Rjane Pratella,Guillaume piloto * Abstracto Metabolismo de aminocidos se encuentra en el cruce entre la asimilacin de nitrgeno, la fijacin de carbono y el metabolismo secundario. Debido a esta posicin central en el metabolismo de la planta, el metabolismo de aminocidos est estrechamente regulada por numerosos factores para que coincida con la demanda de los rganos y la disponibilidad de la reduccin de carbono y nitrgeno inorgnico. Aunque se han mostrado las enzimas de la biosntesis de aminocidos para ser regulada a nivel de transcripcin y protenas, sin embargo, no se han identificado los genes implicados en la deteccin de aminocidos, la transduccin de seales y regulacin.La sobreexpresin de glutamina Dumper1 conduce a un gran aumento en el contenido de aminocidos de la planta y, como se muestra aqu, a la insensibilidad a la aplicada externamente aminocidos. Este fenotipo es una reminiscencia de la de la pig1-1mutante propuso para mostrar un metabolismo desregulado. Estos datos sugieren que GDU1 est implicado en la regulacin del metabolismo de los aminocidos y el transporte. Como se public anteriormente, el anlisis de mutantes de delecin de dominio demuestra que VIMAG de GDU1 es importante para la funcin de la protena. Los datos actuales muestran, adems, que otras regiones participan a esta funcin. Reglamento del Metabolismo de los Aminocidos en Plantas Contrariamente a los animales, las plantas son capaces de sintetizar todos los aminocidos utilizando amonio y los intermediarios del metabolismo de hidratos de carbono. La sntesis de aminocidos est ntimamente ligada a la eficiencia de absorcin de nitrgeno y la actividad fotosinttica. La integracin de estos dos parmetros se consigue a nivel de la regulacin de la actividad de la nitrato reductasa que proporciona el metabolismo con amonio. 1 1 Las diversas vas que conducen a la sntesis de aminocidos en las plantas estn bastante bien descritas. 2 Seis pistas principales se pueden identificar en funcin de la molcula de carbohidrato de partida, que proviene de la gluclisis, el ciclo del cido tricarboxlico o la va de la pentosa fosfato ( Fig. 1 ). La regulacin de la actividad de las ramas de la biosntesis de los aminocidos de cadena ramificada (derivado de oxaloacetato) y de los aminocidos aromticos (derivados de fosfo enol piruvato) ha sido ampliamente estudiado. Es importante destacar que se ha demostrado que algunas enzimas biosintticas para ser positiva o negativamente regulado por productos finales ( Fig. 1 ). Como consecuencia de ello, la planta o el crecimiento celular se inhibe por la aplicacin externa de un aminocido que conduce un efecto de retroalimentacin negativa: este aminocido inhibe la actividad de una va, lo que resulta en el agotamiento en el otro cido (s) amino producido por esta rama . 3Regulacin transcripcional por diferentes tensiones se ha demostrado para algunos enzimas de la ruta de los aminocidos aromticos 4 , 5 y las enzimas implicadas en la produccin y la degradacin de la prolina. 6 Adems, la evidencia experimental muestra que las actividades de las diferentes vas se ajustan para uno del otro, y la modificacin de la actividad de una va conduce a la modificacin del contenido en la mayora de los otros aminocidos.7 , 8 Guyer et al. 9 tambin mostr una mejora clara de la acumulacin de transcripciones para las enzimas de varias vas en respuesta a una inhibicin de la sntesis de histidina. Una regulacin cruzada va del metabolismo parece entonces que existen en la planta, pero an no est claro si esta regulacin se lleva a cabo a nivel transcripcional y / o en el nivel post- traslacional. Se puede suponer que esta regulacin transversal de la va depende de las actividades de deteccin de aminocidos y de transduccin de seales. Sin embargo, los mecanismos subyacentes y los genes implicados quedan an por identificar. 1 8 Resistencia de dos Arabidopsis mutantes a altas concentraciones de Amino Acids Hasta hace poco, las mutaciones o manipulaciones que conducen a modificaciones de contenido de aminocidos en las plantas afectadas genes que codifican enzimas del metabolismo de aminocidos. En 2004, dos documentos describen el aislamiento de mutantes que muestran un aumento en el contenido de aminocidos: pig1-1 y gdu1-1D . 