Cocos Gram positivos y Gram negativos

Gnero Staphylococcus
Clasificacin
ste gnero pertenece a la familia de Staphylococcaceae e incluye a ms de treinta
especies. Seis de estas especies son las de gran importancia en el campo de salud
pblica: S. aureus, S. epidermidis, S. haemolyticus, S. saprophyticus, S. lugdunensis y S.
schleiferi. El nico que da positivo a la prueba de la coagula es S. aureus, mientras que
todos los restantes pertenecen al grupo de los estafilococos coagulasa negativa (ECN).
Caractersticas morfolgicas
Son bacterias esfricas, no poseen flagelos ni esporas y slo algunas cepas son
capsuladas, generalmente se agrupan en cmulos parecidos a racimos de uvas. Su pared
celular consta de una capa externa rica en protenas y una capa interna de
mucopptido.
Los estafilococos coagulasa positiva (ECP) contienen a la protena A la cual es una de las
molclas que neutraliza in vivo las defensas del hospedero.
Caractersticas de cultivo
Se reproducen fcilmente en caldo o agar nutritivo, aunque su crecimiento en agar
sangre es ms abundante y hace posible poner de manifiesto hemolisinas
estafilocccicas de accin enrgica presentes en los ECP.
Para su aislamiento se hace uso de medios selectivos:
Medio Fundamento

S110

La gelatina es el sustrato de la enzima gelatinasa. La lactosa y el manitol son los
hidratos de carbono fermentables. El cloruro de sodio, se encuentra en alta
concentracin, para inhibir el desarrollo de la flora acompaante.
Este medio permite en la misma placa, obtener pruebas de identificacin
presuntiva de especie como: desarrollo de pigmentos, fermentacin de
manitol e hidrlisis de la gelatina.

MSA
La degradacin del manitol con produccin de cido cambia el color del
medio, de rosado a amarillo. La formacin de colonias de estafilococos no
patgenos son de tamao pequeo rodeadas de una zona roja. Los
estafilococos patgenos producen cido del manitol, desarrollan colonias ms
grandes rodeadas de una zona amarilla.
La elevada concentracin de cloruro de sodio inhibe a la mayora de las
bacterias que son halo-sensibles.


Condiciones de incubacin Requerimiento de oxgeno
Desarrollan dentro de limites muy amplios
de temperatura (10-45 C). Su ptimo se
obtiene entre los 30 y 37 C.
Incubar 24 48 h a 35C
En 18 a 24 horas y bajo condiciones
aerobias se logra un desarrollo abundante,
pero la mayora de las cepas se reproduce
aceptablemente en ausencia de oxgeno;
se consideran como facultativos.


Pruebas bioqumicas
Prueba Principio Resultado


Catalasa
Enzima: catalasa, descompone al perxido de
hidrgeno en oxgeno y agua.
Disponer de una solucin del 3 al 30% de perxido de
hidrgeno en refrigeracin y de un cultivo puro de 18 a
24 horas del microorganismo

Catalasa
positivo


Coagulasa


Para establecer si se trata de S. aureus o ECN. La
coagulasa origina la coagulacin del plasma en dos
pasos: inicialmente se vrifica una reaccin entre la
enzima producida por el microorganismo y el factor
reactivo de la coagulasa (FRC) y, posteriomente, las
redes de fibrina son producidas por efecto del complejo
formado.

Formacin
de redes de
fibrina o de
un coagulo.
Positivo
para S.
aureus.

Baird
Parker
El medio base contiene peptona,extracto de carne y extracto de levadura,
que son la fuente de carbono, azufre, nitrgeno, vitaminas y minerales. El
piruvato de sodio y la glicina estimulan selectivamente el crecimiento de
Estafilococos. El cloruro de litio y telurito actan como inhibidores de
microorgansimos contaminantes. Debido a la reduccin del telurito a teluro S.
aureus desarrolla colonias negras.

