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Indice:
Introduccin y generalidades
La clula y el ciclo celular
El cromosoma
La inmunidad
Los antgenos y anticuerpos
Las clulas implicadas en la produccin de los
anticuerpos
La respuesta inmune
El sistema de complemento
Los antigenos de histocompatiblidad
La gentica del complejo mayor de
histocompatibilidad
Generalidades de inmunologa
Por Rafael Amadeo Mateo Capilla,
Tecn Laboratorio Clnico
Captulo 1. Introduccin y gen-
eralidades

La inmunologa, como ya es bien sabido por
nosotros, es la parte de la biologa que se ocupa
del estudio del sistema inmune, concibiendo como
tal al conjunto de rganos, tejidos y clulas que
en los vertebrados tienen como funcin biolgica
el reconocer elementos extraos o ajenos dando
una respuesta. Esto es lo que llamamos respuesta
inmune.
El hombre, como cualquier otro animal, posee
unos sistemas que ante la invasin de sustancias
extraas al organismo, generalmente microorgan-
ismos, las reconoce y ulteriormente las destruye.
Los animales vertebrados tienen dos grandes
tipos de sistemas que coneren la resistencia o el
estado de inmunidad frente a los agentes patge-
nos:
A) Uno, del que forman parte elementos celulares
como fagocitos (macrfagos), clulas NK (natural
killer o asesinas naturales), factores humorales
bactericidas o bacteriostticos (lisozima, PCR,
complemento, interfern).
Este sistema es natural, es decir, sus compo-
nentes estn siempre presentes y dispuestos para
actuar inmediatamente sin requerir ningn fen-
meno que induzca su generacin.
Carece de especicidad, es decir actan sobre
gran variedad de microorganismos sin que posean
un mecanismo de reconocimiento que les permita
distinguir selectivamente unos de otros.
Tampoco presenta memoria, es decir que no au-
mentan su ecacia al responder al mismo microor-
ganismo en un segundo contacto con l.
B) El segundo sistema inmunitario es mas com-
plejo y ecaz. Son responsables de este sistema
los linfocitos y los anticuerpos. Aquellos se unen
a las sustancias extraas (Antgenos) provocando
su destruccin. Asimismo producen unas sustan-
cias, llamadas anticuerpos, que tambin se unen
a las sustancias extraas provocando una serie de
reacciones tendentes a eliminar el antgeno del
organismo.
Este segundo sistema tiene la capacidad de
memoria. Es decir que en un futuro contacto con
el mismo antgeno, se repite el mismo proceso
inmunitario pero con mayor intensidad y en un
tiempo mucho ms corto
Tambin es concreto, es decir, las clulas y las
sustancias (Ac.) que forman parte de l, recono-
cen a las sustancias extraas (antgenos) actuan-
do sobre ellas. Es decir tienen receptores precisos
por cada uno de los antgenos que puedan existir.
Finalmente, y al contrario que el primer sistema,
los anticuerpos necesitan un estmulo antignico
para que se produzcan en el organismo.
Los dos sistemas el innato y el adaptativo no
actan separadamente sino que interaccionan
ayudndose uno a otro
reaccin antgeno - anticuerpo
Las tcnicas inmunolgicas se basan, casi todas,
en las reacciones Ag.-Ac. y
en las manifestaciones que de dicha reaccin se
derivan.
Capitulo 2. La clula y el ciclo
celular
Todos los organismos vivos estn compuestos por
unidades biolgicas, llamadas clulas, que consti-
tuyen en su conjunto el cuerpo de un ser vivo.
Las clulas se agrupan en tejidos, que a su vez
constituyen el cuerpo. La clula constituye un niv-
el biolgico clave e insustituible para la vida, tanto
para los seres vivos superiores como inferiores.
Vamos a ver algunos rasgos de la morfologa celu-
lar que debemos conocer:
La clula se puede asemejar a un globo lleno de
agua. El globo sera la membrana celular, que
engloba a un contenido lquido, el citoplasma.
Flotando en este citoplasma encontramos var-
ias estructuras. Por un lado los orgnulos u or-
ganelas (mitocondrias, retculo endoplasmtico,
ribosomas...) que son los encargados de realizar
gran parte de las funciones celulares nutricin,
obtencin de energa-. Por otro lado, y tambin
otando en el citoplasma, tenemos al ncleo
rodeado por su propia membrana nuclear. En el
interior del ncleo se hallan el DNA (cido des-
oxirribonucleico). El DNA se organiza formando
los cromosomas, que como sabemos contienen la
informacin gentica de esa clula. El ser humano
tiene su informacin gentica organizada en 23
pares de cromosomas, 46 en total. El ser humano
(al igual que el resto de los mamferos) tiene en el
ncleo de todas las clulas de su cuerpo la misma
informacin gentica, agrupada en los 46 cromo-
somas.
Concurren dos tipos de clulas:
Clulas somticas: Constituyen la mayora
de las clulas de nuestro cuerpo. Contienen
toda la informacin gentica de un individuo,
organizada en 23 pares de cromosomas, 23
procedentes de la madre (vulo) y 23 del
padre (espermatozoide) que se unieron en la
fecundacin. Se las denomina clulas diploide:
2n cromosomas, 2x23 cromosomas.
Clulas germinales, sexuales, gametos:
Estas clulas estn situadas en la gnadas
de los aparatos reproductores femenino y
masculino. Los gametos contienen la mitad
de la informacin gentica de un individuo:
23 cromosomas. Se dice que son clulas
haploide: n cromosomas, 23 cromosomas.
Estas clulas necesitan unirse al gameto
complementario (fecundacin), para completar
as la informacin para dar lugar a un individuo
humano completo. Como sabemos los gametos
son dos:
-varn: espermatozoides, que se forman en
el testculo. -mujer: vulo, que se forma en el
ovario.
El cdigo gentico
El DNA es una macromolcula compleja,
compuesta por dos cadenas o hlices que
se entrelazan entre s formando una doble
hlice. Cada cadena est formada por millones
de eslabones, llamados nucletidos o bases
nitrogenadas (son cuatro: A-T, G-C).
Ambas hlices estn unidas entre s, a nivel de
los eslabones complementarios de cada hlice,
por parejas. La secuencia de los pares de bases
es lo que determina el cdigo gentico.
Segn el orden que sigan esos pares de bases,
se codica una funcin u otra, o simplemente
no se codica nada. El DNA de la clula se
organiza en cromosomas. Cada cromosoma es
una molcula largsima de DNA. El ser humano
tiene su DNA organizado en 23 pares de
cromosomas distintos, es decir, 46 cromosomas.
La mnima secuencia de DNA que es capaz de
codicar una funcin o una estructura completa
se denomina GEN. Sin embargo concurren largas
secuencias del DNA, que si bien molecularmente
se compongan de lo mismo que un GEN (son
una secuencia de nucletidos), no codican
absolutamente, y por lo tanto no se les llama
genes. Algunos han llamado a esas secuencias
vacas, DNA basura. Hoy da se piensa que la
funcin de ese DNA es estructural, es decir,
contribuye a dar estabilidad a la molcula de
DNA. Cada cromosoma contiene miles de genes.
Hoy da se estima que el ser humano tiene ms
de 30.000 genes en sus cromosomas.
La codicacin de las funciones
Como ya dijimos, todas las clulas del cuerpo
humano tienen en su ncleo todos los
cromosomas y por tanto todos los genes, es
decir, toda la informacin de un ser humano.
Si cualquier clula tiene toda la informacin
gentica necesaria para poder codicar todo un
ser humano, cualquier clula de nuestro cuerpo
podra generar un nuevo ser humano?
La cuestin es la siguiente: las clulas de
nuestro cuerpo contienen toda la informacin de
un ser humano, pero SOLO CONSIGUEN LEER
y por lo tanto procesar- la informacin de los
genes que codican la funcin a la que est
llamada esa clula. Por ejemplo y simplicando:
una clula de la piel de la mano tiene toda la
informacin de un ser humano, pero slo le est
permitido leer el gen que codica la piel y el que
codica el que est en la mano. El resto de la
informacin, el resto de los genes, si bien estn
ah, esa clula no los puede leer.
El mecanismo que desarrolla la clula para la
NO LECTURA de los genes, es el sistema de
plegamientos y metilaciones. Al aplicarse estos
sistemas a un gen, ese gen se hace ilegible.
Codicacin del dna
El DNA del individuo embrionario ser
esencialmente idntico al DNA de ese mismo
individuo cuando sea adulto. Sin embargo
observamos que el volumen de informacin
que lee y expresa el DNA embrionario es
abrumadoramente mayor.
1. la totipotencialidad.
En los momentos posteriores a la fecundacin,
el embrin unicelular la primera clula del
nuevo individuo-, tiene en su ncleo toda la
informacin gentica de un nuevo ser humano,
distinto de sus padres. Ese nuevo ser unicelular
posee la capacidad de empezar a desarrollar
todo un individuo humano. El DNA de ese
embrin esta absolutamente legible, se puede
expresar toda la informacin, se consiguen leer
todos los genes.
A las 24 horas se produce la primera divisin
celular. En sus primeros estadios (sus primeras
divisiones celulares), el DNA del zigoto tiene
la peculiaridad de permanecer puro, sin
plegamientos. Por tanto, si separramos
articialmente las dos primeras clulas del
zigoto bicelular, comprobaramos que cada
clula generar un embrin. Estas clulas
del embrin en sus fases iniciales se llaman
CELULAS TOTIPOTENCIALES, es decir, que
consiguen dar lugar a TODO un individuo.
2. La Pluripontencialidad
A medida que el embrin sigue su desarrollo y
se van produciendo ms divisiones celulares,
las clulas embrionarias se van desigualando
hacia funciones y estirpes celulares jados.
Esta diferenciacin se consigue a travs de
los plegamientos en el DNA celular, que dejan
ilegibles los genes que no va a necesitar
expresar esa clula. De esta forma, cuando
el embrin ya est en fase de blastocisto (7-
14 das postfecundacin), , si extrajramos
articialmente las clulas de su Masa Celular
Interna y las cultivramos, nunca daran
lugar a un embrin completo, sino a estirpes
celulares determinadas por los genes que
en ese momento se consiguen leer. Estas
clulas que tienen capacidad para dar lugar
a cualquier estirpe celular, pero no a un
embrin completo, las denominamos CELULAS
PLURIPOTENCIALES. En el caso descrito,
estas clulas pluripotenciales se llamara
tambin CELULAS MADRE EMBRIONARIAS o
STEM CELL EMBRIONARIAS. En sus sucesivas
divisiones, la clula madre embrionaria va
perdiendo su capacidad de dar lugar a todos
los distintos tejidos, al tiempo que empiezan a
diferenciarse, a especializarse hacia un tejido u
otro.
Las clulas en su desarrollo obstentan dos
cualidades bsicas: la pluripotencialidad y la
diferenciacin, que se contraponen: cuanta
ms pluripotencialidad posee una clula,
menos grado de diferenciacin tiene, y al
revs. La pluripotencialidad, propia de la clula
inmadura o indiferenciada, es la capacidad
de una clula para convertirse en todas las
potenciales estirpes celulares. La diferenciacin
sin embargo es la cualidad por la cual la clula
adquiere ya una especializacin dentro de un
tipo celular concreto que le hace no poder
convertirse en otro tipo celular distinto.
En el embrin concurren gran cantidad de
clulas PLURIpotenciales que se multiplican a
gran velocidad para ir dando lugar las diversos
partes y rganos del individuo. A medida que
proliferan esas clulas, se van diversicando
hacia un rgano y otro corporal, producindose
la especializacin: esa clula est ah con una
ubicacin, y con un funcin concreta.
