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Duplicacin de ADN

Aunque existen algunas diferencias el proceso es bsicamente igual en bacterias y en eucariotas:


La secuencia de nucletidos en el origen de replicacin del ADN acta como seal de iniciacin.
La enzima helicasa separa las dos hebras de la doble hlice para que sirvan de molde. El desenrollamiento de la hlice da
lugar al superenrollamiento en los extremos de la horquilla de replicacin, actuando entonces las enzimas
topoisomerasas que liberan esta tensin. La topoisomerasa I corta una hebra y la topoisomerasa II las dos. Una vez
liberada la tensin vuelven a sellar la doble hlice.
Mientras se separan las dos hebras se van uniendo las protenas estabilizadoras (SSB), de forma que se mantengan
separadas ambas hebras y se estabilice la horquilla de replicacin.
El proceso de duplicacin es bidireccional; hay dos horquillas de replicacin por cada burbuja de replicacin.
La primasa (una ARN-polimerasa) sintetiza los fragmentos de ARN que sirven de cebador (primer) para la ADN-polimerasa.
La ADN-polimerasa III incorpora en direccin 5'3' los nucletidos, formando una nueva hebra de crecimiento continuo
denominada hebra conductora.
Sobre la otra hebra antiparalela, primero, a unos mil nucletidos del origen de replicacin, se sintetizarn unos cincuenta
nucletidos de ARN que servirn para que la ADN-polimerasa III incorpore los desoxinucletidos. Una vez formados,
la ADN-polimerasa I, gracias a su funcin exonucleasa, ir eliminando los tramos de ARN y los ir rellenando con ADN,
sintetizados gracias a su actividad polimerasa.
Finalmente interviene la ADN-ligasa, que empalma entre s los distintos fragmentos de la hebra de crecimiento discontinuo,
denominada hebra retardada.
El proceso se puede dividir en 3 fases: iniciacin, elongacin y terminacin.
Iniciacin
Mediante consumo de ATP en direccin a la horquilla de replicacin, la helicasa acta rompiendo los puentes de hidrgeno que
mantienen unida la doble hlice. El siguiente conjunto de protenas reclutadas son las denominadas protenas SSB (protenas
ligantes de ADN monocatenario) encargadas de la estabilizacin del ADN monocatenario generado por la accin de las helicasas,
impidiendo as que el ADN se renaturalice o forme de nuevo la doble hlice, de manera que pueda servir de molde. Por otro lado,
conforme las helicasas van avanzando se van generando superenrollamientos en la doble cadena de ADN por delante de la horquilla.
Las topoisomerasas son las enzimas encargadas de eliminar los superenrollamientos cortando una o las dos cadenas de ADN y
pasndolas a travs de la rotura realizada, sellando a continuacin la brecha.
Elongacin
En el siguiente paso, la holoenzima ADN Pol III cataliza la sntesis de las nuevas cadenas aadiendo nucletidos sobre el molde. Esta
sntesis se da bidireccionalmente desde cada origen, con dos horquillas de replicacin que avanzan en sentido opuesto. Cuando el
avance de dos horquillas adyacentes las lleva a encontrarse, es decir, cuando dos burbujas se tocan, se fusionan, y cuando todas se
han fusionado todo el cromosoma ha quedado replicado.
As, durante la sntesis, en cada horquilla de replicacin se van formando dos copias nuevas a partir del cebador sintetizado en cada
una de las dos hebras de ADN que se separaron en la fase de iniciacin, pero debido a la unidireccionalidad de la actividad
polimerasa de la ADN Pol III, que slo es capaz de sintetizar en sentido 5 3', la replicacin slo puede ser continua en la hebra
adelantada; en la hebra rezagada es discontinua, dando lugar a los fragmentos de Okazaki.
Una vez se han juntado todos se completa la doble hlice de ADN.
Terminacin (de los genomas lineales)
El final de la replicacin se produce cuando la ADN polimerasa III se encuentra con una secuencia de terminacin. Se produce
entonces el desacople de todo el replisoma y la finalizacin de la replicacin.



