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SUSTANCIAS

cloroformo
alcohol de 95
nitrato de plata
potasa alcohlica
beta naftol
solucin alcohlica
concentrada de potasa
timol
resorcinol
piridina
cristal de yodo
clorhidrato de piperacina

MATERIALES

Panema
Cronmetro
Equipo de diseccin
Bistur
Vaso de precipitacin
Erlenmeyer
Equipo de destilacin.
Tubos de ensayo
Pipetas
Guantes de ltex
Mascarilla
Mandil
Jeringuilla 10cc

UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos Garca MSc.
Alumno: Bastidas Guerrero Tania Lorena
Curso: Quinto Paralelo: A
Grupo N 5
Fecha de Elaboracin de la Prctica: Lunes 23 de junio del 2014
Fecha de Presentacin de la Prctica: Lunes 30 de Junio del 2014

PRCTICA N 5
Ttulo de la Prctica: Intoxicacin por cloroformo.
Animal de Experimentacin: Cobayo.
Va de Administracin: Intraperitonial
OBJETIVOS DE LA PRCTICA

1. Observar la reaccin que presenta el cobayo ante la Intoxicacin por cloroformo.
2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que acta el
toxico.
3. Adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de
4. identificacin.
Equipo de destilacin.
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Tubos de ensayo
Pipetas
Guantes de ltex
Mascarilla
Mandil
Gorro
Zapatones en caso de usar sandalias

PROCEDIMIENTO
1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo.
2. Colocamos el cobayo en el panema.
3. Tener todos los materiales a utilizar listos.
4. Administramos al cobayo, 5 ml de cloroformo por va intraperitoneal y
anotamos el tiempo.
5. Observamos los efectos que produce en el cobayo.
6. Despus de 17 minutos pasado la primera dosis, inyectamos 5 ml ms del toxico
y con esto se lleg a la muerte del animal.
7. Procedimos a la apertura del cobayo con la ayuda del bistur.
8. Observamos el estado de las vsceras.
9. En un vaso de precipitacin recolectamos la sangre y colocando las vsceras
(picadas lo ms finas posibles).
10. El contenido del vaso anterior lo pasamos al baln para proceder a la destilacin.
11. Armamos correctamente el equipo de destilacin (mtodo de soxhleth),
asegurando que no existan fugas que conlleven a prdidas del destilado.
12. Adicionamos a las vsceras acido tartrico (25 ml) y calentamos con la lmpara
de alcohol esto con movimiento circular durante 30 minutos (el destilado fue
recibido en NaOH).
13. Con el destilado procedimos a realizar las reacciones de identificacin del
cloroformo en medios biolgicos.
14. Una vez terminada la prctica se limpia todo el material y el rea utilizada.
REACCIONES DE RECONICIMIENTO

1. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo
con otras tantas de alcohol de 95 que contiene un poco de nitrato de plata, se
inflama la mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y
que el cido clorhdrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto
originando un precipitado de cloruro de plata.

2. REACCIN DE DUMAS.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene
cloroformo a unos mililitros de potasa alcohlica (proporcin 1:10), se originan
formiatos y cloruro de potasio.
CHCl3 + 4 KOH ----- ClK + HCO2K + H 2 O


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Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porcin se le agrega
percloruro de hierro produciendo un color rojo en fro o un precipitado en
caliente.
A la otra porcin se le agrega solucin de nitrato de plata producindose un
precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amonaco diluido.

3. REACCIN DE LUSTGARTEN.- al calentar la muestra con unos miligramos
de beta naftol y solucin alcohlica concentrada de potasa (preferentemente un
trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.
Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo ms o menos oscuro;
con resorcinol la coloracin e roja violceo y con la piridina rojo.

4. REACCIN DE ROSEBOOM.- se disuelve un pequeo cristal de yodo en la
solucin muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de
piperacina; si el cloroformo est presente en la muestra, la coloracin violeta
inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.

GRFICOS:

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLGICOS


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Reaccin positivo caracterstico precipitado de AgNO
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REACCIN DE DUMAS.
Reaccin positivo caracterstico color rojo


Reaccin positivo caracterstico precipitado de cloruro de plata






REACCIN DE LUSTGARTEN
Reaccin positivo caracterstico se observ el color azul.
Antes se torna transparente
Despus se observa el
precipitado
Despus aparece una coloracin rojiza
En fro En caliente
Despus aparecimiento de
un precipitado
Antes se torna transparente
Antes se torna transparente


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Reaccin positivo caracterstico se observ el color amarillo.














Reaccin positivo caracterstico se observ el color rojo -
violaceo.









