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NMUNOPARASITOLOGIA:
ORIGEN, ESTADO ACTUAL
Y PERSPECTIVAS
Pierre Ambroise- Thoma.9

AN

. TECEDENTES

Durante mucho tiempo la inmunologa permaneci a la zaga en el estudio de las enfermedades parasitarias
debido, sobre todo, a la dificultad para
obtener material de parsitos adecuado
para preparar antgenos. Como se sabe,
la mayor parte de los parsitos no se
pueden cultivar in vi-~-o. En ciertos casos
su multiplicacin en animales de laboratorio es imposible, difcil o escasamente
productiva. Por otra parte, el ciclo vital
de estos organismos incluye muchas fases
diferentes, cada una con caractersticas
antignicas ms o menos definidas (antgenos especficos de fase).
Una dificultad nueva e importante es la seleccin de la fase que mejor
se adapta a cierto objetivo; por ejemplo,
el diagnstico oportuno de una enfermedad parasitaria. Otro obstculo semejante
es la gran complejidad de los antgenos
parasitarios: si utilizamos el trmino mosaico de antgenos para microorganismos
como las bacterias y los virus, habr que
encontrar una expresin superior para
describir la complejidad antignica de los
parsitos.
Presentado en el Simposio de Inmunoparasitologa celebrado en Medelln, Colombia, del 20 al 23 de junio
de 1983.
L Universidad de Grenoble, Facultad de Medicina, Laboratorio de Parasitologa y Patologa de Enfermedades
Exticas. Direccin postal: 3800 La Tronche, Francia.

Por otro lado, algunas de las

muchas fracciones antignicas son comunes a varias especies de parsitos o son
compartidas por el parsito y su husped
u otros microorganismos. Estasfracciones
no especfkas son la causa de muchas
reacciones cruzadas. Por consiguiente, la
purificacin de antgenos parasitarios resulta muy difcil y pocas veces logra obtener reactivos muy puros, aun si se emplean tcnicas complejas. En ocasiones,
algunos grupos de investigadores, con
ayuda de equipos muy complejos, han
credo aislar fracciones verdaderamente
especficas de ciertos parsitos. Pero en
realidad, estudios ulteriores demostraron
(como sucedi en el caso de la hidatidosis) que esas fracciones podan encontrarse en especies de parsitos ms o
menos emparentadas con la estudiada.
En las condiciones experimentales actuales dichas fracciones antignicas son
extraordinarias, mucho mejores que
otras, pero no absolutamente especficas.

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247

PLICACIONES

PRINCIPALES

A pesar de todas estas dificultades, la inmunoparasitologa ha adquirido grandes recursos tcnicos y cient6
cos. Se conocen varias aplicaciones importantes, principalmente en el diagnstico
y la evaluacin de la curacin, despus
del tratamiento, de varias parasitosis. En
fecha ms reciente se torn ms real la esperanza de elaborar una vacuna contra
varias parasitosis, en especialel paludismo.
Tambin es digna de mencin
la creciente rapidez con que se est desarrollando esta nueva disciplina. Cada
descubrimiento, cada adelanto tcnico,
se pone en prctica muy pronto. As ha
sucedido con la identificacin de nuevas
clases de inmunoglobulinas
(IgE), el
cultivo in vitre de Pllzsmodi~m fuLiparum, las pruebas serolgicas nuevas y
ms sensibles (radioinmunovaloracin y
prueba de inmunoadsorcin enzimtica,
mejor conocida por la sigla ELISA), los
mtodos de extraccin, purificacin y
caracterizacin de fracciones protenicas y
muchos adelantos ms.

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NMUNODIAGNOSTICO
DE PARASITOSIS
Hasta ahora el diagnstico inmunolgico de las parasitosis ha dependido sobre todo de tcnicas serolgicas.
Como es evidente, estas solo pueden
usarse en casosde parasitosis intratisular
profunda donde el contacto huspedparsito es lo bastante cercano para provotar la produccin de anticuerpos circulantes. Las diversas tcnicas serolgicas
pueden dividirse en dos categoras, descritas a continuacin.
En los mtodos gue emplean
un antgeno determinado
se requiere

