Aleyda Montañez

DETERMINACIN DE COMPUESTOS AROMTICOS EN
AGUA POTABLE MEDIANTE SCREENING DE MUESTRAS

Y CROMATOGRAFA LQUIDA CON DETECCIN UV

Autor: Ing. Aleyda L. Montaez Palencia

Tutor(a): Dra. Lisbeth Manganiello de Vega

Valencia, Mayo de 2008

UNIVERSIDAD DE CARABOBO
REA DE ESTUDIOS DE POSTGRADO
FACULTAD DE INGENIERA
MAESTRA EN INGENIERA AMBIENTAL


Autor: Ing. Aleyda L. Montaez Palencia.
Trabajo de Grado presentado ante el rea de
Estudios de postgrado de la Universidad
de Carabobo para optar al Ttulo de
Magster en Ingeniera Ambiental.






Aprobado en el rea de Estudios de Postgrado de la Universidad de Carabobo por
Miembros de la Comisin Coordinadora del Programa:

Nombre C.I. N Firma

Nombre C.I. N Firma

Nombre C.I. N Firma


Dedicatoria:

A Dios, por iluminarme el camino.

A mis Padres, quienes con su apoyo han
sabido guiar mis pasos y darme la
confianza para seguir adelante.

V

Agradecimiento:

A la Dra. Lisbeth, por sus difanos conocimientos
y calidad humana, en aras de la consecucin de la
meta anhelada.

Al Centro de Investigaciones Qumicas, por
proporcionarme los recursos para el desarrollo
de esta investigacin.

A Nancy Mendoza, por su constante apoyo.

VI

NDICE GENERAL

Pg.
RESUMEN
INTRODUCCIN........................................................................................... 1
CAPTULO I. EL PROBLEMA
1.1 Planteamiento y formulacin del problema............................................. 4
1.2 Objetivos de la investigacin................................................................... 9
1.2.1 Objetivo general... 9
1.2.2 Objetivos especficos....... 9
1.3 Justificacin de la investigacin. 10
CAPTULO II. MARCO TERICO
2.1 Antecedentes....... 13
2.2 Bases tericas.. 19
2.2.1 Transporte, distribucin y transformacin de contaminantes.. 19
2.2.2 Potabilidad del agua...... 20
2.2.3 Fuentes de abastecimiento.... 22
2.2.3.1 Agua subterrnea..... 24
2.2.3.2 Consideraciones para la seleccin de un pozo como fuente de
abastecimiento de agua destinada al consumo humano....

27
2.2.3.3 Fuentes de contaminacin del agua subterrnea..... 27
2.2.3.4 Vulnerabilidad del agua subterrnea....... 30
2.2.4 Compuestos aromticos... 32
2.2.4.1 Tolueno.. 32
2.2.4.2 Benceno.. 33
2.2.4.3 Etilbenceno. 34
2.2.5 Fundamentos tericos de las metodologas de anlisis 35
2.2.5.1 Sistemas de Anlisis por inyeccin en flujo (FIA). 35
2.2.5.2 sistemas de cromatografa lquida de alta resolucin. (HPLC). 39
2.2.5.3 Sistema de extraccin en fase slida........ 46
2.2.5.4. Sistema de espectrofotometra ptica, UV- Visible 50
2.3 Bases Legales.... 53
2.4 Definicin de trminos..... 56
CAPTULO III. METODOLOGA
3.1 Diseo de la investigacin......................................................................... 58
3.2 Desarrollo de las fases del proyecto.... 59
3.2.1 Fase I: Diagnstico.. 59
3.2.2 Fase II: Factibilidad Funcional... 68
3.2.3 Fase III: Propuesta...... 83
VII

CAPTULO IV. ANLISIS DE RESULTADOS
4.1 Objetivo correspondiente a la fase de diagnstico 87
4.1.1 Determinacin del nmero de muestras matriz de seleccin. 87
4.1.2 Anlisis de opinin de los habitantes de las viviendas muestreadas. 90
4.1.3 Valores de pH en las muestras estudiadas 91
4.2 Sistema de Screening de Muestras.. 91
4.2.1 Optimizacin de variables de operacin del Sistema de Screening de
Muestras...