REACCIN DE ROSEBOOM
Reaccin positivo no se observ la coloracin amarillo-
rojiza.
Despus se observo el
color azul
Antes se torna rojo Despus cambia a color
amarillo
Antes se torna transparente
Antes se torna amarillo
Despus cambia a color
violeta


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OBSERVACIONES
Tiempos:
Inicio de la prctica: 08:24am
Hora de administracin del toxico al cobayo: 08:34 am
Deceso del animal: 09:02 am (28 minutos)
Hemos observado que al administrar cloroformo por va intraperitoneal al cobayo
este presento sntomas como respiracin agitada, depresin del sistema nervioso central,
presenta leves convulsiones respiracin escasa e hipoxia, asimismo se observa
distencin abdominal.

CONCLUSION
Al trmino de esta prctica podemos darnos cuenta que el cloroformo es una sustancia
txica, al observar la rpida accin de depresin del SNC, perdida de movilidad, adems
de las convulsiones y la hipoxia que llevaron a la muerte del animal en un periodo de 28
minutos con una dosis de 10 ml de toxico y finalmente mediante las reacciones de
identificacin constatamos la presencia de cloroformo en el destilado de las vsceras.
RECOMENDACIONES
Realizar la asepsia del rea a trabajar.
Utilizar el equipo de proteccin adecuado: bata de laboratorio, guantes,
mascarilla.
Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
Utilizar la cmara de gases para realizar las pruebas y evitamos as
intoxicaciones.
Al someter calor en el tubo de ensayo para las reacciones, realizarlo de lado y
que no est alguna persona en esa direccin, ya que puede haber salpicadura del
toxico.


CUESTIONARIO
1. Cules son los principales sntomas que produce el cloroformo en el
organismo?
Despus se torna color
amarillo
Antes se torna
transparente


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Est clasificado como moderadamente txico, sin embargo est considerado como
posible carcinognico humano. Una probable dosis letal para humanos es de 0.5 a 5 g
/Kg. Sin embargo, se sospecha que es carcingeno para humanos. Puede causar una
muerte rpida, atribuida a paro cardiaco y una muerte lenta por dao al hgado y rin.
Debe evitarse que personas alcohlicas, con problemas graves nutricionales, de hgado,
rin y sistema nervioso central, utilicen este producto.
Inhalacin: Los signos de intoxicacin aguda con vapores de cloroformo, en general,
son: depresin respiratoria, neumonitis qumica, edema pulmonar, acidosis metablica,
depresin del sistema nervioso central, dolor de cabeza, fatiga, adormecimiento y
prdida del equilibrio. Se ha informado, tambin de arritmias y paro cardiacos.
Por este medio se tienen riesgos particularmente para hgado y riones, ya que el
cloroformo tiende a alojarse en los tejidos de estos rganos, unindose covalentemente a
macromolculas celulares. La ingestin de alcohol, potencializa la toxicidad de los
vapores de cloroformo.
Su poder como anestsico se presenta a concentraciones entre 10000 y 15000 ppm,
mientras que entre 15000 y 18000 puede ser fatal por paro respiratorio.
Contacto con ojos: Ocasiona conjuntivitis, e, incluso, quemaduras dolorosas, ya sea en
forma de vapor o lquido.
Contacto con la piel: No hay una absorcin significativa a travs de la piel.
Ingestin: Provoca nusea, vmito, salivacin, anorexia, irritacin gastrointestinal y
dao a hgado y riones.
Carcinogenicidad: Se ha encontrado que es un carcinognico en ratas y ratones y se
sospecha que es un carcingeno humano a largo plazo y debe ser reemplazado por otros
disolvente, cuando sea posible.
Mutagenicidad: Se tienen resultados negativos en algunos estudios realizados con
Salmonella typhimurium.
Riesgos reproductivos: Es teratognico para ratas y ratones y altamente txico al feto
por inhalacin en experimentos con estos mismos animales. Tambin ha estado
implicado en desordenes similares en humanos, por lo que se recomienda que las
mujeres embarazadas no tengan contacto con este producto.

