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IEFPS TXURDINAGA

U.D.1: INTRODUCCIN A LOS MTODOS


INSTRUMENTALES DE ANLISIS
1.- METODOLOGA ANALTICA
1.1. INTRODUCCIN
Qumica analtica: estudia el conjunto de principios, leyes y trminos cuya finalidad
es la determinacin de la composicin qumica de una muestra natural o artificial. Este conjunto de leyes y trminos utilizados para dicho fin, constituyen el anlisis qumico.
La qumica analtica se divide en dos ramas principales:
-

Cualitativa

Qu hay?

Cuantitativa

En qu cantidad?

El anlisis cualitativo determina que tipo de elementos o grupos qumicos se encuentran en la muestra analtica.
El anlisis cuantitativo se refiere a la determinacin de las cantidades de los mismos en la muestra.
Sern pues, mtodos de la qumica analtica, aquellos procedimientos que permitan
conseguir los fines de determinacin e identificacin.

1.2. PROCESO ANALITICO


El proceso analtico sigue una secuencia lgica de etapas:
1.2.1. Planteamiento del problema
Un primer paso que debe preceder al mtodo analtico, es una definicin clara del
problema analtico, de manera que, el mtodo de trabajo seleccionado dependa de la respuesta a las siguientes cuestiones:
a) Intervalo de concentracin de trabajo:
Puede limitar el nmero de mtodos posibles.
A menor concentracin ms sensible a de ser el mtodo empleado.
b) Qu grado de exactitud se requiere ?
Es preciso tener en cuenta que el tiempo necesario para llevar a cabo un
trabajo, aumenta de forma exponencial con la exigencia de mayor exactitud, as, para mejorar la fiabilidad de un resultado desde, por ejemplo
(desde un 2 % hasta un 02 %), el tiempo consumido por el analista puede aumentar en un factor de 100 o ms, lo que implica que, el nivel de
exactitud exigido, con frecuencia, determina el proceso analtico a seguir.
c) Qu otros componentes hay en la muestra?

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Para elegir un mtodo de determinacin de una ms especies, es necesario saber, que otros compuestos lo acompaan, a fin de identificar
ciertas interferencias, es posible que tengamos una muestra a parte de
preguntar A y B, es necesario C.
d) Qu propiedades fsico-qumicas tiene la muestra ?
El qumico tambin debe considerar el estado fsico de la muestra para
determinar se debe homogeneizarla, o si puede alterarse su composicin
en las condiciones de laboratorio, as como, el tratamiento ms adecuado para su disolucin sin prdida de analito.
e) Cuntas muestras se analizan ?
Es un importante criterio en la seleccin de un mtodo, ya que:
-

Para un gran nmero de muestras se puede emplear un tiempo considerable. El coste de estas operaciones se repartir entre todas las muestras.

Para un nmero reducido de muestras, ser menos costoso un procedimiento ms largo y tedioso, que suponga un mnimo de estas operaciones.

Ejemplo:
Dos clientes, quieren determinar el porcentaje de Hg en la muestra de cada uno:
A

Quiere conocer con gran exactitud el contenido en Hg en un cargamento de

mineral donde Hg es compuesto mayoritario, por lo que, podr proveer al laboratorio muestra en cualquier proporcin.
B

Contenido en Hg en una moneda antigua con Hg a un nivel de ppm, exigiendo

que no sea daada la moneda.


An cuando el problema es el mismo, el mtodo analtico tendr grandes diferencias:
A

Podrn utilizarse mtodos gravimtricos muy exactos, pero que destruyen la

muestra.
B

Ser necesario someter la muestra a un bombardeo de e- , seguido de espec-

troscopia con rayos , de manera que no se destruya la muestra, aunque el mtodo es muy
costoso.
1.2.2. Obtencin de la muestra para el anlisis
Muestra: porcin pequea seleccionada para su examen, de una cantidad de material que es mucho mayor.
A la hora de recoger la muestra es de especial atencin que esta sea representativa
de una mucho mayor. Su composicin debe reflejar lo mejor posible una porcin representativa de todo el material.

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Dentro de la muestra se hayan distribuidos constituyentes, es decir, las sustancias que trataremos de determinar. Segn el porcentaje de estos en la muestra, hablamos de:
-

Constituyentes principales: > al 1% del total.

Constituyentes secundarios : (01 1) % del total.

A nivel traza: < al 01% del total.

Ultratrazas: a nivel de ppm.

La cantidad disponible de un constituyente para un procedimiento analtico elegido,


depende tanto del nivel del constituyente como del tamao de la muestra. As, segn el
tamao de la muestra sea macroscpica, semimacroscpica, semimacroscpica, microscpica, submicroscpica o ultramacroscopica, las cantidades del constituyente se hacen
cada vez menores se utilizan tcnicas analticas cada vez ms sofisticadas.

Mtodo

Peso de muestra (mg)

Volumen de muestra (ml)

Macroanlisis

> 100

> 10

Semimicroanlisis

10 100

1 10

Microanlisis

1 10

01 1

Ultramicroanlisis

<1

< 01

Muestreo: proceso por el cual se obtiene una fraccin representativa siendo a menudo
esta etapa la ms difcil de todo el procedimiento analtico, y la que limita la exactitud de
todo el procedimiento.
Conceptos:
- Lote: material completo del que se toman las muestras. Ej.: todo el agua de un lago.
A menudo, los lotes estn formados por unidades mustrales. Ej.: Cajas individuales
de un camin.
- Muestra Bruta: se obtiene del lote para anlisis o almacenamiento. Suele seleccionarse de modo que sea representativa del lote y su eleccin es crtica para realizar
un anlisis vlido. De la muestra bruta se toma una muestra de laboratorio.
- Muestra de laboratorio: ms reducida. Debe tener exactamente la misma composicin de la muestra bruta. Para realizar los anlisis individuales se emplea alicuotas o
porciones de prueba de la muestra de laboratorio.
La identificacin de la poblacin de la que debe obtenerse la muestra es inmediata,
mientras que la obtencin de la muestra bruta, muestra de laboratorio, no son sencillas, y
pueden requerir ms esfuerzo e ingenio que cualquier otra etapa del esquema general de
todo el anlisis.

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Cuando las muestras son homogneas (igual composicin en todas sus partes), la
variacin en los resultados debe reflejar solamente, la habilidad del analista y la variabilidad inherente del mtodo.
En la realidad las muestras suelen ser heterogneas (distinta composicin en sus
partes), con lo que el problema se complica en gran medida. Cuando se analiza un material heterogneo, el resultado final depende de la forma en que se elijan las muestras del
material, y de cmo se trate la muestra una vez colectada.
En cuanto a las estrategias de muestreo:
-

Muestreo de caso homogneo: situacin ms fcil. Una vez obtenido, este se divide en unidades, y aleatoriamente se analizan distintas unidades. Se obtienen resultados ms precisos si se mezclan la n unidades, y
se realizan n anlisis de los grupos mezclados, que analizando las n unidades separadamente.

Muestreo de caso no homogneo: tomamos varias muestras de cada


uno de los estratos, y de cada una de ellas tomamos otro par, se mezclan y as se obtiene la muestra representativa para el anlisis.

De modo general, se describen algunos de los mtodos de slidos, lquidos y gases:


1. Muestreo de Slidos:
Slido en fragmentos o partculas: si las muestras consisten en lotes discretos se toman cogiendo una seleccin aleatoria de dichos lotes. Cuando existen variaciones dentro de los lotes porque ha tenido lugar una estratificacin
o segregacin durante el transporte. Ej.: Un vagn con carbn en el que las
partculas pequeas se depositan en el fondo. Se toma una muestra representativa del lote, o bien se convierte este lote en una corriente de material,
tomndose las muestras aleatoriamente.
Slido en forma compacta: las muestras de metales y aleaciones se obtienen por limaduras, trituracin o taladro. En general no es seguro suponer
que todos los trozos de metal obtenidos de la superficie son representativos
del total, por lo que se debe muestrear el interior del slido.
En el caso de barras o lingotes, se puede serrar la pieza, y tomar el serrn
acumulado, o bien, se puede taladrar al azar, tomando como muestras las
virutas formadas. El taladro debe atravesar el bloque o llegar a la mitad desde los lados opuestos.
2. Muestreo de Lquidos:
Homogneos: se toman aleatoriamente distintas muestras como en el
caso de los slidos.
Con materiales en suspensin: se pueden tomar muestras a distintas
profundidades manteniendo en constante agitacin el conjunto.

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Frecuentemente se utiliza una sonda llamada ladrn toma muestras, la


cual se sumerge a la profundidad que se desee y se abre para recoger la
muestra. De esta forma se pueden obtener muestras a distintas profundidades, y por mezcla de todas ellas obtener una muestra representativa, ya que
a veces es difcil la agitacin.
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Muestreo de gases:
Gas libre en gran cantidad: llenar un tubo con el gas con desplazamiento del
aire que en principio contienen estos recipientes, que despus se cierran por
medio de llaves o sellando sus extremos.
Gas de forma inaccesible al operador: ej.: muestra de gases existente en un
horno o en una tubera: s prctica un orificio en las paredes del horno, y se
introduce en el un tubo provisto de una camisa de refrigeracin que conduce
el gas al aparato de anlisis (anlisis automtico), o que el gas vaya a una
ampolla que va a contener la muestra.

