METODO

DE OBTENCION
DE AZUL
DE
METILENO
POLICROMICO
por
R. DARGALLO
El fundamento del metodo
consiste
en obtener rapida-
mente un precipitado de azul de metileno policromico por
medio de una solucion de sosa, en separar luego este preci-
pitado de la disolucion
excesivamente alcalina en que se
ha formado y , finalmente , en disolverlo en agua destilada
y en disminuir aun la alcalinidad de esta disolucion por la
adicion de otra cantidad de azul de metileno ordinario que
se transformara mas lentamente.
Esta tecnica, a su vez, esta fundada en la propiedad que
tiene el azul policromico de permanecer disuelto en un me-
dio neutro o muy ligeramente alcalino y precipitarse poco
a poco o rapidamente en cuanto la alcalinidad sobrepasa
ciertos limites , variables segun la substancia alcalina que se
utilice, sosa, potasa, carbonato potasico, carbonato de li-
tina, etc.
La manera como operamos es la siguiente:
Se prepara en el acto una solucion de azul de metileno
en la proporcion de O' 5 o gr. por
5 0
cc. de agua destilada y
otra de sosa ( en cilindros ) en cantidad de
2 ' 5 0
gr. por
2 5 cc. de agua destilada y se mezclan, afiadiendo la segunda
218 Publications d e l' I nstitut d e C ie ncie s
a la prime ra conte nid a in una probe ta con tapOn e sme ri-
lad o o se ncillamcnte e n un f rasco.
En se guid a, e l azul d e me tile no toma un tono mas in-
te nso y vira al viole ta. Lue go, al cabo d e pocos minutos,
si se agita e l re cipie nte so e xtie nd e n sobre las pare d e s d e l
mismo unos grumitos d e pre cipitad o que e n contacto con
] a atm6sf e ra f orm. an a sit alre d e d or y d e stilan in e strias
un he rmoso color viole ta. S i so agita d e nue vo, d e sapare ce
para volve r a f ormarse e n se guid a e n virtud d e las nue vas
particulas d e pre cipitad o aportad as. Este f e n6rne no d ura
d e 3o a 6o minutos, lue go d e ja d e prod ucirse y e l liquid o
que d a d e un color azul palid o, sucio por las particulas me . z-
clad as d cl pre cipitad o.
De je se re posar unos d ias (una se mana) y al cabo d e e ste
tie mpo f iltre se y e spe re se a que e l f iltro y e l pre cipitad o que -
d e n bie n se cos. Esto suce d e a los 2 6 3 d ias.
Mie ntras e l f iltro y su conte nid o pe rmane ce n hume d os,
e xiste d e masiad a sosa e n contacto con e l azul policr6mico
para que se obte ngan bue nos re sultad os. Este tie mpo e s e l
mas importante . S i se d isue lve e n agua e l pre cipitad o con
e l f iltro, aun hume d os, se vue lve a pre cipitar e l azul
d e me tile no policr6mico al cabo d e unas cuantas horas o d e
uno o varios d ias. (S i e sto suce d ie se , vue lvase a f iltrar y
e spe re se a que e l f iltro y e l pre cipitad o que d e n bie n se cos. )
Prod ucid a la d e se caci6n d e l f iltro y d e l pre cipitad o, p6n-
ganse ambos e n e l re cipie nte ante riorme nte e mple ad o, pre -
viame nte lavad o y anad ase
50
cc. d e agua d e stilad a. Agi-
te se bie n.
Espe re se 48 horas para ve r si la d isoiuci6n ha sid o bie n
he cha, e n cuyo caso se obtie ne tin
liquid o d e color viole ta
que moja bie n ] as pare d e s d e l re cipie nte . Y anad ase 0`25
gramos d e azul d e me tile no d isue ltos e n 5o cc. d e agua d e s-
tilad a.
De je se pasar otro par d e d ias y f iltre se e l colorante d e
T r e b a l l s d e l a S o c i e t a l d e B i o l o g i a . 1915 219
nue vo y pa r a s i e m pr e , o b i e n c o ns e r va s e a s i y f i l t r e s e c a d a
ve z a nt e s d e e m pl e a r l o .
Es t e a zul d e m e t i l e no po l i c r o m i c o ha m a d ur a d o c o m -
pl e t a m e nt e a l c a b o d e uno o d o s m e s e s , s i e nd o d e no t a r
que l a pr o pi e d a d m e t a c r o m a t i c a , que a pa r e c e l a ul t i m a y
que , po r t a nt o , s e na l a l a c o m pl e t a m a d ur a c i o n, e s l a que c o -
r r e s po nd e a l o s he m a t i e s que s e t i ne n e n ve r d e c o m o ya s e
s a b e . b l i e nt r a s t a nt o , l o s he m a t i e s s e t i ne n e n un c o l o r
r o jo -vi o l a c e o .
La s d i f e r e nt e s t o na l i d a d e s d e c o l o r a c i o n que s e pue d e n
o b t e ne r c o n e l a zul po l i c r o m i c o l a s he m o s he c ho no t a r
e s t ud i a nd o l a c t o l o g i a y l a hi s t o qui m i c a g e ne r a l d e l e s put o
c o n e l a zul d e Unna ( z) .
Pr e c i s a m e nt e c o n vi s t a s a e s t a s i nve s t i g a c i o ne s he m o s
t r a t a d o d e o b t e ne r nue s t r o a zul po l i c r o m i c o , c o n e l c ua l
he m o s c r e i d o o b s e r va r m e jo r d i f e r e nc i a c i o n e nt r e e l e xu-
d a d o s e r o -a l b um i no s o y l a m uc i na y m e jo r l i m i t a c i o n d e l o s
pr o t o pl a s m a s que c o n e l a zul po l i c r o m i c o d e Unna .
La t e c ni c a d e c o l o r a c i o n, e n e s t e c a s o , e s l a m i s m a
e m pl e a d a po r B e za nc o n y d e Jo ng .
La b o r a t o r i o d e Pa t o l o g i a i nt e r na d e l Dr . V a l l e jo . Fa -
c ul t a d d e Me d i c i na .
( 1) R. Da r g a l l o . Es t ud i o g e ne r a l d e l o s e l e m e nt o s hi s t o qui r ni c o s y
c i t o l o g i c o s d e l o s e s put o s . - T r e b a l l s d e l a S c c i e t a t d e B i o l o g i a . 1914.