91
4.2.2 Calibracin sistema de Screening de muestras... 94
4.3 Sistema de Cromatografa lquida con deteccin UV. 95
4.3.1 Variables de operacin del Sistema de Cromatografa Lquida. 97
4.3.2 Calibracin sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV... 98
4.4 Determinacin de muestras sintticas mediante el sistema de Screening de
Muestras..

100
4.4.1 Determinacin de muestras sintticas mediante el sistema de
Cromatografa Liquida con deteccin UV

101
4.4.2 Determinacin de muestras reales aplicando el mtodo de Screening de
Muestras y el mtodo de Cromatografa Lquida con deteccin UV

103
4.5 Valores de las muestras obtenidos del equipo de Cromatografa Lquida
con deteccinUV...

105
4.6 Costos asociados a la preparacin de patrones y materiales... 106
4.6.1 Sistema de extraccin y preconcentracin. 108
4.6.2 Sistema de Screening 108
4.6.3 Sistema de cromatografa liquida con deteccin UV. 109
4.6.4 Comparacin de Costos para ambos sistemas de deteccin 109
4.7 Propuesta de aplicacin del sistema de Screening y la tcnica de

110
CAPTULO V. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Conclusiones.... 114
Recomendaciones... . 116
BIBLIOGRAFA 118
APNDICES (recopilado en cd complementario)
Apndice A Norma sanitaria de calidad de agua
Apndice B Norma venezolana. Tcnica de muestreo. 2709:2002 COVENIN
Apndice C Norma venezolana. Toma de muestra. 2614:1994 COVENIN
Apndice D Ficha internacional de seguridad
Apndice E Cotizaciones de los equipos
Apndice F Caractersticas de absorcin de los compuestos aromticos
Apndice G Tablas del estudio del muestreo
ANEXO A Sistema de tuberas del conjunto residencial Bayona Country I
ANEXO B Fotos Av. Valencia
ANEXO C Solicitud de permiso Bayona Country I
ANEXO D Error relativo

NDICE DE TABLAS

Pg.
Tabla 2.1 Caractersticas del agua superficial y subterrnea
23
Tabla 2.2 Parmetros utilizados para evaluar la contaminacin de agua
Subterrnea

28
Tabla 2.3 Extraccin en fase slida (SPE): Fuerza de elucin de los
Disolventes

48
Tabla 2.4 Componentes Orgnicos... 54
Tabla 2.5 Componentes relativos a la calidad organolptica del agua potable 54
Tabla 2.6 Frecuencia mnima para el anlisis de los parmetros relacionados
con las caractersticas organolpticas, fsicas y qumicas del agua
potable...

55
Tabla 3.1Instrumento utilizado para la toma de la muestra.. 63
Tabla 3.2 Caractersticas de los reactivos utilizados (solventes y patrones). 83
Tabla 3.3 Lmites permisibles establecidos por la Normas Sanitarias de
Calidad del Agua Potable

84
Tabla 4.1Condiciones experimentales optimizadas para el Sistema de
Screening de Muestras de compuestos aromticos.

94
Tabla 4.2 Figuras de mrito para el sistema de Screening de Muestras en la
determinacin de compuestos aromticos en aguas destinadas al
consumo humano

95
Tabla 4.3 Condiciones experimentales optimizadas para el equipo de
Cromatografa Lquida para la determinacin de compuestos
aromticos

98
Tabla 4.4 Figuras de mrito del equipo de Cromatografa Liquida para la
determinacin de benceno, tolueno y etilbenceno...