4. Errores de muestreo
Los grandes errores son debidos con ms frecuencia a un muestreo incorrecto que
a una aplicacin del mtodo no adecuado.
Entre los qumicos analticos, existe un dicho popular: A menos que se conozca
con certeza la historia completa de una muestra cualquiera, el analista har bien en no
perder su tiempo analizndola.
La libreta del analista debe contener informacin de cmo se colecta y almacena la
muestra, antes de describir como se realiza el anlisis.
Las causas ms frecuentes de error son:
-

Que el material se encuentre estratificado y la toma que se realiza no


tenga en cuenta la disposicin de los estratos, es decir, que no estn
proporcionalmente representados.

Que la propiedad analtica que se mida, vare de forma no uniforme desde la superficie hasta el centro.

Que en emulsiones o suspensiones durante el transporte se produzca


una separacin de partculas, no siendo posible agitar todo el volumen
para obtener una muestra homognea.

Para errores aleatorios, la desviacin estndar global (S0), se relaciona con la desviacin estndar del proceso analtico (Sa) y la desviacin estndar global del muestreo
(Sm):
So2 = Sa2 + Sm2
En la mayora de los casos la varianza del proceso analtico (Sa2) se conoce a partir
de medidas repetidas sobre una nica muestra de laboratorio, por lo que, Sm se puede

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calcular a partir de medidas de So, de una serie de muestras procedentes de distintas


muestras brutas.
Younden, demostr que cuando la incertidumbre de la medida Sa es menor que un
tercio de la incertidumbre del muestreo (Sm), no tiene sentido mejorar la incertidumbre de la
medida.
Ejemplo:
Sm = 10%
-

S Sa = 5% :
So = ( 012 + 0052 )05 = 011 = 11%

S Sa = 1%

So = ( 012 + 0012 )05 = 010 = 10%


1.2.3. Preparacin de materiales
La palabra reactivo se refiere a la sustancia o mezcla qumica usada para un propsito determinado en un procedimiento de anlisis.
En la mayora de laboratorios lo normal es emplear reactivos de grado analtico,
reactivos de gran pureza en los que el nivel de impureza es muy bajo, variando entre ( 10-2
- 10-4 ) % , ya que la presencia de impurezas puede tener efectos serios en el anlisis. Sin
embargo, es ms importante preocuparse del ingrediente activo utilizado, es decir, la riqueza de un patrn determinado en la sustancia activa.
Otros factores que deben ser considerados en la preparacin de un reactivo analtico disuelto, son su exactitud y su estabilidad.
Para muchas aplicaciones no es necesario preparar una solucin con gran exactitud. Ej.: Reactivo en exceso, mientras que por ejemplo, en valoraciones la incertidumbre no
debe ser mayor al 01 %.
En cuanto a la estabilidad, algunas soluciones de reactivos se descomponen en
cuestin de horas, por lo que, deben ser preparadas justo antes de su empleo mientras
que otras son estables durante aos.
Antes de llevar a cabo un anlisis se debe tener confianza en el procedimiento. Para ello el procedimiento completo se ha de llevar a cabo mediante estndares de referencia, similares en composicin a la muestra desconocida, y adems contienen una cantidad
exactamente conocida del constituyente a ser determinado.
1.2.4. Tratamiento de la muestra
Antes de llevar a cabo el anlisis es necesario homogeneizar la muestra bruta si se
trata de un lquido, un polvo fino o una suspensin puede ser suficientemente homognea
para obtener de ella una muestra de laboratorio.
Si es un slido debe pulverizar a fin de que la muestra de laboratorio tenga la misma composicin que la muestra bruta. Para ello se utiliza un mortero o molino de bolas.
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Antes del anlisis, los slidos suelen secarse a 110 C para eliminar el agua absorbida, aunque en algunos casos este no es efectivo, y en otros se producen cambios en la
composicin de la muestra por efecto del calor. Una vez obtenida la muestra de laboratorio, se disuelve para realizar el anlisis. Si la muestra no se disuelve en condiciones moderadas, ni con ataques de reactivos diluidos o en condiciones de T moderada, puede recurrirse a la digestin cida o a la fusin.
Los reactivos ms comunes para atacar muestras, son los inorgnicos ( HCl, HNO3)
y menos frecuente disoluciones de amoniaco y de hidrxidos de metales alcalinos.
El amoniaco concentrado mas calor, disuelve todos los metales excepto al cromo y
aluminio, que s pasivan por la formacin de un xido superficial. Tampoco disuelve reacciones que contengan Sn, Sb W. Muchas sustancias comunes como Si, ciertos xidos
minerales y algunas aleaciones no se disuelven en los reactivos acuosos que acabamos
de indicar. En este caso esta indicado el recurso de la fusin con sales slidas. Para ello la
muestra, una vez reducida a polvo fino, se mezcla ntimamente con un exceso de unas 10
veces de fundente, calentando hasta la fusin. Las Tas oscilan entre 300 y 1000 C, obtenindose un producto soluble en agua, llamado fundido. Sin embargo, en la medida de lo
posible debe evitarse utilizar este mtodo, debido a los inconvenientes que se plantean:
1. Contaminacin de la muestra con las impurezas del fundente.
2. Las disoluciones acuosas resultantes tienen alto contenido en sales que pueden
crear dificultades en las siguientes etapas del anlisis.
3. Las altas Tas necesarias para una fusin aumentan el peligro de prdidas por
volatilizacin
4. l fundente ataca el recipiente donde se realiza la fusin, con lo que se produce
una nueva fuente de contaminacin de la muestra.
Por otra parte, la materia orgnica a veces debe destruirse a fin de liberar los elementos inorgnicos para su anlisis. Ej.: (determinacin de Mg en vegetales).
El proceso de mineralizacin de la muestra se lleva a cabo por dos vas:
1. Mineralizacin hmeda u oxidacin hmeda utilizando agentes oxidantes lquidos (H2SO4 , HNO3 , HClO4

concentrado y en calor, reacciona explosivamen-

te con la materia orgnica).


Es posible realizar la mineralizacin hmeda a elevadas presiones, trabajando
en un autoclave a presiones de 100 atmsferas y Tas entre 250 300 C.
Como reactivos oxidantes (HNO3 , HNO3 + HCl)
Un procedimiento corriente de mineralizacin hmeda a elevada presin y T,
se basa en la descomposicin por microondas con HNO3 y otros cidos minerales dentro de recipientes hermticos de tefln. La calefaccin se lleva a cabo en
hornos de microondas (especialmente diseados), obtenindose eficiencias espectaculares en la mineralizacin.

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2. Mineralizacin seca: calcinar el componente orgnico expuesto al aire o en corriente de O2


1.2.5. Eliminacin de Interferencias.
En el anlisis qumico, la muestra muchas veces contiene especies que pueden interferir en la determinacin de los analitos de inters, bien porque producen una seal indistinguible del analito o bien porque la atenan, siendo preciso eliminarlas. Pocas tcnicas
analticas estn libres de interferencias, por lo que , una etapa importante en la mayora de
estos anlisis es su eliminacin. La eliminacin de interferencias, puede llevarse a cabo de
dos maneras:
-

Qumicamente: usando agentes enmascarantes ( sustancia que reacciona con el interferente para formar una especie que ya no intensifica la
seal del analito).Se consigue mediante un ajuste pH, un cambio en el
estado de oxidacin ...

Fsicamente: separndolas previamente a la determinacin. Se realiza


mediante precipitacin, extraccin, cromatografa o destilacin.

Todos estos procesos tienen en comn la distribucin de los componentes de una


mezcla entre dos fases que despus se pueden separar mecnicamente.
En este captulo estudiaremos los mecanismos de separacin por precipitacin.
Separacin por Precipitacin.
Basadas en la existencia de grandes diferencias de solubilidad entre el analito y sus
interferencias.
La posibilidad terica de este tipo de separacin, puede determinarse mediante
clculos de solubilidad, pero otros factores como la coprecipitacin, la excesivamente lenta
velocidad de precipitacin, o la dificultad para la floculacin de los precipitados coloidales
pueden hacerla, inviable.
Algunos de los agentes precipitantes ms tiles se describen a continuacin:
a) Separaciones basadas en el control de la acidez:
En la prctica:
-

Separaciones en disoluciones relativamente concentradas de cidos


fuertes.

Separaciones en disoluciones tamponadas a pH intermedio.

Separaciones en disoluciones concentradas.

b) Separaciones de sulfuros a excepcin de metales alcalinos y alcalinotrreos.


