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La cintica de crecimiento analizada corresponde a una cepa de Saccharomyces cerevisiae,

tambin conocida como levadura de cerveza, cultivada en un biorreactor. El medio elegido para el
crecimiento fue el caldo glucosa, cuya composicin de 1 litro consiste de:
Glucosa 5 g
Peptona 7 g
Fosfato bipotsico 5 g
Agua destilada 1000 ml

La glucosa es la fuente de energa de la levadura, mientras que la peptona es la fuente de
nitrgeno. El fosfato bipotsico acta como estabilizador y el agua como medio mvil para la
levadura. El biorreactor fue inoculado alrededor de las 8 de la maana, y cada hora se retiraba
una muestra para realizar mediciones de turbidez con la ayuda de un espectrofotmetro y realizar
observaciones al microscopio con la finalidad de detectar si el cultivo fue contaminado. El objetivo
de la medicin de la turbidez es determinar la concentracin de levadura en el medio con el fin de
analizar el crecimiento. El espectrofotmetro emite un haz de luz que atraviesa la muestra y mide
la cantidad de luz que no se dispers. Entre mayor es la cantidad de clulas, mayor es la cantidad
de luz dispersada y por lo tanto, mayor es la turbidez de la muestra. La unidad de la turbidez es la
D.O. a mayor turbidez, mayor densidad ptica y por ende, mayor nmero de clulas en el medio
(Madigan, et al.).
La densidad ptica puede ser utilizada para observar el crecimiento. No obstante, es preferible
utilizar una conversin de la D.O. a la biomasa, es decir, la cantidad de materia de la levadura en s.
La cual tiene la ventaja de ser expresada en g/L. Para hacer la conversin, se toma el hecho de
que el la concentracin de biomasa []es proporcional a la D.O.
[] ( )
[] ( )
En la prctica, se realiza una curva de peso seco con el objetivo de determinar la relacin de D.O.
con [] Sin embargo, debido a que S. cerevisiae es un m.o. histricamente reconocido,se recurri
a la literatura para encontrar dicho factor, el cual corresponde a 1 D.O. @ 600 nm =35 g de
biomasa/L.





Los datos recolectados de la cintica de S. cerevisiae:
t (h) D.O. @ 600
nm
Biomasa
(g/L)
0 0.253 0.08855
1 0.254 0.0889
2 0.285 0.09975
3 0.287 0.10045
4 0.378 0.1323
5 0.445 0.15575
6 0.66 0.231
7 0.701 0.24535
8 1.297 0.45395
9 1.429 0.50015
10 1.829 0.64015
11 2.321 0.81235
12 2.452 0.8582
13 2.477 0.86695
14 2.494 0.8729

Para visualizar mejor la informacin recolectada, es pertinente analizar el crecimiento de S.
cerevisiae con una grfica de Biomasa vs Tiempo.

0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
1
0 2 4 6 8 10 12 14 16
B
i
o
m
a
s
a

(
g
/
L
)

Tiempo (h)
Como se puede observar, hay primero una fase estacionaria donde no se registran cambios
significativos de biomasa,luego una fase de crecimiento exponencial y finalmente una fase
estacionaria. Para modelar dicho crecimiento, existe el modelo de crecimiento exponencial


Donde:
=concentracin de biomasa (g/L).
= velocidad especfica de crecimiento (h
-1
).
t= tiempo (h)
es especfica de cada m.o. y depende de muchos factores, tanto del medio como la
temperatura. Como se puede apreciar, el modelo de crecimiento exponencial es una relacin no
lneal que puede ser linealizada con distintos mtodos de regresin.
Para realizar dichos clculos, se eligi la fase de crecimiento correspondiente al crecimiento
exponencial y se aplicaron distintos mtodos de regresin




0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
0 2 4 6 8 10 12
B
I
O
M
A
S
A

(
G
/
L
)

TIEMPO (HORAS)
Series1 Regresin lineal Regresin exponencial
Regresin potencial Regresin polinmica (m=2)
A continuacin se muestra un anlisis los coeficientes de correlacin obtenidos en las regresiones:

Tipo de regresin Coeficiente de correlacin
Lineal 0.9263
Polinmica 0.9866
Potencial 0.9501
Exponencial 0.9837
Crecimiento saturado