Voguel
Jonson
La inhibicin casi total de la flora presente en una muestra se produce por el
telurito de potasio, cloruro de litio y la glicina. El manitol hace al medio
diferencial por vire del indicador rojo de fenol a amarillo por el cambio de pH.
Los estafilococos coagulasa positiva reducen el telurito de potasio a teluro
metlico formndose colonias negras.




Factor
aglutinante

Su reactividad no se ve afectada por la accin de
anticuerpos inducidos por la coagulasa por lo que
demuestra que la composicin qumica de ambas es
diferente. Convierte el fibringeno en fibrina
directamente, sin necesidad que intervengan factores
plasmticos.
Prueba
positiva:
Observaci
n de un
precipitado
granular o
de cmulos
blancos al
cabo de 20
a 30
segundos.

Importancia Clnica
Existen varias cepas de ECN que participan en ciertos padecimientos infecciosos, en
especial cuando el paciente se somete a procedimientos mdicos invasivos o es tratado
con sondas, catteres, etc.
Se reconoce a S. aureus la especie ms virulenta, algunas de las afeciones que puede
causar son imptigo, septicemia, neumona, furunculosis, infecciones intrahospitalarias e
intoxicaciones alimentarias. Produce diversas toxinas como: la dermonecrotoxina, la toxina
del sndrome del shock txico y las enterotoxina A, B, C1, C2, D, E y F.
Gnero Streptococcus
Clasificacin
Este genero pertenece a la familia Streptococcaceae, sus especies de mayor
importancia son S. pyogenes, S. agalactiae, S. equisimilis, S. canis, S. sanguis, S. salivarius, S.
pneumoniae, S. bovis y E. faecalis. ste ltimo pertenece a otro gnero pero comparte
ciertas caractersticas con este gnero.
- Clasificacin de Lancefield: Dividi a los estreptococos de acuerdo con las
caractersticas serolgicas de cada carbohidrato C. Dicha subdivisin va desde
la A hasta la V (sin existir I ni J), esta basada en las diferenias qumicas y por lo tanto
inmunolgicas de cada cepa.
- Clasificacin de Brown: Se pueden dividir en tres clases, depediendo del tipo de
hemlisis que produce en placas de agar sangre de carnero.
o Sntesis de las estreptolisinas S (activa en presencia de O2) y O (inactiva
en presencia de O2): Hemolisis total o .
o
o Ninguna sntesis de estrptolisinas: No hemolticas (NH)
Caractersticas morfolgicas
Son cocos Gram positivos, inmviles y no esporulados que, en su mayora, presentan
cpsulas muy evidentes. Todos los estreptococos son capaces de agruparse formando
cadenas largas, exceptuando a la especie S. pneumoniae

Su pared celular est constituida por tres capas:
- Interna: corresponde a un mucopptido bacteriano clsico
- Intermedia: conocida como carbohidrato C, su composicin qumica es
especfica de grupo
- Externa: Conformada por protenas M,T y R que determinan el serotipo de
cada cepa.
La capsula se localiza recubriendo a la pared celular, estructurada por un carbohidrato
denominado cido hialurnico.
Caractersticas de cultivo
El medio adecuado para su aislamiento es el agar sangre de carnero puesto que,
adems permite observar el tipo de hemlisis de la cepa implicada. El agar tripticasena
soya representa la mejor base ya que esta libre de carbohidratos.
La sangre de carnero es la apropiada ya que los bovinos no son susceptibles de infeccin
por estos microorganismos y por lo tanto no es posible que la sangre contenga
anticuerpos en contra de las estreptolisina inmungena O las cuales neutralizaran su
accin.

