Fosforilacin oxidativa

Proceso por el cual los electrones se

transfieren desde el NADH y FADH2 al O2 a
travs de tres complejos proteicos de la
membrana mitocondrial interna

Estructura de las mitocondrias

Las
membranas
externas y sus
respectivas
caras son
diferentes

NADH

Esquema del
transporte de
a travs de los tres
complejos

NADH-Q
oxidorreductasa

Q-citocromo c
oxidorreductasa

Cit c

Citocromo c
oxidasa

O2

Succinato DHQ reductasa

La teora quimiosmtica
Fue desarrollada por Peter Mitchell (19201992)
Le vali el Nobel de 1978
En los comienzos de la dcada del 60 se
conoca el papel del ATP como moneda de
energa, pero se supona que su sntesis era
por fosforilacin a nivel de sustrato. En
consecuencia, se buscaba un hipottico
intermediario de alta energa capaz de
fosforilar al ADP.
La teora postula que la energa para la
sntesis de ATP proviene de la formacin de un
gradiente qumico por el cual los H+ son
bombeados fuera de la mitocondria.

MM Ext

Fumarato
Succinato

MM Int

Componentes del sistema de transporte de

Oxidante o reductor
Complejo
NADH-Q
oxidoreductasa

Masa
(kd)

SU

Gr.
prosttico

Lado de la
matriz

En la
membrana

880

34

FMN

NADH

127

FAD

Succinato

250

10

Hemo bH

200

10

Hemo a

Lado
citoslico

Fe-S
Succinato-Q
reductasa
Fe-S
Q-citochromo c
oxidoreductasa

Citocromo c

Hemo bL
Hemo c1
Fe-S
Citocromo c
oxidasa
Hemo a3
CuA y CuB

Citocromo c

Estructura y estados de reduccin de quinonas

Estructura y estados de reduccin de flavinas

Centros hierro-azufre: Fe no hemnico + S c. lbil

(A) 1 Fe unido a 4 Cistenas

(B) Centro 2Fe-2S con puentes sulfuro de Cis
(C) Centro 4Fe-4S

El grupo hemo: integrante de los citocromos

Hemo c

Citocromo c

Hemo b

Hemo a

El espectro de absorcin de los citocromos permite su

identificacin y da informacin sobre su estado
444

420
Red

605

Ox
BioqUmica - FCByF

La estructura de los citocromos est conservada

en especies diferentes

Atn

Rhodospirillum rubrum

Paracoccus denitrificans

La secuencia de los
citocromos se usa en
estudios filogenticos

Determinacin de la secuencia de los

transportadores de electrones
E0
NAD + + H+ + 2 NADH

-0.320

NADHDH(FMN) + 2 H+ + 2
NADDH(FMNH2)

-0.300

UQ + 2 H+ + 2 UQH2

0.045

Cit b (Fe3+) + Cit b (Fe2+)

0.077

Cit c1 (Fe3+) + Cit c1 (Fe2+)

0.220

Cit c (Fe3+) + Cit c (Fe2+)

0.254

Cit a (Fe3+) + Cit a (Fe2+)

0.290

Cit a3 (Fe3+) + Cit a3 (Fe2+)

0.550

O2 + 2 H+ + 2 H2O

0.816

E0
NAD + + H+ + 2 NADH

-0.320

O2 + 2 H+ + 2 H2O

0.816

O2 + NADH + H+ H2O + NAD+

1.14

G0 = -n FE0 = -52.6 kcal/mol

ADP + Pi ATP + H2O G0= 7.3 kcal/mol
Para el bombeo de 1 H+
G = 2.3 RT [pHin pHex] + Z F
En hepatocitos el potencial es aprox. 0.168V,
da un G = 21.5 kJ/mol. Comparado con alred. de 40 a
50 kJ/mol para la sint. de 1 ATP al menos 2 H+, las
estimaciones son que casi 3

O2

% Cit
red

Bi

m
U
q
o

ic a

yF
B
C
-F

b
c1
c
a + a3

Succ
t

rotenona
NADH UQ Cit b Cit c1 Cit c Cit (a + a3) O2
Antimicina A
NADH UQ Cit b Cit c1 Cit c Cit (a + a3) O2
CNNADH UQ Cit b Cit c1 Cit c Cit (a + a3) O2

COMPLEJO I
(NADH-Q

2 H+
Espacio interm.

QH2
Q

Matriz

Bi
oq
U
m
ica

-F

CB
y

880 kDa (43 SU)

FMN
5 FeS
Aceptor: Q

2x1

2x1

oxidoreductasa)

2 H+

NADH + H+
NAD+

FMN + 2 H+ + 2 H- FMNH2 - H+ - FMNH - H+ - FMN

Q + Q-. + + 2 H+ QH2
4 H+in 4 H+ex

COMPLEJO II (Succinato-Q reductasa)

Espacio interm.