Las funciones biolgicas del ADN incluyen el almacenamiento de informacin (genes y genoma), la codificacin de protenas
(transcripcin y traduccin) y su autoduplicacin (replicacin del ADN) para asegurar la transmisin de la informacin a las clulas
hijas durante la divisin celular. La funcin principal del ADN es mantener a travs del cdigo gentico la informacin necesaria para
crear un ser vivo idntico a aquel del que proviene (o muy similar, en el caso de mezclarse con otra cadena como es el caso de la
reproduccin sexual o de sufrir mutaciones).
Genes y genoma
El ADN se puede considerar como un almacn cuyo contenido es la informacin (mensaje) necesaria para construir y sostener el
organismo en el que reside, la cual se transmite de generacin en generacin. El conjunto de informacin que cumple esta funcin
en un organismo dado se denomina genoma, y el ADN que lo constituye, ADN genmico.
El ADN genmico (que se organiza en molculas de cromatina) se encuentra en el ncleo celular de los eucariotas, adems de
pequeas cantidades en las mitocondrias y cloroplastos. En procariotas, el ADN se encuentra en un cuerpo de forma irregular
denominado nucleoide.

El ADN codificante
La informacin gentica de un genoma est contenida en los genes, y al conjunto de toda la informacin que corresponde a un
organismo se le denomina su genotipo. Un gen es una unidad de herencia y es una regin de ADN que influye en una caracterstica
particular de un organismo (como el color de los ojos, por ejemplo). Los genes contienen un "marco de lectura abierto" que puede
transcribirse, adems de secuencias reguladoras. Las encargadas de este mecanismo son las protenas.
La funcin principal de la herencia es la especificacin de las protenas, siendo el ADN una especie de plano oreceta para producirlas.
La mayor parte de las veces la modificacin del ADN provocar una disfuncin proteica que dar lugar a la aparicin de
alguna enfermedad. Pero en determinadas ocasiones, las modificaciones podrn provocar cambios beneficiosos que darn lugar a
individuos mejor adaptados a su entorno.
Las aproximadamente treinta mil protenas diferentes en el cuerpo humano estn constituidas por veinte aminocidos diferentes, y
una molcula de ADN debe especificar la secuencia en que se unen dichos aminocidos.
En el proceso de elaborar una protena, el ADN de un gen se lee y se transcribe a ARN. Este ARN sirve como mensajero entre el ADN
y la maquinaria que elaborar las protenas y por eso recibe el nombre de ARN mensajero o ARNm. El ARN mensajero sirve de molde
a la maquinaria que elabora las protenas, para que ensamble los aminocidos en el orden preciso para armar la protena.
El ADN no codificante
El ADN del genoma de un organismo puede dividirse conceptualmente en dos: el que codifica las protenas (los genes) y el que no
codifica. En muchas especies, slo una pequea fraccin del genoma codifica protenas.
El ADN no codificante (tambin denominado ADN basura o junk DNA) corresponde a secuencias del genoma que no generan una
protena (procedentes de transposiciones, duplicaciones, translocaciones y recombinaciones de virus, etc.) Hasta hace poco tiempo
se pensaba que el ADN no codificante no tena utilidad alguna, pero estudios recientes indican que eso es inexacto. Entre otras
funciones, se postula que el llamado "ADN basura" regula la expresin diferencial de los genes.

