PRACTICA 1

INTRODUCCIN AL LABORATORIO Y NORMAS DE BIOSEGURIDAD

Durante las prcticas con materiales infecciosos, en un laboratorio microbiolgico, se pueden producir
infecciones con ms frecuencia que en otros laboratorios.
Las vas de infeccin ms frecuentes son:
-Boca: por comer, beber, pipetear con la boca, por utilizar lpices contaminados.
-Piel: por cortes o rasguos.
- Ojos: Por salpicarse con materiales infecciosos, por transferencia de dedos contaminados.
Se debe estar consciente de que se deben tomar las medidas de seguridad para no adquirir ningn tipo de
infeccin que pudiera haber en el laboratorio, es importante el uso de guantes, bata y cubrebocas para
ayuda de cada uno y no contraer alguna infeccin.

PRCTICA II
DESCRIPCIN Y MANEJO DE EQUIPO Y MATERIAL DE LABORATORIO.


La finalidad de la prctica era aprender el debido procedimiento que se debe llevar con los materiales
encontrados en el laboratorio de microbiologa. Es importante cada funcin de ellos para que en las
prcticas siguientes no cometamos ningn error ni que se produzca algn tipo de infeccin.
PRCTICA III
TINCIN Y MORFOLOGA DE BACTERIAS Y HONGOS
TINCIN DE GRAM
1.- Primer colorante: un colorante bsico (+) catin que en contacto con las clulas cargadas negativamente
reacciona con ellas colorendolas. El ms utilizado es el cristal violeta o violeta de genciana
2.- Solucin mordiente: fija las tinciones y aumenta la afinidad entre el colorante y las clulas. Los
mordientes usados tienen sales metlicas, cidos o bases, por ejemplo: una solucin diluida de yodo
3.- Agente decolorante: es un disolvente orgnico, alcohol acetona (1:1)
4.- Colorante de contraste. Es un colorante bsico de distinto color que el primer colorante como la
safranina.




1.- CRISTAL VIOLETA

2.- LUGOL

3.-ALCOHOL- CETONA


4.- SAFRANINA


RESULTADOS al microscopio




En la prctica adems de que observamos los microorganismos, aprendimos a realizar las tinciones para los
microorganismos y aprendimos a diferenciar cuales son las soluciones que se ocupan para cada una de las
colonias de microorganismos.




















Prctica IV
Mtodos Genticos para el estudio de los microorganismos
(prctica virtual)




PRACTIVA
VIRTUAL:













Se compara con el ADN genmico base.




Esta prctica fue diferente a las dems porque se realizo virtualmente, sin embargo se pueden aprender
tcnicas como PCR que nos ayuda a saber sobre el genoma de las personas.




GRACIAS A ESTA PRCTICA PODEMOS SABER LA ESTRUCTURA DE VARIOS MICROORGANISMOS COMO:
Streptococcus mutans UA159, complete genoma


Description: Escherichia coli CFT073, complete genome
Molecule type: nucleic acid
Query Length:5231428
Description
Nucleotide collection (nt) See details

Description: Mycobacterium tuberculosis H37Rv complete genome
Molecule type: dna
Query Length:4411532
Description: Nucleotide collection (nt) See details
Program: BLASTN 2.2.28+ Citation










Prctica V
Medios de cultivo, tcnicas de siembra y morfologa de bacterias y hongos

Tcnica de siembra:
Medios de cultivo
Placa de agar de soya tripticasa
Placa de agar Saboraud con cloranfenicol
Tubo de ensayo medio liquido cerebro- corazn
Tubo de ensayo con medio de gelosa fundida
Placas de gelosa
Tubo de gelosa slida
1.- Encender los mecheros, ajustar la flama hasta que presente un color bien marcado, para as poder
esterilizar el asa.

2.- Para realizar la tcnica de siembra por estra cruzada:


Se toma la muestra del tubo de ensaye, y posteriormente se lleva a las cajas de petri que contienen el
cultivo y se realiza la estra.

Para volver a tomar la muestra se esteriliza tanto el asa como los tubos en un medio muy caliente.

Todos los procedimientos se repiten con todas las muestras que ya se haban dicho al inicio de la prctica.

Se llevan a incubar por unos 3 das hasta obtener los resultados.


RESULTADOS:

Las siembras fueron exitosas ya que en los diferentes medios de cultivo y cada uno con la tcnica la
replicacin de colonias microbianas se dio.
Practica VI.
Estudio de Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis Streptococcus alfa, beta y gama
hemolticos.
PROCEDIMIENTO:
CEPAS
Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
Streptococcus alfa, beta y gamma hemolticos.

MEDIOS DE CULTIVO
2 cajas de Petri de agar 110
5 cajas de Petri de agar gelosa sangre
2 cajas de Petri con agar manitol salado
1 caja de Petri de cromoagar aureus
1 tubo de solucin salina estril

1. A partir del cultivo de S.aureus y S. albus
hacer un frotis y teirlo con la tcnica de
Gram y observar al microscopio.

2. Sembrar
los cultivos de
Staphylococcus
aureus y
epidermidis en agar gelosa sangre, agar
110 y cromoagar aureus e incubar a 37C
2 durante 24 horas y observar la
hemlisis producida y viraje de color









3.- Sembrar en agar manitol salado las mismas
cepas, incubar a 27C durante 24 horas y
observar si hay un viraje de color en el medio de
cultivo hacia amarillo, la reaccin ser manitol
positiva, la cual es producida por el
Staphylococcus aureus.
A partir del cultivo de Streptococcus beta, alfa y
gamma hemolticos hacer un frotis y teirlo con
la tcnica de Gram y observar al microscopio.











