U.T.N.

Biotecnologa
F.R.R. Ao 2014



















Trabajo Prctico N 2:
Observaciones macroscpicas
Cultivo de microorganismos del medio ambiente










Profesor Adjunto: Licenciada. Liliana E. Vergara

Jefe De Trabajos Prcticos: Bioqumica. Laura Stella

Aux. Docente: Ingeniera Qumica. Roco Garca




Alumna: Olivares Mara Eugenia










U.T.N. Biotecnologa
F.R.R. Ao 2014


Objetivos
Observar la gran variedad de microorganismos presentes en el ambiente,
reconociendo las diferencias morfolgicas macroscpicas de las colonias que se
obtienen.
Poner de manifiesto la necesidad de trabajar en estricta esterilidad en
microbiologa debido a la facilidad con que se puede contaminar el material de
trabajo.


Fundamentos
La aplicacin de correctos procedimientos para la preparacin de materiales en el
laboratorio de microbiologa, nos permite conocer y reconocer microorganismos en el
laboratorio por simple observacin macroscpica. Este tipo de observaciones sirve de
complemento al estudio microscpico que se hace del microorganismo

Desarrollo de actividades

En el siguiente trabajo prctico se realizan observaciones macroscpicas de las colonias y
su evolucin en el tiempo.

1) Se procedi a la Desinfeccin de mesadas de trabajo con una solucin de lavandina al
10%, para asegurar condiciones de asepsia.

2) Preparacin de las placas. Como medio de cultivo se utilizo AGAR, preparado en el
prctico anterior. Para disponerlo en las placas de Petri, se procedi a calentarlo primero
en una manta calefactora y luego continuamos el calentamiento en bao mara, hasta
completa disolucin. Posteriormente se lo coloc en las placas de Petri, previamente
esterilizadas, luego se apoyo se tapo hasta la mitad con la tapa de la placa hasta que se
solidifique.

3) se realizo la siembra de las placas con dos muestras tomadas del ambiente, que en este
caso fueron las siguientes:

1
ra
Muestra: Exudado de un vaso descartable de uso comn.
2
da
Muestra: saliva de un chicle

Se dividi las placas en dos imaginariamente y se sembraron ambas muestras en las dos
placas, con la diferencia que una placa se sembr en la mesada, siempre cerca del
mechero, condiciones ambientales y la otra se sembr bajo campana de seguridad
biotecnolgica. Para que sirva de comparacin las dos condiciones donde se realizo la
siembra.

*la siembra de realizo con el instrumento denominada ansa de ojal, luego de esterilizar el
ansa en la llama del mechero exponindola formando un ngulo de 45, se enfra la misma
en los bordes de la placa de petri, se carga el ansa con la muestra y se realizan estras
paralelas.

Se llevaros ambas placas a la estufa



U.T.N. Biotecnologa
F.R.R. Ao 2014

Observacin
Debido a que la temperatura, en el da en que se efectuaron las siembras, era baja, no se
logro observar (luego de 48hs, ni das posteriores), desarrollo microbiano.


Por lo tanto, se realizo nuevas siembras.

1) Se prepar una solucin de 0,01 g de levadura tipo comercial en 10 ml de agua destilada
y se sembr en una mitad de la placa y en la otra mitad se sembr levadura slida.

2) En la otra placa se sembr una de las muestras suministradas por la ctedra:
Escherichia coli del medio de agar sangre en estufa.

3) se las coloco en estufa

4) luego de 5 das se realizo la observacin macroscpica de las mismas


Observacin macroscpica de placas suministradas por la ctedra.

Se analizo de forma visual las placas suministradas por la ctedra, reconociendo
diferencias morfolgicas macroscpicas de 4 colonias.

Se realizaron los dibujos de las distintas colonias.

