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CENTRO UNIVERSITARIO INTERAMERICANO

QUIMICO FARMACOBIOLOGO

ALUMNA: CITLALLI DE LOS ANGELES HERNANDEZ


GARCIA

GRUPO: 3332

SECCCION: B

PRACTICA 3: DESNATURALIZACION DE PROTEINAS,


PRUEBA DE BIURET Y PRUEBA XANTOPROTEICA.

PROFESORA: NORMA MARTINEZ TECUALT

FECHA DE ENTREGA: 09 DE OCTUBRE DEL 2013

INTRODUCCION
Las protenas son filamentos largos de aminocidos unidos en una secuencia
especfica. Son creadas por los ribosomas que "leen" codones de los genes y
ensamblan la combinacin requerida de aminocidos por la instruccin gentica.
Las protenas recin creadas experimentan una modificacin en la que se agregan
tomos o molculas adicionales, como el cobre, zinc y hierro. Una vez que finaliza
este proceso, la protena comienza a plegarse sin alterar su secuencia
(espontneamente, y a veces con asistencia de enzimas) de forma tal que los
residuos hidrfobos de la protena quedan encerrados dentro de su estructura y
los elementos hidrfilos quedan expuestos al exterior.
La forma final de la protena determina su manera de interaccionar con el entorno.
Si en una disolucin de protenas se producen cambios de pH, alteraciones en la
concentracin, agitacin molecular o variaciones bruscas de temperatura, la
solubilidad de las protenas puede verse reducida hasta el punto de producirse su
precipitacin. Esto se debe a que los enlaces que mantienen la conformacin
globular se rompen y la protena adopta la conformacin filamentosa. De este
modo, la capa de molculas de agua no recubre completamente a las molculas
proteicas, las cuales tienden a unirse entre s dando lugar a grandes partculas
que precipitan. Las protenas que se hallan en ese estado no pueden llevar a cabo
la actividad para la que fueron diseadas, en resumen, no son funcionales.
Esta variacin de la conformacin de las protenas se denomina desnaturalizacin.
La desnaturalizacin no afecta a los enlaces peptdicos: al volver a las condiciones
normales, puede darse el caso de que la protena recupere la conformacin
primitiva,

lo

que

se

denomina

desnaturalizacin.

Son

ejemplos

de

desnaturalizacin, la leche cortada como consecuencia de la desnaturalizacin de


la casena, la precipitacin de la clara de huevo al desnaturalizarse la ovoalbmina
por efecto del calor o la fijacin de un peinado del cabello por efecto de calor sobre
las

queratinas

del

pelo.

En

este

experimento

vamos

desnaturalizacin de las protenas del huevo y de la leche.

provocar

la

OBJETIVO GENERAL

Identificar la presencia de protenas en diversos alimentos por medio de la


reaccin de biuret y xantoproteica.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Manifestar la presencia de cobre por medio de la prueba de biuret.

Aprender a realizar las soluciones para realizar la desnaturalizacin.

Observar la nitracin de anillos de fenol presente en ciertos aminocidos.

MATERIALES
Material:
12 tubos de ensayo
Pipetas de .5, 1 y 2 ml
Balanza
2 vasos de precipitado de 500 ml
2 vasos de precipitado de 250 ml
3 vidrios de reloj
2 agitador
Probeta de 500ml
Huevo, sal y leche
Una gradilla
Reactivos:
10ml de albumina al 2 %
10ml leche
10ml disolucin clara de huevo ( 1 clara en 500ml de agua con 5gr de sal)
8ml HCL al 20%
8ml NaCL al 4%
14ml NaOH al 20%
1ml de CuSO4 al 1%
6ml HNO3 al 40%

CALCULOS

51 ml albumina al 2%
gr=

= 1.02 gr de albumina disolver en 51 ml de agua destilada.

27 ml HCl al 20%
V=

= 5.4ml de HCl, agregar 21.6 ml de agua destilada.

28 ml NaCl al 4%
V=

= 1.12 ml de NaCl, agregar 26.8 de agua destilada.

51 ml de NaOH al 20%
gr=

= 10.2 gr diluirlo en 51 ml de agua destilada

15 ml de CuSo4 al 1%
gr=

= 0.15 gr

27 ml de HNO3 al 40%
V=

= 10.8 ml de HNO3 agregar 16.2 de agua destilada.

DIAGRAMA
Entrada con la
vestimenta adecuada

Presentacin de
seminario

Preparar material y
reactivos

Realizar Asepsia

Primero cortar el papel


y trazar unas lneas.