10 , 11 Desafortunadamente, el gen responsable de la recesivo pig1-1 mutacin no ha sido identificado.Los pIG1 - plantas presentan un aumento del metabolismo de aminocidos lder hasta el aminocido sobreacumulacin y la insensibilidad a las concentraciones de aminocidos elevados en el medio de crecimiento. El gdu1-1D mutacin es causada por la sobreexpresin de una pequea protena de membrana, GDU1.Gdu1D - plantas presentan un mayor contenido de aminocidos y el transporte dentro de la planta en comparacin con el de tipo salvaje y secretan glutamina por los hidatodos. 2 La protena GDU1 contiene dos dominios conservados: un segmento de la membrana y el dominio especfico de la planta "VIMAG", presentes en la parte C-terminal de la protena. Hemos demostrado recientemente que el dominio VIMAG es necesario para GDU1 para hacer que el Gdu1D - fenotipo cuando se sobreexpresa en las plantas.12 Las similitudes sorprendentes entre los fenotipos de ambas pig1-1 y gdu1-1D plantas nos llev a comparar la resistencia de estos mutantes a txicos concentraciones de aminocidos. El crecimiento de los mutantes que sobreexpresan diversas versiones mutadas o truncadas de GDU1 tambin fue probado en ese ensayo. Los LOG1plantas tienen un supresor de G a R mutacin en el dominio de VIMAG GDU1 en el gdu1-6D fondo, las plantas GDU1 sobre-expresa GDU1 que carece del dominio VIMAG, y las plantas C- GDU1 sobreexpresan slo el dominio C-terminal de GDU1 . Estos tres genotipos no presenten el Gdu1 - . fenotipo 12 1 El crecimiento de las plantas de tipo salvaje (WS y COL-7 ecotipos) se ve gravemente inhibida por la presencia de histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina y valina ( Fig. 2 ).pig1-1 plantas slo eran susceptibles a los aminocidos de cadena ramificada leucina, lisina y metionina. Esto est en buen acuerdo con el hecho de que este mutante se identific por su resistencia a la fenilalanina, un aminocido aromtico. 10 Sorprendentemente, la lnea gdu1-6D que sobreexpresan la protena intacta GDU1 no presenta ninguna inhibicin del crecimiento por cualquiera de los aminocidos en los medios de comunicacin, demostrando que estas plantas son an menos susceptible a los aminocidos que pig1-1 .Una razn para este fenotipo puede ser que las plantas son menos sensibles al efecto de retroalimentacin negativa de aminocidos en las enzimas metablicas, o que presentan como pig1-1 un aumento de la tasa de descomposicin y la sntesis de aminocidos. Esto se supone que es una consecuencia de una desregulacin de la homeostasis de aminocidos. 10 Es importante tener en cuenta que las mutaciones que afectan a transportadores de aminocidos pueden dar lugar a un fenotipo resistente a los cidos amino. 13 -15 Sin embargo, esta tolerancia no est acompaada por los cambios dramticos en el contenido de aminocidos de las plantas observadas para pig1-1 y gdu1-6D . 10 , 11 1 4 Las plantas C-GDU1 no muestran Gdu1 - . fenotipo en suelo 12 en buen acuerdo con este hecho, estas plantas se comportan exactamente como el tipo salvaje en aminocidos que contiene los medios de comunicacin. Por el contrario, mientras que las plantas que sobreexpresan una protena GDU1 modificado ( log1 y DGDU1) present ningn fenotipo visible en la tierra, 12 de ellos resultaron ser resistentes a algunos aminocidos (histidina, isoleucina y valina, lisina y tambin para los log1 mutantes ). A pesar de la prdida de la mayor parte de su funcionalidad por la mutacin o la delecin del dominio VIMAG, GDU1 es, pues, todava capaz de conferir resistencia a algunos aplicados de forma exgena aminocidos. Esto demuestra que el dominio VIMAG no es el nico dominio funcional de GDU1. La secuencia del dominio transmembrana es particularmente conservada entre las protenas GDU, 12 lo que sugiere que podra soportar parte de la funcin de la protena. La participacin de los tramos menos conservadas, C-terminal de aminocidos en la funcin de GDU1 no puede sin embargo ser excluida. 1 La primera conclusin del experimento que aqu se presenta es que, aunque el dominio VIMAG es necesario para muchos aspectos de Gdu1 - fenotipo, otras regiones del GDU1 son importantes para la funcin de la protena. Pero lo ms importante, este experimento pone de relieve otro componente de la Gdu1D - fenotipo, es decir, la resistencia a la aplicada externamente aminocidos, que revela una perturbacin probable en la regulacin del metabolismo de los aminocidos. Proponemos que la GDU1 protena de la membrana est implicada en la regulacin del metabolismo de los aminocidos.GDU1 sera el primer gen identificado como involucrados en este proceso y el estudio de la funcin GDU1 ayudar a arrojar luz sobre un no caracterizado, pero central, proceso de fisiologa de las plantas.
