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UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA


ASIGNATURA: PARASITOLOGIA
I SEMESTRE 2008
INSTRUCCIONES Y RECOMENDACIONES PARA EL DESARROLLO
DE LAS CLASES PRACTICAS
1. Las clases prcticas se desarrollarn en el Laboratorio de Parasitologa ubicado
en el Local Central 3 Piso.
2. La asistencia del estudiante a la prctica es obli!"o#i! en el horario
establecido, con una tolerancia para el ingreso de 5 minutos. Despus de este
tiempo, se le consignar como inasistencia.
$. l estudiante ingresar al laboratorio pro!isto del material "ue le #ue solicitado
en #orma anticipada por la ctedra.
%. La prctica ser desarrollada con a$uda de una %ua, la misma "ue ser
entregada a un estudiante de cada grupo de prctica, una semana antes de su
e&ecuci'n.
&. Los estudiantes sern distribuidos en grupos de traba&o, teniendo en cuenta la
disponibilidad de e"uipos, materiales $ reacti!os.
'. l estudiante en el Laboratorio deber asumir las siguientes medidas de
bioseguridad(
- )sistir con mandil limpio, guantes $ mascarilla cuando el caso lo re"uiera.
- *o beber, comer, #umar o aplicarse cosmticos durante el desarrollo de la
prctica.
- La!arse las manos con bastante agua $ &ab'n, cuando sea necesario.
- +anipular las muestras biol'gicas ,heces, sangre, etc- con mucho cuidado,
e!itando la contaminaci'n de su persona, compa.eros $ del ambiente de
traba&o.
- +ane&ar las pipetas de acuerdo con las instrucciones de la ctedra. D(
)i)*)! +!)(#! (l (,"*-i!)"( lo ll(.!#/ -i#(0"!+()"( ! l! bo0!.
- Depositar los desperdicios en una bolsa plstica desechable "ue la ctedra
ubicar en una de las mesas de traba&o. )l #inali/ar la prctica, un integrante
de cada grupo lo sellar $ lo desechar en el recolector de basura "ue se
encuentra ubicado en el primer piso del local central.
- De&ar la mesa de traba&o, los materiales $ e"uipos completamente limpios $
en orden.
1. C*!l2*i(# !.(#3! o 45#-i-! -( lo, (2*i4o, o +!"(#i!l(, -( l!bo#!"o#io6 ,(#/
-( ()"(#! #(,4o),!bili-!- -(l (,"*-i!)"(. L! 0/"(-#! ,( ()0!#!#/ -(
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,*b,!)!-o 4o# (l (,"*-i!)"(.
ES8UEMA PARA LA ELA9ORACI:N DEL INFORME DE PRACTICA:
1
l estudiante presentar un 0n#orme por cada prctica reali/ada al ingresar a la
siguiente prctica, el cual deber contener(
A. EN LA HO;A DE PRESENTACI:N:
- *ombre de la 1ni!ersidad
- 2acultad a la "ue pertenece
- *ombre de la asignatura
- * $ 3tulo de la prctica
- C'digo $ nombre del estudiante
- *ombre del docente
- %rupo $ 4orario de Prctica
- 2echa de e&ecuci'n de la prctica
- 2echa de presentaci'n de la prctica
- 5emestre $ ).o )cadmico.
9. EN EL CONTENIDO:
- 3631L7 D L) P89C30C)
- 7:;30<75 ) D5)887LL)8
- =10P75 > +)380)L5 130L0?)D75
- 851L3)D75(
a. numerar los mtodos de diagn'stico "ue utili/'.
b. %ra#icar las obser!aciones reali/adas siguiendo las recomendaciones
"ue se indican(
- l tama.o de los es"uemas deben ser elaborados de acuerdo con el
n@mero de aumento utili/ado.
- Los es"uemas dibu&ados deben tener relaci'n con las caractersticas
de los parsitos obser!ados, no se aceptar pegado de recortes,
#otocopias o copias de imgenes de 0nternet.
- 57L1C0A* DL C15307*)807.
- 51%8*C0)5
- 828*C0)5 :0:L07%8920C)5( l alumno puede nombrar otras #uentes
de in#ormaci'n, adems de las recomendadas en la %ua de Prctica-.
PARASITOLOGIA I < 2008
PRACTICA N= 1
AME9AS INTESTINALES
2
COMPETENCIAS:
- 0denti#icar a la Entamoeba histolytica, en su #ase de tro#o/oito $ "uiste.
- 0denti#icar a las amebas comensales( Entamoeba hartmanni, Entamoeba coli $
Endolimax nana, en su #ase de "uiste.
- +ane&ar adecuadamente los siguientes mtodos coproparasitol'gicos(
+todo Directo con 5uero 2isiol'gico $ lugol.
