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ANALISIS FISICOQUIMICO Y MICROBIOLOGICO DE MEDICAMENTOS

INFORME N 2
PRESENTADO POR
ANNY JAIMES
JANETH ZUIGA
MARCELA LADINO
DIANA CARRILLO
UNIVERSIDAD DE CIENCIAS APLICADAS UDCA
BOGOTA, MAYO 25 DE 201
OBJETIVOS
Determinar la sensibilidad o resistencia de la Gentamicina (antibitico) frente al
Staphylococcus epidermidis (microorganismo)
Medir los halos de inhibicin para hallar mm corregidos y Log de la concentracin corregida
Conocer y analizar el procedimiento para la realizacin de la valoracin microbiolgica de
antibitico mediante el mtodo de cilindro en placa establecido en la U!"
#nterpretar los res$ltados obtenidos l$ego de la realizacin del mtodo"
Diferenciar e interpretar la formacin de halos presentes en la m$estra"
Comprobar si la m$estra (G%&'(M#C#&() analizada c$mple o no c$mple con las
especificaciones establecido en la U!"
METODOLOGIA
R!"#$%"& '(" )*( +",&!- con potencia de )*+ mcg,mg
R!"#$%"& ,$#'.$/(- $na m$estra de gentamicina inyectable con concentracin de *-mg,ml
E( '( "0"& TSA- hacer perforaciones en forma circ$lar e.$idistantes con $n cilindro
R!1!2$&- %ste proceso en ) ca/as de petri con agar '(
S! '2$#$%"&"(- 0 ca/as de petri para la m$estra y 0 para el %st1ndar
E( #3) .4&.'#3) .&!",3)- agregar m$estra %st1ndar seg2n3
15 ."6"30 circ$los para m$estra y 0 para est1ndar
N3 1'!,!(3.$edar seg$idos los vertidos de est1ndar4m$estra"estandar0""
25."6"- 0 circ$los para m$estra y 0 para est1ndar0
5."6"- 0 circ$los para m$estra y 0 para est1ndar 0
75."6"- 0 circ$los para est1ndar * y 0 para est1ndar 0
55."6"- 0 circ$los para est1ndar * y 0 para est1ndar 0
85."6"- 0 circ$los para est1ndar * y 0 para est1ndar
INCUBAR
Con ay$da de $n pie de rey o regla4 mido los halos .$e se generaron alrededor del cilindro

5ecopilo datos
R!"#$%3 #3) .9#.'#3)
SIEMBRA : METODO EN CILINDRO ; PLACA
Gelificar
C(6( D%
!%'5#
Colocar
cilindros
Llenar los
cilindros con las
respectivas
dil$ciones
5etirar cilindros y
registrar los
di1metros de los
halos de inhibicin"
5ealizar c1lc$los y
determinar la
potencia
!ara realizar las dil$ciones de los est1ndares se procedi as73
G!(2"+$.$("
*-mg,8ml (9:*mg,9--ml)

'omar 9ml de Gentamicina

Llevar a :- ml en $n baln aforado para $na concentracin de 9mg,ml

'omar al7c$otas de

9 8 0 * :
-4:ml 84:ml 9-ml 8ml :ml

8:ml :-ml 9--ml 9-ml 9-ml


8-mcg,ml :-mcg,ml 9--mcg,ml 8--mcg,ml :--mcg,ml
94:*mg 9ml
; 9--ml ; <9:*mg
S3 [100 mcg/mlL]
potencia muestra 40 mg/mL
9mg 9--mcg ;< *-"---mcg s,n madre
*-mg ;
=i< (9---mcg ,8:ml) , ( *-"---mcg,ml) < -4)8: ml 8:ml
:ml :-ml
=93 v1= 100 mcg/mL* 50 mL
9---mcg,ml
< :ml
S#( S23.< =M'!)2&">
-4)8:mg,ml

llevar a 8:ml

tomar :ml

Llevar a :-ml para $na concentracin de 9--mcg,ml
C"#.'#3-
C9 ; =9 < C8 ; =8
9--mcg,ml ;> < 9---mcg,ml ; :-ml
(9--mcg,ml ; :-m)l , (9---mcg,ml) < :ml