La mayora de los cationes forman sulfuros poco solubles cuyas solubilidades
difieren mucho entre s, dado que es relativamente fcil controlar la solubilidad
de una disolucin acuosa por ajuste del pH. Las separaciones basadas en la
formacin de sulfuros insolubles han sido siempre muy utilizadas.
c) Otros precipitantes inorgnicos
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No existen iones de uso tan general para separaciones, como los iones hidrxido y sulfuro. Los iones cloruro y sulfato, son tiles por presentar un comportamiento selectivo. As, el cloruro se utiliza para separar Ag de la mayora de otros
metales. El sulfato se utiliza para aislar Pb, Sr, Ba.
d) Precipitantes orgnicos
Existen algunos reactivos tiles para aislar varios iones inorgnicos, algunos
como la dimetilgliocsima, que se caracteriza por su gran selectividad formando
precipitados con unos pocos iones. Otros como la 8-hidroxiquinoleina forman
compuestos poco solubles con muchos cationes.
En este caso puede conseguirse la selectividad necesaria para la separacin,
mediante el control del pH y la variabilidad de los productos de solubilidad de
sus productos.
e) Separar iones de constituyentes presentes en cantidades traza
La separacin cuantitativa de un elemento traza por precipitacin presenta varios problemas incluso cuando no son importantes las prdidas por solubilidad.
Entre ellas destaca la sobresaturacin porque de esta forma se retrasa la formacin del precipitado.
Es difcil la coagulacin de pequeas cantidades de una sustancia dispersa en
forma coloidal. Adems es posible que una porcin apreciable del slido se
pierda en su manipulacin. (Ej.: (Trasvase y filtrado).
Para minimizar esto, se aade a la disolucin una cantidad de otros iones que
forman un precipitado con el reactivo. El precipitado del ion aadido se llama
colector, y arrastra de la disolucin la especie minoritaria de inters. (Ej.: Para
aislar una muestra de oxido de manganeso se aade una pequea cantidad de
ion frrico a la disolucin antes de aadir NH3 como agente precipitante. As, el
FeOH arrastra incluso pequeas cantidades de MnOH.
Un colector puede arrastrar a un constituyente traza, debido a que tienen solubilidades parecidas, o bien, a fenmenos de coprecipitacin, y el colector no debe
interferir en la determinacin del elemento traza.
f)

Separacin por precipitacin electroltica


Constituye un mtodo muy til para hacer separaciones. Mediante ella se asla
en una fase aparte, la especie ms fcilmente reducible (o bien oxidable, dependiendo del componente), ya sea el componente deseado o no deseado de la
mezcla.
En este sentido el ctodo de Hg ha encontrado una amplia aplicacin en la eliminacin de muchos iones metlicos antes del anlisis. Por lo general los iones
metlicos ms frecuentemente reducibles que el Zn, se depositan fcilmente en
el Hg, quedando en disolucin iones tales como el Al, Be y metales alcalinos.

g) Otros mtodos
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Separacin por extraccin


Se basan en el diferente grado en que los solutos (tanto inorgnicos como orgnicos), se distribuyen entre dos disolventes inmiscibles.

Separaciones por intercambio inico


Se basan en que las interferencias o el analito, son retenidos en un slido intercambindose por otros iones fijados previamente en l.

Separacin de especies inorgnicas por destilacin


Tiene lugar cuando los coeficientes de particin son muy diferentes para
una sustancia entre la disolucin y la fase de vapor.

Separaciones cromatogrficas
Aqu los componentes se reparten o distribuyen entre dos fases, una de
las cuales es mvil (puede ser un lquido, un gas, o un fluido supercrtico,
que fluye a travs de este lecho estacionario.

1.2.6. Medida (Determinacin propiamente dicha)


La parte de la medida en general significa la determinacin propiamente dicha. La
medida dar lugar a la cantidad precisa del constituyente buscado en la muestra. Por ello
constituye el ncleo fundamental de un anlisis.
La eleccin del mtodo se hace entre una amplia variedad de tcnicas posibles.
Las categoras principales de determinaciones analticas son las siguientes:
1.) Determinacin gravimtrica
Se convierte el constituyente en una forma que se puede pesar con precisin.
2.) Determinacin volumtrica
Se hace reaccionar el constituyente en una razn estequiomtrica conocida y
precisa, con un reactivo estandarizado.
3.) Determinacin espectroscpica
Se somete el constituyente a la absorcin o emisin de radiacin electromagntica.
4.) Espectroscopia de masa
Los constituyentes de la muestra se examinan en espectros de masas tras hacerlos pasar por campos elctricos y magnticos.
5.) Determinacin electroqumica
El constituyente afecta al equilibrio redox en un electrodo adecuado, aqu se
realizan medidas de magnitudes elctricas como Voltios, Amperios, Capacidades, Resistencias, etc.
6.) Determinacin cromatogrfica
Se separa el constituyente mediante el paso a travs de una columna y se caracteriza mediante un detector.
7.) Determinacin radioqumica

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Se determina el constituyente por medicin de la emisin de partculas

o ra-

yos por istopos inestables.


De todos estos mtodos, tenemos mtodos volumtricos y gravimtricos entre los
clsicos, y espectroscpicos, electroqumicos y cromatogrficos entre los instrumentales.

1.2.7. Interpretacin y conclusiones


En la interpretacin de datos analticos, debemos distinguir dos aspectos:
El primero se refiere a la confiabilidad de las mediciones, y por tanto al nivel de confianza en los resultados, es decir, como de bien se produjo todo el proceso cualitativo.
El segundo es la aplicacin de los datos confiables a la resolucin del problema, por
ejemplo, podemos deducir valores confiables de los resultados obtenidos para los
niveles de cloruros de agua.
Sin una interpretacin y unas conclusiones, el anlisis qumico no debera realizarse, pues solo constituira una mera recoleccin de datos y una prdida de tiempo valioso.
1.2.8. Acciones
Se incluye en esta etapa, ya que las conclusiones del proceso analtico completo
deben conducir a una meta. Estos resultados pueden llevar a una mejora en los niveles de
contaminacin ambiental o en la calidad de una manufactura, condena de un criminal, entre otros ejemplos.

2.- TRATAMIENTO ESTADSTICO DE LOS RESULTADOS ANALTICOS


La inferencia estadstica consiste en la obtencin de conclusiones a partir de un
cierto nmero de observaciones experimentales de acuerdo a unas hiptesis formalizadas
y con unas reglas de clculo objetivas, as mediante su uso se pueden investigar posibles
tendencias en los datos y aplicar criterios que permitan descubrir las causas de error no
aleatorias, as mismo, el tratamiento estadstico de una serie de experimentos planificados
adecuadamente que permitan ver la influencia de diversas variables con ms eficacia y
menos trabajo que mediante el mtodo tradicional de mantener constantes todas las variables excepto una de ellas y de su influencia y as una por una cada variable sucesiva.
Es importante sealar que las tcnicas de la estadstica clsica son solo aplicables
a un nmero infinito de observaciones, una situacin que difiere de ser la de una serie tpica de resultados cualitativos (entre 2 5 repeticiones). Sin embargo, la propia estadstica
ha realizado modificaciones para adaptar los conceptos a series pequeas de datos. En
este punto se ha establecido lo que se llama Jerarqua metodolgica.
x1 (Resultado individual)

Una alicuota

x (Media de n resultados)

n alcuotas (n < 30)

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(Media de

resultados)

alcuotas (n > 30)

2.1. TIPOS DE ERRORES EN EL ANLISIS CUANTITATIVO


Los anlisis cuantitativos juegan un papel predominante en cualquier laboratorio
analtico, por lo que, los errores que aparezcan en ellos son de gran importancia.
Nuestro principio, ser que no existen resultados cuantitativos vlidos sino van
acompaados de una estimacin de los errores inherentes a ellos, los cientficos experimentales harn una distincin fundamental entre tres tipos de errores:
2.1.1. Errores Accidentados o Crasos
Estos errores son tan graves que no queda otra alternativa que abandonar el experimento y empezar de nuevo.
Ejemplos:

Prdida de parte de la muestra

Contaminacin de la muestra

Avera de algn instrumento

Todos estos errores que ocurren, incluso en los laboratorios mejor controlados, se
reconocen con mucha facilidad en consecuencias en el anlisis. Solo tenemos que distinguir con detenimiento entre los errores sistemticos y aleatorios.

2.1.2. Errores Sistemticos o Determinados


Son aquellos que pueden determinarse y probablemente evitarse o corregirse.
Afectan al resultado, siempre en el mismo sentido, bien por exceso o por defecto. Su magnitud puede ser constante para todas las muestras de una serie, o ser proporcional al tamao de la muestra, o bien variar de un modo ms complicado, por ejemplo el error cometido al pesar una muestra higroscpica, que es siempre positivo, ya que aumenta con el
tamao de la muestra y vara con el tiempo que se emplea en la pesada, con la humedad
atmosfrica y con la temperatura. El error originado por la adsorcin en las columnas cromatogrficas es negativo (adsorcin irreversible).
Otros errores comunes de este tipo son causados por impurezas en los reactivos,
tambin por errores instrumentales, por ejemplo: mal calibrado de las balanzas, pH-metros.
Errores de operacin, errores del mtodo, por ejemplo: coprecipitacin de impurezas, solubilidad de precipitados, interferencias en la muestra.
Estos errores sistemticos o determinados, afectan a la exactitud del mtodo analtico.
2.1.3. Errores aleatorios o indeterminados
Son errores fortuitos cuya magnitud y signo no pueden predecirse ni calcularse.
Son producidos por el efecto de variables que no se pueden controlar, y se caracterizan
porque se presentan por exceso o defecto con igual probabilidad.

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Se revelan por las pequeas diferencias en mediciones sucesivas efectuadas por el


mismo analista.
Producen este tipo de errores los pequeos cambios en la T, P, humedad del ambiente, fluctuaciones en el suministro elctrico, corrientes de aire a la hora de la pesada en
balanzas de precisin.
Estos errores afectan a la precisin de un experimento, y si se realiza un nmero
elevado de experiencias, la exactitud puede no resultar necesariamente aceptada.
Los errores sistemticos dan lugar a una prdida de exactitud pudiendo o no afectar
a la precisin segn que dicho error sea constante o variable.
2.2. EXACTITUD Y PRECISIN
En anlisis cuantitativo de cualquier propiedad de la materia (peso, volumen, etc.),
esta sujeto a cierto grado de incertidumbre, por lo que jams se podr conocer el verdadero valor de la magnitud. A lo que se aspira es a obtener una estimacin de la magnitud que
sea satisfactoria.
La exactitud es el grado de concordancia entre el valor medido y el valor real. Como casi nunca se conoce el valor verdadero absoluto, una definicin ms realista es la
concordancia entre el valor medido y el valor real aceptado.
La precisin es el grado de concordancia entre replicas de mediciones de la misma
cantidad, es decir, es la repetibilidad de un resultado.
Es necesario distinguir entre repetibilidad y reproducibilidad, para hacer referencia a
la precisin de un experimento:
-

Repetibilidad: estimacin del grado de dispersin en una serie de replicas de la


misma cantidad. Son experiencias llevadas a cabo por un mismo analista en un
tiempo relativamente corto sin cambiar de instrumento ni de material de laboratorio, y usando las mismas disoluciones.

Reproducibilidad: mide el grado de dispersin entre series de resultados, o sea,


experiencias realizadas en ocasiones distintas con disoluciones distintas y con
material de laboratorio distinto. Segn diferentes facetas, podemos calcular la
reproducibilidad de distintas formas.

Se puede observar como las medidas de una serie pueden ser muy precisas y sin
embargo poco exactas. La precisin no es garanta de exactitud, pero son necesarias medidas precisas para conseguir exactitud. Con poca precisin difcilmente se tendr una
buena exactitud.
2.2.1. Maneras de expresar la exactitud
Existen varias maneras y unidades para expresar la exactitud de una medida.
Siempre se supone que existe un valor verdadero para establecer la comparacin:

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A.) Error Absoluto: diferencia entre el valor medido y el valor verdadero con respecto al signo. Se expresa en las mismas unidades que la medicin.
Cuando el valor medido es el promedio de varias mediciones, el error se llama
error medio.
Aqu el trmino absoluto tiene un significado distinto al significado matemtico. Es una magnitud ignorando su signo. Aqu error absoluto es la diferencia
entre el resultado experimental y su valor aceptado incluyendo su signo.

Ea = X1

Xv

Xv = verdadero valor
xi

Ea = X

Xv

siendo

X
N

B.) Error Relativo: error absoluto o medio expresado como % del valor verdadero:

Xi

Xv

ER

100
Xv

Xv

ER

100
Xv

EJEMPLO: El resultado de una anlisis es de 252 gr. en comparacin con el valor


real que es 262 gr. Calcular Ea y ER :
Ea

252

262

252
ER

01 gr.

262
38 %

100
262

2.2.2. Maneras de expresar la precisin


A.) Desviacin estndar: medida ms medida de la variabilidad de un resultado.
Se define como la raz cuadrada de la suma de los cuadrados de las diferencias, entre los
valores medidos individualmente y la media de las mediciones dividida por (N 1):
(xi

x)2

05

S
N1

UD1: Introduccin mtodos instrumentales anlisis

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Este parmetro proporciona una medida de la dispersin de un conjunto de resultados alrededor del valor medio. Tiene las mismas unidades que los datos.
Al aumentar N, la cantidad (N 1) se acerca cada vez ms a N (poblacin), por lo
que, no tiene trascendencia usar N N 1, en el clculo de la desviacin estndar. Aunque para nmeros pequeos de observaciones (caso especialmente importante en Q. Analtica), la distincin es significativa.
xi

05

N
Experimentalmente, la S de la muestra constituye una estimacin de la desviacin
estndar de la poblacin ( ), que es la que se desea conocer. No se puede determinar
realmente un nmero infinito de mediciones. S se aproxima a

, cuanto mayor es el ta-

mao de la muestra. Anlogamente, la media de la muestra, resulta ser una estimacin


tanto ms exacta en la medida de la poblacin, cuanto mayor es el tamao de la muestra
aleatoria.
El cuadrado de la desviacin estndar, se denomina varianza (V = S2).
B.) Desviacin estndar relativa (DER): mejor medida de la precisin para fines
comparativos:
S
CV (coef. de variacin) = DER

100
x

Sus unidades son %, y es un ejemplo de error relativo, es decir, es una estimacin


del error dividida por una estimacin del valor absoluto de la cantidad medida.
Los errores relativos se utilizan con frecuencia en la comparacin de las precisiones
de los resultados obtenidos y son importantes en el clculo de la propagacin de errores.
2.3. DISTRIBUCIN DE ERRORES
Aunque la S proporciona una medida de la dispersin de un conjunto de resultados
alrededor del valor medio, no indica la forma en que se encuentran distribuidos los resultados.
En teora, una concentracin puede tomar cualquier valor de manera que la distribucin de la poblacin se ajusta a una curva continua. El modelo matemtico habitualmente empleado es la distribucin normal o Gausiana descrita por la ecuacin:
Exp.

Y
2

UD1: Introduccin mtodos instrumentales anlisis

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Un anlisis un poco ms detallado demuestra que cualquiera que sean los valores
de

y , aproximadamente un 60 % de los valores de la poblacin caen dentro de

la media, cerca de un 95 % se ubican dentro de


encuentran dentro de

de

2 de la media, y cerca de un 997 % se

3 .

La distribucin normal no solo se obtiene cuando se realizan mediciones repetidas


de una misma muestra, tambin los resultados obtenidos a menudo se adaptan a la distribucin normal cuando se mide la misma magnitud para diferentes muestras de la misma
poblacin.

2.4. APLICACIONES DE LA ESTADSTICA A LOS RESULTADOS ANALTICOS


2.4.1. Intervalos de Confianza
El intervalo alrededor de la media, determinada experimentalmente, dentro del cual
podemos encontrar la media verdadera con cierto grado de probabilidad, se denomina intervalo de confianza, y los valores extremos de este intervalo son los lmites de confianza. Podemos expresar los lmites de confianza como:

t
x
n
Intervalo, lmite de confianza
t : Student, depende del nmero de grados de libertad, en nuestro caso (n 1), y el
grado de probabilidad (certeza o confianza) en nuestros resultados.
Si suponemos que la distribucin es normal, entonces el 95 % de las distribuciones
normales se encontrarn en el intervalo dada por:
x

196

x
n

UD1: Introduccin mtodos instrumentales anlisis

196
n
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Tambin se utiliza con diferencia el intervalo de confianza al 99 % que viene dado


por:
x

<

Los limites de confianza al 95 % para la concentracin de ion nitrato, se calcularan:


x
n
S
00165

00165

0500 196

0
50

0500

00046

50
gr / m

A medida que el tamao de la muestra disminuye la incertidumbre al utilizar S para


aproximar

aumenta, y a fin de permitir usar S, la ecuacin usada para calcular los limi-

tes de confianza se puede modificar como:


S
x

t
n

EJERCICIOS:
Se determin el contenido de NaCl de una muestra de orina, utilizando un electrodo
selectivo de iones, obtenindose los siguientes valores:
102 mM, 97 mM, 99 mM, 98 mM, 101 mM, 106 mM
x

1005 mM;

S = 327 mM;
n 1 = 5; Nivel de confianza = 95 %; t = 257
327
1005

257

(1005

34) mM

6
Calcular los limites de confianza al 95 y 99 %, para la concentracin de iones de
sodio:
327
(1005

54) mM

UD1: Introduccin mtodos instrumentales anlisis

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Los lmites de confianza se pueden utilizar como una prueba para detectar errores
sistemticos como se muestra en el siguiente ejemplo:
Se comprueba la escala de absorbancia de un espectrofotmetro a una

concreta,

usando un patrn que da una absorbancia de 047. Los valores determinados fueron 10, de
los que se obtuvieron unos valores de: x = 0461 y S = 003. Calcular el intervalo de
confianza del 95 % de la absorbancia media y decir se existe un error sistemtico.
0003
0461

226
10
0463

0461

0002

Rango de trabajo obtenido


0459

Esta fuera del rango 047, por lo que podemos decir que existe un error sistemtico
en estas afirmaciones.