99
Tabla 4.5 Concentraciones de las muestras sintticas obtenidas en el sistema
de Screening de Muestras

100
Tabla 4.6 Concentracin de las muestras sintticas en el equipo de
Cromatografa Liquida con deteccin UV..

102
Tabla 4.7 Valores de benceno, tolueno y etilbenceno obtenidos en la
determinacin de compuestos aromticos en muestras de agua
destinadas al consumo humano

103
Tabla 4.8 Valores de las muestras obtenidos del equipo de Cromatografa
Lquida con deteccin UV....................

105
Tabla 4.9 Precios de los solventes utilizados en el sistema de Screening y de
Cromatografa Lquida con deteccin UV...

107

IX

Tabla 4.10 Costos establecidos para los materiales requeridos para la
preparacin de patrones para el sistema de Screening y de
Cromatografa Lquida con deteccin UV

107
Tabla 4.11 Costos de los materiales necesarios para la realizacin de la
extraccin preconcentracin de las muestras de benceno,
tolueno y etilbenceno

108
Tabla 4.12 Costos de los equipos utilizados para la aplicacin del sistema
de Screening de Muestras...

108
Tabla 4.13 Costo de los equipos utilizados para la aplicacin del sistema de
Cromatografa Lquida con deteccin UV...

109

X

NDICE DE FIGURAS

Pg.
Figura 2.1 Elementos de las rutas medio ambientales de exposicin... 19
Figura 2.2 Esquema de los tipos de acufero 26
Figura 2.3 Detalles de los rodillos de una bomba peristltica. 36
Figura 2.4 sistema de inyeccin de una muestra a baja presin.
37
Figura 2.5 Esquema del papel que desempea un sistema de Screening de
Muestras

39
Figura 2.6 Sistema de HPLC Waters, utilizado en el Laboratorio de
Cromatografa Lquida de Alta Presin.

40
Figura 2.7 Componentes bsicos de un sistema para HPLC. 42
Figura 2.8 Inyector modelo U6K de la Waters. Vista del equipo en posicin
para cargar la muestra...................................................................

44
Figura 2.9 Procedimiento de la Extraccin en Fase Slida (SPE).. 49
Figura 2.10 Instrumentacin bsica en UV Visible 50
Figura 2.11 Sistema ptico con lmpara de deuterio.... 52
Figura 3.1 Ubicacin del pozo surtidor de agua al Conjunto Residencial
Bayona Country I, el cual se encuentra detrs del Centro
Comercial Cristal en la zona de Naguanagua..

66
Figura 3.2 Partes del Sistema de filtracin modelo Kontes Ultra Ware
utilizado en el presente trabajo..

66
Figura 3.3Minicolumnas C
18
utilizados para la extraccin de los Compuestos
Aromticos (benceno, tolueno y etilbenceno)..

66
Figura 3.4 Diseo del sistema de extraccin y preconcentracin. 67
Figura 3.5 Envases para almacenar el extracto recuperado. 68
Figura 3.6 Vista y diagrama de partes de una Ultramicro celda de flujo 69
Figura 3.7 Bomba peristltica y vista de planta indicando los rodillos que
dan movimiento al flujo...

70
Figura 3.8 Vista de la ubicacin de la vlvula de inyeccin en el Sistema de
Screening diseado y vista de cerca de la vlvula de inyeccin.

71
Figura 3.9 Procedimiento de inyeccin de la muestra.. 71
Figura 3.10 Diagrama del detector UV donde se indica el lugar de
acoplamiento de la ultramicro celda y una vista de cerca..

72
Figura 3.11 Esquema del diseo del sistema de Screening UV-Visible. . 73
Figura 3.12 Vista frontal del sistema de bombeo y sealizacin de sus
componentes..

75
Figura 3.13 Vista frontal del sistema inyector sealando sus partes 75

XI
Figura 3.14 Vista de la columna de separacin cromatogrfica... 76
Figura 3.15 Vista y diagrama del detector indicando sus dimensiones. .. 77
Figura 3.16 Vista del registrador en el sistema de cromatografa lquida. 77
Figura 3.17 Esquema del sistema de cromatografa lquida con deteccin
UV

78
Figura 3.18 Sistema de filtracin y vista del proceso de colocacin de
la membrana de filtracin

80
Figura 4.1 Matriz de seleccin de muestreo aleatorio...... 88
Figura 4.2 Distribucin porcentual de los resultados arrojados por la hoja de
protocolo para la toma de muestra en relacin a la apariencia del
agua

