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La iniciativa de implementar nuevas herramientas de investigación surge en respuesta a la necesidad de ampliar el conocimiento relativo a mejores formas de diagnóstico y tratamiento de afecciones neuropsiquiátricas, como la depresión y la ansiedad. El presente trabajo, consiste en una contribución al estudio de la neuroquímica de las emociones y su lado patológico. La labor se enfoca en la estandarización de un protocolo por Cromatografía Líquida de Alta Resolución de detección electroquímica (HPLC-EC), para la cuantificación de aminoácidos transmisores, involucrados en el desarrollo de dichas patologías. Este protocolo se desarrolló en el Laboratorio de Investigaciones en Neurociencias de la Universidad de Costa Rica. El principal objetivo es el de evaluar las características químico-físicas necesarias para la separación efectiva de los aminoácidos GABA y Glutamato, basándose en el trabajo de Rowley, et al (1995). Para cumplir con dicho objetivo, se evaluaron los parámetros cromatográficos: intensidad de corriente, temperatura, pH, índice de flujo y concentración de metanol, en función de la resolución y la detección de los aminoácidos. Asímismo, se hizo uso de una técnica para el marcaje químico de analitos de baja detección: la técnica de derivatización. Adicionalmente, se realizaron pruebas para determinar la repetibilidad, la linealidad y el efecto que tiene la matriz sobre la detección de los aminoácidos. Con base en estos ensayos, fue posible desarrollar un protocolo repetible y lineal para la cuantificación efectiva de GABA y Glutamato. El nuevo protocolo consiste en la utilización de una fase móvil con metanol:agua al 23% y un pH 5,5; bajo condiciones de corrida de 0,65ml/min; 850mV; 10:50nA ;un rango de temperatura entre 18-23°C; y una cantidad de reactivo de derivatización de 22μL (OPA 86mM)/mL de solución acuosa de aminoácidos.
Título original
Implementacion de Un Protocolo Por HPLC Para La Cuantificacion de Acido Gamma Aminobutirico y Glutamato en Cerebro de Rata
La iniciativa de implementar nuevas herramientas de investigación surge en respuesta a la necesidad de ampliar el conocimiento relativo a mejores formas de diagnóstico y tratamiento de afecc…