+todo de Concentraci'n por 2lotaci'n de 2aust.
E8UIPOS Y MATERIALES(
De la ctedra De los alumnos
B +icroscopios binoculares B 3 Lminas portaBob&etos
B %radillas B 3 Laminillas cubreBob&etos
B 3ubos de ensa$o B 4eces humanas #rescas $ diarreicas.
B Pipetas de CD ml B C pa"uete pe"ue.o de detergente
B 5uero 2isiol'gico B E bolsas negras grandes para recolectar
basura
B 5oluci'n de Lugol B %uantes
B 5oluci'n de sul#ato de /onc al 33.3F B +andil limpio
B )plicadores de ca.a
B 4eces conser!adas en 2ormol al CDF
PROCEDIMIENTO(
C. Entamoeba histolytica, agente etiol'gico de la amebosis, es uno de los
proto/oarios pat'genos de ma$or importancia clnica "ue habita el intestino grueso del
hombre. n su ciclo !ital presenta la #ase de tro#o/oito $ "uiste.
T#o>o?oi"o o >!,( .(("!"i.!( <i!e en la lu/ intestinal $ en los te&idos. 5u tama.o !ara
entre CD a GD Hm, con un promedio de C5 a ED Hm. s sensible a los cambios de
temperatura $ a la desecaci'n, destru$ndose rpidamente en el medio eIterno.
8*i,"( o >!,( i)+@.il( s resistente a las condiciones des#a!orables del medio
ambiente. 5u tama.o promedio es de CE a C5 m de dimetro.
RELACION HOSPEDERO<PARASITO: Entamoeba histolytica puede !i!ir en la lu/
intestinal del portador sano sin causar lesiones. Cuando las produce, stas son
ma$ormente ulcerati!as $ necr'ticas. Los lugares o #ocos primarios de in!asi'n son
generalmente el ciego $ la regi'n del recto sigmoideoJ en algunos casos, puede in!adir
secundariamente otros 'rganos produciendo la amebosis eItraintestinal.
DIAGNOSTICO PARASITOLOGICO:
l diagn'stico e identi#icaci'n del tro#o/oito se reali/a en heces #rescas disentricas
utili/ando el +todo Directo con 5uero 2isiol'gico, $ del "uiste, en heces blandas o
#ormadas empleando el +todo Directo con Lugol $ los +todos de Concentraci'n por
#lotaci'n $Ko sedimentaci'n. l halla/go del "uiste en las heces ser reportado como
L=uiste de Entamoeba histolytica / Entamoeba disparA, teniendo en cuenta "ue
ambas especies, son mor#ol'gica $ estructuralmente indistinguiblesJ solo se pueden
di#erencias utili/ado coproantgenos.
O9SERVACI:N DEL TROFOZOITO DE Entamoeba histolytica
METODO DIRECTO O EN FRESCO CON SUERO FISIOL:GICO( 5e procede de la
siguiente manera(
3
- Colocar una o dos gotas de suero #isiol'gico en una lmina portaBob&etos.
- )gregar una pe"ue.a cantidad de heces con un aplicador de ca.a $ homogeni/arla
bien sin llegar a los bordesJ la transparencia de la muestra preparada debe permitir
leer a tra!s de ella un papel impreso.
- Cubrir la preparaci'n con una laminilla $ lle!arla al microscopio para su obser!aci'n
con ob&eti!o de MDN.
C!#!0"(#3,"i0!,:
- 2orma !ariable.
- +o!imiento progresi!o con emisi'n de seud'podos largos $ delgados cuando la
ameba esta acti!a.
- ctoplasma !isible, hialino, casi transparente.
- ndoplasma #inamente granuloso con muchas !acuolas digesti!as.
- 1n n@cleo !esicular, es#rico, con cariosoma central diminuto.
- Presencia de inclusiones citoplasmticas ,!acuolas, hemates $ grnulos de
gluc'geno-. La obser!aci'n de hemates en el endoplasma con#irma a la especie
Entamoeba histolytica.
O9SERVACI:N DE 8UISTE DE Entamoeba histolytica
METODO DIRECTO CON LUGOL( l procedimiento es idntico al anterior, s'lo "ue,
en !e/ de 5uero 2isiol'gico se utili/a Lugol.
MBTODO DE FLOTACI:N Y CENTRIFUGACI:N DE FAUST( 5e utili/a la
soluci'n de sul#ato de /inc al 33.3F con densidad de C.COD.
