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Anti-A1 Lectina

Tests en Tubo y Porta


Grupos sanguneos
Determinacin cualitativa del antgeno A1 en hemates humanos.
IVD

Conservar a 2 - 8C.

4. Resuspender cuidadosamente el botn celular y leer macroscpicamente


por aglutinacin.

El antgeno A1 es un subgrupo del grupo A y fue descubierto en 1910. Anti-A1


normalmente es no-reactivo a 37C, sin embargo ejemplos que reaccionan a 37C
y predominantemente IgM, pueden causar destruccin de los hemates in vivo.
Aproximadamente el 78% de la poblacin del grupo A es A1 y el 22% es A2. Para la
gente perteneciente al grupo AB se aplican proporciones similares.

B. Mtodo en Porta
1. Preparar una suspensin de hemates a testar al 35-45% en suero, plasma
o PBS.
2. Depositar en un porta identificado: 1 volumen del reactivo Anti- A1 y 1
volumen de la suspensin de hemates.
3. Utilizando un stik aplicador limpio, mezclar el reactivo y las clulas en una
rea de unos 20 x 40 mm.
4. Lentamente inclinar el porta de atrs a delante manteniendo el porta a
temperatura ambiente.
5. Leer macroscpicamente durante un periodo que no exceda los 30
segundos ya que despus de los 30 segundos algunas clulas de los grupos A2
y A2B pueden mostrar una dbil aglutinacin.
6. Cualquier reaccin dbil debe ser repetida con la tcnica en tubo.

REACTIVOS

INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS

PRINCIPIO DEL MTODO

Los reactivos provocan la aglutinacin directa de los hemates que contengan el


antgeno A1, despus de la centrifugacin. La ausencia de aglutinacin
generalmente es indicativo de la inexistencia del antgeno A1 (ver Limitaciones).
SIGNIFICADO CLNICO

El reactivo del grupo sanguneo Anti-A1 Lectina de Spinreact se prepara a partir de


un extracto de semillas Dolichos biflorus, diludo con una solucin de cloruro de
sodio que contiene albmina bovina. El reactivo es suministrado en la dilucin
ptima para su utilizacin en todas las tcnicas aqu recomendadas sin necesidad
de diluciones o adiciones suplementarias. Ver el lote y caducidad de cada
referencia en la etiqueta del vial.
PRECAUCIONES

1. El reactivo es slo para uso en diagnstico in vitro.


2. Si el vial del reactivo est roto o agrietado, descartar inmediatamente su
contenido.
3. No utilizar reactivos caducados. (ver la etiqueta de vial).
4. No utilizar reactivos que presenten precipitados.
5. La manipulacin del reactivo debe realizarse con la apropiada indumentaria de
proteccin, tales como guantes desechables y bata de laboratorio.
6. El reactivo ha sido filtrado a travs de cpsulas de 0.2 m para reducir la
carga biolgica. Una vez abierto el vial, el contenido debe permanecer viable hasta
la fecha de caducidad, siempre y cuando no haya una marcada turbidez la cual
podra ser indicativa de deterioracin o contaminacin del reactivo.
7. El reactivo contiene < 0.1% de azida sdica. La azida sdica puede ser txica,
si se ingiere y puede reaccionar con cobre o plomo de las tuberas y formar azidas
metlicas explosivas. En caso de eliminacin del producto, hacerlo con abundante
agua del grifo.
8. Ningn mtodo puede garantizar que los productos derivados de fuentes
humanas o animales estn libres de enfermedades infecciosas. Manipular y
desechar con precaucin los viales y su contenido.
9. Para mayor informacin sobre la eliminacin del producto o descontaminacin
en caso de derrame, ver las fichas de seguridad.

1. Positivo: La aglutinacin constituye un resultado positivo y dentro de las


limitaciones aceptadas para el procedimiento del test, indica la presencia del
antgeno A1 en los hemates testados.
2. Negativo: La ausencia de aglutinacin de hemates constituye un resultado
negativo y dentro de las limitaciones aceptadas para el procedimiento de la
tcnica, indica la ausencia del antgeno A1 en los hemates testados.
3. Discrepancias: Si no existe correlacin entre los resultados obtenidos en el
grupo directo y el grupo inverso, es preciso realizar ms pruebas
Estabilidad de las reacciones
1. Leer los tests realizados en tubos inmediatamente despus de la
centrifugacin. Los retrasos pueden suponer la disociacin de los complejos
antgeno-anticuerpo, causando falsos negativos o resultados positivos dbiles.
2. Los tests en porta deben ser interpretados en 30 segundos a fin de
asegurar la especificidad y evitar la posibilidad de que un resultado negativo sea
incorrectamente interpretado como positivo debido al secado del reactivo.
3. Los resultados, de tests realizados a otras temperaturas de las aqu
recomendadas, deben ser interpretados con cautela.
LIMITACIONES

1. Se recomienda la utilizacin de un control positivo (idealmente clulas del


grupo A1B) y un control negativo (clulas del grupo A2) para testar de forma
paralela en cada lote de tests. Los tests deben considerarse invlidos si los
controles no muestran los resultados esperados.
2. En las tcnicas aqu recomendadas un volumen es aproximadamente 40l
utilizando el gotero suministrado.
3. La utilizacin de los reactivos y la interpretacin de los resultados deben
llevarse a cabo por personal cualificado y formado de acuerdo a los requisitos del
pas dnde los reactivos estn siendo utilizados.
4. El usuario debe determinar la idoneidad de los reactivos para otras tcnicas.

1. Anti-A1 puede reaccionar con clulas Tn-poliaglutinables o Cad-positivas.


2. La sangre de los neonatos no puede ser tipada con precisin usando el
reactivo Anti-A1 Lectina ya que el antgeno A1 no est completamente
desarrollado en los hemates hasta los 6 meses de edad.
3. Antes de confirmar el grupo sanguneo ABO de individuos mayores de 6
meses, deberan confirmarse los resultados de su grupaje sanguneo ABO,
testando su suero o plasma frente a clulas conocidas del grupo A1 y B .
4. Muestras conservadas pueden dar reacciones ms dbiles que muestras
frescas.
5. Puede tambin ocurrir falsos resultados positivos o negativos debido a:
Contaminacin de los materiales del test.
Inadecuadas conservacin, concentracin celular, tiempo o temperatura de
incubacin.
Centrifugacin inapropiada o excesiva.
Introduccin de suero humano/globulinas gamma en el test.
6. El usuario es responsable del funcionamiento de los reactivos en cualquier
otro mtodo distinto de los mencionados como tcnicas aqu detalladas.
7. Cualquier desviacin de las tcnicas aqu recomendadas debera ser
validada antes de su utilizacin.

CONSERVACIN

CARACTERSTICAS DEL MTODO

No congelar. Los viales de reactivo deben ser conservados a 2-8C.


Almacenamientos prolongados, a temperaturas fuera de este rango, pueden
provocar una aceleracin de la prdida de reactividad. El reactivo seguir siendo
estable hasta 7 das si permanece a temperaturas que no excedan los 30C.

1. El reactivo ha sido caracterizado para todos los procedimientos aqu


mencionados.
2. Prviamente a su liberacin, cada lote de Anti-A1 Lectina de Spinreact es
testado a travs de las tcnicas recomendadas frente a un panel de hemates
antgenos-positivo, a fin de asegurar la adecuada reactividad.
3. El Control de Calidad del reactivo se llev a cabo utilizando hemates
lavados en PBS, previa utilizacin.
4. El reactivo cumple las recomendaciones de la ltima versin de las Guas
para los Servicios de transfusin de sangre del Reino Unido.

NOTAS

MATERIAL NECESARIO

Stick aplicador.
Portaobjetos de vidrio para el microscopio.
Tubos de vidrio (10 x 75 mm or 12 x 75 mm).
Visor de Rh.
Tampn fosfato salino (PBS): NaCl 0.9%, pH 7.0 0.2 at 22C 1C
Hemates control Positivos (grupo A1B) y negativos (grupo O) c.
Centrfuga de tubos.
Pipetas volumtricas.
MUESTRAS

th

1. Widman FK. Technical Manual, 9 Edition. American Association of Blood Banks, Arlington,
VA, 1985; Chapter 8
th

2. Race RR, Sanger R. Blood Groups in Man, 6 Edition. Blackwell Scientific, Oxford 1975;
Chapter 2
th

Sangre extrada con o sin anticoagulante. Si el tipado no se efecta de inmediato,


conservar las muestras a 2-8C. Las muestras de sangre en EDTA o citrato deben
ser tipadas en 48 horas. Las muestras recogidas en ACD, CPD or CPDA-1 pueden
ser testadas hasta 35 das desde su fecha de extraccin. Todas las muestras de
sangre deben ser lavadas con PBS al menos 2 veces antes de realizar el test.
PROCEDIMIENTO
A. Mtodo en tubo

1. Preparar una suspensin de hemates a testar lavados al 2-3% en PBS.


2. Aadir en un tubo identificado: 1 volumen de reactivo Anti- A1 y un volumen de
la suspensin de hemates.
3. Mezclar minuciosamente y centrifugar los tubos durante 20 segundos a 1000
rcf (g) o a una fuerza y tiempo alternativos adecuados.
GSIS03

BIBLIOGRAFA

Ed.2009

3. Mollison PL. Blood Transfusion in Clinical Medicine, 8 Edition. Blackwell Scientific, Oxford
1987; Chapter 7
rd

4. Issitt PD. Applied Blood Group Serology, 3 Edition. Montgomery Scientific, Miami 1985;
Chapter 6
5. Guidelines for the Blood Transfusion Service in the United Kingdom. H.M.S.O. Current
Edition.
6. British Committee for Standards in Haematology, Blood Transfusion Task Force.
Recommendations for evaluation, validation and implementation of new techniques for blood
grouping, antibody screening and cross matching. Transfusion Medicine, 1995, 5, 145-150.
PRESENTACIN

Anti- A1 Lectina

Ref.:1700010

5 mL

SPINREACT,S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN


Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99 e-mail: spinreact@spinreact.com