como reactivo antignico el parsito completo o un fragmento del mismo; por

ejemplo, la inmunofluorescencia indirecta y las diferentes pruebas para aplicaciones determinadas, como. la de Sabin y
Feldman para identificar toxoplasmosis o
la de Vogel-Minning para la esquistosomiasis. En la prctica estos estudios se hacen con cantidades muy pequeas de
material parasitario; sin embargo, es
claro que los mtodos que necesitan
parsitos vivos adolecen de ciertas limitaciones. Desde el punto de vista cientfico, la principal ventaja de las pruebas
con ciertos antgenos en particular es que
ponen de manifiesto, sobre todo, antgenos somticos de superficie, que figuran
entre los ms importantes por estar situados en la interfase de la relacin
husped-parsito.
Las reacciones que utiZi!zan
antfgenos soZubZesse hacen con extractos
parasitarios ms o menos purificados.
Entre estastcnicas figuran la hemaglutinacin indirecta, aglutinacin de diversas
partculas sensibilizadas, contrainmunoelectroforesis, fijacin del complementa, ELISA, radioinmunovaloracin,
prueba inmunolgica en capa delgada
(TIA) y otras; poseen ventajas e inconvenientes prcticamente complementarios
de los que presentan los mtodos a base
de antgenos determinados.
Las aplicaciones actuales del inmunodiagnstico tienen que ver prcticamente con todas las parasitosis viscerales,
pero sobre todo con la toxoplasmosis. En
efecto, el diagnstico serolgico de esta
protozoosis es la aplicacin ms importante de la inmunoparasitologa. Cada
ao se hacen en Francia unos 5 millones
de pruebas para detectar toxoplasmosis.
En realidad, este es un caso especial pues
las pruebas serolgicas se hacen ms para
determinar la presencia de inmunidad

espontneamente adquirida en mujeres

jvenes, con miras a aplicar profilaxis de
la toxoplasmosis congnita, que para
diagnosticar la enfermedad, que en la
mayor parte de los casosno esmanifiesta.
Los dos mtodos de referencia
en este campo son la inmunofluorescencia indirecta y la prueba del colorante. Se
estn estudiando otras tcnicas (ej.,
ELISA)para mejorar las caractersticas y la
rapidez de las pruebas serolgicas de deteccin en grandes grupos de poblacin.
En realidad, los resultados dependen de
la calidad de los antgenos disponibles.
Cuando estas pruebas se hacen en embarazadas puede haber una verdadera
urgencia por determinar el comienzo o la
evolucin de la enfermedad.
La bsqueda de anticuerpos
IgM por distintos mtodos serolgicos
(IgM inmunofluorescente) puede proporcionar informacin complementaria.
No obstante, existe una probabilidad de
error principalmente en relacin con la
presencia del factor reumatoide o de
anticuerpos antinucleares. La deteccin
de anticuerpos IgM puede bloquearse si
los anticuerpos antitoxoplsmicos de IgG
son demasiado abundantes. Para evitar
estasprobabilidades de error se han propuesto varios mtodos, tales como absorcin de los sueros en IgG polimerizada o
aglomerada por calor, tratamiento previo
de los sueros con protena A, aislamiento
de la fraccin IgM de las gammaglobulinas y titulacin de los anticuerpos especficos. Ninguno es completamente
satisfactorio 0 prctico.
Hace muy poco tiempo se dio
con una probable solucin, consistente
en hacer la prueba ELISAprimero por el
mtodo de doble emparedado y luego
por el de ELISAinvertida, lo cual es ms
sencillo y parece ser igualmente preciso.

Con estas tcnicas es probable detectar

IgM antitoxoplsmica en ms de 80% de
los recin nacidos con toxoplasmosis congnita; con la IgM inmunofluorescente la
proporcin es de 25 % .
Otra aplicacin sobresaliente
del serodiagnstico de parasitosis se observa en la amebiasis, en la cual varias
tcnicas serolgicas (inmunofluorescencia indirecta, hemaglutinacin indirecta
y electrosinresis) son positivas en ms de
95 % de los casos de localizacin heptica, o sea, un ndice diagnstico excelente.
Es claro que las pruebas serolgicas no se pueden aplicar en caso de
parasitosis exclusivamente intestinales.
Los exmenes coproparasitoscpicos permiten hacer un diagnstico ms sencillo
e innegable. Por lo que respecta a otras
protozoosis, la principal utilidad del serodiagnstico del paludismo sera cuando se
dificulta el diagnstico parasitolgico directo, como en el caso de portadores de
paludismo desconocidos entre donantes
de sangre. En cambio, la leishmaniasis y
en especial la tripanosomiasis (tanto la
forma africana como la sudamericana), se
han beneficiado enormemente de los
mtodos serolgicos.
Las helmintiasis que se han estudiado mediante pruebas serolgicas
son la hidatidosis (con ms de 90% de
positividad en las formas hepticas), fascioliasis, esquistosomiasis, triquinosis y
filariasis como la oncocercosis. En general, las mejores pruebas son las que utilizan tcnicas correctas y antgenos suficientemente purificados que dan una
positividad mayor de 90% , proporcin
superior a la de los estudios parasitolgicos.
En realidad, es importante
matizar estos valores totales que incluyen
resultados de naturaleza muy diferente.
Por esta razn, los resultados serolgicos
positivos bajos solo pueden ser presuntivos debido al riesgo de reacciones

