UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS

FACULTAD DE INGENIERA Y ARQUITECTURA

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE INGENIERA
AMBIENTAL
PROYECTO DE INVESTIGACIN
EVALUACIN DE LA DEGRADACIN DE COMPUESTOS
CARBOHIDRATADOS (ALMIDN) MEDIANTE ACTIVIDAD ENZIMTICA
CON FINES DE MITIGACIN AMBIENTAL, TARAPOTO 2014
PRESENTADO POR:
Armas Salinas Fredy Milton
Cotrina Valles Maria Elena
Fernndez Pezo Acelith
Grndez Valera Mary Magaly
Guerrero Paredes Peter
Loayza Chistama Fnix
Mora Prez Percy Juan
Rengifo Vsquez Hildebrando
Saldaa Prez Edinson Rene
Soriano Pinedo Marco Antonio
Vela Chvez Juan Ramn
CURSO:
Biotecnologa
CICLO:
VIII
PROFESOR:
Blgo. Henry G. Jave Concepcin
TARAPOTO PER
2014

NDICE
1.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ......................................................................... 4

1.1.

Descripcin de la realidad problemtica............................................................. 4

1.2.

Antecedentes Tericos relacionados con la Investigacin. ............................. 5

1.3.

Formulacin del Problema. ................................................................................... 7

1.3.1.

Problema Principal. ............................................................................................ 7

1.3.2.

Problema Especfico .......................................................................................... 7

1.4.

2.

3.

4.

5.

Delimitacin de la Investigacin........................................................................... 7

1.4.1.

Delimitacin social: ............................................................................................ 7

1.4.2.

Delimitacin Espacial......................................................................................... 7

1.4.3.

Delimitacin Temporal. ...................................................................................... 8

OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN. ...................................................................... 9

2.1.

Objetivo General. ................................................................................................... 9

2.2.

Objetivos Especficos. ........................................................................................... 9

JUSTIFICACIN, IMPORTANCIA Y LIMITACIONES DE LA INVESTIGACIN.

9
3.1.

Justificacin de la Investigacin........................................................................... 9

3.2.

Importancia de la Investigacin. ........................................................................ 10

3.3.

Limitaciones de la Investigacin. ....................................................................... 10

MARCO TERICO. ..................................................................................................... 10

4.1.

Antecedentes de la investigacin AUMENTAR ............................................... 10

4.2.

Marco Terico ....................................................................................................... 13

4.3.

Marco Conceptual ................................................................................................ 17

METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN .............................................................. 20

5.1.

Hiptesis de la Investigacin. ............................................................................. 20

Hiptesis General ............................................................................................................. 20

Hiptesis Especfica. ....................................................................................................... 20
5.2.
5.2.1.

Variables e Indicadores. ...................................................................................... 21

Variable independiente (X) ............................................................................. 21

5.2.2.
5.3.

Variable Dependiente (Y) ................................................................................ 21

Operacionalizacin de hiptesis, variables e indicadores. ............................ 22

Variable independiente (X): ........................................................................................ 22

Variable Dependiente (Y):........................................................................................... 22
5.4.

Tipo y Nivel de Investigacin .............................................................................. 23

5.4.1.

Tipo de la Investigacin................................................................................... 23

5.4.2.

Nivel de la Investigacin. ............................................................................... 23

5.5.

Mtodo y Diseo de la Investigacin ................................................................ 23

5.5.1.

Mtodo de la Investigacin ............................................................................. 23

5.5.2.

Diseo de la Investigacin. ............................................................................. 24

5.5.3.

Poblacin y Muestra ........................................................................................ 24

5.6.

Tcnicas, Instrumentos y Fuentes de Recoleccin de datos. ....................... 25

5.6.1.

Tcnicas. ........................................................................................................... 25

5.6.2.

Instrumentos ..................................................................................................... 25

5.6.3.

Fuentes .............................................................................................................. 26

Laboratorio de la Universidad Alas Peruanas. ............................................................ 26

5.7.

6.

Tcnicas de Procesamiento y Anlisis de Datos Recolectados. .................. 26

5.7.1.

Seleccin y Representacin por Variables. ................................................. 26

5.7.2.

Utilizacin del Procesador sistematizado Computarizado. ........................ 26

5.7.3.

Pruebas Estadsticas ....................................................................................... 26

CRONOGRAMA Y PRESUPUESTO ........................................................................ 26

6.1.

Cronograma .......................................................................................................... 26

6.2.

Presupuesto .......................................................................................................... 27

BIBLIOGRAFA ..................................................................................................................... 30
ANEXOS: ............................................................................................................................... 32

1.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1.

Descripcin de la realidad problemtica.

La tendencia actual y las altas exigencias ambientales han
impulsado el desarrollo de nuevas tcnicas. Actualmente, existe
un dficit general en torno al cuidado del ambiente a causa de
la carencia de investigacin, infraestructura y poca motivacin
para desarrollar empresas que basen sus fundamentos en el
progreso de este campo de la biotecnologa. Su desarrollo, as
como el de otras reas de la biotecnologa, est afectado por
problemas como la

tecnolgica con respecto a los pases

industrializados. Segn la firma internacional, Frost & Sullivan,

analistas dedicados al estudio de mercados mundiales, el
comercio de enzimas esta seccionado en distintos segmentos
dependiendo la industria y la aplicabilidad de estas. Segn el
estudio, para el ao 2003 se gener cerca de 142 millones de
dlares solo en la industria alimenticia siendo el sector ms
innovador el de la ingeniera gentica a partir de organismos
modificados, OGM. Con un 47.3%, las enzimas destinadas al
procesamiento del almidn (amilasas) y los azucares componen
el sector ms amplio en la industria.

Los problemas son cada vez mayores y se dificultan al

pasar los aos, por lo que se busca una alternativa eficaz y
amigable con el ambiente, por donde el uso y aplicacin de
enzimas para degradar materia orgnica es una alternativa, ya
que estas degradan compuestos acotando la energa de
activacin y la efectividad para el desdoblamiento y/o
degradacin de los compuestos de inters.

1.2.

Antecedentes Tericos relacionados con la Investigacin.

VILLADA W. (2010). DETERMINACIN EXPERIMENTAL DE
LAS CONDICIONES DE OPERACIN PARA EL PROCESO
DE HIDRLISIS ENZIMTICA DE ALMIDN DE YUCA
NATIVA DE LA REGIN AMAZNICA EN LA CIUDAD DE
LETICIA. En este trabajo se priorizaron tres variedades de
yuca por sus caractersticas fisicoqumicas. Mediante un diseo
completamente

al

azar

con

estructura

factorial

fueron

seleccionadas las mejores condiciones para llevar a cabo la

reaccin de hidrlisis enzimtica en cuanto a tipo de enzima a
emplear, orden de adicin de las enzimas y concentracin de
sustrato. La hidrlisis se realiz a temperaturas medias con las
enzimas en estado libre e inmovilizado. Para el biocatalizador
inmovilizado se emple un nuevo mtodo de atrapamiento de
tipo coraza-ncleo con alginato de calcio y material poroso. Los
resultados obtenidos indicaron que las variedades de yuca
Arpon, Arawana y Piririca presentaron la mayor potencialidad
para la produccin de azcares fermentables. Adicionalmente,
el par enzimtico GC626 ( amilasa) y GZYME480 Ethanol
(amiloglucosidasa) operado a 63C por 30 horas a un pH de 4.5
adicionadas

simultneamente

son

las

condiciones

ms

adecuadas para llevar a cabo el proceso. El estudio mostr que

la mayor produccin de azcares fue obtenida con la variedad
Arpn a una concentracin de sustrato (almidn crudo) de 28%
w/v con la enzima en estado libre. Por otro lado, los
biocatalizadores desarrollados con concentraciones de material
poroso del 3% para GC626 y 4% para GZYME480 obtuvieron
retenciones de actividad del 70% y 90% respectivamente,
lograron a su vez la mejor concentracin final de azcares

empleando la variedad Arpon como sustrato al 32% w/v.

CASTRO C.; NAVAS C.; CARO O.; y PIEROS Y. (2008).

Obtencin de amilasas fngicas a partir de Aspergillus sp.,
aislado de semillas de lentejas. Este proyecto se llev a
cabo en Bogot - Colombia y su objetivo fue aislar
microorganismos

productores

de

amilasas

para

producir

enzimas hidrolticas del almidn. El agente productor detectado

fue una cepa del genero Aspergillus sp. Quien fue aislado de
granos de lentejas. Este microorganismo fue llevado a medio
de cultivo en agar YPD bajo parmetros especficos de
incubacin. Luego de 18 das se realiz cambio de sustrato ha
salvado de trigo y se llev a cabo pruebas de Lugol, medicin
de actividad enzimtica y extraccin del complejo enzimtico.
Los resultados indican que las amilasas presentes en el
complejo enzimtico obtenido del cultivo de Aspergillus sp,
sobre salvado de trigo, fueron activas en el desdoblamiento de
la molcula de almidn a pH 5.0 y temperatura de 37C
demostrando su carcter dbilmente cido y su proveniencia
mesfila. El equivalente de dextrosa como medida cuantitativa
de la hidrlisis del polisacrido fue de 6.5, evidenciando la
capacidad enzimtica amiloltica del complejo enzimtico
obtenido. En este trabajo se confirm teora antes mencionada y
la capacidad de hongos del gnero Aspergillus sp., para la
produccin de amilasas.

Falta otro antecedente

1.3.

Formulacin del Problema.

1.3.1. Problema Principal.
Sera factible degradar compuestos carbohidratados
(almidn) mediante actividad enzimtica?

1.3.2. Problema Especfico

Cmo influir la temperatura y la aireacin en el
proceso

enzimtico

para

la

degradacin

de

compuestos carbohidratados?
Cul ser el porcentaje de degradacin de los
compuestos carbohidratados?
Cul

ser

la

importancia

ambiental

de

los

tratamientos enzimticos para solucionar problemas

de contaminantes ambientales por carbohidratos?

1.4.

Delimitacin de la Investigacin.
1.4.1. Delimitacin social:
La presente investigacin podra ser til en proyectos de
inters pblico a travs de escalamientos
previa

coordinacin

trabajadores

del

de

sector

directivos,
pblico

sucesivos

funcionarios
y/o

privado

y
de

saneamiento. Asimismo se considerara a expertos

acadmicos y experimentados profesionales.

1.4.2. Delimitacin Espacial.

La investigacin se realizar en el laboratorio de la
Universidad Alas Peruanas Filial Tarapoto. El mismo
que se ubica en el Jr. Martnez de Compagn 1056

Regin San Martn-Per.

Lugar

: Laboratorio de la Universidad Alas

Peruanas

Distrito

: Tarapoto

Provincia

: San Martn

Departamento

: San Martn

Longitud

: 6 29' 37"

Latitud

: 72 22' 03"

1.4.3. Delimitacin Temporal.

El presente trabajo de investigacin se desarrollara en un

tiempo estimado de cinco (05) meses, el mismo que

comprende desde el mes de agosto hasta diciembre.
2.

OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN.
2.1.

Objetivo General.

Evaluar la degradacin

de compuestos carbohidratados

utilizando un pool enzimtico.

2.2.

Objetivos Especficos.

Evaluar la temperatura y la aireacin en el proceso

enzimtico

para

la

degradacin

de

compuestos

carbohidratados.

Determinar el porcentaje de degradacin de degradacin de

los compuestos carbohidratados.

Evaluar la importancia ambiental de los tratamientos

enzimticos para solucionar problemas de contaminantes
ambientales por carbohidratos.

3.

JUSTIFICACIN, IMPORTANCIA Y

LIMITACIONES

DE LA

INVESTIGACIN.
3.1.

Justificacin de la Investigacin.
Con

este

proyecto

biotecnolgicas prcticas

se

busca

incorporar

soluciones

para la degradacin de materia

orgnica (almidn) utilizando enzimas. Bajo esta temtica se

permitir lograr avances en trminos de investigacin en el rea
ambiental.

La profundidad de esta investigacin radica en buscar en

que concentracin de medio o materia orgnica la enzima acta
ms rpido y eficaz de degradarlo, con el fin de mejorar el

desarrollo de este proceso.

3.2.

Importancia de la Investigacin.
La utilizacin de enzimas para la degradacin de materia
orgnica se est volviendo una alternativa para descontaminar
agua y suelo. Ya que esta tcnica es nueva e innovadora; estos
compuestos son naturales y no sintticos, adems pueden ser
utilizados a escala industrial para tratar aguas residuales u
otros.

3.3.

4.

Limitaciones de la Investigacin.

Limitada informacin publicada y disponible.

Escasos trabajos de investigacin realizados o publicados.

Limitada disponibilidad de las enzimas.

MARCO TERICO.
4.1.

Antecedentes de la investigacin AUMENTAR

S. MITIDIERI; A. SOUZA; A.SCHRANK; M. HENNING
(2005). Detergente con formulacin enzimtica de
amilasa obtenida de Aspergillus niger. Un estudio
comparativo en detergentes comerciales. El proyecto
manifiesta

una

problemtica

de

la

necesidad

de

compuestos naturales y eficaces para la industria de

detergentes. El presente artculo describe la produccin,
purificacin y parcial caracterizacin de un complejo de
amilasa producido por A. niger y uso potencial en
formulacin de detergentes. Se dise un cultivo con
distintos microorganismos a la espera de conocer el agente

10

que mejor resultados otorgar en cuanto a produccin de

amilasa se refiere. Se trabaj con medio APM usando
residuos industriales de protena de soya y almidn como
fuente de carbono adems de minerales. Se realizaron
ensayos analticos con pruebas de DNS, iodometra y
control de los parmetros de pH y temperatura. El extracto
obtenido del complejo enzimtico fue comparado en tres
formulaciones comerciales de detergentes para determinar
su actividad de limpieza en equipos de hospitales, ciruga y
endoscopia.

Los

resultados

indicaron

que

el

microorganismos con mejor performance en la produccin

de amilasa fue el Aspergillus niger con una produccin de
3.9 U/ml en medio sumergido y una actividad excelente de
degradacin de en el rango de 50-55C y un pH de 4.0.

J. Meneses, C. M. Corrales, M. Valencia (2007).

SNTESIS Y CARACTERIZACIN DE UN POLMERO
BIODEGRADABLE A PARTIR DEL ALMIDN DE YUCA.
En la presente investigacin se elabor un polmero
biodegradable a partir del almidn de yuca con base en la
implementacin

de

la

metodologa

Taguchi

como

herramienta de diseo de experimentos. El almidn dulce

de yuca se mezcl, variando las condiciones, segn lo
indicado por el diseo de experimentos, con reactivos que
cumplen

la

funcin

de

plastificantes,

extensores,

espesantes, lubricantes, humectantes y desmoldantes. Las

diferentes mezclas se sometieron a procesos comunes
para los polmeros convencionales en un molino abierto,
una inyectora y una prensa de vulcanizacin. El proceso

11

experimental
polimricas

arroj
con

como

resultado

caractersticas

seis

muestras

adecuadas,

que

se

sometieron a la medicin de sus propiedades fsicas,

qumicas, mecnicas y de biodegradabilidad.
M. SALAS; M. RODRIGUEZ; M. PEREZ; R. PEREZ
(2005).

Produccin

de

amilasas

por

medio

de

Aspergillus niger sumergidos en cultivos de aguas de

lavado de dos empresas alimentarias. El objeto de este
proyecto fue de analizar la produccin de enzimas amilasas
por cepas de Aspergillus niger en aguas de lavado de
industrias cerveceras y crnicas para determinar la
capacidad de produccin de proteasas, amilasa y de
depuracin de medio donde crecen. La metodologa
aplicada se bas en la creacin de un medio de cultivo de
aguas de lavado con aplicacin de nutrientes que mejoren
la adaptacin del agente. Se implement pruebas de
azucares, niveles de nitrgeno y fosforo y demanda
qumica de oxigeno (DQO). Se analizaron los parmetros
de produccin de enzima, pH, temperatura y concentracin
de iones. Los resultaron indican que los niveles de amilasa
y proteasa obtenidos son marcadamente dependientes de
la concentracin inicial de almidn en el medio de cultivo.
Las fuentes de nitrgeno (peptona, aminocidos y extracto
de levadura) fueron totalmente influyentes en la produccin
de enzimas. El pH ptimo encontrado fue de 4.95 en las
amilasas y la temperatura fue de 50C y 60C. Los niveles
de las dems cepas fueron muy inferiores al registrado
anteriormente.

12

4.2.

Marco Terico

ACTIVIDAD ENZIMATICA: Los enzimas son sustancias que

facilitan las reacciones qumicas. Sin embargo, a pesar de
que algunos radicales de los aminocidos que forman el
centro activo participan activamente en el proceso qumico,
en s un enzima no interviene en la reaccin qumica, sino
que solamente la favorece. En definitiva, cualquier reaccin
qumica catalizada por un enzima deber de producirse por
s

sola,

aunque

su

proceso

de

reaccin

sea

comparativamente muy lento. Es decir, que las reacciones

catalizadas enzimticamente son espontneas. Un enzima,
por tanto, lo que hace no es ms que acelerar la velocidad
de una reaccin qumica, de tal forma que sta se realiza de
forma prcticamente instantnea. La aceleracin de una
reaccin qumica por medio de un enzima se produce
gracias a la unin del sustrato susceptible de la reaccin con
el enzima determinado. Esta unin se produce mediante el
perfecto acoplamiento entre el sustrato y el centro activo del
enzima, formndose una estructura intermedia llamada
complejo enzima-sustrato, imprescindible para que pueda
llevarse a cabo la catlisis enzimtica. Durante la formacin
de este complejo tiene lugar la transformacin qumica del
sustrato, ayudada por los aminocidos catalticos presentes
en el centro activo. Aunque estos aminocidos suelen
transformarse en el transcurso de la reaccin, terminada
sta vuelven a su estado inicial. De esta forma, una vez
concluida la reaccin qumica, el sustrato se transforma en
el producto que, al no poseer una estructura complementaria

13

al centro activo, es liberado, regenerndose el enzima en su

forma inicial, dispuesta as para realizar de nuevo la misma
reaccin.

Los enzimas aceleran la velocidad de las reacciones

qumicas gracias a que bajan la energa de activacin de la
reaccin. Una determinada reaccin qumica se produce
cuando un cierto nmero de molculas de sustratos eleva su
energa interna hasta alcanzar un estado de transicin o
activado en el cual la transformacin qumica se produce y
el sustrato se transforma as en Enzimas.

La velocidad de la reaccin (medida en moles de

producto formado por unidad de tiempo) depender, por
tanto, del nmero de molculas de sustrato que alcanzan el
estado activado. El aumento de energa interna que debe
adquirir el sustrato para pasar a estado activado se conoce
como energa de activacin.

En condiciones normales, son pocas las molculas de

sustrato que adquieren la suficiente energa de activacin
como para alcanzar el estado activado, por lo que la
velocidad de la reaccin ser baja. Ahora bien, cuando el
sustrato se une al enzima, el complejo enzima-sustrato
necesita una energa

de activacin mucho menor. Y

entonces le ser mucho ms fcil al sustrato alcanzar el

estado de activacin, aumentando de esa forma el nmero
de molculas de sustrato que alcanzan dicho estado y, del
mismo modo, ser mayor la velocidad de la reaccin

14

qumica, al ser mayor el nmero de moles de producto

formados por unidad de tiempo.

Las reacciones catalizadas enzimticamente tienen

lugar a velocidades que son de 106 a 107 veces mayores
que las correspondientes reacciones no Catalizadas. Cuatro
son los factores principales que parecen contribuir al gran
incremento de velocidad producido por los enzimas:

El enzima puede fijar la molcula de sustrato de tal modo

que el enlace susceptible se halle muy prximo al grupo
cataltico del centro activo y orientado de tal forma con el
centro cataltico que el estado de transicin se alcance con
facilidad.

Algunos enzimas se pueden combinar con el sustrato para

formar un intermediario covalente inestable que reacciona
con ms facilidad para formar los productos. Este complejo
enzima-sustrato tiene una probabilidad elevada de alcanzar
el estado de transicin, y permite as que el sustrato halle un
paso Inferior a travs de la barrera de la energa de
activacin.

Al proporcionar grupos funcionales capaces de actuar como

dadores o aceptores de protones, el enzima puede efectuar
una catlisis general cida o Bsica, de tal modo que se
permiten as determinadas reacciones qumica que precisan
un pH muy cido o muy bsico en un ambiente general con
pH neutro Como es el interior celular.

15

El enzima puede inducir una tensin o una distorsin en el

enlace susceptible de la molcula de sustrato, determinando
que la ruptura del enlace sea ms fcil (P. Fernndez,
2010)

ORGANISMO GENTICAMENTE MODIFICADO (OGM) es

aquella planta, animal, hongo o bacteria a la que se le ha
agregado por ingeniera gentica uno o unos pocos genes
con el fin de producir protenas de inters industrial o bien
mejorar ciertos rasgos, como la resistencia a plagas, la
calidad nutricional, la tolerancia a heladas, entre otras
caractersticas. (Departamento

de

Agricultura,

Alimentacin y Accin Rural - 2008)

BIOTECNOLOGA: Es la serie de procesos industriales que

implican el uso de organismos vivos, bien sean plantas,
animales o microorganismos. La biotecnologa es la nueva
revolucin industrial. La idea que subyace en ella es
sencilla: por qu molestarse en fabricar un producto cuando
un microbio, un animal o una planta (los verdaderos
protagonistas de la biotecnologa) pueden hacerlo por
nosotros.

(BIOTECNOLOGA:

GENERALIDADES,

RIESGOS Y BENEFICIOS; Gloria Romero Vzquez 2008)

LA BIOTECNOLOGA: Utiliza clulas vivas o productos

sintetizados por stas, como las enzimas. Las clulas
pueden proceder de plantas o animales conocidos, o

16

pueden ser microorganismos como las levaduras o las

bacterias.

(PARTE

DESARROLLO

A.

LA

BIOTECNOLOGA:

aplicacin;

SU

http://www.bio-

nica.info/biblioteca/anonimnobiotecnologia.pdf

4.3.

Marco Conceptual

BIOCATALIZADORES: son sustancias que reducen la

cantidad de energa necesaria para que se pueda producir
una reaccin qumica en un ser vivo, tambin llamada
energa de activacin, acelerando la velocidad de reaccin.
No se alteran en el proceso. En los seres vivos, la energa
procede del ATP. Para economizar el consumo de ATP
existen estas sustancias llamadas
Los biocatalizadores actan de dos formas:

Fijndose al sustrato, de modo que debilita sus enlaces lo

cual facilita su ruptura.

Atrayendo hacia su superficie a los reactivos, lo cual facilita

su encuentro y por tanto la reaccin.

Los principales biocatalizadores son: enzimas, vitaminas,

hormonas y algunos oligoelementos (Fe, Cu, Zn, I, F,). (M.
GONZLEZ, 2010)

AMILASA: Es un enzima hidrolasa que tiene la funcin de

catalizar la reaccin de hidrlisis de los enlaces 1-4 del
componente
el almidn para

-Amilasa

al

digerir

formar azcares simples.

el glucgeno y
Se

produce

principalmente en las glndulas salivales (sobre todo en

las glndulas partidas) y en el pncreas. Tiene actividad
enzimtica a un pH de 7. Cuando una de estas glndulas se

17

inflama, como en la pancreatitis, aumenta la produccin de

amilasa

aparece

elevado

su

nivel

en sangre (amilasemia).falta autor

Falta hablar de la enzima beta -1,4

INHIBIDORES. Son aquellas sustancias que actan sobre

las enzimas disminuyendo o impidiendo su actuacin sobre
el sustrato. La inhibicin puede ser irreversible, cuando el
inhibidor, llamado en este caso veneno metablico, se une
covalentemente al enzima, alterando su estructura e
inutilizndola

de

forma

permanente

(los

insecticidas

organofosforados inhiben la acetilcolinesterasa, o el cianuro

a la citocromo oxidasa). ( Departamento de Biologa y
Geologa ; J. Molina - 2005)

EL ALMIDN: es el principal polisacrido de reserva de la

mayora de los vegetales, y la principal fuente de caloras de
la

mayora

de

la

Humanidad.

Es

importante

como

constituyente de los alimentos en los que est presente,

tanto desde el punto de vista nutricional como tecnolgico.
Gran parte de las propiedades de la harina y de los
productos de panadera y repostera pueden explicarse
conociendo el comportamiento del almidn.

Lo que llamamos almidn no es realmente un

polisacrido, sino la mezcla de dos, la amilosa y la
amilopectina. Ambos estn formados por unidades de
glucosa, en el caso de la amilosa unidas entre ellas por

18

enlaces a 1-4 lo que da lugar a una cadena lineal. En el

caso de la amilopectina, aparecen ramificaciones debidas a
enlaces a 1-6. (BIOQUIMICA DE ALIMENTOS; Miguel
calvo.
http://milksci.unizar.es/bioquimica/temas/azucares/almid
on.html

LAS ENZIMAS HIDROLTICAS: son un conjunto de

enzimas

del

almidn

(alfa-amilasa,

beta-amilasa,

glucoamilasa y enzimas desramificadoras) que catalizan la

degradacin del almidn. Existen amilasas de uso industrial
tanto de origen bacteriano como fngico. Las amilasas son
producidas a gran escala para su uso en la industria de la
alimentacin

de

la

produccin

de

combustibles.

(Bertoluzzo MG, Bertoluzzo SMR Taller de Fsica Subsuelo

Laboratorio Central- Facultad de Ciencias; Universidad
Nacional

de

Rosario.

file:///C:/Users/Mariele/Downloads/Bertoluzzo_Producci
%C3%B3n_de_enzimas.pdf )

LAS PROTEASA:

son enzimas que

peptdicos de

rompen

los enlaces

las protenas.

Usan

una molcula de agua para hacerlo y por lo tanto se

clasifican como hidrolasas. Las proteasas actan rompiendo
los

enlaces

peptdicos

de

las protenas para

liberar

los aminocidos. Pueden romper todas las protenas a

menos que sean parte de una clula viva. Hay diferentes
tipos de proteasas para el tipo de enlace peptdico que
necesita ser analizado. Por ejemplo, hay proteasas fngicas,

19

pepsina y papana, las cuales realizan diferentes funciones.

Sin embargo, algunos organismos, como los virus, se
cubren con un escudo de protenas, lo que obliga al cuerpo
a utilizar grandes cantidades de proteasas para atacar el
escudo antes de que su sistema inmunolgico pueda matar
el

virus.(MEDIFARMA

S.A.

HTTP://WWW.ECURED.CU/INDEX.PHP/PROTEASA )

5.

METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN
5.1.

Hiptesis de la Investigacin.
Hiptesis General

El pool enzimtico degradar al compuesto carbohidratado.

Hiptesis Especfica.

Mediante la utilizacin de un sistema aireado, un sistema

controlado a temperatura de 37 C y otro sistema control, se
determinara

la

influencia

de

estas

variables

en

la

degradacin del compuesto carbohidratados.

Mediante un proceso comparativo teniendo como referencia

un sistema patrn se determinara el porcentaje de
degradacin de los compuestos de carbohidratados.

Mediante el proceso metodolgico se determinara la

importancia ambiental de los tratamientos enzimticos para
solucionar problemas de contaminantes ambientales por

20

carbohidratos.

5.2.

Variables e Indicadores.
5.2.1. Variable independiente (X)

Actividad enzimtica.

5.2.2. Variable Dependiente (Y)

Degradacin

del

almidn

y/o

compuestos

carbohidratados.

21

5.3.

Operacionalizacin de hiptesis, variables e indicadores.

VARIABLE

Hiptesis General.
- Mediantes
la
accin
enzimtica y teniendo en
cuenta las variables ms
relevantes
se
lograr
degradar a los compuestos
de carbohidrato.
Hiptesis Especfica.
- Segn el origen y/o
procedencia
del
pool
enzimtico se debern
tener en cuenta las
variables a monitorear.
- Mediante
un
proceso
comparativo
teniendo
como
referencia
un
sistema
patrn
se
determinara el porcentaje
de degradacin de los
compuestos
de
carbohidratados.

DEFINICIN
CONCEPTUAL
Variable
independiente
(X):
Actividad
enzimtica
Variable
Dependiente (Y):
- Degradacin de
materia orgnica.

DEFINICIN
OPERACIONAL
Desarrollo
del
pool enzimtico
en las diferentes
concentraciones
de compuestos
carbohidratados.

INDICADOR

ESCALA

5.4.

Tipo y Nivel de Investigacin

5.4.1. Tipo de la Investigacin.
Aplicativo - Experimental.

5.4.2. Nivel de la Investigacin.

Cuantitativa

5.5.

Mtodo y Diseo de la Investigacin

5.5.1. Mtodo de la Investigacin
Se desarrollara en etapas y esto consiste en:
ETAPA 1: Etapa de gabinete inicial

Coordinacin con el laboratorio, revisin bibliogrfica,

obtencin del carbohidrato (almidn qumicamente puro),
revelador (cristal de yodo) y pool enzimtico.

ETAPA 2: Etapa de laboratorio

Evaluacin

de

la

degradacin

de

compuestos

de

carbohidratados (Almidn Qumicamente Puro) mediante

actividad enzimtica desarrollado en el sistema:

Sistema:
Patrn 01 (agua destilada ms almidn), volumen de 200
ml y pH 7 0,5 (estabilizado con buffer 7).
Patrn 02 (agua destilada, almidn y pool enzimtico),
volumen de 200 ml y pH 7 0,5 (estabilizado con buffer
7).
Evaluacin

01

(agua

destilada,

almidn

pool

enzimtico), volumen de 200 ml y pH 7 0,5

23

(estabilizado con buffer 7) mas aireacin y temperatura

ambiental.
Evaluacin

02

(agua

destilada,

almidn

pool

enzimtico), volumen de 200 ml y pH 7 0,5

(estabilizado con buffer 7) y temperatura constante a
37C.
Evaluacin

01

(agua

destilada,

almidn

pool

enzimtico), volumen de 200 ml y pH 7 0,5

(estabilizado con buffer 7) ms aireacin y temperatura
constante a 37C.
NOTA:

Los

tres

sistemas

sern

monitoreados

constantemente (cada 5 minutos).

Transcurrido un tiempo prudencial se evaluara la
actividad enzimtica utilizando como revelador a una
solucin

de

yodo

con

lectura

directa

en

espectrofotmetro (xxxx nm).

ETAPA 3: Etapa de gabinete final.

Interpretacin de resultados.

Presentacin del informe.

5.5.2. Diseo de la Investigacin.

Mediante la propuesta de los objetivos ya establecidos se
realizaran los pasos a seguir para formar una metodologa
ordenada.

5.5.3. Poblacin y Muestra

Poblacin: Todos los compuestos carbohidratados.

Muestra: ..

24

5.6.

Tcnicas, Instrumentos y Fuentes de Recoleccin de datos.

5.6.1. Tcnicas.

Software ArGis 2014 10.2

Revisin de libros virtuales referente al tema.

Se utiliz el internet, para la bsqueda de pginas

relacionada al tema.

5.6.2. Instrumentos

Cmara fotogrfica

LAPTOP

Impresora.

Materiales de Laboratorio

Cristal de Yodo

Agua destilada

Almidn

Pipeta

Tubo de Ensayo tapa rosca

Espectrofotmetro

Balanza analtica

Vaso precipitado

Varilla de vidrio

Azul de metileno

Materiales de Oficina

Papel bond A-4

Papel bulki

Lapiceros

25

Lpices

Computadora

USB

CD

5.6.3. Fuentes
Laboratorio de la Universidad Alas Peruanas.
5.7.

Tcnicas de Procesamiento y Anlisis de Datos Recolectados.

Seleccin y Representacin por Variables.

La seleccin de datos para ser procesado se ha considerado
mediante las variables independientes y dependientes para
contribuir a

mejorar la informacin sobre la presente

investigacin.

Utilizacin del Procesador sistematizado Computarizado.

Para la utilizacin del presente trabajo se utilizar lo siguiente
procesar datos de campo obtenidos:

Software office 2010 (Excel, Word, etc.).

5.7.1. Pruebas Estadsticas

La presente investigacin con respecto a

las pruebas

estadsticas se desarrollar con grficos de barras segn se

adece a los resultados obtenidos.
6.

CRONOGRAMA Y PRESUPUESTO
6.1.

Cronograma

ACTIVIDADES

MESES 2014

26

Agosto

Setiembre

Octubre

Noviembre Diciembre

Revisin Bibliogrfica

Elaboracin del perfil

del proyecto

Aprobacin de proyecto

Desarrollo y evaluacin
del proyecto

Sustentacin
proyecto

del

Fuente: Propia 2014

6.2.

Presupuesto

PRESUPUESTO DEL PROYECTO

ITEM

JUSTIFICACION

2.3.1 5
MATERIALES
2.3.1 5.1 DE OFICINA
LAPICERO
LIBRETA DE CAMPO
MARCADORES

Unidad
de
Medida

Unidad
Unidad
Unidad

Costo
Costo
Unitario
Parcial
Cantidad
S/.
S/.

10
2
2

42

74.5

2
4
3.5

20
8
7

27

2.3.2 2.4

2.3.2 2.4
4

2.3
2.3.1

2 . 3 . 1
1

2.3.1 3

2.3.1 3.1

2.3.2 2

2.3.2 2.1

INDELEBLES
PAPEL BOND A4
SOBRE MANILLA A4
MEMORIA
USB
Kingston 4gb
SERVICIOS
DEPUBLICIDAD,
IMPRESIONES,
DIFUCION E IMAGEN
INSTITUCIONAL
SERVICIO
DE
IMPRESIONES
DE
ENCUADERNACION Y
EMPASTADO.
IMPRESIN
ANILLADO
BIENES Y SERVICIOS
COMPRA DE BIENES
CAMARA
DIGITAL
samsung
LAPTOP TOSHIBA
ALIMENTOS
Y
BEBIDAS
COMIDA
COMBUSTIBLES,
CARBURANTES,
LUBRICANTES
Y
AFINES
COMBUSTIBLES,
CARBURANTES,
LUBRICANTES
Y
AFINES
GASOLINA
SERVICION
BASICOS,
COMUNICACIONES,
PUBLICIDAD
Y
DIFUCION
SERVICIOS
DE
ENERGIA

Paquete 1
Unidad 20

13
0.5

13
10

Unidad

16.5

16.5

3.6

24

0.1
3.5

10
14

Ciento
100
Volumen 4

2330.00 2330
Unidad

430

430

Unidad

1900

1900

10

600.00

10

600

15.30

153

15.3

153

6.00

720

diario

60

Galones 10

28

ELECTRICA, AGUA Y
GAS
SERVICIO
DE
SUMINISTRO
DE Horas
ENERGIA ELECTRICA
SERVICIO DE AGUA
Dia
SERVICIO
DE
2.3.2 2.2 TELEFONIA
E
INTERNET
SERVICIO
DE
horas
INTERNET
SUMINISTROS
2.3.1 8
MEDICO
MARTERIALES,
INSUMOS,
INSTRUMENTAL
Y
ACCESORIOS
2.3.1 8.2
MEDICOS,
QUIRURGICOS
ODONTOLOGIGOS Y
DE LABORATORIO
MARTERIALES,
INSUMOS,
INSTRUMENTAL
Y
2.3.1 8.2 ACCESORIOS
MEDICOS,
1
QUIRURGICOS
ODONTOLOGIGOS Y
DE LABORATORIO
TOTAL

120

240

120

480
120

120

120

3 800

7
799.50

PRESUPUESTO
7 799.50 S/.
TOTAL
IMPREVISTOS
38.90 S/.
5%
TOTAL
7838.4 S/.

29

BIBLIOGRAFA
- http://www.bdigital.unal.edu.co/3882/1/293752.2010.pdf
- http://revista.eia.edu.co/articulos8/Art.5.pdf
- http://QUIMICA.LAGUIA2000.COM/CONCEPTOSBASICOS/BI
OCATALIZADOR#IXZZ3DDUGB0O6)
- http://www.rincondelasciencias.com

30

31

ANEXOS:

MATRIZ DE CONSISTENCIA
TITULO

PROBLEMA

OBJETIVOS

OPERALIZACION

HIPOTESIS
VARIABLE

Problema
General

Objetivo
General

Hiptesis
General

Degradacin
de compuestos
carbohidratados
Sera factible
(almidn)
degradar
Mediantes
la
mediante
compuestos
Degradar
accin
actividad
compuestos
enzimtica y
enzimtica con carbohidratados
(almidn)
carbohidratados teniendo en
fines de
mediante
enfrentndolos
cuenta las
mitigacin
actividad
con
un
pool
variables
ms
ambienta,
enzimtica
con
enzimtico
con
relevantes
se
Tarapoto 2014
fines de
fines de
lograr
mitigacin
mitigacin
degradar a los
ambiental,
ambiental.
compuestos
Tarapoto
de
2014?
carbohidrato.

Independiente
(X)

Actividad
enzimtica
Dependiente
(Y)

Degradacin
de materia
orgnica.

DIMENSION

METODO

INDICADOR

1.-Tipo de la
Investigacin.
Desarrollo del
pool enzimtico
Ambiental,
en las
Aplicativo - Experimental.
educativo y
diferentes
cultural.
concentraciones
de compuestos
2.- Diseo de la
carbohidratados
Investigacin.
Mediante la propuesta de
los objetivos ya
establecidos se realizaran
los pasos a seguir para
formar una metodologa
ordenada
3.- Poblacin

Pool
enzimtico
4.- Muestra

Compuestos
Carbohidratados.

Problema
Objetivos
Especfico
Especficos.
a) Qu
a) Determinar las
variables de
variables que se
deben tener en
deben tener en
cuenta en el
cuenta en el
proceso
proceso
enzimtico para enzimtico para la
la degradacin
degradacin de
de compuestos
compuestos
carbohidratados? carbohidratados.

Hiptesis
Especifica

5.- Tcnicas

a) - Segn el
origen y/o
procedencia del
pool enzimtico
se debern tener
en cuenta las
variables a
monitorear.

Software ArGis
2014
Revisin de libros
virtuales referente al
tema.
Se utiliz el internet,
para la bsqueda de
pginas relacionada

b) - Mediante un
proceso
comparativo
b) Determinar el
teniendo como
b) Cul ser el
porcentaje de
referencia un
porcentaje de
degradacin de
sistema patrn se
degradacin de
degradacin de los determinara el
los compuestos
compuestos
porcentaje de
carbohidratados?
carbohidratados.
degradacin de
los compuestos
de
carbohidratados.
c) Cul ser la
importancia
ambiental de los
tratamientos
enzimticos para
solucionar
problemas de
contaminantes
ambientales por
carbohidratos?

c) - Evaluar la
importancia
ambiental de los
tratamientos
enzimticos para
solucionar
problemas de
contaminantes
ambientales por
carbohidratos.

c) - Mediante el
proceso
metodolgico se
determinara la
importancia
ambiental de los
tratamientos
enzimticos para
solucionar
problemas de
contaminantes
ambientales por
carbohidratos.

al tema.