Pasar las tiras de


aminocidos sobre la
boquilla de hidrxido
de amonio para la
fijacin.

Ya preparado el
butano agregar unas
gotas a las tiras de
papel

Por ultimo colorar las


tiras en el fondo del
vaso de butanol y
cido actico, taparlas
y observar cambios .

Anotar las
observaciones de cada
cromatografa y su
trayectoria.

Recoger material y
reactivos

Entrega de vale por


material y reactivos

Marcar una lnea a


2cm del borde inferior
y ponerle el nombre de
cada aminocido a los
tiras de papel.

Pesar los reactivos


para preparar los
aminocidos y diluir
las soluciones a 0.005
M

Lavar materiales

PROCEDIMIENTO
Procedimiento para desnaturalizacin de protenas
1.- Hacer 3 series de 4 tubos de ensayo y enumerarlo.
2.- A la 1 serie agregar 2 ml de disolucin de albumina al 2%.
3.- A la 2 serie agregar 2 ml de leche.
4.- A la 3 serie agregar 2 ml de disolucin de clara de huevo.
5.- Tubo n1 aadir 2 ml de HCL.
6.- Tubo n2 aadir 2ml de NaCl al 4%.
7.- Tubo n3 aadir 2 ml de NaOH al 20%.
8.- Tubo n4 calentar a bao mara y anotar las observaciones.
Prueba de Biuret
1.- Agregar 2ml de disolucin de albumina a un tubo.
2.- Agregar 2ml de leche a 2 tubos.
3.- Agregar 2ml de disolucin de clara de huevo.
4.- Aadir 2 ml de NaOH al 20% a cada tubo y agitar.
5.- Agregar 4 o 5 gotas de CuSO4 al 1% a cada tubo y agitar y anotar las
observaciones.
Prueba Xantoproteica
1.- Agregar a un tubo 2 ml de disolucin de albumina.
2.- Agregar a un 2 tubo 2ml de leche.
3.- Agregar a un 3 tubo 2ml de clara de huevo.

4.- Aadir 2 ml de disolucin de HNO3 al 40% a cada tubo y anotar observaciones.

RESULTADOS Y DISCUSIN DE RESULTADOS


En la prctica de laboratorio se realiz una desnaturalizacin de protenas como la
albumina y casena; a estas se les realizaron una serie de procedimientos como
reaccin de los aminocidos aromticos, reaccin xantoproteica, adems de la
desnaturalizacin de las protenas por factores fisicoqumicos, como resultado
obtuvimos que las protenas fueron desnaturalizadas por factores qumicos.

En el procedimiento 1, el color amarillo indicaba la presencia de protenas en


todos los casos este color fue tenue lo cual nos indica la casi total ausencia de
protenas en las soluciones: en el procedimiento 2 , en este paso se obtuvo como
resultado la presencia de aminocidos aromticos en las soluciones: en el 3 el
color violeta se debe a la presencia de enlaces peptdicos.

CONCLUSION
Puedo concluir que esta prctica fue excelente ya que pudimos realizar con
mucho xito la prctica y cubrir todos mis objetivos de la prctica la
desnaturalizacin de protenas fue muy buena ya que a simple vista se observ
todo y algo muy importante fue que realizamos bien los clculos y la preparacin
de reactivos que utilizamos
.
Tambin podemos concluir que llegamos a realizar la desnaturalizacin de
protenas con los pasos correctos y fue por eso que pudimos observar los cambios
de color que daba cada reaccin como el color amarillo tenue y el violeta.

CUESTIONARIO
1.- Qu factores afectan la desnaturalizacin de las protenas?
Calor, determinadas sustancias qumicas que rompan sus enlaces en la
estructura, cambios bruscos de ph, presin.
2.- Cul es el fundamento de la prueba de Biuret?
Detecta la presencia de aminocidos en forma de pptidos, detectando
principalmente dipeptidos, en el cual los atomos del cobre se unen a varios NH,
reaccionan los aminocidos y rompe enlaces peptidicos tornando de un color
violeta por la presencia de peptidos.
3.- Cul es el fundamento de la prueba Xantoproteica?
Esta determinar la cantidad de protena soluble en una solucin usando HNO3 el
cual reacciona con los aminocidos que tengan fenilo y lo convierte en hidroxilo el
cual da una colometria amarilla.

BIBLIOGRAFIA
Campbell,

Peter;

Smith,

Anthony

Peters

Timothy.(2006).Bioqumica

Ilustrada.(5ed).Ed.Masson Elsevier.
Voet, Voet.(2007).Bioqumica.(3ed).Ed.Panoamericana.pp.86-92.