Recientemente, un grupo de
investigadores de la Universidad de Yale ha descubierto una secuencia de ADN no codificante que sera la responsable de que los
seres humanos hayan desarrollado la capacidad de agarrar y/o manipular objetos o herramientas.
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Algunos genes no codifican protenas, pero s se transcriben en ARN: ARN ribosmico, ARN de transferencia y ARN de
interferencia (ARNi, que son ARN que bloquean la expresin de genes especficos
Transcripcin y traduccin
En un gen, la secuencia de nucletidos a lo largo de una hebra de ADN se transcribe a un ARN mensajero (ARNm) y esta secuencia a
su vez se traduce a una protena que un organismo es capaz de sintetizar o "expresar" en uno o varios momentos de su vida, usando
la informacin de dicha secuencia.
La relacin entre la secuencia de nucletidos y la secuencia de aminocidos de la protena viene determinada por el cdigo gentico,
que se utiliza durante el proceso de traduccin o sntesis de protenas. La unidad codificadora del cdigo gentico es un grupo de
tres nucletidos (triplete), representado por las tres letras iniciales de las bases nitrogenadas (por ej., ACT, CAG, TTT). Los tripletes
del ADN se transcriben en sus bases complementarias en el ARN mensajero, y en este caso los tripletes se denominan codones.
Replicacin del ADN
La replicacin del ADN es el proceso por el cual se obtienen copias o rplicas idnticas de una molcula de ADN. La replicacin es
fundamental para la transferencia de la informacin gentica de una generacin a la siguiente y, por ende, es la base de la herencia.
El mecanismo consiste esencialmente en la separacin de las dos hebras de la doble hlice, las cuales sirven de molde para la
posterior sntesis de cadenas complementarias a cada una de ellas. El resultado final son dos molculas idnticas a la original.


El ADN (cido desoxirribonucleico) es la molcula donde se encuentra toda la informacin necesaria para que los seres vivos puedan
llevar a cabo todas sus funciones vitales. En ella residen tambin todas las particularidades que hacen de cada individuo alguien
nico. A travs del ADN se heredan determinadas caractersticas de padres a hijos y as sucesivamente de generacin en generacin.
Hace apenas algo ms de veinte aos, en la ciudad de Leicester, Inglaterra, el cientfico Alec Jeffreys, casi por azar, descubri que
todos los individuos podan ser identificados a partir de un patrn especfico de su ADN, al que l mismo denomin huella
gentica. La huella gentica poda identificar a un nico individuo en la poblacin mundial.
Como consecuencia de este hallazgo, surgieron las pruebas de ADN y con ellas, se abrieron ante nosotros infinitas posibilidades para
su aplicacin, desde analizar y determinar los vnculos biolgicos entre padres, hijos, hermanos, abuelos o nietos hasta la resolucin
de los ms intrincados casos criminales.
El ADN se ha convertido en una de las herramientas ms precisas para la identificacin de individuos y es utilizado por miles de
laboratorios fundamentalmente en:
(1) La identificacin de vestigios biolgicos de inters en la investigacin criminal de muy diversos delitos.
(2) La identificacin de restos humanos y personas desaparecidas.
(3) La investigacin biolgica de la paternidad y otras relaciones de parentesco.
Desde el principio de su implementacin, los anlisis genticos se utilizaron, como todava se hace en la actualidad, para resolver
casos concretos. Sin embargo, con el paso del tiempo, en muchos pases se consider conveniente reunir en una base de datos los
perfiles genticos de grupos de sujetos que hubiesen cometido delitos con el fin de armar bancos con perfiles de ADN de individuos
que permitieran el rastreo de criminales.
Al da de hoy, muchas naciones, como Alemania, Holanda, Gran Bretaa, Francia o los Estados Unidos, cuentan con Bancos de ADN.
Estas bases facilitan la identificacin de los responsables de delitos, permiten conectar diferentes crmenes cometidos por la misma
persona, descartar sospechosos cuando no existe correlacin entre los perfiles genticos obtenidos en la escena del crimen y los del
detenido; ayudar a correlacionar diferentes sucesos; etctera.
En los sitios donde existen dichos bancos genticos, cuando, bajo las circunstancias previamente legisladas, la polica detiene a un
sospechoso, est autorizada a tomarle una muestra de sangre o saliva, obtener su perfil gentico e introducirlo en la misma base de
datos. Automticamente el sistema coteja los resultados de las evidencias con los del o los imputados y tambin con todos los
perfiles incluidos en la base. Si ambos perfiles coinciden, el sospechoso puede pasar a la categora de culpable o, en caso contrario, a
la de inocente.


