INFORME DE LABORATORIO N2

CRECIMIENTO DE MICROORGANISMOS EN UN CULTIVO BATCH

Presentado por:
David Leonardo Amaya Ladino-6121963
Heidy Paola Leon Amaya-6121842

1. METODOLOGA:

Diagrama 1. Metodologa
2. RESULTADOS Y ANLISIS DE RESULTADOS:
Despus de preparar las muestras de cada vaso de precipitado y verterlas en las
probetas se pesaron, al final del tiempo de fermentacin se pesaron nuevamente y
estos fueron los resultados obtenidos:



Pesos muestras Peso Inicial(g) Peso Final(g) Volumen
Inicial(ml)
Probeta 1 77,43 78,59 30
Probeta 2 77,28 78,72 30
Probeta 3 70,18 77,93 29

Durante el bao de mara, se dio la fermentacin de la levadura, evidenciados un
crecimiento de esta, los datos obtenidos fueron los siguientes:
Tiempo (min) Volumen (cm
3
)
Probeta 1 Probeta 2 Probeta 3
0 30 30 29
2 30,5 30 29
4 31 31 30
5 32 31,5 33
10 33 32 35
15 34 36 37
20 36 40 50
25 38 44 60,5


Grafica n1. Crecimiento de la muestra
(


)

Variacin del volumen:
(

)
0
10
20
30
40
50
60
70
0 5 10 15 20 25 30
V
o
l
u
m
e
n

(
c
m
3
)

Tiempo (min)
Crecimiento del volumen en cada medio
Probeta 1
Probeta 2
Probeta 3


(

)
(

)
Produccin de CO
2:

Figura 1. Cultivo despus de la fermentacin
2.1 Discuta los resultados obtenidos con la variacin de la biomasa:
La fermentacin realizada, fue una fermentacin aerobia con levadura comercial,
utilizando como fuente de carbono azcar. Teniendo en cuenta los resultados
mostrados anteriormente se evidencia que al inicio no era notorio el crecimiento del
cultivo, puesto que la levadura apenas empezaba a acoplarse al medio y a la
temperatura, pasados ya 5 o 6 minutos empez a notarse el crecimiento del cultivo; la
muestra con mayor cantidad de inoculo presento un mayor crecimiento en
comparacin con las otras dos muestras, teniendo menor crecimiento la que tena
poca cantidad de inoculo; pese a que no se utiliz glucosa como fuente de carbono y
no se prepar el inoculo con ms tiempo, la fermentacin fue exitosa y se evidencio
una produccin de biomasa y dixido de carbono.
2.2 Realice un diagrama de proceso de la fermentacin etanolica a gran escala




Diagrama n2.Fermentacion etanolica a gran escala
2.3 Explique en que consiste un sistema de fermentacin tipo batch, continua,
por lote alimentado, por lecho empacado(inmovilizacin de clulas)

Fermentacin tipo batch:
Una fermentacin discontinua (batch) puede ser considerada como un "sistema
cerrado". Al inicio de la operacin se aade la solucin esterilizada de nutrientes y se
inocula con el microorganismo. A lo largo de toda la fermentacin no se aade nada,
excepto: oxgeno (en forma de aire), un agente antiespumante, un cido o una base
para controlar el pH.
La composicin del medio de cultivo, la concentracin de la biomasa y la
concentracin de los metabolitos cambia generalmente como resultado del
metabolismo de las clulas, observndose las cuatro fases tpicas de crecimiento: fase
de latencia, fase logartmica, fase estacionaria, fase de muerte. En los procesos
comerciales la fermentacin frecuentemente se interrumpe al final de la fase
logartmica o antes de que comience la fase de muerte.