89
Figura 4.3 Fuente de dixido de carbono y la solucin de sustancias que
causan dureza.

90
Figura 4.4 Espectro de absorcin obtenido para la mezcla de compuestos
aromticos (benceno, tolueno y etilbenceno)....

93
Figura 4.5 Condiciones cromatogrficas.. 96

XII
ICaptulo I Aleyda L. Montanez Palencia


Tutor(a): Dra. Lisbeth Manganiello de Vega
Valencia, 2008
RESUMEN
La evaluacin de la calidad del agua destinada al consumo humano es relevante
porque permite detectar los compuestos aromticos que se encuentran dentro de los
lmites permisibles, segn la Norma Sanitaria de Calidad de Agua Potable en Gaceta
Oficial Venezolana. Esta necesidad de monitorear estos compuestos con efectos
toxicolgicos sobre la poblacin, requiere del diseo de mtodos de anlisis rpidos,
seguros, confiables y sensibles, del cual se pueda obtener una respuesta Si/No, que
permita la toma de decisiones ante una situacin determinada. Ante esto, se dise un
sistema de Screening de muestras para la determinacin de hidrocarburos aromticos
totales. A fin de ampliar la informacin analtica una vez obtenida una respuesta
afirmativa, se optimiz un sistema de Cromatografa Lquida con deteccin UV
(ultravioleta), el cual identifica y cuantifica en las diferentes muestras de agua, las
especies de benceno, tolueno y etilbenceno. Se estudi el agua del pozo de
abastecimiento (zona sensible al riesgo de contaminacin) que surte al conjunto
residencial Bayona Country I en el sector Tazajal del Municipio Naguanagua del
Estado Carabobo. Se seleccionaron 52 muestras de agua de consumo humano
mediante un diseo estadstico previo, las cuales fueron sometidas a un tratamiento de
extraccin - preconcentracin y analizadas mediante el sistema de Screening de
muestras. De la totalidad de las muestras slo 5 requirieron ser analizadas por el
sistema de Cromatografa lquida con deteccin UV, obtenindose como resultado
concentraciones de las especies tolueno y etilbenceno por debajo del lmite
permisible. El sistema de Screening es 75% ms econmico que el sistema de
Cromatografa Liquida de acuerdo con el estudio de estimacin de costos. Ambos
juegan un rol importante en los laboratorios de anlisis de agua ya que el primero
permite reducir costos, tiempo y gasto de solventes y el segundo permite ampliar la
informacin de la presencia y concentracin de las diferentes especies aromticas a
fin de determinar el grado de toxicidad del sistema.

Palabras Clave: Agua para consumo humano, compuestos aromticos, sistema de
Screening de muestras, sistema Cromatografa Lquida con deteccin UV.

XIII

60
INTRODUCCIN

El agua es esencial para la vida, por esta razn se debe insistir en la relacin
agua y salud, donde la disponibilidad y la calidad del agua determinan el grado de
salud e higiene de cualquier sociedad. El agua y la salud son dos aliados estratgicos
que contribuyen al sostenimiento y a la calidad de la vida. (Probea, 2005). Asimismo,
el agua se considera un vehculo para la transmisin de enfermedades, ya que desde
hace muchos aos el anlisis de sta ha permitido juzgar su calidad sanitaria (Urso,
2005).
En muchos lugares tanto el agua de superficie como la subterrnea estn
contaminadas con desechos industriales, agrcolas y municipales. De acuerdo con la
Comisin Mundial sobre el Agua para el siglo XXI, ms de la mitad de los ros
principales del mundo estn tan agotados que ponen en peligro la salud humana y
envenenan los ecosistemas circundantes. En pases en desarrollo las fuentes de agua
potable estn contaminadas. Slo la mitad de los 550 millones de habitantes del Asia
sur oriental tienen acceso al agua potable (Infoforhealth, 2005).
Se considera al agua como el recurso que define los lmites del desarrollo
sostenible. No hay sustituto para el agua y el equilibrio entre las demandas de la
humanidad y la cantidad disponible ya es precaria (Rodrguez R, 2005). Cada uno de
los seis mil millones de habitantes de la Tierra debe consumir unos 4 litros de agua al
da. No obstante, ms de 2 mil millones de personas no tienen hoy acceso al agua
potable (Urso, 2005).
Por otra parte, en todo el mundo 2.300 millones de personas padecen
enfermedades relacionadas con el agua, las cuales se deben a la contaminacin por
desechos humanos, animales o qumicos (Infoforhealth, 2005). Los hidrocarburos
aromticos (BTEX) benceno, tolueno, etilbenceno, meta y orto xileno son