Pruebas bioqumicas
Prueba Principio Resultado
Sensibilidad s 0.02 0.04 U
(g/mL) de bacitracina
Para diferenciar a los
estreptococos del grupo A
(hemolisis ) de Lancefield.
A estas concentraciones
de antibitico el
microorganismo es incapaz
de desarrollar.
Prueba positiva: si
alrededor del disco de
antibitico se observa un
halo de inhibicin de por lo
menos 10 mm de dimetro.
Prueba de CAMP Solo para estreptococos
del grupo B sintetizan un
pptido muy difusible
(factor de CAMP), cuya
carctertica consiste en
mejorar o agudizar las
zonas de hemolisis
producidas por la
hemolisina de S. aureus.
Prueba positiva: si en la
zona en la que convergen
el factor de CAMP y la
lisina estafilocccica, se
observa una hemolisis ms
evidente, en forma de
punta de flecha, la cual
apunta hacia la estra de S.
aureus.

Importancia Clnica
Diferentes especies de estreptococos ocasionan al ser humano enfermedades como:
faringoamigdalitis, sinusitis, otitis, caries, oftalmas, piodermitis, septicemia, meningitis, etc.

La especie ms importante de este genero es S. pyogenes, debido a su mayor frecuencia,
virulencia y a que produce la potente exotoxina pirognica de Sterptococcus (SPE,
adems de producir la angina de Ludwig, erisipela, fiebre escarlatina y las enfermedades
autoinmunes (fiebre reumtica y glomerulitis).
S. agalactiae es el principal causal de la fiebre puerperal y la sepsis neonatal y S.
pneumoniae es uno de los patgenos de la meningitis infantil

Genero Neisseria
Clasificacin
Forma parte de la familia Neisseriaceae y sus especies principales son: N. gonorrhoeae,
N. meningitidis, N. lactamicus, N. lactamicus, N. sicca, N. catarrhalis, N. flava, N. subflava,
N. perflava y N. flavescens. Las ltimas cuatro especies presentan pigmentos hidrosolubles
que van desde el amarillo hasta el naranja.
Caractersticas morfolgicas
Son cocos Gram negativos, se agrupan en pares y presentan sus lados adyacentes
aplanados; son inmviles, no esporulados y slo N. gonorrhoeae y N. meningitidis
presentan cpsulas.
Caractersticas de cultivo
La mayora de ellas puede desarrollar en medios sencillos (agar nutritivo), aunque N.
gonorrhoeae y N. meningitidis son muy exigentes en cuanto a requerimientos nutricionales,
algunos desarrollan bien en agar sangre y otro en agar chocolate.
El medio mas adecuado para su primoaislamiento es el Thayer Martin: base adecuada
(Hinton Mueller o base GC para preparar agar chocolate) + hemoglobina +
polienriquecimiento (adenina, guanina, tiamina, vitamina B12, glutamina, cistina, cistena
NAD
+
, dextrosa, nitrato frrico, etc.) + VCN (vancomicina, colistn y nistatn)
Las Neisserias y M. catarrhalis son aerobias estrictas y desarrollas a 35 C en 24 horas.
N. gonorrhoeae y N. meningitidis requieren de hasta 48 hrs. Y que exista una atmsferas
entre 5 y 10% de CO2.
Pruebas bioqumicas
- Prueba de la citocromo oxidasa: detecta si el microorganismo posee una
citocromo oxidasa capaz de oxidar compuesto aminados.
Prueba positiva: cuando de 1 a 4 minutos se observa un color negro o azul
obscuro.
Importancia Clnica
La mayora posee gran importancia, pero slo pocos participan como verdaderos
patgenos:

- N. gonorrhoeae: es el agente causante de la gonorrea, padecimiento
considerado como la segunda enfermedad de transmisin sexual.
- N. meningitidis: causante de la meningitis infantil en los paises de origen sajn.
- N. lactamicus, N. sicca, , N. catarrhalis, , N. flava, N. subflava, N. perflava :
forman parte de la flora habitual de vas respiratorias altas y N. lactamicus
tambin forma parte de la flora vaginal.




Bibliografa:
Garza Velasco Ral Manual de Bateriologa experimental, Dpto. de Biologa, Facultad de
Qumica, UNAM.
http://www.dibico.com/productos.php?t=med&m=d&IdCat=1
http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/estafilococomedio110.htm