As pues, cuando el feto se halla
aproximadamente en el 3 mes de vida (n de
la etapa de organognesis), la mayor parte de
sus clulas ya se hallan diferenciadas segn el
tipo celular que se necesita para cada rgano.
Tras el nacimiento, prcticamente todos
los tejidos, sobre todo aquellos que ms se
renuevan, conservan una cantidad pequea
variable de clulas pluripotenciales capaces de
multiplicarse y poder as proporcionar clulas
con el n de renovar y reparar los tejidos en
los que residen. Esas clulas formadoras de
mltiples clulas hijas, que estn programadas
para regenerar el tejido donde residen, se
llaman clula MULTIPOTENCIALES. Son otro
tipo de clulas madre o progenitoras (stem
cells).
3. La multipotencialidad
La multipotencialidad se concreta como
la capacidad de formar clulas, pero
exclusivamente del tipo celular del tejido al
que ataen o paran. Estas clulas concurren,
y estn presentes en la totalidad de los
rganos de la medios corporales del adulto, y
coexistiendo en su rgano con el resto de las
clulas diferenciadas, posee una participacin
nica, es decir, se facilita los diversos tipos
celulares que conciertan el rgano en el que
moran con el resultado, pongamos por caso,
de recuperarse las poblaciones de clulas que
se degeneran.
El ciclo celular
El ciclo de una clula es anlogo al de un ser
vivo,nace mediante la divisin de una clula
progenitora, crece, y se reproduce. Todo este
proceso es lo que constituye un ciclo celular
completo

El ciclo celular alcanza cuatro perodos designados
G1, S, G2 Y Mitosis. La fase G1, llamado primera
etapa de crecimiento, se instruye con una clula
hija que procede de la divisin de la clula madre.
La clula se agranda de tamao, se condensa
nuevo material citoplsmico, en especial protenas
y ARN.
El perodo S o de sntesis, en el que cursa la
duplicacin del ADN. Cuando concluye este
perodo, el ncleo contiene el doble de protenas
nucleares y de ADN que al comienzo.
El perodo G2, o segundo perodo de crecimiento,
en el cual se continua sintetizando ARN y
protenas; al termino de este perodo queda
perceptible por el surgir de permutas en la
estructura celular, que son visibles al microscopio
y que son indicadores del principio de la mitosis
o divisin celular. La fase de tiempo que acontece
entre dos mitosis, y que alcanza los perodos G1,
S, y G2, es designado como la interfase.
Captulo 3. El cromosoma
Los cromosomas son las estructuras fsicas de
la clula eucariota que llevan los genes. Estos
cromosomas solo son maniestos en el momento
de la divisin celular, exponiendo a totalidad sus
caractersticas morfolgicas en el momento de la
metafase.
Los cromosomas son los transportadores de
la mayor parte del material gentico y jan
la organizacin de la vida y las caractersticas
hereditarias de cada especie. Los ensayos de
Mendel mostraron que muchos de los caracteres
del guisante dependen de dos factores, despus
llamados genes, de los que cada individuo recibe
un ejemplar procedente del padre y otro de la
madre.
Propiedades cromosomaticos mediante tinciones
especiales vistas al microscopio :
Todos los sujetos de una misma
especie obstentan el mismo nmero de
cromosomas
Los cromosomas se duplican en
el momento de la divisin celular y, una vez
completada, recuperan el estado original
Los cromosomas de una clula
dieren en tamao y forma, y de cada tipo se
hallan dos ejemplares, de modo que el nmero
de cromosomas es de 2N (esta propiedad se
denomina diploida)
En el momento de la formacin
de clulas sexuales (meiosis) el nmero de
cromosomas baja a N. La fertilizacin del vulo
por el espermatozoide, restaura el nmero de
cromosomas a 2N, de los cuales N proceden del
padre y N de la madre
Adems de los cromosomas usuales
que forman parejas, concurren los cromosomas
X e Y que condicionan el sexo. El cromosoma
X est presente en dos copias en las hembras,
mientras que los varones tienen un cromosoma
X y un cromosoma Y. La asignacin del sexo a
un solo par de cromosomas explica la proporcin
aproximadamente igual de varones y hembras.
Los cromosomas se observan mejor
al microscopio en el momento de la metafase,
cuando el DNA se ha duplicado y la cromatina
est muy condensada, formando las cromtidas
(las dos hembras de DNA todava unidas por
un solo centrmero). A partir de las fotografas
obtenidas en esta fase, se crea el cariotipo,
agrupando los cromosomas por parejas
En la especie humana, el nmero de cromosomas
es de 24 pares. Los 22 primeros son parejas de
los cromosomas 1, 2, .. , y 22 (se denominan
autosomas) mientras que la pareja 23 es la XX
y la 24 la XY para los varones o las XX para las
hembras. Los cromosomas dieren en cuanto
a forma y tamao dependiendo del nmero de
pares de bases que contengan. Los cromosomas
X e Y reciben el nombre de cromosomas sexuales
o gonosomas. En el ratn concurren 20 pares
de cromosomas y en la mosca drosophiila
melanogaster tan solo 4 pares.
En el momento de la metafase, las dos hembras
del DNA ya duplicado se hallan unidas por
el centrmero y el cinetocoro. El centrmero
esta constituido por DNA, mientras que el
cinetocoro es una protena. Segn la posicin del
centrmero, los cromosomas reciben el nombre
de metacntrico, submetacntrico, acrocntrico o
telocntrico . En el cariotipo humano los pares de
cromosomas 13, 14, 15, 21, 22 son acrocntricos
y el cromosoma Y es sub-telocntrico.
El centrmero divide el cromosoma en dos brazos:
un brazo corto (brazo q) y un brazo largo (brazo
p). Por convencin, en los diagramas, el brazo q
se coloca en la parte superior.
Algunas tcnicas de tincin hacen que los
cromosomas aparezcan con bandas oscuras y
claras que se alternan en cada uno de los brazos
siguiendo un patrn concreto y repetible para
cada cromosoma. Estas bandas dependen de la
situacin dinmica del cromosoma, de manera
que los cromosomas en profase tienen muchas
ms bandas que los que se hallan en metafase.
La numeracin de estas bandas est alcanzada
por convenio aceptado por los geneticistas e
inicia para cada brazo a partir del centrmero. Las
ltimas bandas reciben el sujo ter (21ter). De
modo que, la posicin de cada uno de los genes
puede ser precisada. En los ltimos aos, los
geneticistas estn terminando de mapear todos
los cromosomas en el llamado proyecto genoma
humano
Tema 4. La inmunidad
La inmunidad es la capacidad de no ser
susceptible o no verse afectado por una
enfermedad o proceso.
Cuando se habla de resistencia especca,
decimos que concurren propiedades del husped
que le coneren resistencia inespecca a la
infeccin. El trmino inmunidad comprende a
todas aquellas propiedades del husped que
le coneren resistencia a un agente infeccioso
concreto. Esta resistencia puede ser de todos los
grados, desde la susceptibilidad casi total hasta la
no susceptibilidad completa.
Por lo tanto resistencia e inmunidad son
trminos relativos que implican nicamente que
un hospedador es ms o menos susceptible a
una infeccin dada que otro. Nada se puede
deducir en relacin a los potenciales mecanismos
de esta resistencia. La inmunidad puede ser
natural o adquirida; y esta logra ser pasiva o
activa. La inmunidad natural es aquella que no
se logra a travs del contacto precedente con el
agente infeccioso sino en gran medida esta jada
genticamente.

La inmunidad innata
La inmunidad innata de una persona son
las barreras que no permiten la entrada de
materiales nocivos al cuerpo, formando as la
primera lnea de defensa de la respuesta inmune.
Algunas de estas barreras son la piel, el cido
estomacal, la mucosa (atrapa microorganismos
y partculas pequeas), el reejo de la tos y
enzimas en las lgrimas y las grasas de la piel.
Si un antgeno traspasa las barreras externas, es
atacado y destruido por otras partes del sistema
inmunolgico. La inmunidad innata tambin
incluye aquellas cosas que hacen resistentes a los
humanos a muchas de las enfermedades de los
animales.
El sistema inmunolgico incluye ciertos tipos
de glbulos blancos, al igual que sustancias
qumicas y protenas en la sangre (como protenas
del complemento e interfern), algunas de las
cuales atacan directamente a las sustancias
extraas en el cuerpo y otras trabajan juntas para
ayudar a las clulas del sistema inmunolgico.
La respuesta inamatoria (inamacin) es parte
de la inmunidad innata y se presenta cuando
los tejidos son lesionados por bacterias, trauma,
toxinas, calor o cualquier otra causa. Las
sustancias qumicas circunscribendo histamina,
bradiquinina, serotonina y otras son liberadas por
el tejido daado y hacen que los vasos sanguneos
derramen lquido en los tejidos, lo que deriva en
una inamacin localizada. sto ayuda a aislar la
sustancia extraa del contacto con otros tejidos
corporales.
Las sustancias qumicas tambin atraen a
los glbulos blancos que se comen a los
microorganismos y clulas muertas o daadas. El
proceso por el cual estos glbulos blancos rodean,
sumergen y destruyen las sustancias extraas se
llama fagocitosis y las clulas son colectivamente
llamadas fagocitos, las cuales nalmente mueren.
El pus se forma debido a la acumulacin de tejido
muerto, bacterias muertas y fagocitos vivos y
muertos.
Inmunidad adquirida
Cualquier forma de inmunidad no innata, sino
que se adquiere a lo largo de la vida. Puede ser
natural o articial e inducida pasiva o activamente.
La inmunidad adquirida de forma natural se
obtiene mediante el desarrollo de anticuerpos
como consecuencia de un episodio infeccioso
previo o por la transmisin de anticuerpos de la
madre al feto a travs de la placenta o al recin
nacido a travs del calostro.
La inmunidad pasiva
Forma de inmunidad adquirida debida a la accin
de los anticuerpos transmitidos de forma natural
a travs de la placenta de la madre al feto o a
travs del calostro de la madre al lactante o bien
articialmente por inyeccin de un suero como
tratamiento prolctico de alguna enfermedad.
La inmunidad pasiva no es permanente como la
activa.
Clulas plasmticas clula linfoide o linfocitoide
que se localiza en la mdula sea y el tejido
conjuntivo y aparece a veces en la sangre
perifrica. Posee un ncleo excntrico con
material cromatnico de gran anidad tintorial
que se distribuye segn el patrn que recuerda
los radios de una rueda o esfera de reloj. Las
clulas plasmticas intervienen en el mecanismo
inmunolgico y se producen en grandes
cantidades en el mieloma mltiple.
Tema 5. Los antgenos y anti-
cuerpos
Molcula, generalmente proteica, que da lugar
a la formacin de un anticuerpo con el que
reacciona especcamente.
Es una sustancia extraa al organismo capaz de
inducir una respuesta inmunitaria, es decir, capaz
de provocar la aparicin de anticuerpos o de
clulas que actan sobre ella.
En la supercie del antgeno concurren unas
estructuras, trozos o fragmentos moleculares,
que son las que verdaderamente van a
reaccionar con el anticuerpo y con las clulas
que las van a atacar. Estos fragmentos se llaman
determinantes antignicos o eptopos. Un Ag.
es ms inmunognico cuanto mayor nmero de
determinantes antignicos posea.
Puede haber en un Ag. varios determinantes
antignicos del mismo tipo o diversos. Consiguen
reaccionar todos con el Ac. o Acs. o no.