2.4.2. Rechazo de Resultados


Con frecuencia al efectuar una serie de replicas de anlisis, uno de los resultados
obtenidos ser muy distinto de los otros. A este valor se le conoce como valor anmalo. Se
han sugerido diversas pruebas estadsticas para determinar si una observacin debe rechazarse. Una de las ms correctas desde el punto de vista estadstico es la prueba de la
Qumica de Dixon. Para su clculo, se ordenan los datos en orden decreciente de su valor,
y en la relacin que se calcula como el cociente entre la diferencia entre el valor sospechoso y el ms prximo a l dividido por el rango, es decir, la diferencia entre el mayor y menor valor:
valor sospechoso

valor ms prximo

valor ms grande

valor ms pequeo

La relacin Q experimental calculada se compara con los valores tabulados de Q


para un nivel de confianza determinado. Si la relacin calculada resulta mayor o igual que
el valor tabulado, se puede rechazar la observacin sospechosa.
Determinar la concentracin de nitrato (NO2-) en una muestra de agua, teniendo
en cuenta los siguientes resultados:
Anlisis

[NO-2] gr/L

0403

0410

0401

0380

Determinar si el valor de 038 es rechazable segn el nivel de confianza del 95 %


(Valor de las tablas para n=4, 0.829:
UD1: Introduccin mtodos instrumentales anlisis

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1.) 0401; 0403; 0401; 0380


0380 0401
070

2.) Q
0410 0380

3.) 070 < 0829 valor no rechazable


La prueba Q es bastante estricta, no es aplicable en el caso de series pequeas de
datos.
En una situacin ideal, habra que tomar nuevas medidas cuando aparezca un dato
sospechoso, sobre todo si se han tomado inicialmente pocos valores. Esto podra aclarar si
debiera rechazarse o no el valor sospechoso, o si se debiera mantener. Tambin se reducira su efecto sobre la media y la desviacin estndar.
En el ejemplo anterior se aaden:
0400; 0413; 0411; Se debera mantener el valor de 0380?
0380

0400

0413

0380

0606

Para n = 7 y 95 % de confianza, obtenemos una Q terica de 0569 < Q calculada


s tendramos que rechazar 0380
Es importante tener en cuenta, que para un nivel de confianza del 95 %, existe un
5 % de riesgo de rechazar incorrectamente un valor sospechoso.
Cuando las medidas se repitan unas cuantas veces, lo que es normal en el anlisis
qumico, el rechazo de un valor origina una gran variacin sobre la media y la desviacin
estndar. Adems, debe evitarse el hecho de tomar tres medidas y rechazar la que ms
difiere de las otras dos. En general, se puede demostrar que se obtiene una estimacin
ms confiable de la media utilizando el valor que esta en medio de los otros tres, en lugar
de utilizar la media de los dos que no fueron rechazados. Pueden presentarse tambin
valores sospechosos que pueden ser los dos prximos, o uno a cada extremo del intervalo
de valores.
Esto origina una reduccin en el valor calculado de Q, ya que en el primer caso se
produce una reduccin del numerador, y en segundo un aumento del denominador. En
este caso es necesario emplear una prueba para un par de valores anmalos.
2.4.3. Presentacin de los resultados
Como ya hemos sealado, los resultados experimentales carecen de importancia si
no van acompaados de una estimacin de los errores que han tenido lugar durante la

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medida. Es casual citar la media como la estimacin de la cantidad medida, y la desviacin


estndar como la estimacin de la precisin.
Menos frecuente es dar el resultado en la forma de los lmites de confianza al 95 %
de la media.
ts
x
n
Redondeo de la respuesta: el nmero de cifras significativas indica la precisin del experimento. El nmero de cifras significativas es el nmero de dgitos que se necesitan para
expresar cientficamente un valor sin prdida de exactitud.

Ejemplos:
1427

4 cifras significativas (1427 102)

14270 102

5 cifras significativas

6302 10

4 cifras significativas (0000006302)

92500 Este es un caso ambiguo, porque segn como se exprese tendr diferentes cifras significativas:

92500

925 104

3 cifras significativas

9250 104

4 cifras significativas

92500 104

5 cifras significativas

Los ceros son significativos cuando se localizan en medio de un nmero, al final de


un nmero y a la derecha de la coma decimal. En los dems casos no son cifras significativas.
Este nmero de cifras significativas en un anlisis est condicionado por la medida
menos exacta:
16235 63
2 cifras

75
2 cifras

En cuanto al redondeo se hace uso de las siguientes reglas:


Si la ltima cifra significativa es menor que 5, esta no sufre modificacin.
Si es mayor que 5 se incrementa en uno.
Si es igual a 5 y no hay ms cifras significativas a continuacin o son cero, no se
modifica, pero si es diferente a 0 se aumenta en uno.
63,765 = 63,76
63,7651 = 63,77
3.- ANLISIS INSTRUMENTAL: CALIBRACIN
3.1. INTRODUCCIN
Los mtodos analticos se suelen clasificar en:

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1. - Mtodos clsicos: en los mtodos clsicos de anlisis cuantitativo la cantidad


de analito se determina por medidas gravimtricas o volumtricas que son ideales para anlisis de alta precisin, especialmente cuando se analiza un nmero
pequeo de muestras que son necesarias para el anlisis de materiales estndar.
2. - Mtodos Instrumentales: utilizan un instrumento ms o menos complejo para
evaluar una propiedad fsica o fsico-qumica del sistema objeto de anlisis. Esta
definicin es un poco ambigua, pues no existe ningn anlisis qumico gravimtrico o volumtrico que no recurra por una parte al examen de una propiedad fsica como la precipitacin, cambio de volumen, y por otra parte que no emplee
algn artificio experimental (buretas). Adems actualmente la instrumentacin
se utiliza tambin para otras muchos fines, entre los cuales cabe destacar aquellas que conducen a la morfologa y estructura de las molculas.
En definitiva, las tcnicas instrumentales implican por una parte el estudio terico
de los principios fsicos y fsicos-qumicos de los mtodos utilizados, as como el conocimiento de tamao, forma, estabilidad y estructura de las molculas; y por otra parte implican la descripcin y conocimiento de los componentes bsicos de los instrumentos empleados.
3.2. GRFICAS DE CALIBRACIN EN ANLISIS INSTRUMENTAL
Segn la ISO (International Stndar Office), la calibracin se define como el conjunto de operaciones que permiten establecer en determinadas condiciones experimentales,
la relacin existente entre los valores indicados por el aparato, con los valores obtenidos
en la medida de un valor conocido.
El procedimiento operatorio en anlisis instrumental para la calibracin es:
El analista prepara una serie de muestras (5 6) con concentraciones conocidas de
analito, y las mide en el instrumento en iguales condiciones y seguidamente medir las
muestras problema. De esta manera, a partir de la seal obtenida para cada patrn de
concentracin conocida se construye la grfica de calibracin, y a partir de ella se obtiene
la concentracin del analito en las muestras problema.
El procedimiento anterior generalmente presenta varias preguntas estadsticas:
-

Es lineal la grfica de calibracin?, y si es curva qu grfica tiene?

Teniendo en cuenta que cada uno de los puntos de la grfica est sujeto a
errores, cul es la mejor recta que pasa por esos puntos?

Suponiendo que la calibracin es lineal, cules son los errores estimados y


los lmites de confianza para la pendiente y la ordenada en el origen?

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Cundo la grfica se usa para el anlisis de una muestra problema, cules


son los errores y los limites de confianza para una concentracin determinada?

Cul es l limite de deteccin del mtodo, es decir, la menor concentracin


de analito que se puede detectar con un nivel de confianza predeterminado?