Posteriormente, se analiz el modelo de regresin exponencial y tomando en cuenta la relacin de


se obtuvo el modelo de crecimiento exponencial para S. cerevisiae, el cual se prob contra los
datos experimentales:
44



Tiempo
(h)
Experimental Modelo Error %
3 0.10045 0.09862845 1.8133875
4 0.1323 0.12898031 2.50921143
5 0.15575 0.16867264 8.29703877
6 0.231 0.22057985 4.51088538
7 0.24535 0.28846097 17.5712116
8 0.45395 0.37723177 16.900149
9 0.50015 0.49332085 1.36541951
10 0.64015 0.64513512 0.7787424
11 0.81235 0.84366862 3.85531065

De igual forma, se model la fase de desaceleracin del crecimiento mediante el modelo de
Monod, para esto, hay que recordar que en el medio se encuentra glucosa, la cual es el sustrato
del que el m.o. obtiene energa. La concentracin de glucosa puede ser medida de sobrenadantes
centrifugados mediante la prueba de azcares residuales.Obteniendo as informacin que nos
permita ilustrar la siguiente grfica:

Como puede observarse, hay una relacin entre el consumo de sustrato y el crecimiento. El
modelo de Monod es de particular importancia para modelar la fase de desaceleracin
(correspondientes a los puntos 10,11,12, 13 y 14) del crecimiento y se rige por la siguiente
ecuacin:

]
Donde:
= velocidad especfica de crecimiento (h
-1
).

=velocidad especfica de crecimiento mxima (h


-1
).
= concentracin de sustrato.

= constante de Monod.
Dicho modelo se relacion con la regresin de razn de crecimiento :

]




0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
1
0
2
4
6
8
10
12
14
16
0 2 4 6 8 10 12 14 16
C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i

n

B
i
o
m
a
s
a

(
g
/
L
)

C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i

n

G
l
u
c
o
s
a

(
g
/
L
)

Tiempo
Sustrato
Biomasa
Por ende, mediante el clculo de la regresin fue posible determinar el modelo de Monod
siguiente:




Sustrato Experimental Modelo de
Monod
Error
0.994 0.24679447 0.25470203 3.20410866
0.2218 0.23822876 0.23328594 2.07481829
0.0055 0.05490589 0.04438001 19.1707635
0.0012 0.01014413 0.01116358 10.0496736
0.0007 0.0068397 0.00662998 3.0661955







0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2


(
h
-
1
)

Concentracin de glucosa (g/L)
Modelo de Monod
Datos experimentales
26652 [
S
26936 S
]
R=0.992767

Tiempo (h)
(h-1)
Sustrato
(h-1)
1/S 1/
10 0.64015 0.994 0.2467945 1.006036217 4.05195464
11 0.81235 0.2218 0.2382288 4.508566276 4.19764603
12 0.8582 0.0055 0.0549059 181.8181818 18.212982
13 0.86695 0.0012 0.0101441 833.3333333 98.5791547
14 0.8729 0.0007 0.0068397 1428.571429 146.205312

Otra forma de calcular la constante de Monod es mediante la linealizacin de un diagrama de
Linewaver Burk, el cual consiste en el recproco del modelo de Monod:



Ahora, despejando el valor de Ks y
max
a partir de la ecuacin, obtenemos los siguientes datos:
Ks=0.0269238

max
=0.261650
Los cuales pueden ser sustituidos en un nuevo modelo de Monod,


y = 0.1029x + 3.8219
R = 0.9928
0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 200 400 600 800 1000 1200 1400 1600
1
/


(
h
)

1/S
Regresin lineal
2665 [
S
269238 S
]

Sustrato Experimental Monod por RRC Monod por
LLB
Error % Error %
0.994000 0.246794 0.254749 0.254750 3.223006 3.223450
0.221800 0.238229 0.233317 0.233327 2.061653 2.057598
0.005500 0.054906 0.044367 0.044383 19.194576 19.164789
0.001200 0.010144 0.011159 0.011164 10.008955 10.055835
0.000700 0.006840 0.006627 0.006630 3.103059 3.061005