El n de determinantes antignicos presentes en
un Ag. es la valencia total del antgeno. El n de
molculas de Ac. que se consiguen unir al mismo
tiempo con el Ag., o lo que es lo mismo, el n de
determinantes antignicos expuestos, es la
valencia efectiva o funcional del antgeno.
La composicin qumica del Ag. puede ser
variada. En general son protenas, si bien tambin
consiguen ser lpidos o glcidos, pero tienen
menor poder antignico o inmunognico.
Los antgenos particulados, como virus,
bacterias o hemates extraos, son altamente
inmunognicos.
Eptopo: Determinante antignico que produce
una interaccin especca reversible con una
inmunoglobulina. Consiste en un grupo de
aminocidos localizados sobre la supercie del
antgeno.
Hapteno: sustancia no proteica que interacciona
con el anticuerpo en los puntos de unin de
ste con el antgeno. A diferencia del antgeno
verdadero, no es capaz de inducir la formacin
de anticuerpos; sin embargo, al unirse a una
protena portadora, si puede inducir una respuesta
inmunitaria.
Clulas asesinas: Nula o clulas K, linfocito
que se produce en la mdula sea y carece de
las caractersticas marcadores de supercie de
los linfocitos B y T. Representa una proporcin
pequea dentro de la poblacin de linfocitos.
Estimuladas por la presencia de anticuerpos,
puede aparentemente atacar ciertas dianas
celulares de forma directa.
Clulas dendrticas: se originan de la mdula
sea, circulan en la sangre y colonizan los rganos
linfoides y la epidermis en donde se les llama
clulas de Langerhans. En estos lugares ellas son
responsables de la presentacin de los antgenos
a los linfocitos. Para algunos autores estas clulas
se derivan de los monolitos. Algunos utores estas
clulas se derivan de los monocitos.
Tolergeno:
Macrfago: Clula fagocitara del sistema retculo-
endotelial como las clulas de kuffer del hgado,
los esplenocitos del bazo y los histiocitos del tejido
conjuntivo.
Fagocitosis: Proceso por el cual determinadas
clulas engullen y destruyen microorganismos en
sus vacuolas intracitoplasmticas (fagolisosomas).
Interfern: Protena celular natural formada
cuando se expone las clulas a un virus u otra
partcula extraa de cido nuclico. Induce
la produccin de la protena de inhibicin de
traduccin en las clulas, produciendo tambin
un bloqueo en la traduccin del ARN viral de las
clulas infectadas y ofreciendo as proteccin a
otras clulas contra virus (evita que se extienda el
proceso infeccioso). El interfern es epecco de
especie

Los anticuerpos
Los anticuerpos son glicoprotenas (protenas
unidas a azcares) (inmunoglobulinas)
secretadas por un tipo particular de clulas, los
plasmocitos. Los plasmocitos son el resultado de
la proliferacin y diferenciacin de los linfocitos B
que han sido activados. Su propsito es reconocer
cuerpos extraos invasores como las bacterias y
virus para mantener al organismo libre de ellos.
La produccin de anticuerpos forma parte de la
respuesta inmune humoral
Cada molcula de anticuerpo est compuesta
por cuatro cadenas polipeptdicas (tetrapptido)
unidas por puentes disulfuro (-S-S-). En las cuatro
cadenas, iguales dos a dos, se desigualan:
Cadenas ligeras L (light): estn compuestas
por alrededor de 220 aminocidos, con dos
regiones, una variable de 110 aminocidos en el
extremo amino-terminal, y una constante de 110
aminocidos en el extremo carboxi-terminal.
Cadenas pesadas H, heavy, las cuales estn
constituidas por 440 aminocidos, menos dos
tipos que tiene 550. Al igual que en las ligeras
se desigualan dos regiones, una variable de 110
aminocidos en el extremo amino-terminal, y
una constante de 330-440 en el extremo carboxi-
terminal.
Concurren dos clases de cadenas ligeras, kappa
y lambda, que consiguen ser diferenciadas por
antisueros precisos. Cada tipo de cadena tiene
un dominio variable (VH y VL, respectivamente)
y otros constantes (CH y CL) jados por la
secuencia de aminocidos. Los dominios variables
estn unidos a los constantes por regiones J (de
Joining, unin).
Las dos cadenas pesadas H que se unen entre
ellas mediante dos puentes disulfuro, y cada una
de ellas se une a una cadena ligera L mediante
otros puentes disulfuro que se produce a nivel
del extremo carboxi-terminal de la cadena ligera,
adquiriendo as una forma de Y.Cada brazo de la Y,
o fragmento Fab (de antigen binding Fragment),
se une al antgeno de forma independiente, o
sea que el anticuerpo es bivalente. El resto de la
molcula, o fragmento Fc (ya que cristaliza con
facilidad) no participa en la unin con el antgeno
sino que es reconocido por los receptores
celulares precisos, y contribuyeendo as al proceso
mediante el cual el antgeno es destruido.
La mayora de los anticuerpos se desigualan
de otras protenas por no presentar catlisis
enzimtica en su funcin, por lo que
tradicionalmente se consideran protenas de
reconocimiento de supercies moleculares. Sin
embargo, en la dcada de los aos 90 del siglo
XX y principios del siglo XXI diversos estudios
de inmunologa encontraron anticuerpos con
propiedades catalticas, dichos anticuerpos
han recibido el nombre de Abzimas. Dichas
inmunoglobulinas se hallan en cantidades bajas
en el suero de personas sanas. Un ejemplo de
la concurrencia de las abzimas en el cuerpo
humano fue la deteccin de Abzimas contra
ADN en la leche materna. Entre algunas otras
de estas actividades catalticas detectadas estn
las de peptidasas inespeccas y amilolticas
(degradacin de almidn). Por otro lado se ha
observado un incremento en el nivel de abzimas
en enfermedades de tipo autoinmune.
Clasicacin
En el ser humano concurren cinco clases de
anticuerpos, conocidas por el nombre de
inmunoglobulinas: G (IgG), A (IgA), M (IgM), D
(IgD), E (IgE), que dieren en tamao, carga
elctrica, composicin de aminocidos y azcares.
La inmunoglobulina G representa el 80% del total.
la IgG, esta inmunoglobulina puede atacar a
cualquier tipo de patgeno, por ejemplo virus,
bacterias y hongos, bloqueando sus toxinas. Tiene
cuatro subtipos, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4.
IgA representa alrededor del 15 al 20% de las
inmunoglobulinas de la sangre. Acta contra
patgenos que contactan con la supercie
corporal, ingeridos o inhalados. Concurren dos
formas: IgA1 e IgA2.
IgM es una inmunoglobulina que puede detectar
el tipo de ABO sanguneo de una persona.
Tambin es importante en el diagnstico de fase
aguda de distintas infecciones.
IgD constituye alrededor del 1% en la membrana
plasmtica de los linfocitos B. Participa en el
desarrollo de clulas de memoria en los linfocitos
B.
IgE es una inmunoglobulina que se halla en
la membrana de los baslos y del mastocito.
Participa en las reacciones de hipersensibilidad, y
en la respuesta a parsitos.

Captulo 7. Las clulas impli-
cadas en la produccin de los
anticuerpos
Se considera actualmente que tres tipos de clulas
participan en las diversos fases que, despus de
la introduccin de la sustancia extraa antignica,
desemboca en la produccin de anticuerpos.
El macrfago es la primera clula que entra en
accin cuando un agente extrao, por ejemplo un
microbio, penetra en el organismo. Este leucocito,
que se halla en el bazo, la cavidad peritoneal,
los pulmones y, en general en todas las puertas
de entrada del individuo, es una clula bastante
grande (20-25m) capaz de movimientos rpidos,
que se desplaza continuamente por el cuerpo y
se dirige hacia los lugares de invasin microbiana.
Tiene la notable propiedad de reconocer las
clulas o sustancias extraas, al igual que las
clulas envejecidas del organismo, de ingerirlas
y de destruirlas para que sean eliminadas
ulteriormente.
Cuando estos antgenos estaos han sido
modicados por la digestin que ha tenido lugar
en el interior de los macrfagos, se produce una
transferencia del macrfago a la clula productora
de anticuerpos, llamada clula B.
No se sabe actualmente claramente si la sustancia
transferida es un cido nucleico (ARN) o ms
probablemente, un complejo antignico - ARN.
La clula B proviene de la mdula sea (de ah
su nombre, derivado del Bone Marrow). Fue
descubierta primero en los pjaros en un rgano
linfoide: la bolsa de Fabricio. En los animales
se halla este tipo de clula tambin en el bazo
y en los ganglios linfticos. Su aspecto es el de
un linfocito o el de un plasmocito. sta ltima
clula posee una maquinaria de sntesis proteica
muy desarrollada: el retculo endoplsmico. Los
anticuerpos son sintetizados sobre los ribosomas
que tapizan las vesculas de este retculo. El
linfocito no tiene un equipo de sntesis tan
desarrollado, pero no hay duda de que es tambin
productor y secretor de anticuerpos.
El nombre de clula B caracterizan una categora
funcional y no un tipo morfolgico ,se trata en una
nocin terica que ha sido puesta de maniesto
por claman 10 y por Miller y Mitchel 11 cuando
estos autores han demostrado que dos tipos
de clulas linfoides a dems de los macrfagos
,concurran en las sntesis de anticuerpos la clula
B que produce y segrega el anticuerpo y la clula
T se invierte en la sensibilizacin de la clula B .
La clula T es una clula derivada del timo. Se
sabia que hacia tiempo que el timo, que es un
rgano vestigtial en el adulto tiene un cierto
papel inmunolgico pero solo hace muy poco
,gracias a los trabajos de Miller se advirti su gran
importancia en las defensas inmunolgicas .Los
ratoncillos recin nacidos timectomizados privados
de timo por una operacin se deenden muy mal
contra todo tipo de infeccin y consiguen aceptar
injertos de piel de ratn o de otras rasas cuando
estos injertos serian indiscutiblemente rechazados
por un ratoncillo normal existe un ejemplo
natural de una deciencia ,el de los ratones
desnudos que estn genticamente desprovistos
de timo . no son estas clulas t las que fabrican
los anticuerpos ,su presencia es indispensable
por que las reaccionan con el anfgeno por un
mecanismo actualmente desconocido despus
estimulan las clulas B estimuladas por si mismas
por ellas por su parte por el anfgeno o uno de los
determinantes de este.
La cooperacin celular
El descubrimiento de estas cooperacin celular
ha abierto un nuevo capitulo apasionante de
la siologa inmunitaria me parece esenciales
dos aspectos de esta cooperacin el detalle del
movimiento de cooperacin y la especicad de
esta.
En los que conciernen el primer punto, nuestras
ideas han evolucionado desde hace diez aos
mientras que despus del descubrimiento del
fenmeno de cooperacin entre clula T y B
se pensaba que esta cooperacin se hacia
por contacto directo se sabe ahora que esta
colaboracin se ejerce por medio de sustancias
producidas por las clulas T y que difundindose
,consiguen alcanzar las clulas B .
El problema fundamental que queda planteado
consiste en la especicad de la estimulacin
de la celular hay un clon especial de clulas T
preparado para reaccionar para cada anfgeno
,susceptible de penetrar en el organismo o esta
estimulacin tiene lugar de manera no especica
,es decir no importa que antgeno estimulado no
importa que clula T .Dicho de otra manera ,las
clulas T obstentan en su supercie receptores
precisos no solo tipo de receptor por clon para
el antgeno es difcil tener una respuesta a esta
pregunta ,mas a un cuando la identicacin
misma de la clula T cada vez es menos segura .