PRECAUSION
Trabajar cerca del mechero para:
evitar una contaminacin de la muestra
evitar contacto con los microorganismos (resguardando la salud)

U.T.N. Biotecnologa
F.R.R. Ao 2014

Dibujos e imgenes
Placas suministradas por la Ctedra




PLACA N 1: (Gram (-) Escherichia coli Levin)







PLACA N 2: (Gram (-) Escherichia coli Agar CLDE)








U.T.N. Biotecnologa
F.R.R. Ao 2014


PLACA N 3: (Gram (+) Staphylococcus Aureus ; Agar Sangre)









PLACA N 4: (Gram (+) Staphylococcus Aureus ; Agar CHAPMAN)










U.T.N. Biotecnologa
F.R.R. Ao 2014

Placas sembradas durante el Prctico

PLACA N 5: Medio de cultivo con levaduras








PLACA N 6: Escherichia coli del medio de agar sangre en estufa











U.T.N. Biotecnologa
F.R.R. Ao 2014

OBSERVACIONES MACROSCOPICAS CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS

PLACA N 1: (Gram (-) Escherichia coli Levin)
1) FORMA: circular (Escherichia coli irregular)
2) TAMAO: menor a 3mm. Medianas
3) BORDES: enteros
4) ELEVACION: con cierta elevacin (convexa)
5) COLOR Y OLOR: verde oscuro. No presenta olor apreciable
6) ASPECTO OPTICO: Brillosa
7) CONSISTENCIA: mantecosa
8) EXUDADOS: no presenta


PLACA N 2: (Gram (-) Escherichia coli Agar CLDE)
1) FORMA: circular (Escherichia coli irregular)
2) TAMAO: menor a 3mm. Medianas
3) BORDES: enteros
4) ELEVACION: con cierta elevacin (convexa)
5) COLOR Y OLOR: no presenta color. No presenta olor apreciable
6) ASPECTO OPTICO: translucida
7) CONSISTENCIA: mantecosa
8) EXUDADOS: no presenta

PLACA N 3: (Gram (+) Staphylococcus Aureus ; Agar Sangre)
1) FORMA: circular
2) TAMAO: pequeo
3) BORDES: enteros
4) ELEVACION: no presenta ( plana)
5) COLOR Y OLOR: Gris. No presenta olor apreciable
6) ASPECTO OPTICO: Opaco
7) CONSISTENCIA: mantecosa
8) EXUDADOS: no presenta

PLACA N 4: (Gram (+) Staphylococcus Aureus ; Agar CHAPMAN)
1) FORMA: puntiforme
2) TAMAO: pequeo
3) BORDES: no tiene
4) ELEVACION: no presenta (plana)
5) COLOR Y OLOR: no presenta color. No presenta olor apreciable
6) ASPECTO OPTICO: opaca
7) CONSISTENCIA: mantecosa
8) EXUDADOS: no presenta

U.T.N. Biotecnologa
F.R.R. Ao 2014

PLACA N 5: Medio de cultivo con levaduras
1) FORMA: puntiforme
2) TAMAO: pequeo
3) BORDES: no tiene
4) ELEVACION: no presenta (plana)
5) COLOR Y OLOR: negro y marron. No presenta olor apreciable
6) ASPECTO OPTICO: aterciopelada
7) CONSISTENCIA: polvorienta
8) EXUDADOS: no presenta

PLACA N 6: Escherichia coli del medio de agar sangre en estufa
1) FORMA: puntiforme
2) TAMAO: pequeo
3) BORDES: no tiene
4) ELEVACION: no presenta (plana)
5) COLOR Y OLOR: negro y marron. No presenta olor apreciable
6) ASPECTO OPTICO: aterciopelada
7) CONSISTENCIA: polvorienta
8) EXUDADOS: no presenta



























U.T.N. Biotecnologa
F.R.R. Ao 2014

Conclusin

En el prctico realizado nos permiti, adquirir habilidad en la siembra de
diferentes muestras en distintas condiciones, as como reconocer la importancia de
trabajar en condiciones de asepsia tanto para el cuidado de la salud como para favorecer el
desarrollo microbiano.

Tambin nos brindo la posibilidad de entrenarnos en el reconocimiento
macroscpico de las distintas caractersticas morfolgicas de las colonias presentes en las
placas.



Bibliografa
Apunte proporcionado por la Ctedra.
Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke, Christine L Case. Introduccin a la
Microbiologa. Editorial Medica Panamericana 2007.