Antes de abordar estas cuestiones debemos considerar aspectos sobre el trazado


de las grficas de calibracin:
a.) Es esencial que los patrones de calibracin cubran el intervalo completo de concentracin requerido en los anlisis en los que se encontraron las muestras problema.
b.) La concentracin de las muestras problema se calcula por interpolacin, a excepcin del mtodo de la adicin estndar, que se hace por extrapolacin.
c.) Es importante incluir una muestra en blanco en la curva de calibracin. Esta
muestra no contiene ningn analito, pero si contiene la misma composicin que las otras
muestras estndar de referencia, y est sujeta a la misma secuencia del proceso analtico.
Su respuesta en la medida podra ser cero, pero por impurezas de reactivos u otras causas
puede no ser as.
d.) La curva de calibracin se representa siempre con la respuesta del instrumento
en el eje de ordenadas y la concentracin de los patrones en el eje de abscisas.
Tres de las tcnicas de calibracin mas comnmente usadas son la curva o grfica
analtica, el mtodo de las adiciones estndar y el mtodo de estndar interno.
3.2.1. Curva o grfica analtica
En esta tcnica se prepara una serie de soluciones estndar que contienen concentraciones conocidas del analito teniendo en cuenta los puntos antes sealados. Dichas
soluciones deben cubrir el intervalo de concentracin de inters, as como tener una composicin matricial tan parecida como se pueda a la de las soluciones de las muestras problema. Tambin se analiza una solucin en blanco de fondo.
Las respuestas netas de cada solucin estndar menos la de fondo se representan
frente a las concentraciones de las soluciones estndar a fin de obtener la grfica de calibracin.
Generalmente hay una relacin lineal entre la seal analtica Y, y la concentracin
X. Por ello, los datos se ajustan a una recta por el mtodo de mnimos cuadrados, es decir,
minimizando la suma de los cuadrados de los residuos Y.
Una vez establecida la grfica de calibracin se puede obtener la concentracin de
analito en cualquier muestra problema por interpolacin del valor en dicha recta.
3.2.1.1. Coeficiente de Correlacin momento-producto
Aqu se analiza el primer problema planteado en la pregunta anterior.
Supongamos que la representacin de una lnea recta toma la expresin
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y = b x + a,
los puntos individuales sobre la recta los denotaremos como
(x1, y1), (x2, y2), etc.,
Blanco

siendo l primer punto el blanco.


La media de los valores de x la denotaremos x y la de y ser y , as que el

punto ( x, y ) se conoce como centro de gravedad de todos los puntos.


Para estimar si los puntos experimentales se ajustan a una recta, calculamos el
coeficiente de correlacin que viene dado por R y tiene la siguiente expresin:
xi

x yi

1 < r < +1
xi

yi

En qumica analtica, normalmente r es > 099, siendo relativamente poco comunes los valores de r < 09.
Es importante no despreciar cifras decimales durante los clculos, como se muestra, aunque dos puntos de desven de la mejor recta, el valor de r es muy prximo a 1,
sin embargo, se obtendr un valor de

que en algunos cosos ser prximo a 1, an

cuando la representacin no sea lineal, por tanto siempre es necesario representar la curva
de calibracin.
Por otro lado, un r = 0 no significa que x e y no estn relacionadas, sino que no
estn linealmente relacionadas, los valores de r obtenidos en el anlisis instrumental son
generalmente muy altos, de manera que un valor calculado junto con la propia grfica de
calibracin suele ser suficiente para asegurar al analista que ha obtenido una relacin lineal til.
En ocasiones se obtienen valores de r

ms bajos, siendo necesario utilizar una

prueba estadstica para establecer si r es realmente significativo. El mtodo ms simple


es calcular un valor de t usando la ecuacin:
r
t

n2

05

(1 r2)05

Este valor est tabulado y se compara usando una prueba t de dos colas y n 2
grados de libertad.
Si t (calculado) es mayor que t (terico), se puede asegurar que existe una correlacin significativa. Tambin se pueden calcular los limites de confianza de la pendiente y la
ordenada en el origen, y comparar que estos parmetros estn incluidos dentro de estos
limites.
3.2.2. Mtodo de adiciones estndar
Se utiliza cuando es imposible suprimir interferencias fsicas o qumicas en la matriz
de la muestra.

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Supongamos que un analista desea determinar cido Acetilsaliclico en una aspirina


comercial. Si utilizamos este mtodo, podra realizar una calibracin con disoluciones
acuosas de acetilsaliclico, y utilizar la grfica de calibracin resultante para la determinacin de la concentracin del analito en la muestra problema.
Sin embargo, utilizar soluciones puras para establecer la grfica de calibracin, solo
es vlido cuando no existen efectos matriz, es decir, no se produce aumento o disminucin
en la seal correspondiente al analito debido a la presencia de otros componentes en la
muestra.
Una primera solucin a este problema podra ser realizar la calibracin aadiendo
cantidades conocidas de analito a una disolucin de composicin semejante a la muestra
problema, pero exenta de analito. Sin embargo, esta disolucin en la mayora de los casos
no se puede conseguir.
Otra solucin consiste en realizar todas las medidas sobre la muestra problema,
esto se consigue usando el mtodo de la adicin estndar. Este mtodo consiste en tomar
volmenes iguales de problema, aadir a cada uno por separado cantidades distintas de
analito, excepto a una de las muestras, y finalmente diluir todas las muestras al mismo
volumen final. Seguidamente se determinan las seales instrumentales para cada disolucin y se representan los resultados. La escala de concentracin (x) se define con la concentracin de analito agregadas a las soluciones muestra. Por tanto, la concentracin desconocida est dada por el punto en el cual la lnea extrapolada corta al eje x, es decir, el
valor de x para y = 0. Este valor es igual a la razn de la ordenada en el origen y la pendiente de la recta de regresin establecida por mnimos cuadrados.
Aunque este mtodo es una forma de evitar los efectos de interferencia causados
por la matriz, tiene dos desventajas:
1.) Es un mtodo de extrapolacin, y por tanto, menos preciso que las tcnicas de
interpolacin.
2.) Es difcil de automatizar, y requiere de mayores cantidades de muestra.
3.2.3. Mtodo de Estndar Interno
Una cantidad fija de una sustancia pura (estndar interno), se aade tanto a las
soluciones muestra como a las soluciones estndar. El estndar interno debe ser una sustancia similar al analito con una seal fcilmente medible y que no interfiere con la respuesta del analito.
Despus se determinan las respuestas del analito y del estndar interno, y se calcula el cociente de las dos respuestas. De esta manera, si se varia algn parmetro que afecte a las respuestas medidas, dichas respuestas del analito y del estndar interno, deben
ser afectadas por igual. Por tanto, el cociente de respuestas depende solamente de la concentracin de analito.

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Una representacin de la relacin o cociente de respuestas analito a estndar interno como funcin de la [ ] del analito, da una grfica de calibracin cuyo ajuste se hace
por mnimos cuadrados.
3.3. PARMETROS CARACTERSTICOS
3.3.1. Limites de deteccin y cuantificacin
En trminos generales se puede definir l limite de deteccin de un analito, como
aquella concentracin que proporciona una seal instrumental significativamente diferente
de la seal de una muestra en blanco, o la seal de fondo.
Significativamente diferente, da al analista un buen margen de libertad para establecer la definicin exacta del limite de deteccin. De hecho, en la prctica existe poco
acuerdo entre los Organismos Oficiales sobre este acuerdo.
Una definicin aceptable de limite de deteccin, que ha sido sugerida recientemente
por organismos de EEUU, es que el limite de deteccin es la cantidad de analito que proporciona una seal y es igual a la del blanco ms tres veces la desviacin estndar del
blanco:
yLD = yB + 3 SB
El limite de cuantificacin o determinacin considerado como el lmite de concentracin ms bajo para mediciones cuantitativamente precisas, se define como la cantidad de
analito que proporciona una seal y es igual a la del blanco ms diez veces la desviacin
estndar del blanco:
yLQ = yB + 10 SB
3.3.2. Rango lineal
El intervalo de concentracin en que es aplicable un mtodo analtico va desde el
limite de cuantificacin hasta la concentracin, a la cual, la curva de calibrado se desva de
la linealidad. En el lmite de cuantificacin, la desviacin estndar relativa de las medidas
es de aproximadamente un 10 %, y disminuye con rapidez cuando aumentan las concentraciones.
3.3.3. Sensibilidad
La sensibilidad de un instrumento o mtodo se define como, su capacidad para discriminar entre pequeas diferencias en la concentracin de un analito. La sensibilidad viene limitada por la pendiente de la curva de calibracin y la reproducibilidad o precisin del
sistema de medida, de manera que para dos mtodos que tengan igual precisin, el que
presente mayor pendiente en la curva de calibracin ser el ms sensible, y viceversa.
La IUPAC, define la sensibilidad como la pendiente de la curva de calibracin a la
concentracin de inters. Como la mayora de las curvas de calibracin son lineales, en
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ellas la sensibilidad de calibracin es independiente de la concentracin, e igual a la pendiente de la recta de calibrado.