Ninguna caracterstica segura permite denir
actualmente una clula T se piensa cada vez mas
que las clulas T es un estado siolgico por el
que pasan numerosa clulas linfoides ,mas que un
tipo celular invariable.
La propiedad inmunolgica de la sustancia
Una sustancia debe tener un peso molecular
mnimo para ser antignico y ciertas
conguraciones qumicas son mas antihiginicas
que otras etc.
Por otra parte no es posible de inmunogenecidad
absoluta pero hay que considerar la pareja
antigenica receptor en efecto la condicin
siolgica del amanal receptor ,la administracin
eventual de sustancias coadyuvantes BCG aceite
mineral isolecitina y nalmente la constitucin
gentica de este animal juegan un papel
determinante y esto de manera desigual para
cada uno de los tipos de anfgenos examinados.
Entre todas estas preguntas la que me parece
mas importante es que hace que un organismo
no reaccione a sus propios anfgenos mientras
que por otro lado estos son perfectamente
inmunogenicos en otro organismo genticamente
desigual esto es lo que se llama tolerancia
natural esta gestin se a progresado desde
que sea descubierto el medio de inducir esta
tolerancia por loa introduccin de esta clula en
los recin nacidos Medawar ,Brent ,Billingham es
la tolerancia adquirida no obstante el mecanismo
que gobierna el auto reconocimiento en todo
individuo se nos escapa a un completamente
todas las teoras sobre las respuestas inmunitarias
buscan explicar este fenmeno pero hay que decir
que estas explicaciones conservan un carcter
hipottico.
Y sin embargo la comprensin de este mecanismo
de reconocimiento tendra una importancia terica
tanto como un alcance practico considerable como
se suea por ejemplo en las posibilidades que
se abriran en el dominio de los transplantes si
se pudiera ,a voluntad ,suprimir el fenmeno del
rechazo se decir que actualmente el problema del
rechazo de injerto no esta resuelto se emplean
recursos provisionales para mantener los injertos
del rin .En otros casos injertos de medula de
corazn el rechazo es prcticamente ineludible y
las drogas inmunosupresivas verdadero veneno
,obstentan continuamente el peligro la vida del
paciente.
Por ultimo otro que campo tambin se beneciara
mucho de un mejor mecanismo del mecanismo
de tolerancia es el del cncer el efecto se admiten
generalmente que el desarrollo clnico del cncer
no solo esta unido a la aparicin de algunas
clulas cancerosas fenmeno que se producira
corrientemente en todo individuo sano sino al
hecho que esta clula escapara a la vigilancia
inmunolgica que se ejerce ordinariamente sobre
todas las clulas del organismo as la enfermedad
cancerosa seria el resultado de un fallo de
la defensa inmunitaria no considerandola el
organismo estas clulas cancerosas como extraas
si bien ellas posean probablemente antgenos
que las distingan de las clulas sanas .en pues
evidente que el conocimiento del proceso del
reconocimiento y de vigilancia debera conducir
a mejorar los medios de lucha contra el cncer e
incluso a su curacin .
La memoria inmunolgica
Cuando un animal a sido puesto una primera
vez en contacto con ciertas sustancias extraas
inmunognicas estimulacin primaria., guarda
un recuerdo de este contacto y reacciona mas
violentamente y antes en un encuentro ulterior
de la misma sustancia ,es el efecto de memoria
inmunolgica esta memoria es ilustrada de
manera dramtica por el caso de la enalexia
,descubierta por portier y Richerten 1907 en
donde el segn contacto de un ser humano con
ciertas medusas podran provocar un Shock fatal.
Esta capacidad de respuesta de manera acelerada
e intensiva a un segundo estimulo inmunitario
que se llama recuerdo ha sido llamada reaccin
secundaria, esta reaccin parece una caracterstica
fundamental del mecanismo inmunitario se la
ve manifestarse ,en lo que concierne al rechazo
de los injertos de un individuo de otra especie
y haberlo rechazado en siete das por ejemplo
eliminacin un injerto de los mismos donantes
en un tiempo claramente mas corto el animal
recuerda su primer contacto con el injerto extrao
y reaccionara mas fuertemente en el segundo
contacto esta caracterstica es tan fundamental
que se puede decir que todo fenmeno de
memoria especica en una reaccin de rechazo
permite asimilar este fenmeno a una respuesta
inmunitaria por su puesto la memoria inmunitaria
esta muy marcada en lo que concierne a la
sntesis de anticuerpos en los vertebrados la
naturaleza la cantidad y la velocidad de aparicin
de anticuerpos se modican en el transcurso de la
respuesta secundaria en un ratn por ejemplo.
La anidad de los anticuerpos para el antgeno
generalmente aumenta en el transcurso de esta
respuesta ,por otra parte el animal fabrica en
esta ocasin a un mas anticuerpos IgG peso
molecular 160.000 que anticuerpos IgM peso
molecular 900.000,cuando en el transcurso
de esta respuesta primaria es a la inversa
nalmente la velocidad de aparicin de las clulas
productoras de anticuerpos as como su numero
total paralelamente a la tasa de anticuerpos en el
suero se ve muy aumentado la duracin de esta
memoria puede ser considerable de tal manera
que los ancianos que fueron afectados por la gran
epidemia de gripe de 1918 son todava 54 aos
mas tarde ,capases de reconocer la sepa que les
infecto y responder mediante una reaccin de
acuerdo .es evidente que hay que postular que el
almacenamiento de informacin se efecta gracias
a clulas memoria o a sustancias memoria o a las
dos.
Captulo 8. La respuesta in-
mune
Los seres superiores deenden constantemente
su integridad biolgica frente a agresiones,
procedentes del exterior as como del propio
organismo. De no ser as, moriran como
consecuencia de tumores e infecciones de
bacterias, virus, hongos, etc. Para que estos
fenmenos de defensa se lleven a cabo, los
organismos disponen de un conjunto de
elementos especiales, conocido como sistema
inmune. La capacidad de defensa se adquiere
antes de nacer y se madura y consolida en los
primeros aos de la vida fuera del seno materno.
La respuesta inmune inespecca es la primera
barrera defensiva del organismo y no requiere
sensibilizacion previa. Este tipo de respuesta es
mediada por clulas con capacidad fagoctica y
clulas asesinas naturales.
La respuesta especca o adquirida se desarrolla
solo frente a la sustancia que indujo su iniciacin
y en ella participan prioritariamente los linfocitos
y los elementos solubles liberadas por los mismos,
anticuerpos y linfocinas. Todas las sustancias que
se comportan como extraas a un organismo
frente a las cuales ste desarrolla una respuesta
inmune especca, se conocen como antgenos.
Generalmente el sistema inmune responde de
forma unitaria, por lo que la divisin en respuesta
inespecca y especca es ms terica que real.
Lo que s ocurre es que, dependiendo de las
circunstancias, en unos casos predomina una u
otra de estas formas de respuesta.
Permanentemente el individuo esta recibiendo
contagios de elementos patgenos que, de
no existir el sistema inmune, invadiran toda
la economa con la consiguiente muerte del
individuo. Tambin el sistema inmune est
protegiendo al individuo frente a la formacin y
crecimiento de clulas neoplsicas. Sin embargo,
hay multitud de casos en los que los sistemas de
defensa son en s causa de enfermedad. Esto es,
por ejemplo, lo que ocurre cuando el individuo
reacciona incluso frente a sustancias, en principio
inocuas, como el polen de plantas, etc. Entonces
se habla de reacciones de hipersensibilidad. En
otros casos, por razones todava no muy bien
conocidas, el sistema inmune reacciona frente a
componentes propios, que destruye, ocasionando
graves trastornos, o incluso la muerte. Se trata de
las enfermedades autoinmunes, que consiguen
afectar a cualquier componente del organismo.
Tambin a veces, las clulas encargadas de la
defensa inmune, proliferan descontroladamente
produciendose entonces los sindromes
linfoproliferativos entre los que los mas frecuentes
son las leucemias.
1.1. RESPUESTA INMUNE INESPECIFICA
La respuesta inespecca representa la primera
barrera defensiva del organismo y es de especial
signicacin frente a la proteccin del mismo ante
infecciones y cncer. Las clulas que mediatizan
esta respuesta, son los PMN neutrlos y
macrfagos, celulas que se caracterizan por
activarse de forma inmediata siempre que
cualquier sustancia extraa penetra en el
organismo, como, por ejemplo, despus de una
herida, en cuyo caso estas clulas se movilizan
hacia dicho foco, reconocen y toman contacto con
la sustancia extraa, que destruyen mediante el
proceso de fagocitosis y posterior lisis intracelular.
En el enfermo crtico, la ausencia o disminucion
funcional de este tipo de respuesta tiene especial
signicacin y trascendencia como se ver
en detalle despus. Tambin en este tipo de
respuesta participan las clulas asesinas naturales,
conocidas como natural killer o NK.
Los mecanismos de defensa inprecisos aportan
un buen sistema de proteccin. Sin embargo, en
muchas ocasiones no es suciente para defender
ecazmente al organismo. Por fortuna ste
dispone de otros mecanismos de defensa, como
es la respuesta inmune especca.
1.2. RESPUESTA INMUNE ESPECIFICA
La respuesta inmune especca se caracteriza ya
que es efectiva ante aquellos antgenos frente
a los cuales se ha iniciado y desarrollado. Este
tipo de respuesta es mediada por los linfocitos.
Los linfocitos son de dos tipos: linfocitos B y
linfocitos T. Los linfocitos T, a su vez, consiguen
ser linfocitos T colaboradores (Th), linfocitos T
citotxicos (Tc) y por algunos autores tambien se
proponen los linfocitos T supresores/reguladores
(Ts).
La respuesta inmune especica, se considera que
puede ser de dos tipos: humoral y celular. Si bien
la separacin de ambos tipos de respuesta es mas
de tipo didctico que real, en general se considera
que cuando el elemento efector nal son las
inmunoglobulinas formadas por los linfocitos B
se trata de una respuesta tipo humoral, mientras
que cuando participan los linfocitos T tanto
colaboradores (Th) como citotxicos (Tc), se trata
de una respuesta tipo celular.
Para que se inicie una u otra respuesta
inmune se requiere el reconocimiento del
antgeno y activacin de los linfocitos. Los
linfocitos B reconocen el antgenos mediante
inmunoglobulinas de membrana (Igs) mientras
que los linfocitos T lo reconocen mediante una
estructura especializada a tal n conocida como
receptor de linfocitos T (TcR). Para que los
linfocitos se activen, se requiere adems del
reconocimiento del antgeno por los receptores
T, la participacin de otras molculas como son
las molculas accesorias y las interleucinas. Si
participa solo el RcT se produce una anergia (no
respuesta).
1.2.1. Respuesta inmune humoral
La ausencia de este tipo de respuesta deja al
individuo tan indefenso frente a toda clase de
grmenes patgenos y otras agresiones, que es
incompatible con la vida si no se instaura a tiempo
un tratamiento adecuado.
La respuesta inmune humoral es mediatizada
por los linfocitos B, que como se ha dicho
anteriormente reconocen al antigeno a travs de
las inmunoglobulinas de membrana. Sin embargo
este estimulo no es suciente para que se inicien
los procesos de proliferacin de estas clulas. Para
ello es necesario que los linfocitos B adems del
estimulo antignico reciban el estimulo de ciertas
interleucinas.