Cada molcula de ADN est constituida por dos cadenas o bandas formadas por un elevado nmero de compuestos qumicos
llamados nucletidos. Estas cadenas forman una especie de escalera retorcida que se llama doble hlice. Cada nucletido est
formado por tres unidades: una molcula de azcar llamada desoxirribosa, un grupo fosfato y uno de cuatro posibles compuestos
nitrogenados llamados bases: adenina (abreviada como A), guanina (G), timina (T) y citosina (C).
La unin de la base nitrogenada (citosina, adenina, guanina o timina) con la pentosa (desoxirribosa) forma un nuclesido; ste,
unindose al cido fosfrico, nos da un nucletido; la unin de los nucletidos entre s en enlace diester nos da el polinucletido, en
este caso el cido desoxirribonucleico. Las bases nitrogenadas se hallan en relacin molecular 1:1, la relacin adenina + timina /
guanina + citosina es de valor constante para cada especie animal. Estructuralmente la molcula de ADN se presente en forma de
dos cadenas helicoidales arrolladas alrededor de un mismo eje (imaginario); las cadenas estn unidas entre s por las bases que la
hacen en pares.
Los nucletidos de cada una de las dos cadenas que forman el ADN establecen una asociacin especfica con los correspondientes de
la otra cadena. Debido a la afinidad qumica entre las bases, los nucletidos que contienen adenina se acoplan siempre con los que
contienen timina, y los que contienen citosina con los que contienen guanina. Las bases complementarias se unen entre s por
enlaces qumicos dbiles llamados enlaces de hidrgeno.

TRANSCRIPCION
La transcripcin es el proceso bioqumico de la transferencia de la informacin en una secuencia de ADN a una molcula de ARN. La
molcula de ARN puede ser el producto final o, en el caso de ARN mensajero (ARNm), se puede utilizar en el proceso de traduccin
para producir protenas. La ARN polimerasa es una protena compleja que lleva a cabo el trabajo principal de la lectura de un molde
de ADN y la sntesis de ARN aunque tambin son necesarias las protenas accesorias. La transcripcin ocurre en el ncleo en las
clulas eucariotas. La transcripcin tiene tres grandes fases: iniciacin, elongacin y terminacin.
Iniciacin
Justo antes de la iniciacin, la ARN polimerasa y las protenas accesorias se unen a una molcula de ADN secuencia arriba del punto
de iniciacin. El ADN se desenrolla para separar y exponer la hebra que se transcribe. Entonces, el complejo de ARN polimerasa se
une a una secuencia promotora, que establece la iniciacin de la transcripcin. La polimerasa comienza a sintetizar una hebra de
ARN complementario a un lado de la hebra de ADN, entrando en la porcin de la secuencia codificante del gen que se transcribe.
Elongacin
Durante la elongacin, el alargamiento de una molcula de ARN se produce por la polimerasa del ADN, que lee el cdigo de tripletes
de ADN en la plantilla de hebra. La polimerasa seguir la lectura de la plantilla hasta que alcance una secuencia que proporciona una
seal que indica que la regin transcrita lleg a su fin. Otro ARN polimerasa se puede unir a la promotora para comenzar la sntesis
de otros ARN antes de que el primero haya terminado.
Terminacin
Al finalizar la sntesis de ARNm, esta molcula ya se ha separado completamente del ADN (que recupera su forma original) y tambin
de la ARN polimerasa, terminando la transcripcin. La terminacin es otra etapa distinta de la transcripcin, porque justo cuando el
complejo de transcripcin se ha ensamblado activamente debe desensamblarse una vez que la elongacin se ha completado La
terminacin de la transcripcin se activa cuando el ARN polimerasa se encuentra con una secuencia particular de ADN, haciendo que
la polimerasa pierda afinidad por la plantilla de ADN. En este punto, el ARN polimerasa se desengancha del ADN y la molcula de
ARN se libera para su traduccin o procesamiento post-transcripcional.