61
contaminantes prioritarios, dado que su presencia en el ambiente es de carcter
antropognico por lo que se requiere su monitoreo continuo en las diferentes matrices
ambientales para determinar niveles en el ambiente. Para ello, se debe contar con
mtodos analticos rpidos y sensibles que permitan analizar un gran nmero de
muestras por da en el laboratorio y al mismo tiempo realizar la extraccin de las
muestras en los laboratorios mviles (Fara R, 2005).
Atendiendo a lo planteado anteriormente, esta investigacin tiene por
finalidad determinar compuestos aromticos presentes en aguas destinadas al
consumo humano en el sector Tazajal del Municipio Naguanagua Estado Carabobo.
El cuerpo del trabajo se ha organizado en captulos: En el primero se hace referencia
al planteamiento y formulacin del problema, la justificacin de la investigacin y los
objetivos correspondientes; en el segundo se desarrolla el marco terico, donde se
exponen los antecedentes y las bases tericas de los sistemas de anlisis
desarrollados, el tercero abarca el marco metodolgico; el cuarto incluye la discusin
de resultados y las justificaciones de los mtodos aplicados para la resolucin de los
objetivos y el quinto hace referencia a las conclusiones y recomendaciones.
Finalmente la bibliografa consultada.


62

CAPTULO I
EL PROBLEMA

El presente captulo hace referencia a la situacin problemtica los objetivos y
la justificacin de la investigacin.
1.1 PLANTEAMIENTO Y FORMULACIN DEL PROBLEMA.
El agua es una fuente de vida, constituye un 70% de nuestro peso corporal. Se
requiere de agua para respirar, para desintoxicar el cuerpo y mantener constante su
temperatura, por ello, aunque el ser humano puede vivir por ms de dos semanas sin
comer, puede sobrevivir solamente tres o cuatro das sin tomar agua, lo que
manifiesta la importancia de este preciado lquido. No obstante el agua puede llegar a
contener grandes cantidades de sales disueltas, slidos en suspensin, metales
pesados; tambin puede ocurrir que los sistemas de alcantarillado, que transportan
aguas servidas sin tratamiento a los ros, lagos y mares, den lugar a la proliferacin de
microorganismos que causan enfermedades como el clera, la tifoidea y la hepatitis,
adquiridas principalmente por beber agua contaminada o por consumir frutas o
verduras regadas con estas aguas (Probea, 2005).
Las industrias son agentes responsables de estos hechos, las cuales necesitan
grandes cantidades de agua limpia en sus procesos de produccin, trayendo como
consecuencia que al usar el agua para lavar sus productos en la fabricacin, acarrean
sustancias txicas como cidos, metales pesados, sales y restos de materiales en
descomposicin. El agua es transportada por tuberas a los ros, lagos o mares, como
un lquido contaminado, siendo los afectados directos la flora y la fauna acutica,
sobretodo los peces ms pequeos. Los peces grandes son ms resistentes a los
compuestos txicos que llegan al agua y, en vez de morir, los acumulan en sus
cuerpos.