El elemento efector nal de la respuesta
humoral son las inmunoglobulinas. El termino
inmunoglobulina fue propuesto por Heberman
para designar a todas las sustancias con
capacidad de anticuerpo, esto es con capacidad
de anteponerse al antigeno. Las inmunoglobulinas
son de cinco clases: inmunoglobulina M (IgM),
inmunoglobulina A (IgA), inmunoglobulina G
(IgG), inmunoglobulina D (IgD) e inmunoglobulina
E (IgE). Las inmunoglobulinas tienen la propiedad
de unirse especcamente al antgeno que indujo
su formacin.
Tras la unin antgeno-anticuerpo (Ag-Ac),
las sustancias extraas (o antgenos) son
destrudas por las inmunoglobulinas a travs de
mecanismos, que consiguen ser diversos segn
el tipo de inmunoglobulina que participa. Esto
se debe a que si bien las distintas clases de
inmunoglobulinas tienen una estrucutura igual
en ciertas partes de la molecula, en otras partes
muestran una estrucura distinta. Podemos decir
que las inmunoglobulinas, al detectar al antgeno
y unirse a el, actan como transductores de la
informacin de la presencia de los mismos, que
sern ulteriormente destruidos por el mecanismo
ms idoneo, en el que colaborarn adems del
propio anticuerpo el sistema del complemento,
macrfagos, los polimorfonucleares o clulas K.
El trmino complemento engloba, una gran
variedad de proteinas, que interactan en un
jado orden, se remuestran por C y se hallan
en el suero. Cuando se produce la activacin del
C se pone en marcha una serie de reacciones,
en forma de cascada, de tal forma que se van
generando productos activos que adems de
inuir en que la reaccin prosiga tienen diversos
acciones biolgicas importantes en la defensa del
organismo.
1.2.2. Respuesta inmune celular
La respuesta inmune de tipo celular cubre
una importante funcin como mecanismo
inmunolgico de defensa, actuando
principalmente frente a bacterias y virus, as
como evitando la aparicin y desarrollo de clulas
tumorales. Sin embargo, este tipo de respuesta
representa una seria limitacin en la prctica
de trasplantes por ser el principal mecanismo
implicado en el rechazo de los mismos.
La respuesta inmune de tipo celular es compleja
en sus efectos y acciones nales, as como en
su iniciacin y desarrollo. En ella participan
esencialmente los linfocitos T colaboradores y
citotxicos. Tal como se ha dicho anteriormente,
los linfocitos reconocen el antigeno mediante
el receptor T (TcR) y lo hacen solo cuando el
antigeno es degradado y procesado en el interior
de las clulas presentadoras de antgeno (APC)
y su determinantes antigncios son expuestos
en la supercie de estas clulas en el seno
de una molcula del complejo principal de
histocompatibilidad.
Las molculas del Complejo Mayor de
Histocompatibilidad (MHC) son una serie de
glicoprotenas presentes en las membranas de
todas las clulas nucleadas, entre las que se
hallan las clulas inmunocompetentes. estas
molculas son esencialmente de dos tipos o
clases, clase I y clase II y tienen entre otras
funciones las de presentar el antgeno a los
linfocitos as como participar en el proceso de
maduracin de los linfocitos en el timo.
Las clulas presentadoras de antgeno tienen
como misin captar, procesar y presentar el
antgeno a los linfocitos T. El reconocimiento del
antgeno por las clulas T exige que previamente
sea procesado proteolticamente en el interior
de las clulas presentadoras de antgeno. Si
bien concurren excepciones, la separacin de
las funciones de los linfocitos T colaboradores
CD4
+
y CD8
+
viene dada por el origen de los
antgenos que reconocen y, en ltimo trmino,
por donde han sido procesados por va
exgena en el sistema endosomal de las clulas
presentadoras de antgeno y expresados en
supercie por el producto de los genes MHC de
clase II. Los linfocitos citolticos CD8
+
reconocen
a los antgenos que han sido procesados
endgenamente en el citosol de la clula infectada
y presentados en supercie por molculas MHC
de clase I, mientras que los linfocitos CD4+
interaccionan con el antgeno en el conctexto de
molculas de case II.
Este fenmeno se conoce como restriccin
por el MHC, es decir, que el TcR que reconoce
especicamente el antigeno ha de encontrarlo
presentado en el contecto de moleculas MHC
propias. En el proceso de reconocimiento e
interaccion de una celula con otra intervienen,
adems, toda una serie de molculas llamadas
molculas accesorias que se hallan bien en la
supercie de los linfocitos T o en las clulas
presentadoras de antgeno. Estas molculas
interaccionan entre s o con otros ligandos
reforzando la unin entre el receptor de las clulas
T y el complejo MHC-pptido e incrementando as
la adherencia intercelular y su anidad.
Cuando tiene lugar el reconocimiento antignico
entre el TcR y la molcula MHC que porta
el antgeno, se desencadena una cascada
de reacciones bioqumicas en el citoplasma
de la clula T, dando as lugar al proceso de
activacin, proliferacin y diferenciacin celular.
Estos mecanismos implican la participacin de
una serie de sustancias intracitoplasmticas,
conocidas como segundos mensajeros y que
son ciertas sustancias de caracter lipdico y
protenas que adquieren sus caracter funcional al
fosforilizarse esencialmente en los aminoacidos
serina y treonina. Como consecuencia de estos
eventos se predecir nalmente la activacin de
la transcripcin de los genes implicados en la
sntesis de la protena y factor implicado en una
determinada funcin, tal como la sntensis de
interleucina 2 u otros factores.
La consecuencia nal de este tipo de respuesta
es la formacin de cedulas Th activas productoras
de inteleucinas y celulas citotxicas (CTL) que
posen capacidad de lisar a las cedulas que portan
el antigeno que indujo su activacin. Este tipo de
respuesta requiere varios das para su desarrollo.
Ante, por ejemplo, un contagio viral, la accin del
interfern y de las celulas NK antecede al de las
clulas CTL.
1.3. CARACTERSTICAS RESPUESTA
INMUNE ESPECFICA
La respuesta inmune especica se caracteriza
por ser de caracter clonal, especica, desarrollar
memoria y ser regulable.
Especicidad. Se sabe que cada antgeno estimula
solo a aquel linfocito o grupo de linfocitos que han
desarrollado y en consecuencia obstentan en su
membrana los receptores capaces de reconocer
y unirse especcamente a l. Estos receptores,
tal como se ha indicado anteriormente, son las
inmunoglobulinas de supercie cuando se trata de
linfocitos B o el TcR cuando se trata de linfocitos
T.
Clonalidad. Cuando un linfocito o grupo de
linfocitos es activado, este prolifera y se diferencia
en mltiples cedulas derivadas, todas ellas
con idnticos receptores de supercie. se dice
entonces que todas estas cedulas constituyen
lo que se denomina clon celular. Tanto la
especicidad como la clonalidad de la respuesta
inmune fue originariamente denidos en los
aos cincuenta por varios inmunlogos entre los
que se encontraba Burnet y se conoci despus
por la teora de seleccin clonal de Burnet.
Esta teoria deca que cada antgeno estimular
a aquel linfocito o grupo de linfocitos que
obstentan en su membrana receptores capaces
de reconocer y unirse especcamente a l y que
como consecuencia se produca su proliferacin
y diferenciacin en clulas con las mismas
caractersticas de reconocimiento que los linfocitos
originales.
Memoria Inmunolgica. Otra caracterstica
importante de este tipo de repuesta es que el
organismo mantiene memoria de un estmulo a
otro cuando son de la misma ndole. Eso se debe
a la permanencia de linfocitos sensibilizados de
larga vida despus de un estmulo antignico.
Regulacin. Este tipo de respuesta dispone de
mecanismos internos de control, de tal forma que
la intensidad de la misma se regula por accin de
diversos tipos de molculas entre las que destacan
las inmunoglobulinas y sobre todo las citocinas.
Captulo 9. El sistema de com-
plemento
Sistema del complemento
El sistema del complemento es una cascada
bioqumica que ataca las supercie de las
clulas extraas. Contiene ms de 20 protenas
diversos y recibe ese nombre por su capacidad
para complementar la destruccin de patgenos
iniciada por los anticuerpos. El sistema del
complemento es el mayor componente humoral
de la respuesta inmune innata[20][21]. Muchas
especies tienen sistemas de complemento, el
mismo no solo se presenta en los mamferos, sino
que las plantas, peces y algunos invertebrados
tambin lo obstentan[22].
En los seres humanos, esta respuesta es activada
por la unin de protenas del complemento
a carbohidratos de las supercies de los
microorganismos o por la unin del complemento
a anticuerpos que a su vez se han unido a los
microorganismos. Esta seal de reconocimiento
produce una rpida respuesta de destruccin[23].
La velocidad de la respuesta es el resultado de
la amplicacin de la seal que ocurre tras la
activacin proteoltica secuencial de las molculas
del complemento, que tambin son proteasas.
Tras la unin inicial de protenas del complemento
al microbio, aqullas activan su capacidad
protesica, que a su vez activa a otras proteasas
del complemento y as sucesivamente. Esto
produce una cascada cataltica que amplica la
seal inicial por medio de una retroalimentacin
positiva controlada. [24]. La cascada origina
la produccin de pptidos que atraen clulas
inmunitarias, aumentan la permeabilidad
vascular y opsonizan (recubren) la supercie del
patgeno, marcndolo para su destruccin. Esta
deposicin del complemento puede tambin matar
clulas directamente al bloquear su membrana
plasmtica.
Segn el atlas de inmunologia se dice que el
sistema complemento est constituido por un
incorporado de protenas sricas que se impulsan
en cascada y por protenas reguladoras o de
mecanismos. El que se de la activacin depende
de su formacin por medio de ligas antgeno-
anticuerpo en la va clsica y por la tarea de
mecanismos bacterianos y otras enzimas en la va
alterna. Una y otra va conuye a nivel de C3 y as
ocasionando similar provecho concluyente.
La va clsica comienza en el momento en que
C1q se acopla al fragmento Fc de dos molculas
de inmunoglobulinas ensambladas al antgeno
dispuesto en una membrana. Se ocasiona la
rotura de C1r y se impulsa C1s el cual fragmenta
C4 y C2 produciendo C4b2b fusionado a la
membrana. C4a, que asume una actividad de
analatoxina, o lo que es lo mismo, provoca suelta
de mediadores en clulas cebadas y baslos,
y C2a propagan hacia el uido. El complejo
bimolecular C4b2b es una C3 convertasa, es
decir, fragmenta un surtido de molculas de C3
ocasionando C3b que se une al complejo C4b2b
para constituir la C5 convertasa (3) y C3a que
es una analatoxina. C3b consuma adems
la primordial funcin de opsonina, ya que al
acoplarse a la membrana, otorga mayor actividad
a la fagocitosis.
La C5 convertasa constituida por C4b2b3b parte
la molcula C5 en los fracciones C5b y C5a. C5a
es analotoxina y C5b es una protena de amarre
para C6. A continuacin se acoplan a ellas C7 y
C8 constituyendo un complejo seguro incorporado
a la membrana que ensambla a C9 (4). Este
postrimero se polimeriza estableciendo junto con
C5b, C6, C7 y C8 el complejo de embestida a la
membrana cumplidora de la lisis celular.
En el sistema Complemento se advierten asimismo
de las protenas sealadas, inhibidores precisos
e inprecisos y reguladores tanto solubles como
componentes de membrana.
Las vitales funciones biolgicas del Sistema
Complemento encierran la opsonizacin, la
quimiotaxis, la lisis celular y bacteriana y la
funcin de analatoxina. Tambin se anota en la
expulsin de complejos inmunes.
