron
capaces de sobrevivir a condiciones de UV.

Procedimiento
1. Aislacin de Microoganismos
Superficies de las naves y facilidades de ensamblaje
asociadas

Mars Odyssey y X-2000

Facilidades Jet Propulsion Laboratory
Kennedy Space Center
Estacin Espacial Internacional

Procedimiento
2. Muestreo de superficies
Extrajeron las cepas formadoras de esporas

Sometiendolas a calor 80 C, 2 minutos

Exponerlas a ultrasonido para desactivar material
biolgico
Cultivo en TSA

3. Identificacin por secuenciacin de genes 16s

rRNA.

Procedimiento
4.

Realizacin de modelo de la Radiacin

Atmosfrica en Marte
Tomaron datos recopilados por Pathfinder, de
la Universidad de Arizona.
Utilizaron dos niveles de polvo a las cuales las
densidades pticas fueron 0.24 y 0.74 para
671nm, cuando el ngulo del sol fue:

2.06 en condiciones altas del sol

70.2 en condiciones bajas del sol

Radiacin de UV

Procedimiento

Recreacin de UV
Utiliz una lmpara de Mercurio
Esta es de luz opaca, ideal para obtener el espectro
electromagntico para exponer las endosporas al
mismo.
Se irradiaron a 1000 J/m2 con UV 254
Luego con Dosis Letales o LD con todo el espectro
UV a las sobrevivientes.

Resultados

Solo 19 de las 43 lneas de endosporas aisladas,

mostraron resistencia a la UVC que comprende
de 200nm a 280. Bacillus pumilus SAFR-032
mostr la mayor resistencias a las Bandas UV
que comprenden de 200nm a 400nm.

Resultados

La B. pumilus demostr ser la ms resistente a un UV

de 200nm a 400nm

Conclusin

Es importante identificar cuales son las cepas de

endosporas ms resistentes y cuales longitudes
de onda en el espectro de UV pueden resistir, ya
que esto ayuda a desarrollar protocolos y
estndares de sanitizacin para naves que viajan
y que provienen del espacio.

Proyecciones Futuras

Desean determinar efectos biocidas de la presin baja y

la desecacin en bacterias sobrevivientes protegidas de
la irradiacin directa de UV.
Estudiar los efectos del polvo y de residuos no
biolgicos en los microorganismos sobrevivientes a
fluido de UV de Marte.
Determinar si los bajos niveles de difusin de radiacin
UV permite la adaptacin de microorganismos
terrestres en diferentes condiciones de Marte.