El microscopio (de micro-, pequeo, y scopio, observar) es un instrumento que
permite observar objetos que son demasiado pequeos para ser vistos a simple vista. Los microscopios magnifican la imagen y aumentan nuestra capacidad para ver detalles que de otro modo no podramos percibir. Existen varios tipos de microscopios, sin embargo, en este laboratorio solo nos referiremos al microscopio de luz, compuesto y de campo claro (aquellos que usan la luz visible para iluminar la muestra que queremos observar). El microscopio de luz usa un par de lentes en serie que enfocan un rayo de luz para iluminar los objetos, que son entonces magnificados. El aumento total del microscopio lo podemos obtener al multiplicar el aumento de ambos lentes, con lo que podemos llegar a ver una muestra hasta unas 500 veces ms grandes de lo que en realidad son. Para ver ms detalles se usan tinciones que resaltan partes de lo que deseamos estudiar o se emplean microscopios especializados. Las partes esenciales que componen un microscopio ptico son:
Parte mecnica - Pie o soporte: sirve como base al microscopio y en l se encuentra la fuente de iluminacin. - Platina y pinza: superficie sobre la que se colocan y sujetan las preparaciones. En el centro hay un orificio que permite el paso de la luz. La platina tiene 2 tornillos, generalmente situados en la parte inferior de la misma, que permiten desplazar la preparacin sobre la platina, en sentido longitudinal y transversal respectivamente. - Tubo: cilindro hueco que forma el cuerpo del microscopio. Constituye el soporte de oculares y objetivos. - Revlver: estructura giratoria que contiene los objetivos. - Brazo o asa: une el tubo a la platina. Lugar por el que se debe tomar el microscopio para trasladarlo de lugar. - Tornillo macromtrico o de enfoque grosero: sirve para obtener un primer enfoque de la muestra al utilizarse el objetivo de menor aumento. Desplaza la platina verticalmente de forma perceptible. - Tornillo micromtrico o de enfoque fino: sirve para un enfoque preciso de la muestra, una vez que se ha realizado el enfoque con el macromtrico. Tambin desplaza verticalmente la platina, pero de forma prcticamente imperceptible.
Parte ptica - Oculares: estn en la parte superior de microscopio y son los sistemas de lentes ms cercanos al ojo del observador. Son cilindros huecos provistos de lentes convergentes con un aumento que es normalmente de 10x. Dependiendo de que exista uno o dos oculares, los microscopios pueden se mono o binoculares.
- Objetivos: son sistemas de lentes convergentes que se acoplan en la parte inferior del tubo, mediante el revlver, y proporcionan diferentes grados de aumento. Un anillo coloreado indica los aumentos de cada objetivo, que tambin van escritos en el lateral del mismo. Algunos objetivos no enfocan bien la preparacin al aire, y se deben de utilizar con un aceite de inmersin (normalmente van marcados con un anillo rojo).
Sistema de iluminacin: - Condensador: sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los concentra sobre la preparacin, de manera que proporciona mayor o menos contraste.
- Fuente de iluminacin: en el microscopio que se usar, la fuente lumnica es una ampolleta halgena de bajo voltaje La luz procedente de la bombilla pasa por un reflector que enva los rayos luminosos hacia la platina. - Diafragma o iris: sobre el reflector de la fuente de iluminacin. Abrindolo o cerrndolo permite graduar la intensidad de la luz.
- Transformador: ya que el voltaje de la bombilla es menor que el de la red, es necesario para enchufar el microscopio. Algunos modelos ya lo llevan incorporado en el pie del microscopio. Adems, el transformador dispone de un potencimetro para regular la intensidad de la luz.
Actividad n1.Reconozcamos las partes de un microscopio. Indica el nombre de las piezas del microscopio indicadas con las flechas.
Cmo utilizar un microscopio?
Los pasos que debemos seguir cuando utilicemos el microscopio son los siguientes: 1.- Antes de encender el microscopio revisa que los lentes oculares y objetivos estn limpios. Si hace falta, lmpialos usando papel de lente seco (puedes usar el aliento para empaar el lente).
2.- Enchufa el microscopio directamente (o al transformador si no lo presenta incorporado).
3.- Coloca la preparacin sobre la platina de forma que la estructura a observar quede en el orificio central de la platina.
4.- Poner el objetivo de menor aumento cuyo amplio campo visual facilita el hallazgo de estructuras importantes.