1. Opsonizacin: el factor C3b se ensambla
covalentemente a la supercie de bacterias
o clulas formndose en un ligando para un
destinatario concreto emplazado en la membrana
de polimorfonucleares y macrfagos entre otros.
De esta forma, la bacteria queda aferrada a la
supercie celular facilitando la formacin del
fagosoma y propiciando la descarga metablica
que transporta a la fabricacin de radicales
libres derivados del oxgeno. Coconcurren cuatro
receptores para fragmentos de C3b en los
leucocitos, CR1, CR2, CR3 y CR4, cuya carencia
decreta una mayor susceptibilidad a sobrellevar
infecciones peridicas.
2. Quimiotaxis: el fragmento C5a, en conjunto
con leucotrienos y citoquinas ( IL-8 ) realizan
anidad sobre leucocitos y monocitos rigiendo
su xodo hacia la zona donde se halla el agente
agresivo. Asimismo, al interactuar con receptores
precisos en los fagocitos acrecientan su motilidad
y conciben dispositivos bactericidas denominados
oxgeno-dependientes al excitar su metabolismo
oxidativo.
3. Lisis: el complejo de asalto a la membrana
se mete en la membrana de bacterias, clulas y
algunos virus causando variaciones de smosis
que acarrean a su muerte.
4. Analatoxina: C3a, C4a y C5a incitan la
suelta de mediadores inamatorios en terceras
clulas los que causan acentuacin de la
permeabilidad vascular particular de la analaxia.
Las clulas cebadas, baslos, clulas musculares
lisas y linfocitos formulan receptores para C3a y
C4a. Las clulas cebadas, baslos, neutrlos,
monocitos/macrfagos y endotelios conservan
receptores para C5a. Las clulas cebadas y
baslos son incitadas a librar mediadores
qumicos substancialmente histamina la que
ocasiona acentuacin de la permeabilidad vascular
y contraccin del msculo liso. Las clulas
musculares y endoteliales se constrien por efecto
directo de las analatoxinas.
Capitulo 10. Los antigenos de
histocompatiblidad
Las molculas de histocompatibilidad fueron
inicialmente descubiertas por ser las principales
responsables de las reacciones de rechazo de
tejidos trasplantados entre individuos de la
misma especie. Los loci genticos reguladores
de la sntesis de estos antgenos se agrupan
en una regin denominada Complejo Mayor
de Histocompatibilidad (MHC) y se heredan de
acuerdo con las leyes de Mendel. Una de las
principales caractersticas de estas molculas es su
extraordinario polimorsmo. Hoy da se considera
que las molculas de histocompatibilidad tienen
como funcin principal recoger pptidos del
interior de la clula, transportarlos a la supercie
celular y all presentarlos a las clulas T.
Las molculas de histocompatibilidad se localizan
en la supercie de las clulas de las distintas
especies animales. En el ratn se denominan
antgenos H-2 y los genes que las codican se
localizan en el cromosoma 17. En el humano se
denominan antgenos HLA (Human Leucocyte
Antigens) y estn codicadas por genes ubicados
en el brazo corto del cromosoma 6. Los primeros
trabajos sobre los antgenos H-2 fueron realizados
por Gorer (1936) en cepas murinas endogmicas
(inbred), obtenidas por el cruce entre animales
hermanos de forma continuada en el momento
de al menos 20 generaciones. El rechazo de
trasplantes entre animales de distintas cepas
endogmicas y la obtencin de aloantisueros
mediante inmunizacin de animales de una cepa
con clulas de otra, permitieron una primera
denicin de este sistema gentico.
En el caso humano, el primer antgeno de
histocompatibilidad descrito fue Mac (en la
actualidad denido como HLA-A2), descubierto
por Jean Dausset en 1958 (Figura 5.1). Pronto se
vio que exista una relacin entre estos antgenos
y la supervivencia de riones trasplantados.
En la actualidad, son ya centenares los antgenos
de este tipo que se han denido gracias a las
intensas colaboraciones establecidas entre los
laboratorios que trabajan en histocompatibilidad,
a travs de los Workshops Internacionales de
Histocompatibilidad que desde 1964 se celebran
peridicamente.
En este captulo estudiaremos la estructura de
estas molculas y la organizacin de los genes
que las codican. Su funcin en el procesamiento
y presentacin de pptidos se estudiar en el
captulo siguiente.
La estructura de las molculas de
histocompatibilidad
Segn su estructura las molculas de
histocompatibilidad se dividen en dos grandes
grupos: molculas de clase I y molculas de
clase II que se hallan codicadas por regiones
genticas distintas dentro del MHC y desempean
distintas funciones inmunolgicas (Figura 5.2).
Las principales molculas de histocompatibilidad
humanas quedan reejadas en la tabla 5.1.
Estructura de las molculas HLA de clase I.
Las molculas de los antgenos de
histocompatibilidad de clase I (Figura 5.3), tanto
en el sistema HLA como en el H-2, se hallan
constituidas por 2 cadenas polipeptdicas: una
cadena pesada, glicosilada, de mayor tamao,
con un peso molecular de 45 kD, que se halla
asociada, mediante interacciones no covalentes a
una cadena ligera, la beta-2-microglobulina que
tiene un peso molecular aproximado de 12.5 kD.
La beta-2-microglobulina, polipptido idntico
al componente srico normal, es idntica en
todos los individuos de la misma especie y
los genes que la codican no se hallan en el
MHC, situndose en el cromosoma 16, en el
hombre y en el cromosoma 2 en el ratn. El
anlisis estructural de la beta-2-microglubulina
revela que pertenece a la superfamilia de las
inmunoglobulinas, con una notoria homologa con
el tercer dominio constante de la cadena pesada
de las inmunoglobulinas. La cadena pesada, por el
contrario, es altamente variable entre individuos
de la misma especie, siendo la responsable
del polimorsmo antignico de las molculas
de histocompatibilidad clase I (Figura 5.4). Se
distinguen tres zonas bien precisadas, una zona
extracelular de mayor tamao en la que se hallan
los determinantes antignicos de la molcula,
una pequea regin transmembrana, hidrfoba, y
nalmente una regin intracitoplasmtica de unos
35 aminocidos.
La zona extracelular se halla organizada en
tres dominios de aproximadamente unos 90
residuos cada uno, denominados alfa-1, alfa-
2 y alfa-3 mantenidos por la concurrencia de
puentes intracatenarios. Los residuos glucdicos
se hallan unidos a la asparagina en la posicin
86 del dominio alfa-1. Los dominios alfa-1 y alfa-
2 constituyen regiones de contenido variable en
aminocidos, es decir son las zonas donde radica
la variabilidad de la molcula. Por el contrario el
dominio alfa-3 es bastante constante, pertenece a
la superfamilia de las Igs y por tanto muestra una
notable homologa con la regin constante de las
inmunoglobulinas y con la beta-2-microglobulina
Estructura de las molculas HLA clase II.
Las molculas de clase II son glicoprotenas
que se hallan en la supercie celular. Estn
formadas por dos cadenas, ambas con un dominio
transmembrana, denominadas cadena a o pesada
y cadena b o ligera, asociadas entre s mediante
interacciones de naturaleza no covalente. Tanto la
cadena a como la cadena b se hallan codicadas
por genes situados en el MHC.
La cadena a tiene un peso molecular aproximado
de 33kD y la cadena b de 29 kD. Ambas cadenas
tienen una organizacin semejante. Estn
constituidas por dos dominios extracelulares y
se conocen con las denominaciones de a-1 y a-2
en la cadena pesada y b-1 y b-2 en la cadena
ligera. Cada uno de estos dominios consta de
90-96 aminocidos. El dominio a-1 es abierto
mientras que los dominios alfa-2, beta-1 y beta-2
se pliegan mediante un puente disulfuro cada uno
de ellos. Cuando se analizan los aminocidos de
las cadenas ligeras, se observa que los dominios
a-2 y b-2 pertenecen a la superfamilia de las
Igs, mientras que los a-1 y b-1, que son los que
muestran mayor diversidad muestran homologa
con los dominios alfa-1 y alfa-2 de los antgenos
clase I. Se aprecian tres zonas donde es ms
frecuente la variabilidad. Un tercer dominio
corresponde a la regin de cada cadena que
atraviesa la membrana celular, contiene unos
30 aminocidos y es de naturaleza hidrofbica.
Finalmente, el cuarto dominio, corresponde a
la parte citoplasmtica de la molcula, es de
naturaleza hidroflica y contiene de 10 a 16
aminocidos..
Estructura tridimensional.
El anlisis de la estructura tridimensional
de los antgenos de histocompatibilidad de
clase I y clase II, determinada mediante
cristalografa, demuestra que los dominios estn
estructurados de forma desigual. As, dentro
de los antgenos clase I, el dominio alfa-3 y
la beta-2-microglobulina estn organizados en
estructura de hoja plegada b. Por el contrario
los dominios a1 y a2 constan cada uno de ellos
de una sola zona formada por cuatro fragmentos
en estructura de hoja plegada b seguido de
otro segmento organizado en forma de a-
hlice. Esta organizacin delimita una hendidura
denominada sitio de unin al pptido (peptide
binding groove) en el que los residuos ms
polimrcos se hallan en el suelo y las paredes
de la hendidura. En esa hendidura se localiza
un pptido que no pertenece a la molcula y
de aproximadamente 8-10 aminocidos. Ese
pptido procede de protenas endgenas, como
veremos en el captulo siguiente e interacciona
con las molculas de histocompatibilidad mediante
fuerzas no covalentes entre sitios precisos
de ambas estructuras. Un jado antgeno de
histocompatibilidad puede unirse a pptidos
diversos siempre que stos posean uno o varios
motivos que interaccionen con zonas de la
molcula cuya estructura suele estar condicionada
por residuos polimrcos.
La estructura tridimensional de los antgenos
de clase II tambin ha sido determinada por
cristalografa y es semejante a la de los antgenos
de clase I. Los dos dominios proximales (a2 y
b2) son los equivalentes al dominio alfa-3 y a la
beta-2-microglobulina de los antgenos clase I,
mientras que los dos dominios distales (alfa-1 y
beta-1) de los antgenos clase II se corresponden
con los dominios alfa-1 y alfa-2 de la molcula
clase I. La hendidura donde se ubica el pptido
se forma entre los dominios alfa-1 y beta-1 de las
molculas clase II.
Distribucin tisular de las molculas clase I
y II.
Las molculas de clase I se hallan presentes en
la mayora de las clulas nucleares del organismo
pero no en todas, dado que, en algunas
localizaciones, su expresin es mnima o incluso
nula, como sucede en el endotelio, glndulas
de Brunner duodenales, trofoblasto velloso o
neuronas del sistema nervioso central.
La expresin de las molculas de clase II se halla
fundamentalmente restringida a macrfagos,
monocitos, linfocitos B y cuando estn activados
tambin en linfocitos T y NK. Igualmente se halla
expresado en alta densidad en otras clulas que
actan como presentadoras de antgenos, tales
como clulas dendrticas del bazo, epidrmicas
de Langerhans o clulas endoteliales. Tambin se
hallan en progenitores hematopoyticos, clulas
leucmicas y clulas de diversos tipos de tumores.
Esta distribucin diferencial de las molculas
de histocompatibilidad de clase I y II se halla
directamente relacionada con la desigual funcin
de cada tipo de molculas. Los niveles relativos de
las molculas HLA en diversos rganos y tejidos
es muy variado (Figura 5.5).