S*EST?NDAR
,& %'(&D(5 aco 9-ml Lo llevo a 9--ml
ol$cin b$ffer
DISCUSI@N DE RESULTADOS
Staphylococcus epidermidis
%s $na especie bacteriana del gnero Staphylococcus4 consistente en cocos Gram?positivos
arreglados en gr$pos4 se presenta frec$entemente en la piel de h$manos y de animales y en
membranas m$cosas
Caracter7sticas
? %s la ca$sa menos com2n en infecciones oport$nistas"
? $ crecimiento no prod$ce hemolisis"
? &o fermenta manitol"
? &o es pigmentado"
? Coag$lasa negativo"
? C$ando se siembra con (gar McCon@ey res$lta $n gr$po A hemol7tica
G Gentamicina
inyectable
*-mg,ml
ol$cin b$ffer
8: ml B9
mcg,mlC
ANTIBIOGRAMA
FENOTIPOS Y MECANISMO DE ACCION A ANTIBIOTICOS EN STAPHYLOCOCCUS
%l antibitico $tilizado para la inhibicin en el laboratorio f$e la gentamicina .$e es $n
antibitico aminogl$csido de amplio espectro" on bactericidas .$e act2an a nivel de
ribosomas en el s$b$nidad 0- bacteriana4 y por ende4 a nivel de s7ntesis de prote7nas4
creando porosidades en la membrana e;terna de la pared cel$lar bacteriana" 'ienen actividad
especialmente en contra de bacterias Gram negativas y aerbicas y act2an sinerg7sticamente
en contra de organismos Gram positivos"
eg2n la literat$ra la gentamicina no ser7a el antibitico de primera eleccin p$esto .$e esta es
indicado especialmente para bacterias Gram negativas y no es el caso del el taphylococc$s
epidermidis p$esto .$e se trata cocos Gram positivos4 seg2n el antibiograma el taphylococc$s
epidermidis no tiene de forma nat$ral $n mecanismo intr7nseco de resistencia de ba/o nivel" %l
fenotipo sensible es el m1s frec$ente para gentamicina solo se presenta $n tipo resistencia
significativa .$e es la inactivacin enzim1tica (((CB)D)?( ! E B 8D DC )4 siendo esta $na de las
posibles ca$sas por la .$e se presentara la formacin de halos inhibitorios esperados"
%;iste $n posible factor .$e p$ede impedir la m$erte de el microorganismo en el medio de
c$ltivo y por ende la formacin de halos de inhibicin es .$e el taphylococc$s epidermidis
tiene $n patognesis partic$larF !oseen $na capa e;terna de polisac1ridos .$e se adhieren
firmemente al pl1stico (en este caso a el fondo del pl1stico de la ca/a de c$ltivo o a s$ tapa)4 lo
.$e tambin contrib$ye a impedir la penetracin de los antibiticos dific$ltando el tratamiento"
Como se obt$vo el res$ltado esperado en la disol$cin 0 se p$ede determinar la efectividad
del antibitico ante el microorganismo" Los c$ltivos 94 8 4 * y :" por lo .$e se genero la
inhibicin adec$ada"
CONCLUSIONES
Los halos que se obtuvieron se clasifca como
intermedio !a que la bacteria se inhibe a
concentraciones normales "ero "uede
inhibirse a concentraciones m#s altas sin
resultar to$ica "ara el hu%s"ed&
e obt$vo conciencia de la importancia de la higiene y el c$idado en la
manip$lacin de materiales biolgicos"
!ara lograr la valoracin acertada de $n antibitico se deben tener en c$enta $na
seria de factores como sonF el medio de c$ltivo4 la temperat$ra4 el tiempo de
inc$bacin y la seleccin del microorganismo" Una alteracin de estos factores
p$ede inhibir la accin del antibitico en este caso la gentamicina"
Con este procedimiento se estandarizo e implemento el proceso anal7tico para la
debida determinacin de potencia microbiolgica de Gentamicina" !ara esto se
analizaron diferentes m$estras provenientes del prod$cto4 almacenadas" %l
mtodo .$e se $tilizo f$e el de cilindro en placa con el debido proceso .$e
encontramos en la U!"
e presentaron halos de inhibicin4 tal vez no f$eron los esperados para poder
registrar alg$nos .$edaron m$y cerca de la ca/a de petri y no se p$do garantizar
ptimos res$ltados"
e debe tener en c$enta .$e en el momento de traba/ar en el laboratorio se debe
tener $na adec$ada $tilizacin y contar con todas las normas ya .$e c$al.$ier
inconveniente .$e se tenga en el proceso y en los c1lc$los nos p$ede afectar las
pr$ebas dando res$ltados inesperados"
La tcnica indicada .$e se re.$iere para la valoracin de antibiticos4 por el
mtodo de cilindro en placa no es m$y complicada4 se re.$iere de especial
c$idado en la preparacin de las dil$ciones4 p$es $n a$mento o dismin$cin de la
concentracin p$ede inhibir la formacin del halo"
%ste tipo de pr1cticas las debemos realizar en $n adec$ado ambiente como lo es
la cabina de fl$/o laminar en donde se garantiza esterilidad del ambiente y donde
se eliminan interferencias y contaminacin cr$zada .$e p$eda interferir con el
desarrollo normal de a practica y por ende de s$s res$ltados"
BIBLIOGRAFAA
Garmacopea U! 0:
CERTIFICADO DE ANAISIS MICROBIOLOGICO
(n1lisis olicitado
(ntibiograma
(n1lisis &$mero
8-90?-:?8:
!rod$cto,Materia
!rima
Gentamicina
Gecha de
5ecepcin 8:,-:,8-90
Lote &o ???? Gecha de (n1lisis 8:,-:,8-90
!resentacin
Comercial
(mpolla *-mg,8ml
!otencia calc$lada de +-
H y 98:H seg2n $sp 0: Laboratorio
????
'cnica (nal7tica
=aloraciones
microbiolgicas de
antibiticos"
Metodo cilindro en
placa
'cnica U! (0:) =aloraciones Microbiolgicas
&ota3 los valores c$alitativos de los patgenos y c$antitativos de los indicadores4 c$mplen con
los par1metros re.$eridos para s$ comercializacin"
CONCEPTO-
RESPONSABLES-
Q5F5 M"&.!#" #",$(3 Q5F J"((!2B Z'C$0"
Q5F5 A((D J"$+!) Q5F5 D$"(" C"&&$##3