249

cruzadas, especialmente frecuentes en

infestaciones con nematelmintos. El
diagnstico puede hacerse nicamente si
la positividad es alta o muy alta: 50 a
60% de casospositivos.
De cualquier modo, el uso simultneo de varias pruebas inmunolgicashechas con diferentes tipos de antgenos mejora mucho los resultados y facilita
su interpretacin. A menudo sucede que
un suero negativo 0 ligeramente positivo
en una prueba puede ser muy positivo en
otra; esto se ha demostrado en casi todas
las parasitosis profundas y usando pruebas
tan variadas como inmunofluorescencia
indirecta, electrosinresis, ELISAy determinacin de IgE especfica (hidatidosis)
mediante diversas radioinmunovaloraciones, como la prueba del radioalergosorbente (RAST)y la del radioinmunosorbente (RIST).
Entre las nuevas perspectivas
del estudio serolgico de las parasitosis es
preciso mencionar los resultados obtenidos hace poco con nuevos tipos de
antgenos. Ya no se trata de extractos
somticos sino de antgenos metablicos
excretados y secretados por parsitos que
se han multiplicado en cultivo o se han
conservado con vida in vitre. Estos
antgenos son muy prometedores y, en
ciertos casos, parecen ser idnticos a
antgenos circulantes que se han identificado en animales con infestacin experim
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mental (toxoplasmosis). Se han obtenido
2
buenos resultados preliminares en palu3
dismo, toxoplasmosis, amebiasis, fascio89
liasis, toxocariasis y oncocercosis. Es evitia dente que estos antgenos metablicos se
producen en cantidades minsculas en
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los medios de cultivo o de supervivencia.
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Por consiguiente, hay que recurrir a tcB
nicas muy sensibles que utilicen muy
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poco reactivo. En todas las aplicaciones
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actuales, y en particular en las infestaG
ciones por nematodos, las antgenos me250

tablicos parecen tener una especificidad

mucho mayor que los somticos.
Recientemente se ha abierto
un nuevo campo de diagnstico indirecto
de parasitosis en el cual ya no se detectan
anticuerpos sino antgenos circulantes 0
complejos inmunitarios circulantes no saturados con anticuerpos. Durante varios
aos esto se ha venido haciendo con tcnicas de inmunoprecipitacin,
que no
son muy sensibles, por lo cual los resultados y aplicaciones prcticas eran limitados. Con la creacin de mtodos mucho
ms sensibles (ej., ELISA), los resultados
se han multiplicado y ya se extienden a
toxoplasmosis, fascioliasis, esquistosomiasis, criptococosis y candidiasis profunda. En ciertos casos, por lo menos, la
deteccin de antgenos circulantes permitir:
0
diagnosticar muy a tiempo las
parasitosis, aun antes de que aparezcan
los primeros anticuerpos circulantes, y
0
hacer un diagnstico indirecto, incluso en pacientes totalmente
desprovistos de anticuerpos circulantes a
causa de inmunodeficiencia primaria o
secundaria a tratamiento inmunosupresor.

NCUESTAS
EPJDEMIOLOGICAS
Las encuestas epidemiolgicas
se estn convirtiendo cada vez ms en
uno de los mejores usos de las tcnicas de
inmunodiagnstico. En general, las pruebas serolgicas requieren muestras
mucho ms sencillas (ej., micromuestras
por puncin digital) que los exmenes
parasitolgicos, y en los resultados hay
poca probabilidad de resultados falsamente negativos; sin embargo, puede
haber resultados falsamente positivos
(reacciones cruzadas). Por tanto, la interpretacin suele ser difcil y debe ba-