127 kDa
FAD
3 FeS (2/2;
4/4 y 3/4)
cit b560
Aceptor: Q

FeS
FeS

FeS

b560

FADH2
FAD
Matriz

o
Bi

Succinato

ica
m

qU

b560

By
C
-F

QH2
Q

Fumarato

2 H+

COMPLEJO III (Q-citochromo c oxidoreductasa)

500 kDa
(dm. 11 SU)
3 cit (b562,
b566, c1)
1 FeS

Cit c

4 H+

Espacio interm.

Cit c1
FeS

QH2

Cit b562
yF

B
Cicloa Q
- FC Cit b

c
mi
U
q
Bio

566

Aceptor: cit c
4 H+in 4 H+ex

4 H+

Matriz

CICLO Q
H+

H+
Cit c

Espacio interm.

1
QH2

QH.
Cit b562

QH2
Bi

U
oq

ica
m

C
-F

F
By

QH.

Cit b566

Matriz

H+

H+

COMPLEJO IV
(cit c oxidasa)
2 H+

Cit c

Espacio interm.

2x1

2x1

CitCit
a3 a3 CuB

oq

U
m
ic a

-F
CB
y

Cit a CuA

Bi

400 kDa (dm. 813 SU)

cit (a y a3)
CuA y CuB
Aceptor: O2
4 H+in 4 H+ex

O2 + 2

Matriz

H+
H 2O

Sntesis de ATP
Fo: transmembrana, 8 SU diferentes (3 en
E. coli), ab2c10-12, canal de H+
F1: 9 SU, 33, es la cataltica

O
T

L
O

T
O

ATP aq

BioqUmica - FCByF

ADP + Pi

ATP unido

Coordenada de reaccin

Adenilato translocasa

ADP 3ATP 4BioqUmica - FCByF

Pi
H+

Lanzadera malato/cetoglutarato
Matriz

Mal

Mal

NAD+
NADH

MDH

OAA
Glu
AAT

KG
Asp

BioqUmica - FCByF

Esp. IM

NAD+
NADH
OAA
Glu
AAT

KG
Asp

Lanzadera de glicerofosfato

Matriz

Esp. IM

DHAP

FADH2

NADH
NAD+

GliceroP

Bi

ic a
m
U
q

By
C
-F

FAD

Q
QH2

Desacoplantes
Sustancias que disipan el gradiente de
H+
Aumentan el flujo de
Cesa la produccin de ATP
Pueden ser naturales (valinomicina) o
sintticos (DNF)

Noradrenalina

Receptor
-adrenrgico

Adenilato ciclasa

Protena G
GTP

m
U
termogenina
oq
Bi

ica

By
C
-F

ATP

AMPc
+

Activacin de
bloqueda por
ATP, ADP, GTP, GDP

Protena
kinasa dep.
de AMPc

Protena
kinasa dep.
de AMPc

ATP
Ac. graso libre

Lipasa
sensible a
hormonas

ADP
Lipasa
sensible a
hormonas

Inhibidores del transporte de

Sustancias inhiben algn componente
de la cadena de TEM
Cesa el flujo de
Cesa la produccin de ATP
Actan en diferentes lugares:

Complejo I: Rotenona, amital,

piericidina
Complejo III: antimicina, mixotiazol,
estigmatelina
Complejo IV: cianuro, sulfuro, CO,
azida (N3-)

Inhibidores de la ATP sintasa

Cesa la produccin de ATP
Cesa el flujo de
Ejemplos: oligomicina, diciclo hexil
carbodiimida (DCCD)
Inhibidores de la translocasa
Cesa la produccin de ATP
Cesa el flujo de
Ejemplos: atractilsido