63
Una fuente de agua no apta para el consumo de la poblacin lo constituye el
agua de uso domstico no tratada, las cual es utilizada diariamente en las casas y al
ser desechadas por el alcantarillado son transportadas hasta un curso de agua, ya sea
un ro, un lago o el mar. Estas aguas una vez que llegan a los ros, muchas veces son
utilizadas por agricultores para regar los sembrados lo cual contamina a los
diferentes cultivos. Para evitar esto, algunas empresas de agua potable instalan
plantas de tratamiento de aguas servidas, haciendo pasar las aguas por unas piscinas
de gran tamao donde las filtran y las purifican para que puedan ser usadas sin
riesgos para el riego de los campos, generndose un ahorro de recursos. (Hopkins,
2000).
Segn la Population Information Program (2000), las enfermedades
transmitidas por el agua causan 12 millones de muertes por ao, 5 millones de ellas
por enfermedades diarricas. En su mayora, las vctimas son nios de pases en vas
de desarrollo. En este sentido, segn datos de la Organizacin Internacional para las
Naciones Unidas (2005), 1.200 millones de personas no poseen agua potable y 2.400
millones carecen de alcantarillados e infraestructuras para el tratamiento del agua.
Esas carencias provocan la muerte diaria de 6.000 nios, que fallecen por
enfermedades relacionadas con el consumo de agua sin los requisitos mnimos de
salubridad. Adems, se estima que un 80% de todas las enfermedades que se registran
en pases subdesarrollados son provocadas por esa ausencia de agua potable.
En esta perspectiva, la Subsecretaria de la ONU, Louise Frechette (2002)
establece:
La amenaza para la salud, la seguridad alimentaria y el medioambiente,
para la estabilidad en s misma es clara. Si dejamos que todo siga igual,
en slo dos o tres dcadas dos tercios de la poblacin mundial vivir una
moder ada o gr ave escasez de agua Di sponi bl e en:
http://www.consumer.es/web/es/solidaridad/2002/12/13/55215.

64
Es del conocimiento de todos que el agua potable es indispensable para la vida del hombre, pero en la medida que la
poblacin va en aumento sta escasea, a la vez que es desperdiciada por personas ignorantes y carentes de responsabilidad y
solidaridad humana. En este sentido y consciente de lo crucial que resulta este vital lquido, es importante considerar la
contaminacin de las fuentes de agua potable (en todas sus formas), ya sea agua corriente, agua embotellada, ros, lagos, arroyos,
lagunas, reservorios, manantiales y pozos (tomando en cuenta que la lluvia fluye a travs del suelo y disuelve los minerales
presentes y en algunos casos, materiales radiactivos). Otro factor que influye en la contaminacin de las aguas lo constituye la
lluvia cida, que llega a los suelos agrietndolos y depositando compuestos orgnicos e inorgnicos a las aguas subterrneas y
como stos no pueden ser degradados o destruidos, traen como resultado que en cierto grado se incorporen al cuerpo humano,
por va alimenticia, por el agua potable y el aire (Probea, 2005)
Los agentes contaminantes que se pueden encontrar en el agua de las fuentes
de abastecimiento son: microbianos, pesticidas, herbicidas, compuestos radiactivos,
qumicos inorgnicos y orgnicos. Siendo el estudio de los compuestos orgnicos
presentes en agua destinada a consumo humano de gran inters, ya que muchos de
stos han sido detectados en aguas superficiales y subterrneas, donde la mayor parte
de contaminacin de acuferos es provocada por prdidas en depsitos subterrneos
de combustibles o solventes, prcticas agrcolas y disposicin de residuos txicos sin
las debidas normas de seguridad, no obstante, la causa ms probable de
contaminacin de aguas superficiales y subterrneas nunca ha sido firmemente
establecida. sta puede deberse a disposicin de residuos domsticos e industriales o
descargas ilegales (Lpez, 2000).
En este orden de ideas, los pozos de abastecimiento de agua, se caracterizan
por la capacidad filtrante que tienen las partculas del suelo para eliminar los agentes
patgenos y otras sustancias indeseables, es por ello que los municipios lo consideran
a la hora de realizar proyectos de urbanismo; dado que requieren menos gastos por
procesos de purificacin o instalacin de costosas tuberas, para llevar las aguas
subterrneas al nivel de agua potable. Sin embargo, aunque las aguas subterrneas no
son tan susceptibles a la contaminacin como las de superficie, stas una vez
contaminadas implican de ser posible una restauracin difcil y de largo plazo (Glynn,
2000).
En este sentido, la presente investigacin pretende detectar la presencia de
hidrocarburos aromticos en muestras de agua para consumo humano, en el sector
Tazajal del Municipio Naguanagua Estado Carabobo, dado que a lo largo de la