sarseen criterios de evaluacin muy precisos y en una metodologa rigurosa, por

ejemplo, mediante muestreo de los pacientes y realizacin de estudios longitudinales.
En general, las encuestas epidemiolgicas basadas en pruebas serolgicas son complementarias de otras
tcnicas de evaluacin. El estudio inmunolgico es concebible nicamente cuando
las pruebas parasitolgicas directas no
pueden hacerseo resultan problemticas,
como sucede cuando el nivel de transmisin es muy bajo. A pesar de estaslimitaciones tan estrictas, las pruebas serolgicas se usan cada vez ms para hacer
estudios epidemiolgicos cuando es indispensable lograr una gran precisin;
por ejemplo, para evaluar la eficiencia de
un programa de erradicacin y para decidir si se suspenden o reducen las medidas
de prevencin. En la actualidad, los resultados ms espectaculares se han obtenido con paludismo, tripanosomiasis
africana y sudamericana, amebiasis, esquistosomiasis y filariasis como la wuchereriasis y la oncocercosis.
Durante varios aos las reacciones cutneas fueron el mtodo ms
usado para la deteccin serolgica o las
encuestas inmunolgicas en grandes grupos humanos. Pero poco a poco se han
dejado de usar debido a ciertos inconvenientes prcticos, entre ellos la necesidad
de usar cantidades relativamente grandes
de antgenos parasitarios y la espera de 48
72 horas para interpretar los resultados
en el caso de ciertas parasitosis. A ello se
agregan varias limitaciones de diagnstico, como la falta de oportunidad y la
persistencia de reacciones cutneas positivas mucho tiempo despus de la curacin.

Actualmente se estn llevando a cabo investigaciones en varios

pases con el objeto de definir de nuevo
la factibilidad de la aplicacin de las reacciones cutneas, que son sin duda un
medio extraordinario y sencillo de deteccin y de estudio de la inmunidad celular. Se han realizado pruebas con los
nuevos tipos de antgenos metablicos
mencionados antes y usando una tcnica
de micropuntura que requiere muy poco
reactivo y limita el riesgo de sensibilizacin o de fenmenos inmunopatolgicos, como ocurre en la toxoplasmosis.

VALUACION
DE LA CURACION
DE LAS PARASITOSIS
Entre las muchas aplicaciones
de las pruebas serolgicas en las parasitosis, con frecuencia se olvida el control
posteraputico, a pesar de que es un
campo en el que la inmunoparasitologa
resulta particularmente valiosa. En la
mayor parte de las enfermedades parasitarias resulta difcil confirmar la curacin
despus del tratamiento, incluso si los
exmenes parasitolgicos son negativos.
Estos exmenes tienen una probabilidad
elevada de resultados falsamente negativos. Empleando la expresin clsica,
el resultado negativo solo significa que
los parsitos no fueros aislados, no que
hayan desaparecido. Esta causa de error
se puede reducir repitiendo los exmenes, pero esta repeticin es en s
misma una limitacin.
Las pruebas serolgicas no estn sujetas a esta probabilidad de resultados falsamente negativos, pues la deteccin de anticuerpos es mucho menos
problemtica y aleatoria que la identificacin de los parsitos. En general, en las
protozoosis el tratamiento produce de inmediato una disminucin de los ttulos

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251

de anticuerpos. Por el contrario, cuando

las helmintiasis son tratadas sobreviene
una elevacin transitoria de la respuesta
serolgica, la cual alcanza el punto mximo 4 a 6 semanas despus del tratamiento y luego disminuye en forma
gradual. En ambos casos, si hubo curacin deben transcurrir entre 10 y 12
meses antes de que las pruebas serolgicas (ej., inmunofluorescencia indirecta)
sean negativas por completo. Aun
cuando son uno de los medios ms precisos de evaluar la curacin, estas pruebas
tienen el inconveniente considerable de
que se tornan negativas en fase tarda.
Una primera mejora, al menos en ciertas
parasitosis como la hidatidosis, sera la
cuantificacin de IgE especfica ms bien
que de IgG. Esta representara una de las
mejores aplicaciones de la deteccin de
antgenos circulantes, ya que al parecer la
reaccin se vuelve negativa con gran rapidez: 2 a 3 meses despus de la curacin.

PERSPECTIVAS
Inmunopatologa y vacunas
antiparasitarias

252

En la actualidad, la inmunoparasitologa ya no est limitada al diagnstico serolgico, pues se han abierto

dos campos nuevos fascinantes: la inmunopatologa de las enfermedades parasitarias y la posibilidad de elaborar vacunas
antiparasitarias. En el primero destacan,
desde luego, los estudios sobre el menoscabo renal en el paludismo causado por
R malariae, ciertas complicaciones hepticas causadas por esquistosomas intestinales, la anemia del paludismo causado
por R fa&&zrum y los trastornos articulares en la filariasis.
En el otro campo se estn
acelerando las investigaciones para
1. encentrar una vacuna contra drversas

parasitosis: toxoplasmosis , amebiasis,

esquistosomiasis. En realidad, la bsqueda de una vacuna contra el paludismo por I) fuZc$urum es la que parece
estar ms adelantada. Aun no es posible
fijar una fecha para la conclusin de estos
estudios, pero es razonable esperar que
en el futuro cercano contemos con una
vacuna contra la nica forma mortal de
paludismo.
Esta posibilidad
abre
enormes perspectivas desde el punto de
vista mdico, socioeconmico y, ms sencillamente, humano.