Factores de transcripcin
Se requieren otras protenas, adems del ARN polimerasa, para la transcripcin. Estas protenas se llaman factores de transcripcin.
Pueden unirse al ARN polimerasa, interactuar con otros factores de transcripcin o se unen al ADN directamente para afectar la
transcripcin. Los factores de transcripcin son necesarios para un montaje correcto del complejo de iniciacin, y tienen
importantes funciones en el alargamiento y la terminacin.
Regulacin de la transcripcin
La eficacia y el grado en el que se produce la transcripcin est regulada por los factores de transcripcin antes mencionados, as
como por las protenas de unin del ADN. Las protenas supresoras se conectan con el ADN para impedir la iniciacin, prevenir que
ciertos genes se transcriban. Otras molculas pueden interactuar con los supresores, hacindolos salir de sus sitios de unin de ADN,
lo que permite que proceda la transcripcin.
TRADUCCION
Es el proceso que convierte una secuencia de ARNm en una cadena de aminocidos para formar una protena. Es necesario que la
traduccin venga precedida de un proceso de transcripcin. El proceso de traduccin tiene cuatro fases: activacin, iniciacin,
elongacin y terminacin (entre todos describen el crecimiento de la cadena de aminocidos, o polipptido, que es el producto de la
traduccin).
En la activacin, el aminocido (AA) correcto se une al ARN de transferencia (ARNt) correcto. Aunque tcnicamente esto no es un
paso de la traduccin, es necesario para que se produzca la traduccin. El AA se une por su grupo carboxilo con el OH 3' del ARNt
mediante un enlace de tipo ster. Cuando el ARNt est enlazado con un aminocido, se dice que est "cargado".
Iniciacin: El RNA-m llega hasta el ribosoma que est separado en sus dos subunidades y se une a la subunidad mayor; a
continuacin se une la subunidad menor. En los ribosomas existen dos lugares en los que pueden caber transferentes, el llamado
LUGAR P (= peptidil) y el LUGAR A (= aminoacil). El RNA-m se une de tal forma que el primer codn se coloca en el lugar P. Este
primer codon siempre es el mismo en todos los RNA-m (salvo en algunas mitocondrias), es el AUG ledo desde el extremo 5', que
codifica para el aminocido Metionina, con el que se inician todos los procesos de traduccin celular. A continuacin llega hasta ese
lugar P un RNA-t con el aminocido Metionina, y al lugar A llega otro RNA-t con el siguiente aminocido que corresponda, segn las
bases del segundo triplete. En ese momento una enzima une ambos aminocidos mediante un enlace peptdico y todo el complejo
se desplaza un lugar hacia el primer codn, de tal manera que ahora el dipptido se coloca en el lugar P (peptidil) y queda libre el
lugar A (aminoacil).
Elongacin: Al quedar libre el lugar aminoacil se acerca un nuevo RNA-t, segn la secuencia de su anticodn, trayendo un nuevo
aminocido, volviendo a crearse un enlace peptdico y repitindose el desplazamiento del complejo. Estos procesos se repiten
siempre que el codn que aparece en el lugar A tenga sentido.
Terminacin de la cadena polipeptdica: En un momento determinado puede aparecer en el lugar A uno de los codones sin sentido o
de terminacin, con lo que no entrar ningn nuevo RNA-t y el pptido estar acabado, desprendindose del anterior RNA-t y
liberndose al citoplasma al tiempo que los ribosomas quedan preparados para iniciar una nueva traduccin.
La nueva cadena va adquiriendo su estructura secundaria y terciaria a la vez que se va formando, de tal manera que al finalizar ya
tiene su conformacin. En ocasiones la protena no es todava funcional y debe ser procesada, aadindole algo, recortndole algo
o, incluso, debe unirse a otros pptidos para adquirir estructura cuaternaria.