Procedimiento(
a. n un tubo de ensa$o de CD ml, preparar una suspensi'n #ecal con agua
destilada $ aproIimadamente C gr de heces.
b. Centri#ugar a E5DD rpm -*#!)"( 1 +i)*"o, desechar el l"uido sobrenadanteJ
repetir el la!ado de la muestra hasta obtener un sobrenadante claro.
c. Decantar el sobrenadante, agregar la soluci'n de sul#ato de /inc al 33.3F
hasta la mitad del tubo, me/clar con el aplicador de ca.a. ).adir la misma
soluci'n hasta aproIimadamente C cm del borde del tubo.
d. Centri#ugar a E5DD rpm durante C minuto. 5 8C7+0*D) *7 P)8)8
C7* L)5 +)*75 L) C*38021%)D78).
e. Colocar el tubo en una gradilla $ con una pipeta a.adir la soluci'n de sul#ato
de /inc hasta #ormar en la super#icie un pe"ue.o menisco, cubrirlo con una
laminilla $ de&arlo en reposo 5 minutos.
#. 3rasladar la laminilla a una lmina portaBob&etos "ue contiene una gota de
lugol $ eIaminar inmediatamente la muestra al microscopio a menor $
mediano aumento.
Con ob&eti!o de MDN, obser!e 1d. las siguientes caractersticas del "uiste de
Entamoeba histolytica / Entamoeba dispar:
- 2orma generalmente es#rica con pared "ustica ntida.
- Citoplasma #inamente granuloso.
- *@cleo !esicular con cariosoma central punti#orme.
- l =uiste inmaduro presente(
1no o dos n@cleos.
0nclusiones citoplasmticas(
a- !acuola de gluc'geno con bordes di#usos.
b- cuerpos o barras cromatoidales con eItremos romos.
4
- l =uiste maduro o 2)5 0*2C3)*3 tiene M n@cleos $ las inclusiones
citoplasmticas estn ausentes.
1. AME9AS NO PATOGENAS DEL INTESTINO GRUESO:
4abitan la lu/ del intestino grueso, donde se alimentan generalmente de #ragmentos de
heces $ de bacterias entricas. Presentan la #ase de tro#o/oito $ "uiste.
n la prctica sern identi#icadas en la #ase de "uiste.
a. Entamoeba hartmanni( s #recuentemente llamada Lpe"ue.a histol$ticaP por"ue
comparte las mismas caractersticas mor#ol'gicas, a eIcepci'n del tama.o, "ue es
menor. l tro#o/oito generalmente mide de O a CD m $ el "uiste de G hasta CD m
de dimetro.
b. Entamoeba coli( l tro#o/oito es de ma$or tama.o "ue E. histolytica. La emisi'n
de seud'podos de bordes romos es lenta, el ectoplasma $ endoplasma es poco
di#erenciado $ el n@cleo presenta un cariosoma grande de posici'n eIcntrica.
C!#!0"(#3,"i0!, -(l 8*i,"((
- n!oltura "ustica ntida.
- 2orma redonda u o!al con presencia de C hasta O n@cleos.
- Cuerpos cromatoidales de eItremos agu/ados, !acuola de gluc'geno de borde
poco de#inido $ de color caoba al te.irse con Lugol, en loa =uistes 0nmaduros.
- Los =uistes +aduros presentan O n@cleos bien di#erenciados con cariosoma
eIcntrico.
c. Endolimax nana( l tro#o/oito es pe"ue.o ,de O a CDm-, el citoplasma presenta
un estrecho ectoplasma claro $ un endoplasma #inamente granular $ !acuolado, el
n@cleo con un cariosoma grande altamente re#ringente.
Por su pe"ue.o tama.o generalmente son obser!ados en su #ase de "uiste "ue
tiene las siguientes caractersticas(
- 2orma o!oide, con un tama.o promedio de G a O m.
- *@cleo con un cariosoma grande !isible, de posici'n central o eIcntrica.
- l =uiste 0nmaduro presenta de C a E n@cleos pe"ue.os, re#ringentes, $ una
!acuola de gluc'geno en el citoplasma.
- l =uiste +aduro tiene M n@cleos bien di#erenciados.
GRAFI8UE TODAS SUS O9SERVACIONES
CUESTIONARIO:
C. s"uematice en #orma eIplicati!a el ciclo !ital de Entamoeba histolytica.
E. 0ndi"ue la #orma de preparaci'n del 5uero 2isiol'gico para el +todo Directo o en
2resco.
3. 0n!estigue por "u se recomienda no parar la centri#ugadora con las mano.
M. n lo "ue respecta a Entamoeba histolytica, mencione 1d.( el estadio in#ectante,
estadio pat'geno, $ estadio de diagn'stico.
9I9LIOGRAFIA
)30)5, ). EDDE. Parasitologa +dica. C ed. Publicaciones +editerrneo. Chile.
:)<8, P. $ col. EDDE. Parasitologa Clnica de Craig $ 2aust. 3 ed. dit. +.5.D.
+Iico.
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