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UNIVERSIDAD

DEL ZULIA

Expresin Gnica
MSC.-- Jhoandry J., Rivera Salazar
MSC.
Salazar..
Laboratorio de Gentica y Biologa Molecular (LGBM). Departamento de Biologa.
Facultad Experimental de Ciencias, L.U.Z., MaracaiboMaracaibo-Venezuela.
e-mail: jhoandriveras@gmail.com / lgbm.fec.luz@gmail.com

Transcripcin
Es el proceso mediante el cual una secuencia de
nucletidos de DNA es utilizada como molde para la
sntesis de una molcula de RNA,, la cual p
puede ser
mRNA, tRNA o rRNA, por mediacin de la enzima RNA
polimerasa DNA dependiente.
Caractersticas del proceso:
1.
2.
3.
4.

Necesita un molde de ADN


La sntesis es de NOVO
La direccin de la sntesis es 5
La transcripcin en asimtrica

ASIMETRA::
ASIMETRA
Solamente se transcribe para cada gen una de las dos hlices de ADN.
ADN.

Complementariedad:

TU

RNA polimerasa: Holoenzima


Holoenzima.

40 -50 nt/
t/ seg. a 37 C

Transcripcin: Reconocimiento del promotor


promotor.
PROMOTOR: Secuencia o secuencias de ADN que
PROMOTOR:
pueden estar en una localizacin relativamente fija
con respecto al sitio de inicio de la transcripcin, y son
reconocidas por la ARN polimerasa.
polimerasa
Caractersticas:
Caractersticas:
Presencia de una hexmero en la secuencia -10,
10
llamada caja TATA (TATAAT). Funcin
Funcin:: Permitir la
conversin
i del
d l complejo
l j cerrado
d en complejo
l j abierto
abierto.
bi t .
Presencia de una secuencia consenso en la regin
d -35
de
3 (TTGACA).
(TTGACA) Funcin
F
Funcin:
i : Proveer
P
lla seall de
d
reconocimiento para la ARN polimerasa
polimerasa..

Transcripcin: Inicio
Inicio.

Secuencias Consenso Promotoras: E. coli


coli..

Secuencias Consenso Promotoras


En bacterias

En eucariotas

Mutaciones cis
cis trans
trans:

RNA polimerasa: Holoenzima.


Holoenzima
Subunidad

Nmero por
molcula
enzimtica.

Funcin

Iniciacin
de
la
interaccin
con
reguladoras.

cadena,
protenas

Iniciacin y elongacin de la
cadena

Unin al DNA

Reconocimiento del promotor

Desconocida

Factor sigma

Es diferente a la actividad de la ADN polimerasa porque no necesita


una secuencia partidora o primer y no posee una actividad nucleasa.

Los factores sigma se nombran por el peso molecular del


producto o por el gen.
Fac.

Gen

Masa
(kDa
kDa))

Uso

Secuencia -35

Separacin

Secuencia -10

70
32
24
54
28

rpoD

70

g
general

TTGACA

16-18
16
18 pb

TATAAT

rpoH

32

choque trmico

CCCTTGAA

13-15 pb

CCCGATNT

rpoE

24

choque
q trmico

Se desconoce

Se desconoce

Se desconoce

rpoN

54

nitrgeno

CTGGNA

6 pb

TTGCA

fliA

28

flagelar
g

CTAAA

15 pb

GCCGATAA

En Bacillus subtilis:
43 = estado vegetativo
55 = antes del comienzo de la esporulacin
60 = despus de la esporulacin.

Transcripcin: Modelo de Elongacin.


Elongacin

Transcripcin: Modelo de Elongacin.


Elongacin

Control de la Expresin Gnica en Procariotas

Opern se define como una unidad gentica funcional formada por un grupo o
complejo de genes capaces de ejercer una regulacin de su propia expresin por
medio de los sustratos con los que interaccionan las protenas codificadas por sus
genes.
Cistrones
R

Gen 1

Gen 2

Gen 3

Este complejo esta formado por genes estructurales que codifican para la sntesis
de protenas (generalmente enzimas), que participan en vas.

Opern: Elementos que lo conforman


Promotor (P)
(P):: se trata de un elemento de control que es una regin del ADN con
una secuencia
i que es reconocida
id por la
l ARN polimerasa
li
para comenzar la
l
transcripcin. Se encuentra inmediatamente antes de los genes estructurales.
Abreviadamente se le designa por la letra P.

Cistrones
R

Gen 1

Gen 2

Gen 3

Opern: Elementos que lo conforman


Operador (O)
(O):: es una regin del ADN con una secuencia que es reconocida por la
protena reguladora. El operador se sita entre la regin promotora y los genes
estructurales. Abreviadamente se le designa por la letra O.