Fermentacin continua: En la fermentacin continua se establece un sistema abierto. La
solucin nutritiva estril se aade continuamente al biorreactor y una cantidad equivalente
de solucin utilizada de los nutrientes, con los microorganismos, se saca simultneamente


del sistema.
Si bien los procesos de fermentacin continua no se utilizan de forma general en la
industria, debido fundamentalmente al mayor nivel de experiencia que se tiene en el
crecimiento de clulas en fermentacin discontinua, el coste de produccin de biomasa
mediante cultivo continuo es potencialmente inferior al de cultivo discontinuo. De este
modo se han instalado plantas de produccin para la produccin continua de protena de
origen unicelular a partir de n-alcanos, compuestos C1 y almidones.
Fermentacin por lote alimentado: Un fed-batch o un lote alimentado es un
mtodo biotecnolgico de produccin basado en la administracin del sustrato limitante
del crecimiento del cultivo. Aqu los sustratos se aaden escalonadamente a medida que
progresa la fermentacin. La formacin de muchos metabolitos secundarios disminuye
debido a la cantidad de glucosa que est en el medio (efecto glucosa), por esta razn en
este tipo de fermentacin los elementos crticos de la solucin de nutrientes se aaden en
pequeas concentraciones al principio del proceso y continan aadindose en pequeas
dosis durante la fase de produccin. Este tipo de fermentacin se utiliza en la produccin
de sustancias como la penicilina y suele emplearse para conseguir elevadas
concentraciones celulares en el biorreactor. Frecuentemente la solucin de alimentacin
est altamente concentrada para, de este modo, evitar en la medida posible la dilucin del
cultivo.
Fermentacin por lecho empacado: Consiste en pasar el medio fresco a travs de un
biorreactor en el que por diversas tcnicas hemos inmovilizado clulas (o enzimas). En el
biorreactor se producen las transformaciones bioqumicas que deseamos y recuperamos
el producto transformado tras su paso por la columna. Con este sistema se eliminan los
problemas de desequilibrio (estabilidad) del sistema continuo clsico y adems el
producto resultante est libre de clulas. Presenta el inconveniente de que no todos los
microorganismos pueden inmovilizarse.

2.4 Consulte tericamente cual es el rendimiento Yp/s de una fermentacin
etanolica.
Rendimiento substrato/producto (Yp/s, es la cantidad de producto sintetizado por cantidad
de substrato consumido. El rendimiento terico estequiomtrico para la transformacin de
glucosa en etanol es de 0.511 g de etanol y 0.489 g de CO
2
por 1 g de glucosa. Este
valor fue cuantificado por Gay Lussac.
2.5 Que significa la inhibicin por producto y por sustrato en un proceso de
fermentacin
La inhibicin por sustrato y por producto es donde el sustrato o el producto de una
reaccin enzimtica inhiben la actividad enzimtica. En la inhibicin por sustrato hay una
disminucin progresiva de la actividad a altas concentraciones de sustrato. Esto puede
indicar la existencia de dos sitios de unin entre sustrato y enzima. La inhibicin por parte
del producto es a menudo una caracterstica reguladora en el metabolismo y puede ser
una forma de retroalimentacin negativa.
3. CONCLUSIONES



La fermentacin aerobia con levadura comercial es un proceso que utiliza
como fuente el carbono de azcar. En la prctica qued demostrado cmo
la levadura necesita acoplarse a un medio y a la temperatura para iniciar su
crecimiento, as como la importancia del inoculo en este proceso. De las
tres probetas usadas, la de mayor crecimiento fue la nmero tres debido a
que posea mayores cantidades de esta solucin.
A pesar de que la glucosa no fue utilizada como fuente de carbono y que el
tiempo de preparacin del inoculo no fue muy extenso, se puede decir que
la fermentacin fue exitosa, evidenciando produccin de biomasa y dixido
de carbono.


4. SUGERENCIAS

Permitir el uso de balanzas ya que solo algunas fueron utilizadas,
teniendo en cuenta que haban ms.
Las probetas escogidas para la prctica eran muy grandes por lo que
se dificultaba ver el cambio de volumen.