5.- Subir la platina usando el tornillo macromtrico y mirando la preparacin desde fuera hasta alcanzar el tope superior. En ningn caso tocar la preparacin con los objetivos.
6.- Mirando por los oculares, bajar lentamente la platina con el tornillo macromtrico hasta conseguir ver el objeto lo ms ntido posible.
7.- Ajustar el enfoque con el tornillo micromtrico hasta verlo claramente.
8.- Para observar la preparacin a mayores aumentos cambiar de objetivo con un simple giro del revlver, pero sin mover el tornillo macromtrico. Con el tornillo micromtrico corregiremos las imperfecciones que se generen al cambiar de objetivo.
9.- Para observar otros campos, desplazar la preparacin moviendo los tornillos de la platina.
Instrucciones de seguridad
Al trasladar el microscopio: - Tmalo desde el brazo, sostenindolo verticalmente y apoyando la base sobre la mano libre.
Mueve siempre suave y lentamente cualquier elemento del microscopio.
Nunca pongas los dedos en las lentes del ocular ni del objetivo. Si se ensucian dichas lentes se limpiarn con un pao suave de algodn, sin utilizar ningn disolvente.
Recuerda que al cambiar una muestra debes: - Baja la platina. - Coloca el objetivo de menor aumento - Quita la preparacin y colocar la siguiente
Para desconectar el microscopio, adems de los tres pasos anteriores: - Apaga y desenchufa el transformador de la red - Tapa el microscopio con su funda
Actividad n2.- Observacin de una letra. Materiales: Una hoja de diario. Scotch. Un portaobjetos. Tijeras 1.- Recorta un trozo pequeo del diario en donde aparezca la letra e. 2.- Coloca el trozo en el centro del porta objeto y fjalo en los extremos con un trozo de scotch. 3.- Sigue las instrucciones de uso del microscopio reseadas en la pgina 4 para instalar el portaobjetos en el microscopio y poder observar la preparacin, utilizando primero el objetivo 10x y luego el objetivo 40x.
4.- Dibuja lo que observas y comenta tus resultados con tus compaeros.
Actividad.- Observacin de clulas del epitelio de la mucosa bucal Materiales: Un palillo Un portaobjetos Pipeta de plstico Azul de metileno o yodo
Instrucciones
1. Usando el extremo no afilado de un palillo de dientes raspa la parte inferior de la mejilla para obtener clulas epiteliales. Ten cuidado de no raspar la parte interior de la mejilla muy duro porque el revestimiento epitelial es delicado.
2. Coloca el extremo del palillo con el que tomaste la muestra en el centro de un portaobjetos del microscopio. Aade una sola gota de agua exprimida de una pipeta de plstico en el centro de la diapositiva. Gira el palillo de dientes en el agua para liberar las clulas de la mejilla humana.
3. Aade una gota de azul de metileno en la solucin de agua y de clulas para teirlas y poder observarlas. Coloca una un cubreobjetos en un ngulo de 45 grado justo dentro del borde izquierdo de la solucin. Mueve los dedos hacia abajo y hacia la derecha para colocar el cubreobjetos encima de la mezcla de las clulas de las mejillas.
4. Revisa si hay burbujas de aire diminutas bajo el cubreobjetos y presinalo ligeramente para liberar las burbujas de aire que encuentres. Coloca el borde de una toalla de papel sobre la solucin que quede por fuera del cubreobjetos para absorber el exceso de humedad. Monte la diapositiva de clulas de mejilla humana en el cubreobjetos para verlas con el microscopio ptico.
5. Sigue las instrucciones de uso del microscopio reseadas en la pgina 4 para instalar el portaobjetos en el microscopio y poder observar la preparacin.
6. Elige el ajuste de aumento X-40 del microscopio ptico y mira a travs de la lente de visin. Gira el dial de enfoque para ajustarlo hasta que aparezca una imagen clara y ntida. Observa las clulas de la mejilla humana buscando estructuras circulares con bordes irregulares que tengan un centro o ncleo oscuro.
7. Cambia la ampliacin del microscopio ptico hasta X-100, y reenfoca la lente para tener ms claridad de imagen si es necesario. Observa el detalle celular aumentado que ofrece la ampliacin adicional. Observa los diferentes detalles dentro de la clula epitelial de las mejillas humanas, mirando la membrana celular y las estructuras nucleicas en el interior del citoplasma de la clula.
8. - Dibuja lo que observas y comenta tus resultados con tus compaeros.