2. Qu medidas de primeros auxilios se deben emplear en una intoxicacin por
cloroformo?

Una exposicin aguda al cloroformo requiere descontaminacin y soporte de vida
bsico para la vctima. El personal de emergencia debe usar ropa de proteccin
adecuada, dependiendo del grado de contaminacin. Toda la ropa y equipo contaminado
debe almacenarse en recipientes especiales, para darles el tratamiento de
descontaminacin adecuado, mas tarde.
De manera general, la vctima debe moverse a una zona ventilada. Evaluar signos
vitales como: pulso y velocidad de respiracin. Si no hay pulso, proporcionar
rehabilitacin cardiopulmonar. Si no respira, proporcionar respiracin artificial. Si la
respiracin es dificultosa, proporcionar oxgeno. No existe un antdoto especfico y se
sabe que no debe darse adrenalina a las personas que sufren envenenamiento por
cloroformo.
Ojos y Piel: Quitar la ropa contaminada, y lavar segn sea el caso, ojos y/o piel con
agua corriente en gran cantidad. Los ojos pueden lavarse tambin con disolucin salina
neutra asegurndose de abrir bien los prpados.
Ingestin: Mantener a la vctima en reposo y caliente. No inducir el vmito. Puede
suministrarse carbn activado, si la vctima est consciente. Usar de 15 a 30 g, para


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nios, o de 50 a 100 g, para adultos con 1/2 a 1 taza de agua. Provocar excrecin con un
cartrtico salino o sorbitol para vctimas concientes, los nios requieren de 15 a 30 g y
los adultos de 50 a 100 g.
EN TODOS LOS CASOS DE EXPOSICION, EL PACIENTE DEBE SER
TRANSPORTADO AL HOSPITAL TAN PRONTO COMO SEA POSIBLE.

3. Cul es el comportamiento del cloroformo en el ambiente?

Agua: En el medio acutico, el cloroformo se descompone con extrema lentitud
(Amenaza para el agua - Clase 3). Debido a su gran volatilidad escapa en forma de gas
de los cuerpos de agua superficiales. La bioacumulacin del cloroformo es mnima a
pesar de su alta liposolubilidad (factor de bioacumulacin en los peces: 6; UBA, 1986).
Aire: Debido a su alto grado de volatilidad, el cloroformo llega a la atmsfera, donde se
acumula en pequeas cantidades. Se descompone por fotlisis.
Suelo: El cloroformo no se adsorbe en partculas de suelo, de modo que se excluye la
posibilidad de su acumulacin en suelos o sedimentos.
Degradacin, productos de la descomposicin: La biodegradacin en condiciones
anaerbicas produce dixido de carbono, cloruro y metano, en tanto que la degradacin
en los organismos (catabolismo) produce dixido de carbono, cloruro y fosgeno. En
presencia de agentes oxidantes, el cloroformo se descompone formando fosgeno y cido
hidroclrico (DVGW, 1988).
Cadena alimentaria: El cloroformo se encuentra en todas partes y, por lo tanto,
tambin ha sido hallado en los alimentos. El agua potable contiene, en ciertas ocasiones,
grandes concentraciones de cloroformo resultante de la cloracin del agua. Se estima
que el promedio de asimilacin diaria de cloroformo asciende a unos 10 m g por
persona; una cuarta parte de esta cantidad proviene del agua potable, otra cuarta parte de
los productos alimenticios y la mitad del aire (DVGW, 1988)
GLOSARIO

1. Anestsico: constituye un grupo farmacolgico usado para deprimir el sistema
nervioso central de manera que permita la realizacin de procederes nocivos o
desagradables, o prevenir/aliviar el Dolor mediante el bloqueo de la conduccin
nerviosa cuando se inyecta localmente en el tejido nervioso.
2. Carcingeno: Cualquier sustancia o agente capaz de desencadenar un cncer en
las clulas sanas; no necesariamente tiene que ser un agente que provoque
mutacin en el material gentico de las clulas.
3. Cloroformo: El cloroformo es un lquido incoloro con olor dulce caracterstico,
muy voltil. Generalmente contiene pequeos porcentajes (1-5 %) de etanol
como estabilizador. Es ligeramente soluble en agua y con densidad mayor que
sta. Es no inflamable, pero productos de su oxidacin, como el fosgeno, son
muy peligrosos. Es peligroso por inhalacin e ingestin.
4. Formiato: Son sales resultantes de la combinacin del cido frmico con
diversas bases y alcaloides. Se dice que obran como poderosos tnicos


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musculares tanto de los msculos estriados como de los lisos hasta el punto de
evitar en cansancio y extinguirlo pronto.
5. Mutagenicidad: Produccin de alteraciones del material gentico celular
(genes, cromosomas) que da lugar a una modificacin permanente de la
constitucin hereditaria.

BIBLIOGRAFA
Toxicologa Mdica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial Cientfico-Mdico.
Madrid. Espaa
WEBGRAFA
Hoja de seguridad VII. Cloroformo. Mxico. Recuperado de
http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdf
Cloroformo. En lnea. Recuperado de
http://wgbis.ces.iisc.ernet.in/energy/HC270799/HDL/ENV/envsp/Vol319.htm#Cresoles
AUTORIA
Bioq. Farm. Carlos Garca MSc.


FIRMA



_________________________
Tania Bastidas

ANEXOS: