AMPLIACIN

EN QUMICA
FSICA

BIOSENSORES AMPEROMTRICOS BASADOS

EN GRAFENO

David Zamora Rubio

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Biosensores amperomtricos basados en grafeno

1-Introduccion
1.2-Aspectos electroqumicos de grafeno
1.1-Sintesis de grafeno
2-Electrodos enzimticos basados en el grafeno
2.1-Biosensor de glucosa oxidasa
2.2-Biosensor de citocromo C
2.3-Biosensor de NADH
2.4- Biosensor de hemoglobina
2.5- Biosensor de colesterol
3-Electrodos no enzimticos basados en grafeno.
3.1-Peroxido de hidrogeno
3.2-Biosensor de cido ascrbico, cido rico y dopamina
4-Dispositivos nanoelectrnicos basados en grafeno
4.1- Sensores de ADN
4.2-Deteccin de iones de metales pesados
4.3-Sensores de gas

Bibliografa: Tapas Kuila; Saswata Bose; Phartha Khanra; Ananta Kumar Mishra;
Nam Hoon Kim; Joong Hee Lee. Biosensors and Bioelectronics, 26, (2011), 26, 46374648

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Biosensores amperomtricos basados en grafeno

1-Introduccion
El desarrollo de electrodos enzimticos por Leland C. Clark en 1962 abri una nueva rea de
investigacin en ciencia mdica y tecnologa, dando como resultado una serie de biosensores
ms sofisticados y precisos. Al poseer una gran variedad de usos, cuyos ltimos hallazgos
vienen dados de ``sistemas reactivos cuyos reactivos estn inmovilizados no teniendo que ser
aadidos.
Un biosensor comprende una interfaz selectiva prxima o integrada a un transductor que
trasmite informacin acerca de las interacciones entre la superficie del electrodo y el analito:

Los biosensores se pueden clasificar en funcin del mecanismo de transduccin:

Resonancia.
Deteccin ptica.
Deteccin trmica.
Transistores de efecto de campo sensibles a iones.
Electroqumicos.

Los biosensores electroqumicos poseen ventajas sobre los dems porque sus electrodos
pueden detectar los materiales presentes en el anfitrin sin daar el sistema, sin embargo su
eficiencia viene limitada por su lenta transferencia electrnica, debido a las caractersticas
estructurales de las protenas y su orientacin desfavorable respecto a la superficie de los
electrodos, ya que los grupos prostticos que son generalmente los electroactivos estn
situados en posiciones interiores de la protena. Para poder reducir al mnimo la distancia de
transferencia electrnica, se utilizan nanomateriales que acten como ``cables de electrones
introducidos en los centros redox de la enzima o protena conectados a los electrodos de
superficie.
Dentro de estos nanomateriales se encuentran:

Nanoparticulas de metales, aleacin y magnticos.

Nanotubos de carbono.
Nanofibras de carbono.

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El uso de nanoparticulas como biosensores es problemtico a causa de su amplificacin de la
seal de forma inconsistente. La modificacin con nanotubos de carbono poseen impurezas
metlicas que son electroqumicamente activa y pueden modificar la lectura o provocar riegos
toxicolgicos, ya que pueden sufrir reacciones redox.
El descubrimiento del grafeno en 2004 aadi una nueva dimensin a la investigacin de
biosensores electroqumicos ya que puede evitar los problemas asociados a los usos de
aleaciones de nanotubos y nanoparticulas. Este material posee propiedades nicas, tales
como:

Rpida transferencia electrnica.

Alta conductividad trmica.
Flexibilidad mecnica.
Biocompatibilidad

Permite darle aplicabilidad potencial a los biosensores electroqumicos, para ello es necesaria
una funcionalizacin apropiada del grafeno y la inmovilizacin de los biomateriales ya que
pueden provocar defectos en la superficie de este.

1.1-Sintesis de grafeno
Existen varios mtodos investigados para la sntesis de grafeno, que incluye exfoliacin y
escisin de los recursos naturales tales como el grafito, la deposicin qumica en fase vapor,
descarga de arco elctrico, crecimiento epitaxial sobre superficies aisladas elctricamente tales
como carburo de silicio, apertura de nanotubos de carbono.
Un mtodo descubierto ms reciente es el conocido como Scotch-Tape, que consiste en la
exfoliacin mecnica de grafito pirrolitico de alto ordenamiento (HOPG), buscando reducir
costes con mtodos ms eficaces en produccin de grandes superficies de capas individuales
de grafeno.
La deposicin qumica en fase vapor puede producir grandes extensiones de una capa
individual de grafeno utilizando sustratos a escala de cobre, nquel y
acido 1, 3, 6, 8-pirenotetrasulfonico.
Tambin es posible prepararlo en superficies de carburo de silicio calentadas a 1250-1450C
durante un periodo corto de tiempo.
El mtodo ms sencillo y econmico es la produccin por reduccin trmica de xidos de
grafeno, adems suele poseer defectos estructurales que proporcionan ventajas para
aplicaciones electroqumicas.

1.2-Aspectos electroqumicos de grafeno

El estudio de la respuesta electroqumica hacia diferentes sistemas redox requiere el
conocimiento de los aspectos electroqumicos del grafeno. La presencia de oxigeno en la
superficie puede mejorar la tasa de transferencia electrnica, debido a la reduccin de la
tensin de sobrepotencial.

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2-Electrodos enzimticos basados en el grafeno

La transferencia electrnica directa sobre enzima acta sin mediadores u otros reactivos. Se
buscan dispositivos que posibilite la inmovilizacin de enzimas sobre sustratos. Sin embargo,
los centros redox de las biomoleculas estn muy incrustados en la red estructural
tridimensional, gracias al grafeno se puede mejorar la transferencia electrnica directa. El uso
de nanoparticulas de metales con grafeno forma biosensores altamente rentables y estables.
En la siguiente tabla se muestran diferentes tipos de de biosensor enzimtico y su lmite de
deteccin.

2.1-Biosensor de glucosa oxidasa

La deficiencia de insulina provocando hiperglucemia provoca un trastorno metablico
denominado diabetes mellitus cuyos sntomas se reflejan en la sangre segn la concentracin
de glucosa. Los biosensores de glucosa basados en grafeno presentan una buena sensibilidad,
selectividad y reproducibilidad. La electroqumica directa de xidos de grafeno (GOx) basados
en centro redox activos son confirmados en el rango potencial de 0.8-0 V, en ausencia de
oxigeno segn los mecanismos de reaccin siguiente:

En presencia de oxigeno, el mecanismo de reaccin sigue diferentes vas:

La alta eficiencia de los biosensores se atribuye a la gran rea de superficie en relacin al

volumen, la buena biocompatibilidad y alta conductividad del grafeno con el GOx.

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2.2-Biosensor de citocromo C
Debido a las funciones biolgicas del citrocromo C se dedica una gran parte de investigacin a
la transferencia electrnica directa de este y los electrodos. Sin embargo los cristales de
carbn limpios no presentan una respuesta voltamperometrica debido a la lenta cintica de
transferencia electrnica entre el electrodo y la interfaz electroltica. El desarrollo de un
nanorrelleno de carbono solventa estos problemas.

2.3-Biosensor de NADH
La coenzima NADH participa en ms de 300 reacciones enzimticas actuando como una
deshidrogenasa. La oxidacin electrocatalitica de NADH se ha investigado como parte de
dispositivos basados en deshidrogenasas, pero la oxidacin electroqumica de electrodos de
cristales de carbono se produce a una alta sobretensin a causa de la lenta cintica de
transferencia electrnica y el ensuciamiento del electrodo, por ello se est investigando el
desarrollo de biodispositivos con una oxidacin efectiva del NADH a bajos potenciales.

2.4- Biosensor de hemoglobina

La hemoglobina es el componente ms importante de la sangre ya que es el responsable del
transporte de oxigeno en todo el sistema circulatorio, siendo su concentracin algo vital y cuya
determinacin exacta es medicamente muy esencial. Se utiliza un electrodo modificado de
quitosano con grafeno para el electroanlisis de la hemoglobina, comparndolo con un
electrodo de quitosano-grafeno/cristales de carbono, mostrando este ultimo un pico redox
mejor resuelto en el voltamograma, mostrando un aumento de respuesta de la corriente de la
hemoglobina con velocidad de barrido de 30 a 150 mV-1 .

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2.5- Biosensor de colesterol

El colesterol y su ester son componentes esenciales de todas las clulas animales, ya que son
precursores por ejemplo del cido biliar y esteroides. Sin embargo, el aumento de los niveles
de colesterol puede causar enfermedades coronarias y arterioesclerosis, por lo es necesario
una deteccin y control.
Se ha desarrollado un biosensor basado en un material hibrido derivado de nanoparticulas de
platino y grafeno con una alta sensibilidad amperomtrica que provoca la inmovilizacin de la
enzima colesterol oxidasa y colesterol esterasa.

3-Electrodos no enzimticos basados en grafeno.

Los electrodos enzimticos se ha demostrado que poseen bajos lmites de deteccin y altas
precisiones. Sin embargo, hay varias desventajas como su inestabilidad, el alto costo de las
enzimas y la complejidad de la inmovilizacin, vindose tambin afectadas las enzimas por la
temperatura, pH o toxicidad de productos qumicos. Para evitar este tipo de problemas se est
investigando en detectores no enzimticos para la deteccin de perxido de hidrogeno, cido
ascrbico y dopamina.

3.1-Peroxido de hidrogeno
Se parte de la base de un nanocompuesto de oxido de manganeso con oxido de grafeno que
muestra una buena respuesta electroqumica en medios alcalinos. Pero el electrodo
funcionalizado de acido pirrolico/grafeno mostr un rango lineal ancho, bajo limite de
deteccin, buena reproducibilidad y estabilidad a largo plazo.

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3.2-Biosensor de cido ascrbico, cido rico y dopamina

La determinacin analtica de cido ascrbico y dopamina en neuroqumica y bioqumica es
problemtico debido a que oxidacin de ambos compuestos se produce prcticamente al
mismo rango potencial, por lo que su deteccin simultnea es muy difcil. Recientemente los
electrodos basados en grafeno si han permitido la deteccin simultanean de cido ascrbico,
dopamina y cido rico.
Se utilizan mltiples capas de nanoescamas de grafeno para la determinacin selectiva en
solucin de buffer fosfato, dando un lmite de deteccin de 0,17 M con una discriminacin
simultanea bien resuelta.

4-Dispositivos nanoelectrnicos basados en grafeno

El mayor inters sobre el grafeno radica en sus aplicaciones potenciales en dispositivos
nanoelectronicos. Por lo que se ha utilizado en la fabricacin de nanodispositivos para la
deteccin de biomolculas, molculas gaseosas e iones de metales pesados, en la siguiente
tabla de muestran los diferentes tipos de sensores hechos de grafeno:

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Biosensores amperomtricos basados en grafeno

4.1- Sensores de ADN

Para el diagnostico y tratamiento clnico es necesario un anlisis sensible, selectivo, rpido y
rentable de biomolecular. Las nanoestructuras de carbono esfricas, nanotubos y nanofibras
se han utilizado para este propsito. Recientemente se han realizado trabajos combinando
grafeno y ADN de hebra simple para la deteccin de biomoleculas.
Se han usado hojas de oxido de grafeno como biosensor de ADN mediante la aplicacin de
infrarrojos a una matriz para reconocer la hibridacin ADN-ADN especifica.
Tambin se ha desarrollado un novedoso inmunosensor basado en oxido de grafeno que
podra detectar con una alta sensibilidad y selectividad rpidamente los virus.

4.2-Deteccin de iones de metales pesados

Los iones metlicos, tales como plomo, cadmio, plata, mercurio y arsnico provocan efectos
ambientales y sanitarios graves por lo que requieren un seguimiento cuidadoso. El desarrollo
de un mtodo de deteccin sensible y selectivo ser beneficioso para el medio ambiente y la
qumica de los alimentos. El desarrollo de sensores se tradujo en una pelcula compuesta de
Nafion y grafeno para la deteccin de plomo y cadmio.

4.3-Sensores de gas
El grafeno tiene un uso potencial en sensores de gas debido a su estructura bidimensional con
una extremadamente alta area de superficie. La deteccin de gas por grafeno implica
generalmente la absorcin y desorcin de molculas gaseosas que actan como donantes de
electrones o aceptores en la superficie del grafeno que produce un cambio en la conductancia
de este. La alta sensibilidad del grafeno hacia diferentes molculas gaseosas ha llevado a su
uso en hidrogeno, monxido de carbono, amoniaco, cloro, dixido de nitrgeno y sensores de
gas de oxigeno.
Se han preparado sensores usando grafeno que son capaces de detectar NO2, H2O, vapor de
yodo, NH3, Co y vapor de etanol de forma individual observando que el grafeno puede formar
semiconductores de banda n o p a travs una adsorcin finita de molculas.
Para realizar un sensor de vapor de agua se uso oxido de grafeno reducido, cuyas muestras
tratadas trmicamente muestran quimioresistividad a la exposicin de vapor de agua.
Tambin se han desarrollado sensores con boro y grafeno dopado con nitrgeno, ya que el
dopado presentaba una unin ms fuerte con amoniaco.