Mandel y Stichler, definen la sensibilidad analtica a una determinada concentracin, teniendo en cuenta la precisin, como:
b

b = pendiente
donde

Ss

Ss

Ss = desviacin estndar de las


seales

3.3.4. Selectividad
La selectividad de un mtodo analtico durante el grado de ausencia de interferencias, debidas a otras especies contenidas en la matriz de la muestra.
Desafortunadamente, ningn mtodo analtico est totalmente libre de interferencias, y con frecuencia deben realizarse distintas operaciones para eliminarlas.
Consideremos una muestra que contiene un analito A, as como dos especies potencialmente interferentes (B y C), encontrndose en [ ] CA, CB, CC, con sensibilidad de
calibracin: ma, mb, mc. La seal medida en el instrumento vendr dada por:
S = ma CA + mb CB + mc CC + Sbl
Blanco

Se define el coeficiente de selectividad de B con respecto de A, como:


mB
KB,A
mA
El coeficiente de selectividad nos da la respuesta relativa del mtodo para la especie B cuando se compara con A.
Anlogamente, el coeficiente de selectividad de C con respecto de A, ser:
mC
KC,A
mA
Si sustituimos en la ecuacin anterior estos coeficientes, obtenemos que:
S = mA (CA + KB,A CB + KC,A CC) + Sbl
Los coeficientes de selectividad pueden variar desde 0 en ausencia de interferencias hasta 1 ms. Un coeficiente ser negativo si la interferencia causa una reduccin en
la intensidad de la seal del analito y a la inversa.
Los coeficientes de selectividad son parmetros de calidad tiles para describir la
selectividad de los mtodos analticos, pero son poco usados.
Ejemplo: Anlisis por mininos cuadrados de datos de calibracin para la determinacin de Plomo, basada en el espectro de emisin de llama, condujo a la ecuacin:
y = 112 CPb + 0312
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obtenindose:
[Pb] ppm

N de replicas

10 0

10

1162

015

10

10

112

0025

0 00

24

00296

00082

Calcular:
a) Sensibilidad de la calibracin.
b) Sensibilidad analtica a 1 y 10 ppm de Pb.
c) Limite de deteccin.
a) Sensibilidad = pendiente ==> m = 112
b) Para 10 ppm de Pb:
b

112

+ discriminacin
+ sensibilidad
+ precisin
+ selectividad

75
Ss

015

Para 1 ppm de Pb:


112
45
0025
c) y = yB + 3 SB
y = 00296 + 3 00082 = 0054
ya
y = bx + a

0054 00296
x

112

La [ ] en el limite de deteccin es x = 0022 ppm de Pb

3.4. RELACIN SEAL - RUIDO


La seal analtica puede dividirse en dos partes: una causada por l / los analitos y
la otra, por los componentes de la matriz de la muestra y por la instrumentacin usada en
la medicin. En este ltimo, parte de la seal se conoce como ruido, y constituye informacin no deseada, ya que degrada la exactitud y precisin del anlisis, a la vez que aumenta
el lmite de deteccin. El efecto del ruido sobre la seal consistente en una parte del registro grfico de una pequea seal de corriente contina.
En la mayora de las medidas, el valor promedio de la seal correspondiente al ruido se mantiene cte., y es independiente de la magnitud de la seal total. As pues, el efecto
del ruido sobre el error relativo de una medida, aumenta a medida que baja el valor de la
cantidad medida. Por esta razn, para describir la calidad de un mtodo analtico o el fun-

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cionamiento de un instrumento, la relacin seal ruido es un parmetro de calidad mucho


mejor que el ruido solo.
Para una seal cualquiera, la magnitud del ruido se define como la desviacin estndar del valor de la seal medida, mientras que la seal viene dada por la media de la
medida.

Media

Sd

Sd

S/N

desviacin estndar
Como norma general, la deteccin cierta de una seal mediante un sistema visual
resulta imposible cuando la relacin seal ruido es < 2 3. S / N < 2 3
Conforme la concentracin disminuye hacia el nivel traza, el problema de distinguir
las seales respecto al ruido, se hace cada vez ms difcil, lo que ocasiona una disminucin en la exactitud y precisin de las mediciones a la vez que se aumenta el lmite inferior
de la cantidad de analito que se puede detectar.
Un aumento en la relacin seal ruido, generalmente indica una reduccin del
ruido, y por tanto, una medicin ms deseable. Los dos mtodos principales para la reduccin del ruido, es decir, el aumento en la relacin seal ruido en anlisis instrumental
son:
Mediante el uso de dispositivos electrnicos como filtros, para procesar seales
mientras pasan a travs del instrumento o
Detectores sincrnicos que atenan el ruido sin afectar de manera significativa a la
seal analtica.
Se puede hacer un posterior tratamiento matemtico de los datos, con un software adecuado, que permite extraer las seales de entornos ruidosos.
4.- ANLISIS INSTRUMENTAL: CLASIFICACIN
4.1. INTRODUCCIN
Para la determinacin de un analito existen:
Mtodos clsicos: mediante la reaccin qumica que se verifica, se deducen
los datos cuantitativos, bien sea por pesada de un precipitado calcinado (gravimetra) o por medida de volumen gastado de una solucin de concentracin
perfectamente conocida que contiene el reactivo (volumetra).
Mtodos instrumentales: Un instrumento para anlisis qumico convierte informacin qumica en una forma ms fcilmente observable. Logra este objetivo en varios pasos, que son:

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1.

Generacin de una seal

2.

Transformacin de la seal en una naturaleza diferente (transduccin)

3.

Amplificacin de la seal como un desplazamiento sobre una escala o sobre la


grfica de un instrumento registrador.

Estos ltimos tienen unas ventajas sobre los primeros:


1.) Permiten realizar anlisis difciles o imposibles por los otros mtodos con una
elevada selectividad y sensibilidad. Adems, mientras en los mtodos clsicos solo podemos determinar un analito por anlisis, en los instrumentales podemos determinar simultneamente varios analitos en un anlisis.
2.)

Suelen ser ms rpidos y baratos que los clsicos. Es fcil la automatizacin

de estos mtodos instrumentales.


3.)

Los instrumentos analticos pueden conectarse a ordenadores, lo que permite

un ptimo control del instrumento y manejo de datos.


4.) Desarrollo de instrumentos inteligentes.
Es difcil extraer generalizaciones comparativas entre los mtodos clsicos y los mtodos instrumentales en cuanto a precisin, comodidad y rapidez, as algunas tcnicas instrumentales son ms sencillas que las tcnicas clsicas, pero otras no. Con ciertas combinaciones de elementos o compuestos un mtodo instrumental puede ser ms especfico,
con otras, un procedimiento gravimtrico o volumtrico est menos sujeto a interferencia.
A partir de ahora solo vamos a hablar de mtodos instrumentales.
Estos mtodos tienen ciertas desventajas:
1.) Requieren ser manejados por tcnicos expertos.
2.) Es necesario una calibracin previa del equipo. Esta calibracin previa se hace
a base de mtodos qumicos, por lo cual la exactitud del mtodo instrumental depende de la exactitud del mtodo qumico empleado.
Esta calibracin suele ser cara.
Los mtodos instrumentales son muy variados, pudindose indicar que casi todas
las manifestaciones de energa tienen su correspondiente mtodo analtico.
La medida de la propiedad fsica se puede realizar mediante tcnicas instrumentales que se pueden resumir en los tres grupos siguientes:

Mtodos electroqumicos Electroanalticos de anlisis

Mtodos pticos de anlisis

Mtodos fisicoqumicos (principalmente separacin: cromatografia)

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Mtodos

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Propiedad fsica medida

Mtodo analtico

Potencial elctrico

Potenciometra

Conductancia elctrica

Conductimetra

Electroqumicos Corriente elctrica

Polarografa: titulaciones amperomtricas

Cantidad de electricidad

Culombimetra

Deposicin elctrica

Electrogravimetra
Colorimetra
Espectrofotometra radiacin visible
Espectrofotometra radiacin infrarrojo

Absorcin de radiacin

Espectrofotometra radiacin ultravioleta

(Espectrofotometra)

Espectrofotometra radiacin rayos X


Absorcin atmica
Espectroscopia Raman
Resonancia magntica nuclear
Espectroscopia de

Rayos X

emisin:

Ultravioleta
Radiacin visible

pticos
Emisin de radiacin

Fotometra de llama
Radiacin visible
Fluorescencia

Radiacin Ultravioleta
Rayos X

Mtodos radioqumicos
Refraccin de radiacin

Refractrometra

Rotacin de radiacin

Polarimetra
Turbidimetra

Dispersin de radiacin

Nefelometra
Difraccin rayos X

Separacin selectiva

Cromatrografa: capa fina,


gases, lquidos, etc.,

Mtodos fisicoqumicos

Razn carga/masa

Espectometra de masas

Observacin microscpica

Microscopa electrnica

Radiacin X

Mtodos por rayos X

Propiedades trmicas

Conductividad trmica y mtodos de entalpa

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El cuadro anterior sugiere que al enfrentarnos a un problema analtico con frecuencia tenemos una variedad asombrosa de mtodos para escoger.
A menudo ocurre que un mismo compuesto puede ser determinado por mtodos
diferentes. Entonces qu mtodo elegir?. La respuesta, lejos de ser fcil, exige el conocimiento de muchos parmetros y obliga a plantearse una serie de cuestiones:
De qu tipo de muestra se trata (acero, tierra, agua..)?
Es un constituyente mayor, menor o en estado de traza (menos de 0,01%)?
Se trata de un anlisis parcial o completo de la muestra?
El anlisis requerido es nico o ser rutinario?
Cul es el grado de precisin necesario?
Se dispone de personal competente para realizar correctamente el anlisis?
Cul ser el coste del anlisis?
De cunto tiempo se dispone para dar el resultado?
Cul es la fiabilidad de los resultados del mtodo previsto?
Cules son las consecuencias de los posibles errores?