RESULTADOS:




PRACTICA VII Exudado farngeo


Materiales para la prctica
MEDIOS DE CULTIVO
1 caja de cultivo con gelosa sangre
1 caja de cultivo con agar sal y manitol
1 caja de cultivo con agar EMB
1 caja de Petri con cromoagar para Staphylococcus
1 caja de Petri de agar mitis-salivarius-bacitracina
1 caja de Petri con agar Biggy

De una persona del equipo se toma muestra raspando con un abate lenguas y tambin con un hisopo.

Tomada la muestra con abatelenguas se pone en un porta y cubre objetos y
se seca con calor.
Posterior a eso se hace la tincin de Gram.




Posterior a eso se ve al microscopio.

RESULTADOS
Pudimos observas las caractersticas de los Staphylococcus y de Streptococcus, as de cules son los medios
de cultivo en que se deben de sembrar y como se debe realizarlo.




Con el asa bacteriolgica estril se realizara en los medios de cultivo las siguientes tcnicas de siembra;
estra cruzada y cultivo puro.
Los medios de cultivo se incubaran a 35c durante 24 y 72 horas, para ser observados al trmino y comparar
entre los medios de cultivo las caractersticas morfolgicas de las colonias y la reaccin bioqumica
desarrollada en el mismo.









RESULTADOS






Prctica VIII
Prueba de actividad cariognica CRT bacteria y sistema Buffer.




Darle una pastilla de parafina a un integrante del equipo para que salive ms rpido, y en un recipiente que
escupa.



Retiramos las lminas protectoras del agar y lo humedecemos de saliva, de esta manera se introduce al tubo
y se cierra bien,
Se incuba durante 48 horas y 37.

RESULTADOS







Se observa que nuestra compaera tena poco actividad cariognica, por lo que determinamos que tiene
poco probabilidad o tiene un tiempo ms prolongado para desarrollar caries

La prueba de buffer consta en agarrar un poquito de saliva de la muestra tomada al principio y se coloca un
poco en laminas para determinad la actividad cariognica.











Prctica IX
Estudio de Microorganismos del Surco Gingival

PROCEDIMIENTO:
Hacer el aislamiento relativo con rollos de algodn, y con una cureta, pasarla por el surco gingival para
poder sacar la mayor placa bacteriana que sea posible.



Colocar la muestra en un tubo con TSB marcado con el numero 1 que ser nuestro tubo muestra. Agitar
vigorosamente el tubo para obtener una mezcla buena y la prctica no fracase.

Posteriormente se realizaran diluciones seriadas de la muestra de la siguiente manera: tomar 1 ml del tubo
1 y transferirlo al tubo marcado -1. Dispersar la muestra. Tomar 1ml del tubo -1 y transferirlo al tubo
marcado -2. Nuevamente dispersar. Repetir este procedimiento para los tubos siguientes



Cada vez que se toma muestra de un tubo debe esterilizarse tanto el asa como
el tubo.

Ya que todos los tubos tienen la muestra dispersada, se deben de tomar 100ul del tubo -3 y transferirlos a
una de las cajas de Petri y hacer el mismo procedimiento con otra placa de Petri pero marcado con el
numero -3 aerobio: Hacer el mismo procedimiento con la muestra del tubo -4 .


Incubar las placas anaerobias en las jarras de anaerobiosis a 37C durante 7 das y las aerobias en la
incubadora a 37C durante 3-5 das




RESULTADOS:




Con esta prctica aprendimos como se debe tomar una muestra del surco gingival.












Prctica X
Estudio de Candida albicans


Raspado bucal
Se har en dos miembros de cada equipo, pasar abatelenguas por zona a estudiar, pasar raspado a un
cubreobjetos, realizar procedimiento para los 2 raspados bucales.



Examen directo
Colocar una gota de KOH al 20% y el cubreobjetos a las 2 muestras
Calentar muestras al mechero (acelera el aclarado)
Observarlas a 40x.
Positivo: presencia de blastoconidias y pseudomicelios
Negativo: presencia solo de blastoconidias




Cultivo de cepa (proporcionada por laboratorio).Resiembra de cepa en agar Saboraud, hacer siembra por
estra cruzada para aislar






RESULTADOS AL MICROSCOPIO
Se observ al microscopio a 40x buscando las blastoconidias (si se observaban pseudomicelios, el paciente
tendra candidiasis)



En el paciente no se observaban blastoconidias lo que significa que no tenia candidiasis.
En el segundo paciente se mostraban muy poquitas.


Y en las placas con Saboraud






PRCTICA No.11
ACCIN DE LOS DESINFECTANTES EN EL CRECIMIENTO MICROBIANO

PRCTICA No. 12
1. ANTIBIOGRAMA