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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PER

Facultad De Ciencias Aplicadas Tarma


Escuela de ingeniera agroindustrial

Reporte
CULTIO IN VITRO DE PLANTAS (SEMILLAS)

Ejecutores:
ALVARO ALANIA, Katherine
EGOAVIL PECHO, Jess
HIDALGO ORTIZ, Annie
MICHO IMAA, Nathaly
VELIZ ESPIRITU, Jercy

Facilitado:
Ing. GRETA HINOSTROZA QUIONEZ

Semestre:

IX

Tarma, JULIO del 2014

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PER FACULTAD DE CIENCIAS


APLICADAS - TARMA
REPORTE N002- RSLP/BIOTEC/AIT/FACAP-UNCP-2014
DIRIGIDO A:

ING. GRETA HINOSTROZA QUIONES


RESPONSABLE DEL CURSO

DE:

ALVARO ALANIA, Katherine


EGOAVIL PECHO, Jess
HIDALGO ORTIZ, Annie
MICHO IMAA, Nathaly
VELIZ ESPIRITU, Jercy
RESPONSABLES DE EJECUCIN DE LA PRCTICA

ASUNTO:

CULTIVO IN VITRO DE PLANTAS (SEMILLAS)

FECHA:

24 de julio del 2014

Me es grato dirigirme a Ud. para saludarla cordialmente y a la es informarle sobre


los resultados obtenidos en l prctica de cultivo in vitro de plantas (semilla),
obteniendo como resultado los siguientes datos:
a. Para realizar el cultivo in vitro de plantas se dispuso con diversos tipos de
semilla de cereales (trigo, cebada, quinua y arveja) las semillas que se
extrajeron se encontraban esterilizadas, pero las semillas aisladas si hay
que esterilizarlas.
b. Se tuvo el vaso con alcohol se remojo por 10 seg inmediatamente se
enjuago con abundante agua esterilizada para iniciar la siembra.
c. PROCEDIMIENTO DEL CULTIVO IN VITRO

Se procedi a preparar el agar :


cloruro de calcio 0.083gr
sulfato de cobre 0.0025gr
sulfato de manganeso 0.223 gr
cido borico 0.62gr

En medio estril se procedi al sembrado de las semillas


SIEMBRA E INCUBACIN DE LAS SEMILLAS

a. En un medio estril se toma de un aso las semillas que previamente


han sido seleccionadas desinfectadas en medio knop o MS
b. Con el uso de un asa de siembra se coloc de 1 a 2 semillas en cada
tubo de ensayo procurando que queden separadas y en contacto con
el medio de cultivo
c. Las muestras ya sembradas, se sometieron a incubacin
temperatura de 24 a 26C

d. Se observ por un periodo de 10 das el desarrollo de las semillas:


Observando que algunas de las muestras se contaminaron con
aspergillus nigger, los cuales eran desinfectados y esterilizados
continuamente.
e. Las muestras de semillas sembradas germinaron mas no se obtuvo la
aparicin de una plntula, ya que algunos factores influyeron tales
como la conservacin de los insumos de la preparacin del agar y la
propagacin de contaminantes de otras muestras.

CUESTIONARIO
Qu pasa si las semillas se deja mas tiempo en etanol?
Por otra parte el etanol acta desnaturalizando las protenas, disolviendo
las capas lipdicas y como agente deshidratante, es letal para bacterias
apero irregular para hongos y virus, no acta sobre las esporas; al
combinarlo con antispticos de otro grupo tiene una mayor accin germicida
(Mateos, 2004; UCh, 2004).

Menciona 3 puntos crticos para la germinacin de semillas


1. La desinfeccin de semillas si este proceso no es correctamente
realizado las semillas se contaminaran de forma bacteriana o fngica.
2. La incubacin es otro punto crtico puesto que si no se encuentra en
constante observacin y control los tubos contaminados producirn que
las muestras en buen estado sean propensas a la contaminacin.

3. si no se procura que el medio sea estril o adecuado, la temperatura e


iluminacin correcta influir en resultado del cultivo deseado.

Por qu algunas semillas requieren de la oscuridad para germinar?


qu tipo de tratamiento luminoso requieren algunas semillas para
poder germinar?
La intensidad de la luz, el fotoperiodo y la cantidad de rojo en relacin
con el rojo lejano presente (denominada relacin R:RL) modulan la
respuesta de las semillas a la luz a travs de este pigmento. La
cantidad de fitocromo activo presente en una semilla en el momento de
su liberacin determina si sta puede germinar en la oscuridad o si
requerir luz para iniciar el proceso.

DISCUSIONES:
El tratamiento que involucra sumergir la semilla en etanol y mantenerla
en agitacin durante 24 horas dio buenos resultados en este trabajo. En
detergente tambin ha sido eficaz en Trigo(Dumroese etal., 1988) y en
cebada, reduciendo significativamente los niveles de Fusarium (James
y Genz, 1981), en especies no forestales como el gnero Tillandsia se
han obtenido resultados favorables (Slack, 2003). La desinfeccin de
semilla de arroz ante la bacteria Burkholderia vietnamiensis tuvo
buenos resultados cuando se combin Perxido de Hidrgeno (10%)
por 10 minutos con hipoclorito de calcio (1%) por una hora (Mich y
Balandreau, 2001) Dandonos a conocer otros mtodos de desinfeccin
puesto que en el procevso de nuestra experimentacin los resultados
obtenidos no fueron tan favorables.
Para otras especies como Agave fue efectivo sumergir en etanol al
70% por 30 segundos e inmersas por 10 minutos en hipoclorito de sodio
comercial al 50% (concentracin final de 3% de hipoclorito de sodio)
(Santacruz et al., 1999); semilla de Agave victoriae-reginae se
desinfectaron al estar en etanol al 70% (v/v) por 1 minuto y agitadas
despus en hipoclorito de sodio domstico (1.2% v/v NaClO) por 20

minutos (Martnez et al., 2003), en Tagetes erecta las semillas fueron


desinfectadas con etanol completo, etanol al 70% por 5 minutos,
hipoclorito de sodio al 2% por 15 minutos (Venegas et al., 2002). Para
semillas de Lilium x formolongi se esterilizaron con hipoclorito de sodio
al 1% (p/v) por 10 minutos (Shimasaki y Fukumoto, 2000). Lo que nos
ofrece mas variados para experimentas nuestras muestras, que nos
den un resultado mas asertivo ya que en el tiempo experimentado y en
las concentraciones indicadas no se lograron los resultados requeridos.
Segn Fernandez, 2001, nos dice que la metodologa se representa
por la preparacin del medio de cultivo, la desinfeccin de la semilla, la
siembra e incubacin de las semillas, lo que tambin concuerda con
nuestra experimentacin, aunque con diferentes parmetros y distintas
muestras.