RxSUMEN
Se hace un repaso de los principales adelantos logrados por la inmunoparasitologa en su corta existencia.
Luego de sealar los obstculos que deben superarse para obtener antgenos
adecuados, se explican brevemente las
principales aplicaciones prcticas de la
nueva disciplina, a saber: inmunodiagnstico de parasitosis, encuestas epidemiolgicas, evaluacin de la curacin
de las parasitosis despus del tratamiento, inmunopatologa de enfermedades parasitarias y perspectivas de la elaboracin de vacunas antiparasitarias,
principalmente contra el paludismo causado por l? fuhjtwzm.La descripcin de
estos adelantos est basada en la experiencia del autor y en una revisin bibliogrfica. Se destaca la rapidez del avance
de la inmunoparasitologa en aos recientes y la orientacin prctica de muchas investigaciones en este campo. 0

BIBLIOGRAFW

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de limmunologie parasitaire. Cah Me B 7:413416, 1981.

3UMMARY
IMMUNOPARASITOLOGY:
ORIGINS, PRESENTSTATUS
AND PROSPECTS
This study reviews the salient advances scored by immunoparasitology during
its brief existence. An account of the obstacles to be overcome before satisfactory antigens can be obtained is followed by a brief
explanation of the chief practical applications
of the new discipline, to wit: the immunodiagnosis of parasitoses, epidemiological sur-

Naot, Y. y Remington, J. S. An entyme-linked

immuno-sorbent assayfor detection of 1 M antibodies to Toxoplasma gondii: use for f ragnosis of acute acquired toxoplasmosis. J Infect DU
142~757-766, 1980.
Remington, J. S. y Miller, M. J. 195 and 75 antitoxoplasma antibodies in diagnosis of acute
congenital and acquired toxoplasmosis. Proc
SOCExp Biol Med 121:357-363,

1966.

veys, post-treatment evaluatron oi- recovery

from paras& diseases,immunopathology of
parasitic diseases,and the outlook for the development of vaccines against them, particularly, against falciparum malaria. The description of these advances is based on the
authors own experience and on a review of
the literature. The paper highlights the rapid
pace of advances in immunoparasitology during recent years and the practical direction of
much research in this field.

253

254

RESUMO

RE3uM

IMUNOPARASITOLOGIA:
ORIGEM, SITUACAO
ATUAL E PERSPECTIVAS

IMMUNOP@ASITOLOGIE:
ORIGINE, ETAT ACTUEL
ET PERSPECTIVES

Passam-se em revista os principais avanfos da imunoparasitologia em sua

curta existencia. Aps assinalar os obstculos
que devem ser superados para obter antgenos adequados, explicam-se brevemente as
principais aplicayes prticas da nova disciplina: imunodiagnstico de parasitoses, pesquisas epidemiolgicas, avaliayo da cura das
parasitoses aps 0 tratan-rento, imunopatologia de enfermidades parasitrias e perspectivas da elabora@0 de vacinas antiparasitrias, principalmente contra o paludismo
causado por Phmodium
fahiparum.
A
descrico desses avances baseia-se na experiencia do autor e numa reviso bibliogrfica.
Destacarn-se a rapidez do avanso da imunoparasitologia nos ltimos anos e a orienta@0
prtica de muitas pesquisas nesse campo.

On passeen revue les succsremports par limmunoparasitologie durant sa

courte existence. Aprs une indication des
obstacles surmonter pour obtenir des antigenes appropris, on explique brievement les
principales applications pratiques de la nouvelle discipline, savoir: immunodiagnostic
des parasitoses, enquetes pidmiologiques,
valuation de la gurison des parasitoses
aprs le traitement, immunopathologie des
maladies parasitaires et perspectives de llaboration de vaccins antiparasitaires, principalement centre le paludisme caus par Plasmoditim falciparum.
La description de ces
progres est base sur lexprience de lauteur
et sut une tude bibliographique.
On
souligne la rapidit du dveloppement de
limmunoparasitologie durant les dernieres
annes, ainsi que lorientation pratique de
nombreuses investigations dans ce domaine.