CUESTIONARIO PRCTICA No.

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PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO.
1.- Defina un medio de cultivo? Y para que se utiliza?
2.- Que es el agar-agar? Mencione la forma de obtencin y uso de los medios de cultivo.
3.- Que es un medio de cultivo sinttico?
4.- Cul es la utilidad del medio de cultivo de acuerdo a su estado fsico?
5.- Que es un medio enriquecido?
6.- Por qu es importante controlar el pH en un medio de cultivo?
7.-Dibuje una curva de crecimiento o cintica de crecimiento microbiano y explique cada una de las
fases.

1.- Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su
crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio
en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie
de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno adecuadas, as
como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y
factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
2.- Sustancia mucilaginosa que se extrae de algunas algas rojas o Rodofceas, frecuentes en el
Ocano Atlntico, Pacfico e Indico. Es una sustancia amorfa. Se emplea como medio de cultivo en
bacteriologa, como apresto de sedas, como sustituto de la gelatina, etc.
La forma seca del Agar-Agar se conoce de mediados del siglo XVIII, cuando un japons descubri,
accidentalmente, la manera de purificarlo y secarlo. Fue llevado de China a Europa y trado a
Amrica a mediados del siglo XIX.

Atendiendo a su estado fsico:
Lquidos
Semislidos
Slidos
Atendiendo a su utilidad prctica:
Medios para aislamientos primarios:
Para usos generales: no selectivos, para cultivo de una amplia variedad de organismos difciles de
hacer crecer. A menudo estn enriquecidos con materiales como: sangre, suero, Hemoglobina, FX,
FV, glutamina, u otros factores accesorios para el crecimiento de las bacterias (Agar Sangre,
Schaeadler, etc) selectivos: (pueden ser de moderada o de alta selectividad) se aaden sustancias
que inhiban el crecimiento de ciertos grupos de bacterias, permitiendo a la vez el crecimiento de
otras. Variando las sustancia aadidas, se vara el tipo y grado de selectividad (Mac Conkey,
Kanamicina-Vancomicina) enriquecidos: ralentizan/suprimen el crecimiento de la flora competitiva
normal potenciando el cultivo y crecimiento deseado (Selenito, medio con Vitamina K).
Para aislamientos especializados: formulaciones nutritivas especiales que satisfacen requerimientos
de grupos especficos de bacterias, ayudando a su identificacin (Lowenstein).
Medios para identificacin:
Diferenciales: formulaciones especiales en las que se estudian las peculiaridades fisiolgicas
(nutricin y respiracin sobre todo) especficas de las bacterias. Seleccionando los medios
adecuados se puede llegar a la identificacin de casi cualquier bacteria (Oxidacin-Fermentacin)
3.- Son aquellos que contienen en su composicin exclusivamente sustancias qumicas conocidas y
disueltas en agua destilada en proporciones determinadas, resultando un medio de composicin
perfectamente definida.
4.- Los siguientes:
1) Medios lquidos: Son los que se presentan en este estado, denominndose por esta razn
caldos. El medio lquido ms utilizado es el llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente de
extracto de carne, peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende la obtencin de
una suspensin bacteriana de una determinada concentracin.
2) Medios slidos: Se preparan a partir de los medios lquidos, agregndoles un agente gelificante.
Los ms utilizados son la gelatina y el agar. Gelatina: Es una protena animal obtenida de los huesos.
Tiene el inconveniente de que es hidrolizada por muchas bacterias, y adems su uso est muy
limitado porque su punto de fusin es bajo (lica a temperatura ambiente) razn por la que no puede
utilizarse para cultivos a 37C, que es la tempera ptima de crecimiento para muchos
microorganismos. Agar-agar:Es un polmero de azcares obtenido de algas marinas. Se trata de una
molcula insoluble enagua pero soluble en agua caliente; una solucin al 1,5% p/v forma un gel firme
entre 32 y 39C y nose funde por debajo de 85C. Funde a 90C y solidifica una vez fundido
alrededor de los 45C.
Tiene el inconveniente de que introduce compuestos orgnicos indefinidos que pueden falsear los
resultados de las necesidades nutritivas de un microorganismo.
Aunque el agar es una mezcla de polisacridos, Araki, en 1937, los dividi en dos grupos:- agarosa,
con poco sulfato, libre de cido pirvico, y- agaropectina, con mucho sulfato y gran cantidad de
cenizas. La proporcin de agarosa a agaropectina en el agar vara segn el alga de origen.
El agar puede utilizarse para diferentes fines, aunque los ms importantes son: agar comercial para
la industria alimenticia, agar bacteriolgico, agares purificados y agarosa, utilizada para electroforesis
en gel. Aproximadamente la mitad de todo el agar que se produce, se utiliza en trabajo
microbiolgico, por lo que es importante la ausencia de metales txicos.
3) Medios semislidos: Se preparan a partir de los medios lquidos, agregando a stos un agente
solidificante en una proporcin menor que para preparar medios slidos. Uno de sus usos es la
investigacin de la movilidad de las bacterias
5.- Son aquellos que, adems de las sustancias nutritivas normales, incorporan una serie de
factores indispensables para el crecimiento de microorganismos exigentes. Este enriquecimiento se
hace por adicin de sangre u otros productos biolgicos (sangre, suero, leche, huevo, bilis, etc.) que
aportan dichos factores. En ocasiones es posible aadir suplementos artificiales a los medios para
producir un enriquecimiento del mismo (p. ej. Polivitex, Isovitalex, etc)El gonococo, por ejemplo,
necesita cistina y cistena para su crecimiento. Estas sustancias son aportadas por la sangre
calentada adicionada al medio de cultivo (agar chocolate).
6.- El pH de los medios de cultivo se ajusta durante su fabricacin a los valores descritos en cada
uno de ellos. Sin embargo, la calidad del agua que se utiliza en su hidratacin, la utilizacin de
medios no recientes etc., pueden modificar este parmetro por lo que es aconsejable verificarlo y
reajustarlo si fuera necesario. En algunos casos se puede ajustar el pH despus de la esterilizacin
de forma asptica y utilizan-do soluciones cidas (Acido Clorhdrico) o bsicas(Sodio Hidrxido)
estriles. En los medios slidos la medida se hace a 45-50C (el agar todava no ha gelificado)
mientras que en los lquidos se hace a temperatura ambiente. Los medios cidos (pH<5) pueden
presentar malas gelificaciones debido a la posible hidrlisis del Agar con la temperatura. Son medios
que no es aconsejable refundirlos, y si es imprescindible, es aconsejable aadirles agar.





7.-



BIBLIOGRAFA:
P. R. MURRAY. Microbiologa Mdica. 2006. Mosby (Elsevier Science).
T.S. WALKER. Microbiologa. 2000. McGraw-Hill Interamericana (513 pginas).
Bacteriologa: http://www.kcom.edu/faculty/chamberlain/Website/lab/idlab/stain.htm