Otras molculas de histocompatibilidad
Concurren otras molculas de histocompatibilidad
entre las que destacan de manera ms
signicativa: HLA-G, HLA-E y HLA-F, que muestran
una gran homologa con las molculas clsicas de
MHC de clase I (HLA-A, -B y -C).
HLA-E: La estructura tridimensional de
la molcula de HLA-E, es muy similar a la de las
molculas clsicas HLA-A, B y C muestrando sitios
de unin conservados para la b-2-microglobulina
y al CD8. Esta molcula, cuando presenta el
pptido adecuado, se une a los receptores CD94/
NKG2A que inhiben la actividad citotxica de las
NK y ciertos linfocitos T. En la actualidad se ha
descubierto que la protena UL40 presente en
los citomegalovirus, es capaz de unirse ella, y
provocar una cascada de inhibicin en las clulas
NK.
HLA- F: Se sabe que esta molcula se
expresa principalmente en amgdalas, bazo y
timo. La localizacin de la protena es intracelular.
Adems, est descrito que los tetrmeros de
HLA-F se unen a los receptores ILTR2 (LIR1) y
ILTR4 (LIR2) que son receptores inhibidores de
leucocitos.
HLA-G: La molcula HLA-G pertenece a
la familia de molculas de histocompatibilidad
no clsicas y se caracterizan por un limitado
polimorsmo y una distribucin celular y tisular
restringida al trofoblasto fetal y clulas del epitelio
tmico. Esta molcula puede presentarse en
siete isoformas distintas, codicadas por splicing
alternativo, cuatro de ellas son protenas unidas
a membrana (HLA-G1, G2, G3 Y G4), y otras tres
isoformas que son protenas solubles (HLA-G5, G6
Y G7). Otras caractersticas de esta molcula son:
Es reconocida por ciertos receptores
inhibidores, tales como KIR2DL4, ILT-2 y ILT-4 y,
en consecuencia posee, capacidad de inhabilitar la
lisis mediada por clulas NK y ciertas clulas T.
Est relacionada con la estimulo de
tolerancia materno-fetal. Se ha demostrado que
la molcula HLA-G es capaz de inhabilitar la
actividad de las clulas NK de los leucocitos de la
decdua sobre los trofoblastos en el momento de
el primer trimestre de gestacin
Parece participar en la vigilancia
del sistema inmune frente a tumores y se
ha descubierto un aumento en el nivel de la
expresin de esta molcula en la supercie de las
clulas infectadas por el HIV, que podra ser una
forma del virus de escapar de la destruccin por el
sistema inmune.
Familia de molculas CD1. Los antgenos CD1 son
glicoprotenas no polimrcas constitudos por
una cadena pesada de 43-49 kDa que, en muchos
casos, se asocia con la beta-2-microglobulina
(beta-2-m). Se ha denido como una molcula
presentadora de antgeno presente en la mayora
de los mamferos encontrndose tanto en las
clulas dendrticas como en timocitos. Mientras
que en ratones las molculas CD1 consiguen
presentar pptidos y molculas no peptdicas
como glicolpidos a clulas T, en humanos slo
hay evidencia de presentacin de antgenos no
peptdicos de origen microbiano, generalmente
a clulas T de TCR restringido Las clulas T
implicadas en el reconocimiento de antgeno
presentado por CD1 son denominadas NKT.
En humanos la familia de los genes de CD1
contiene 5 miembros: CD1A, CD1B, CD1C, CD1D
y CD1E, que se agrupan en dos grupos en base a
la similitud de la secuencia de aminocidos entre
ellas y entre especies. En general, las molculas
de CD1 se expresan predominantemente en
timocitos y en algunas APCs derivadas de mdula
sea como las clulas dendrticas. Se ha descrito
que las clulas del epitelio intestinal expresan las
molculas de CD1d.
Tema 11. La gentica del com-
plejo mayor de histocompatibi-
lidad
Como ya se ha dicho, los genes que codican
las molculas cuya estructura y funcin
hemos estudiado, se hallan agrupados en
el genoma formando el Complejo Mayor
de Histocompatibilidad que se extiende
aproximadamente 2-3 centimorgans
(aproximadamente 4x10
6
pares de bases) y en
el humano contiene al menos 50 genes distintos.
Este grupo de genes se halla organizado de forma
desigual en las distintas especies, conocindose
con precisin la organizacin gentica del MHC
en el hombre, sistema HLA, y el ratn, sistema
H-2. Recientemente se ha propuesto una nueva
taxonoma para clasicar los distintos genes que
codican las molculas de histocompatibidad,
(Tabla 5.2)
* Complejo Mayor de Histocompatibilidad
en el hombre.
El Complejo Mayor de Histocompatibilidad en el
hombre est constituido por un grupo de genes
situado en el brazo corto del cromosoma 6. El
complejo mayor de histocompatibilidad humano
es donde se codican los loci que de los distintos
antgenos HLA clase I y II (Figura 5.6). Entre los
de clase I se hallan los genes que codican las
cadenas a de los antgenos HLA-A, HLA-B y HLA-C
y entre los de clase II se hallan los pares de
genes que codican las cadenas alfa y beta de los
antgenos HLA-DR, HLA-DQ y HLA-DP.
Este grupo de genes se heredan de acuerdo
con las leyes de Mendel, como caracteres
codominantes simples. La regin gentica de
un cromosoma que contiene todos los genes
HLA (a excepcin de los que codican la
beta-2-microglobulina) se denomina haplotipo
HLA (Figura 5.7). As pues un haplotipo HLA
incluye los genes clase I: HLA-A, HLA-B y HLA-C
y los genes clase II: HLA-DR, HLA-DQ y HLA- DP.
y otros loci que codican molculas implicadas
en el procesamiento de pptidos como son los
genes TAP cuyos productos estn implicados en
la transferencia de pptidos del citosol al retculo
endoplsmico y los genes LMP que codican
componentes del proteosoma responsable
de transformar protenas en pptidos que
ulteriormente sern presentados en la supercie
celular. Asimismo en esta regin se hallan
los genes que codican algunos factores del
complemento, la enzima 21-hidroxilasa, la citocina
TNF-alfa y otros genes y pseudogenes con
homologa estructural con los genes clase I y clase
II con limitado polimorsmo y cuya funcin aun se
halla insucientemente aclarada (Figura 5.8). .
La concurrencia de estos diversos loci fue
demostrada inicialmente por la aparicin
espontnea de recombinaciones entre los mismos
o la concurrencia de lneas celulares mutantes,
con prdidas de uno o varios loci y ha sido
conrmada a lo largo de los ltimos aos por el
empleo de tcnicas de biologa molecular que
han permitido aislar y secuenciar estos genes.
Gracias a estas tcnicas de biologa molecular se
ha descubierto la concurrencia en esta regin de
numerosos genes y pseudogenes pero solamente
una minora tienen estructura clase I o clase II
mientras que la mayora no estn relacionados
estructuralmente.
Cada clula del organismo, a excepcin de las
clulas germinales, obstentan un haplotipo natural
del padre y otro de la madre. La mayora de
los genes del MHC son altamente polimrcos,
es decir, consiguen ser estructuralmente
diversos entre individuos de la misma especie.
No obstante, concurren zonas muy guardadas,
prcticamente idnticas en todos los individuos y
zonas altamente variables.
Cada especicidad precisada en la supercie
celular representara un alelo desigual a nivel
genmico. Como se muestra en la, se han descrito
numerosos alelos para los diversos loci HLA. Dado
que cada individuo posee dos de cada uno de
estos alelos, el nmero de combinaciones tericas
potenciales en la poblacin considerada en su
conjunto es muy alto.
A menudo se describen nuevas especicidades
asociadas a otras previamente establecidas. Estas
nuevas especicidades se suelen denominar
especicidades subtpicas que aparecen por
divisin de otras anteriores y a las viejas
especicidades supertpicas. As se puede
observar que las especicidades HLA-B51 y
HLA-B52 se consideran como productos de la
divisin del antgeno HLA-B5. De este modo
la secuencia de los genes HLA ha indicado
que el polimorsmo que es revelado a nivel
serolgico es slo una parte del que se halla a
nivel genmico. As se observa que concurren
numerosos subtipos de HLA-A2 y numerosos
subtipos de HLA-B27. Ello ha hecho que se forme
un nuevo sistema de nomenclatura para los
diversos alelos HLA que utiliza la letra del loci
seguida de 4 dgitos tal como se muestra en el
Apndice. Los dos primeros dgitos seran los de la
especicidad serolgica y los otros dos indicaran
la especicidad mostrada por secuenciacin.
Los haplotipos adquiridos de cada padre van
a determinar el genotipo del hijo, es decir, el
genotipo de ste ser la suma de un haplotipo
procedente de padre y otro procedente de la
madre. En la Figura 5.9 se ilustra grcamente
todo lo anteriormente expuesto. En una
familia determinada en la que el padre tiene los
haplotipos (a) = A2, B8, Cw1, DR1 y (b) = A3, B7,
Cw3, DR4 y la madre los haplotipos (c) = A2, B7,
Cw2, DR2 y (d) = A11, B13, Cw3, DR5 los hijos
podrn adquirir cuatro combinaciones distintas
de estos haplotipos, siendo (a,b), (b,c) y (b,d) los
potenciales genotipos resultantes.
Tras la secuenciacin completa del Complejo
Mayor de Histocompatibilidad en el 1999 se
conoce que esta regin la forman ms de 200 loci,
muchos de los cuales an son funcionalmente
desacreditados, si bien posiblemente la mitad
participe en la situacin del sistema inmune.
* Loci HLA-A, B, C.
La regin que codica las molculas de clase
I est dividida en tres loci, acreditados como
A, B y C, que codican tres tipos de cadenas
pesadas para las distintas molculas de clase
I. Algunos de estos genes han sido estudiados
mediante tcnicas de hibridacin de DNA y se ha
demostrado que se hallan divididos en exones e
intrones, hallndose una estructuracin homloga
a los genes que codican la b-2 microglobulina,
las inmunoglobulinas y otros tipos de protenas.
El prototipo de gen que codica molculas de
clase I, se halla dividido en 8 exones, cada uno
de los cuales, se corresponde a cada dominio
estructural de la molcula. Si bien se conoce
con precisin la funcin de estas tres familias
de antgenos de histocompatibilidad de clase
I expresados en la supercie celular, se ha
demostrado la concurrencia de otros genes que
tambin codican otros antgenos HLA de clase
I con menor polimorsmo y cuya expresin es
variable, tanto en su distribucin tisular como en
la densidad en la membrana celular. Entre estos
genes se circunscriben: HLA-E, HLA-F y HLA-G.
Gen HLA-E: Este gen presenta una
secuencia parecida a la molcula Qa1 murina, que
une pptidos hidroflicos de la secuencia leader
de las molculas MHC clsicas. Se expresa en
pequeas cantidades en la supercie de la clula,
y su expresin est regulada por la presencia
de las otras molculas de histocompatibilidad
presentadas en la supercie celular y es TAP
dependiente.
Gen HLA- F: Este gen es muy
similar en estructura y secuencia a los genes de
las molculas clsicas. Se trancribe en una gran
variedad de clulas y tejidos muestrando un
polimorsmo limitado.
Gen HLA-G: Este gen presenta la
estructura tpica de la HLA clase I y su expresin
parece estar restringida a la placenta y se asocia
con funciones de caracter tolerognico..
* Regin HLA-D
En la regin D se localizan los genes que codican
las molculas HLA-DR, HLA-DQ y HLA-DP. Su
anlisis bioqumico demuestra que se trata de
molculas de clase II compuestas, como ya
hemos indicado, por una cadena a y otra b.
Las molculas HLA-DR y HLA-DQ se ensayaron
por serologa y los antgenos HLA-DP fueron
primeramente precisos por publicaciones
funcionales, por razn de estimulacin secundaria
de linfocitos primeramente sensibilizados (PLT).
El empleo de tcnicas de biologa molecular ha
permitido el aislamiento y secuenciacin de los
genes de esta regin, de manera que hoy se
conoce con precisin que la regin D posee un
elevado nmero de genes.
Los genes de la familia DR advierten un gen DRA
que codica la cadena DRalfa y posee escaso
polimorsmo y al menos cuatro genes DRB
(DRB1, 3, 4, 5) que codican cadenas DRbeta
que contienen gran polimorsmo. Se han descrito
otra serie de pseudogenes DRB (DRB2, 6, 8)
sin conocerse an su funcin y expresin. La
cadena proteica DRalfa puede combinarse (Figura
5.10). con las diversos cadenas beta codicadas
por los genes DRB dando origen a las molculas
de clase II portadoras de las especicidades
HLA-DR (la unin de los productos de los genes
HLA-DRA y HLA-DRB1 y las especicidades
HLA-DRw51, 52 y 53 (la unin de los productos de
los genes HLA-DRA y HLA-DRB5, DRB3 o DRB4,
respectivamente).
Tanto las familias DQ como DP contienen dos
pares de genes, es decir dos genes a y dos genes
b, prximos entre s y todos polimrcos. Slo uno
de estos pares, DQA1 y DQB1 y DPA1 y DPB1,
codican las cadenas a y b de las molculas de
clase II HLA-DQ y HLA-DP respectivamente. Los
otros 2 pares de genes DQA2, DQB2 y DQB3
(pseudogen) y DPA2 y DPB2 obstentan un
limitado polimorsmo y no se hallan expresados
en la supercie celular. Adems existe otra
subregin que contiene un gen a, denominado
DNA, y un gen beta, DOB, que podran codicar
un nuevo tipo de molculas clase II.
Por otra parte tambin se han localizado una
nueva pareja de genes, HLA-DM, no polimrcos,
que se hallan implicados en el proceso de
procesamiento y presentacin de antgeno como
se expone en el prximo captulo. Cada uno de
estos genes esta estructurado en secuencias de
intrones y exones relacionados con los dominios
estructurales de la protena codicada por ellos.
* Tipaje HLA.
Se denomina tipaje HLA, al anlisis llevado a
cabo en el laboratorio para conocer los alelos
HLA de un jado individuo mediante mtodos
serolgicos, anlisis de genes por biologa
molecular (Figura 5.11). y mtodos celulares.
El tipaje HLA tiene especial inters en las
siguientes situaciones:
Estudio de la asociacin con distintas
formas clnicas de una enfermedad. Por ejemplo
la diabetes insulino-dependiente est asociada a
DR3 y DR4 y
En trasplantes de rganos y medula
sea y
Estudios de liacin familiar.
La mayora de los genes del HLA son altamente
polimrcos, como ya se explic en el apartado
anterior, y cada especicidad precisada en la
supercie celular representara un alelo desigual
a nivel genmico. As se han descrito numerosos
alelos para los diversos loci HLA.
Mtodo Serolgico.
El mtodo serolgico ms comnmente empleado
es el test de microlinfocitotoxicidad, que se realiza
enfrentando una poblacin de linfocitos a una
batera de sueros o anticuerpos monoclonales
que son precisos para cada uno de los antgenos
potenciales. Ulteriormente se aade complemento
de tal manera que en los pocillos en los que se
encuentre el antisuero concreto para los antgenos
de un individuo jado, se producir la lisis celular
que podr ser visualizada al microscopio. Para
visualizar la lisis, actualmente se usan una tcnica
uorescente con una mezcla de anaranjado de
acridina y bromuro de etidio. El bromuro de
etidio se ja al ADN de las clulas muertas (que
aparecen de color rojo) y desplaza al anaranjado
de acridina que tie a las clulas vivas de color
verde brillante. Los cultivos se incuban y se hacen
las lecturas de viabilidad celular.
Para producir la tipicacin de los antgenos de
clase II se emplean poblaciones puricadas de
linfocitos B, ya que en estas clulas los antgenos
de clase II se expresan ms abundantemente
que en los linfocitos T (de hecho, las clulas T
expresan cantidades signicativas de molculas
MHC de clase II slo cuando estn activadas).
Los linfocitos B se separan haciendo pasar
suspensiones de linfocitos totales a travs de
una columna empaquetada con bra de nylon.
Por sus propiedades adherentes, las clulas B se
retienen en el nylon y ulteriormente se despegan
por manipulacin mecnica de la columna de la
que previamente se han eliminado, por lavado,
las clulas no adherentes. Existe a su vez, otro
mtodo ms empleado y menos perjudicial para
la separacin de las clulas B que consiste en
el uso de microesferas magnticas acopladas a
anticuerpos contra antgenos precisos de estas
clulas (el antgeno CD19, por ejemplo). La
sangre se mezcla con las esferas y luego stas se
separan en un campo magntico (con un imn)
y se lavan para proceder a su tipicacin por
serologa.
Mtodos de Biologa Molecular:
Las tcnicas de biologa molecular ms usadas (no
las nicas) para detectar polimorsmos en el ADN
emplean los mtodos de:
a. Secuenciacin directa del ADN.
b. Anlisis del tamao de los fragmentos de
restriccin del ADN (RFLP restriction fragment
lenght polymorphism).
c. Reaccin en cadena de la ADN polimerasa
(PCR, polymerase chain reaction).
La secuenciacin directa del ADN no es prctica
para su uso rutinario. Actualmente son utilizadas
tcnicas de PCR-SBT en la que se secuencian los
fragmentos amplicados mediante PCR.
La tcnica de RFLP incluye la fragmentacin del
ADN con enzimas de restriccin, la separacin
electrofortica de los fragmentos, la transferencia
de los fragmentos separados a membranas de
nylon, la hibridacin con sondas, de secuencias
conocidas, marcadas con istopos radiactivos
o con enzimas y la deteccin del producto
por autorradiografa, quimioluminescencia o
colorimetra. La tcnica de PCR permite amplicar
segmentos particulares de ADN en pocas horas
(ver capitulo sobre mtodos inmunolgicos).
Las tcnicas que actualmente ms se emplean
para realizar tipaje HLA son PCR-SSO y PCR-SSP.
La PCR-SSO que se basa en: amplicacin de la
zona polimrca del ADN por PCR, hibridacin
con oligonucletidos precisos de secuencia (SSO)
jados a membranas de nylon. Con la tcnica de
PCR-SSP (Primers precisos de secuencia) slo se
consigue amplicacin en aquellas muestras en
las que los primeros adviertan el alelo para los
que son precisos por lo tanto lo nico que se hace
es acordar la concurrencia o no de los productos
amplicados.
Mtodos Celulares
Tambin existe la posibilidad de detectar los
antgenos de histocompatibilidad por mtodos
celulares mediante el cultivo de mezclas de
linfocitos, del donante y del receptor. Esta
reaccin que se conoce como CML (cultivo
mixto de linfocitos), se basa en la propiedad
que tienen los linfocitos de proliferar cuando se
incuban en presencia de linfocitos portadores
de antgenos HLA diversos. Los linfocitos con
antgenos idnticos no estimulan las respuestas
proliferativas entre ellos. La proliferacin celular
se puede cuanticar empleando dismiles tcnicas,
si bien la ms comn mide la incorporacin de
timidina tritiada (
3
HT) por las clulas proliferantes.
En una variedad de la reaccin, denominada CML
unidireccional, las clulas estimuladoras se tratan
anteriormente con mitomicina C para inhabilitar
su capacidad de divisin celular, sin modicar su
viabilidad (la mitomicina se combina con los husos
cromticos evitando la segregacin cromosmica
y la mitosis) y as las clulas slo funcionan como
antgeno. Los cultivos de clulas mezcladas se
mantienen de 72 a 96 horas antes de adicionar
la timidina radiactiva. De 4 a 18 horas despus
las clulas se colectan, se lavan y se procesan
para determinar la cantidad de radiactividad
incorporada. La agregacin de
3
HT se constituye
tanteando la emisin de radiacin beta en un
medidor de centelleo y los resultas se enuncian
como cuentas por minuto (cpm).
Regulacin de la expresin de los genes del
MHC
En la parte 5 no traducida de los genes se hallan
las reas reguladoras (llamadas elementos cis)
constituidas por el promotor (rea estrictamente
necesaria) y los aumentadores e inhibidores
que modulan la expresin basal de los genes. El
promotor suele estar situado a una trayectoria de
unas 300 bases desde el inicio de la transcripcin,
mientras que los aumentadores o inhibidores se
hallan a trayectorias variables. Sobre estas reas
cis se jan unas protenas llamadas factores
de transcripcin (elementos trans) que son
necesarios para que se active la polimerasa II,
enzima que inicia la transcripcin. En muchos
casos, la estimulo de la expresin de los genes
se debe a modicaciones post-transtraducionales
de estas protenas como son la fosforilacin o
la glicosilacin. Hasta ahora no se conoce el
mecanismo exacto de la expresin de los genes
de clase I y II si bien se han descrito algunos de
sus elementos cis y trans.
Los genes de clase I y beta-2-microglobulina
tienen regiones cis muy parecidas y su expresin
esta coordinada. Se han manifestado tres regiones
cis en el promotor a las que se unen factores de
transcripcin y que se llaman aumentadores A y
B y entre ellos el IRE , elemento de contestacin
al interfern. Adems, concurren dos inhibidores
en dos regiones a unas -700 y -400 bases. Sobre
las reas cis se unen factores de transcripcin
que no son precisos del promotor de clase I, sino
que regulan muchos genes. En la regin I del
aumentador A se une RXRb que es un elemento
de la familia de los receptores de la hormona
tiroidea y del cido retinoico y que se une a AP-1,
protena Activadora 1, que es un complejo de los
oncogenes jun y fos originando un heterodmero
que aumenta su anidad por el DNA. En la regin
II del aumentador A se une el NF-kB, Nuclear
Factor-kB. En la regin IRF se acoplan protenas
que se inducen por efecto del interfern y que se
fosforilan por una tirosina quinasa. Por ltimo, en
el aumentador B parece que se unen protenas del
grupo AP-1 que se maniesta al estimulo con AMP
cclico.
En el iniciador de todos los genes de clase II y
de todas la especies descritas, concurren tres
reas con sucesiones que tienen una considerable
similitud entre los genes y que se denomina X,
Y y W separadas entre si por unas 20 bases.
Estas reas son esenciales para la transcripcin,
elementos cis, y sobre ellas se unen una serie
de factores de transcripcin. La caja Y contiene
una secuencia CCAAT sobre la que se une el NFY
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(Nuclear Factor Y) compuesto por dos protenas A
y B, ambas se requieren para una unin eciente
al DNA. Sobre la caja W se une un factor no
caracterizado hasta ahora y sobre la caja X,
dependiendo del extremo 5(X
1
) se han descrito
protenas RF-X y NF-X y sobre el extremo 3(X
2
)
se unen hXBP y el complejo AP-1, fos-jun, si bien
estas interacciones con el DNA no estn muy
claras. La trayectoria crtica que separa estas cajas
sugiere que los factores de transcripcin que se
unen a ellas interaccionan dando lugar a que se
inicie la transcripcin. Sin embargo, no sabemos
que es lo que hace que se induzca clase II por
efecto del gamma-interfern o ya que en algunos
casos la estimulo de clase II sea constitutiva.