De este modo, cuando se ha definido un nuevo objeto de anlisis, se debe abordar


el problema metdicamente.
Al principio, una vez considerada la naturaleza del analito que hay que determinar,
se plantea la eleccin del mtodo: espectroscpico, electroqumico, separativo...
Despus viene la eleccin de la tcnica: si, por ejemplo, se elige el mtodo cromatogrfico, se recurrir a la cromatografa en fase gaseosa o en fase lquida?
Pero antes de comenzar el anlisis, se plantea la eleccin del procedimiento, relativo a la depuracin y al tratamiento previo al que debe someterse la muestra.
Finalmente, el seguimiento de un protocolo corresponde al modo de operacin elegido. Es la receta de la determinacin, generalmente un procedimiento que es objeto de
normas definidas (AENOR). Esta normalizacin trata de la estandarizacin de las etapas,
desde la preparacin de la muestra hasta la realizacin de las medidas.
Por ltimo, los resultados se establecern segn las normas en vigor, se conservarn los datos primarios del anlisis, por ejemplo, en forma de fichero informtico que no
pueda ser rescrito. Este aspecto importante del trabajo es objeto de una normativa oficial
conocida por el nombre de Buenas Prcticas de Laboratorio.
La ciencia llamada quimiometra tiene como objetivo ayudar a elegir el mejor mtodo para resolver el problema analtico, en funcin de los requisitos exigidos y segn varias
orientaciones: metodologa apropiada, plan de muestreo mnimo, tratamiento de datos e
interpretacin de los resultados. El objetivo es aportar una respuesta correcta tratando los
resultados por mtodos estadsticos con el fin de reducir la cantidad de ensayos sobre todo
para aquellos anlisis que son largos o costosos.

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La profesin de analista requiere competencia cientfica, rigor y honestidad. El analista no solo debe conocer la tcnica, sino comprender el sistema qumico que est estudiando, so pena de correr el riesgo de obtener conclusiones errneas.
En el anlisis instrumental se confa en los resultados suministrados por los equipos
cuanto estos son expresados en forma numrica, ya que generalmente tenemos demasiada tendencia a confundir el rigor de las cifras con el de las medidas. Sin embargo, en anlisis qumico un error podra tener graves consecuencias. Por este motivo en Espaa el RD
822/1993 de 28 de mayo (BOE de 29 mayor de 1993) estableci los Principios de Buenas
Prcticas de laboratorio que posteriormente se han adaptado al progreso tcnico en el RD
1369/2000 (BOE de 20 julio de 2000) que son unas directrices de aplicacin en los anlisis
qumicos y se refieren tanto al modo de organizacin del laboratorio, como a las condiciones en las que el ensayo ha sido planificado, realizado, controlado, registrado y difundido.

Ejercicios de la UD 1
1.--En la valoracin potenciomtrica de un vinagre (valor indicado en la botella 5) se
obtuvieron los datos de la tabla. Se pide:
Utilizando el criterio Q de Dixon al 95% de probabilidad, indicar si se puede rechazar
algn valor y calcular.
Valor medio de los resultados
Rango
Desviacin estndar
Coeficiente de variacin
Intervalo de confianza al 95%
Error absoluto
Error relativo

5,10
4,96
4,93
4,87
5,06
5,00
5,02
4,02
5,00
5,04

2.-En la valoracin conductimtrica de un vinagre (valor indicado en la botella 6) se


obtuvieron los datos de la tabla. Se pide:
Utilizando el criterio Q de Dixon al 95% de probabilidad, indicar si se puede rechazar
algn valor y calcular:
Valor medio de los resultados
6,02
Rango
5,9
Desviacin estndar
5,95
Coeficiente de variacin
5,63
Intervalo de confianza al 95%
6,06
Error absoluto
6,01
Error relativo
6,08
6,02

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3.-En la lectura con el pHmetro de una disolucin de cido clorhdrico se obtuvieron los
datos de la tabla. Se pide:
Utilizando el criterio Q de Dixon al 95% de probabilidad, indicar si se puede rechazar
algn valor y calcular:
Valor medio de los resultados
2,1
Rango
2,3
Desviacin estndar
2,0
Coeficiente de variacin
2,1
Intervalo de confianza al 95%
2,0
Error absoluto
2,4
Error relativo
2,4
2,8
1,4
2,1
Ejercicios de preparacin de muestra y reactivos:
1. Con 1,45 gr. de nitrato de calcio al 97,5% de riqueza, qu volumen de disolucin 0,4 N
de dicha sal se puede preparar?
2. Debo preparar 1000 c.c. de disolucin al 1% (p/v) de sulfato cprico Qu peso de
reactivo del laboratorio deber tomar si en la etiqueta indica que es sulfato cprico pentahidrato del 90 % de riqueza en esta sal?
3. Hasta qu volumen tendra que diluir con agua 250 ml de disolucin de HCl 5 N para
que la concentracin de la nueva disolucin fuese 1 N?
a. Cuntos ml de agua deben aadirse a 250 ml de solucin, 3M de H2SO4 para obtener
otra 4 N?
4. Calcular el volumen de cido sulfrico de riqueza 96 % en peso y
necesita para preparar:
a. Un volumen de 500 ml de disolucin 0,1 N
b. Un volumen de 500 ml de disolucin de concentracin 40 gr/ l.

= 1,84 g / ml que se

5. Calcular la normalidad de la disolucin que se obtiene al mezclar 250 c.c. de disolucin


de hidrxido amnico 2N con 750 c.c. 0,04 N
6. Calcular la concentracin final de una disolucin que se prepara mezclando 100 ml de
HCl 1,5 N con:
a. Un volumen de 400 ml de agua
b. Un volumen de 400 ml de HCl 0,5 M
7. Si mezclamos 200 ml de cido sulfrico 3 N con 400 ml de disolucin 0,2 N del mismo
cido, cuntos ml de agua ser necesario aadir para que la disolucin resultante sea 0,1
N?
8. Preparar partiendo de un hidrxido amnico del 27% en amoniaco y una densidad de
0980 g/cc
a. 1000cc al 02% (p/v)
b. 100 cc 08N
c. 500 cc al 6%0 (p/v)
d. 250 cc con una concentracin de 45 g/l

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9. Se desea preparar 250 cc de cido ntrico al 4% (p/v) para ello se parte del reactivo comercial del 64 % de pureza y una densidad de 135 g/cc. Qu cantidad hay que tomar.
a. Que normalidad tiene la disolucin preparada
b. Que concentracin en g/l
10. Se pesa 55 g de un cromato niquloso del 95 % y cristalizado con 4 molculas de
agua, se disuelve y se afora a 250 cc.
a. Qu N tiene la disolucin preparada
b. Qu concentracin en g/l
11. Se desea preparar 500 cc de hidrxido brico 2 N. Por ello se parte del reactivo del 90
%. Qu cantidad hay que pesar.
a. Si a partir de la disolucin anterior se quiere preparar 1000 cc al 007 %0 .
b. Qu cantidad hay que tomar
12. Para preparar 500 cc de clorito clcico 15 N se parte del reactivo comercial cristalizado con 4 molculas de agua y una riqueza del 80 %
a. Qu cantidad hay que pesar
b. Si a partir de la disolucin anterior hay que preparar 500 cc con una concentracin de
002 g/l . qu cantidad hay que tomar
13. Se preparan 100 cc de cido clorhdrico disolviendo 10 cc del reactivo comercial del 34
% de pureza y un densidad de 116 g/cc.
a. que normalidad tiene la disolucin
b. que % (p/v)
14. Qu normalidad tiene una disolucin que se ha preparado disolviendo 2717 cc de un
cido sulfrico de una densidad 184 g/cc y una riqueza del 98% a un litro.
a. A que volumen habr que diluirse 815217 cc del sulfrico anterior para que la normalidad de la solucin sea 3.
15. Cuanto nitrato sdico se debe pesar para preparar 50 cc de una disolucin acuosa que
contenga 70 mg Na+ / cc
16. Calclese la masa de sulfato alumnico . 18 agua que se necesita para preparar 50 cc
de una disolucin acuosa de concentracin 40 ppm (p/v) Al+++
17. A que grado se debe diluir una solucin de 100 cc de cloruro brico 05 M para obtener
una concentracin 20 mg de Ba+2 / cc.
18. Se quiere preparar 80 cc de una disolucin que contenga 005 g de Mg +2 / cc. Calcular
el peso de sulfato de magnesio-agua (1/7) necesario.
19. Cuanto cloruro crmico agua (1/6) y del 98 % se necesitan para preparar 500 ml de
solucin que contenga 20 ppm (p/v) de Cr+3.
20. Cuantos gramos de carbonato sdico se necesitan para preparar 500 cc de disolucin
que contenga 100 mg de CO 3 2- /cc

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