Cistrones
R

Gen 1

Gen 2

Gen 3

Opern: Elementos que lo conforman


Gen regulador (i)
(i):: secuencia de ADN que codifica para la protena reguladora que
reconoce la
l secuencia
i de
d la
l regin
i del
d l operador.
d El gen regulador
l d est
t cerca de
d los
l
genes estructurales del opern pero no est inmediatamente al lado.
Abreviadamente se le denomina gen i.

Cistrones
R

Gen 1

Gen 2

Gen 3

Opern: Elementos que lo conforman


P t
Protena
reguladora:
reguladora
l d
: protena
t
codificada
difi d por ell gen regulador.
l d
E t protena
Esta
t
se
une a la regin del operador.

Cistrones
R

Gen 1

Gen 2

Gen 3

Opern: Elementos que lo conforman


Inductor: sustrato o compuesto cuya presencia/ausencia induce la expresin del
Inductor:
resto de los genes que conforman el opern. Puede actuar activando la expresin,
denominndose Activador, o bien reprimiendo, llamndose Represor.

Cistrones
R

Gen 1

Gen 2

Gen 3

Opern: Elementos que lo conforman


G
Genes
estructurales:
estructurales
t
t
l : Llevan
Ll
i f
informacin
i para traducir
t d i protenas
t
( li tid ) Se
(polipptidos).
S
trata de los genes cuya expresin est regulada.

Cistrones
R

Gen 1

Gen 2

Gen 3

Opern: Polignicos o policistrnico


Opern:
policistrnico..
El mRNA no sufre procesamiento alguno
en bacterias, tal y como se sintetiza
comienza a traducirse.
traducirse De hecho,
hecho en
bacterias la transcripcin y la traduccin
son simultneas.

Primer polipptido

Seal de terminacin

REGULACIN POR PROTENAS REGULADORAS

Opern inducible:
inducible: es el que en condiciones normales no se
expresa, se activa en respuesta a un agente inductor que funciona como Activador,
expresa
Activador
en el momento que el inductor se une al operador, se activa el promotor y
comienza la transcripcin de los genes estructurales.
El modelo clsico de este tipo de opern es el operon lactosa. Otros ejemplos de
operones inducibles son aquellos que codifican para enzimas que participan en el
metabolismo de sustratos como operon maltosa, arabinosa, etc.

Sugar(s) in Growth
Medium

Relative Amount of
-galactosidase

glucose

glucose + lactose

50

lactose

2500

AraA= L-arabinosa isomerasa;


AraB= LL-ribulokinase;
AraB
ribulokinase;
AraD= 4-epimerasa.

Opern reprimible o represible


represible::

es el que en
condiciones normales s expresa las protenas estructurales an en ausencia de
inductor, en respuesta a un agente represor se activan. El inductor funciona como
represor y se une al operador, inhibiendo el funcionamiento del promotor y la
transcripcin de los genes estructurales.
Ejemplos de este tipo de opern son los operones que codifican para la sntesis
de aminocidos,
aminocidos como opern trp,
trp his,
his etc.
etc

Opern constitutivo
constitutivo::

es el opern que siempre se


expresa, y por lo tanto no estn regulados ni por inductores ni por represores.
Aparece en operones que tienen alguna mutacin en alguno de sus elementos
reguladores y el sistema de control falla y hace que estn expresando los
genes estructurales de manera constitutiva.

Terminacin independiente del factor rho.


Existencia
de
unas
secuencias
terminadoras de unos 40 pares de bases
que contienen una regin rica en pares GC
seguida por una serie de 6 o ms adeninas
(A).
Cuando esta regin del DNA se transcribe
da lugar en el RNA a una secuencia rica
en p
pares GC seguida
g
de 6 o ms uracilos
(U), la regin rica en pares GC forma una
estructura en forma de horquilla (por
autoapareamiento).
Este lazo en horquilla seguido de uracilos
acta como seal para la separacin de la
ARN polimerasa del ADN y terminacin de
la transcripcin.

Terminacin dependiente del factor rho.


Los RNA que presentan seales de
terminacin dependientes de rho () no
suelen presentar el lazo en horquilla
seguido de uracilos.
Para que se produzca la terminacin de la
transcripcin, el factor rho () reconocera
una secuencia especfica
p
del ARN
denominada sitio rut y se unira a ella para
posteriormente tirar del RNA y soltarlo de
la ARN polimerasa.
Las secuencias rut suelen estar un poco
antes (aguas arriba) del lugar en el que la
ARN polimerasa termina la transcripcin.

Los controles que actan sobre la expresin de genes (es decir, el


capacidad de un gen para producir una protena biolgicamente activa)
son mucho ms complejo en eucariotas que en procariotas.
Una diferencia importante es la presencia en eucariotas de la
membrana nuclear, lo que impide la realizacin simultnea transcripcin y
traduccin que se produce en procariotas.
procariotas Considerando que,
que en
procariotas, el control transcripcional de inicio es el principal punto de
Reglamento, en eucariotas la regulacin de la expresin gnica est
controlada casi el equivalente de muchos puntos diferentes.