65
Avenida Valencia de Naguanagua se encuentran funcionando una serie de talleres
mecnicos, los cuales arrojan residuos de solventes industriales, cuya evacuacin
casual, fugas o derrames, puede ser una amenaza creciente para la salud de los
pobladores. Adems es importante mencionar que los pozos una vez que se
encuentran en funcionamiento no reciben un mantenimiento adecuado. Por ello es
necesario hacer el anlisis correspondiente por considerarse sensible a posible
percolacin de los contaminantes antes mencionados.
Los hidrocarburos aromticos como el benceno, tolueno y etilbenceno generan
una serie de riesgos a la salud; Por ejemplo la principal fuente de benceno en el
ambiente son los procesos industriales a travs de los desechos, la fuga de gasolina
desde tanques subterrneos o desde vertederos o sitios de desechos peligrosos que lo
contienen, pudiendo contaminar el agua de manantiales y/o agua subterrnea. El agua
de grifo contaminada con benceno, puede exponer al ser humano al beberla o ingerir
alimentos preparados con sta. Tambin puede ocurrir exposicin al inhalar benceno,
al ducharse o al cocinar con esta agua (Geosalud, 2000). ste compuesto puede
solubilizarse en agua y pasar a travs del suelo hacia el agua subterrnea (Geosalud,
2000). El benceno es un disolvente muy utilizado en la industria y se considera un
poderoso cancergeno (Saade L.2005)
El tolueno entra al medio ambiente al manipular materiales que lo contienen,
tambin puede entrar al agua superficial y al agua subterrnea por derrames de
solventes y productos de petrleo, como tambin por escapes de tanques subterrneos
en gasolineras. De igual forma, los productos que contienen tolueno se desechan en
vertederos o en sitios para residuos, afectando al suelo o al agua cerca del sitio, de
esta forma las personas se ven expuestas cuando respiran aire contaminado en el rea
de trabajo, inhalando el escape de automviles, trabajando con gasolina, kerosn,
aceite para calefaccin, pinturas, lacas, o tomando agua de pozo contaminada,
pudiendo afectar al sistema nervioso. (ATSDR, 2001)

66
El etilbenceno, se encuentra en productos naturales como el carbn y petrleo,
as como tambin en productos de manufactura como tinturas, insecticidas y pinturas,
ste puede ser liberado al agua por desages industriales o por escapes de tanques de
almacenaje subterrneos (ATSDR, 1999). Se biodegrada con rapidez en el medio
ambiente en condiciones aerobias. En estudios realizados en acuferos contaminados
con gasolina se ha observado la biodegradacin total del etilbenceno en un plazo de
10 -16 das, en medio aerobio. Su movilidad en suelos es moderada, ya que tiende a
adsorberse a la fraccin slida de suelos y sedimentos. La hidrlisis no constituye una
va de transformacin ambiental importante para este compuesto Se encuentra
clasificado en el grupo de compuestos con tendencia a ser posibles cancerigenos
(Moreno, 2003).
Por lo tanto se considera fundamental el uso de tcnicas instrumentales de
ltima generacin que permitan la determinacin de especies orgnicas presentes en
al agua, de manera de evaluar el cumplimiento de las normas sanitarias en agua
potable. Un ejemplo de ello lo constituye la Cromatografa de Lquidos (HPLC), una
de las tcnicas analticas de separacin e identificacin con mayor campo de
aplicacin en los laboratorios de hoy. En la actualidad los instrumentos
cromatogrficos se usan ampliamente en la Ingeniera Ambiental y en el rea de las
ciencias, permitiendo mediciones cuantitativas rpidas de los qumicos presentes en
mezclas complejas, cuyas concentraciones son reportadas en ppm (mg/L) y/o ppb
(g/L). La versatilidad y sensibilidad del equipo de Cromatografa Lquida (HPLC)
es uno de los factores ms importantes que hacen posible que la profesin de la
Ingeniera Ambiental, pueda controlar la multitud de amenazas qumicas creadas por
el crecimiento continuo de la industrializacin.
Ante la situacin planteada surge la siguiente interrogante: Cul ser la
concentracin de compuestos aromticos presentes en el agua potable del sector
Tazajal del Municipio Naguanagua Estado Carabobo?

67
1.2 OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN
1.2.1 OBJETIVO GENERAL
Determinar compuestos aromticos en agua potable mediante Screening de
muestras y Cromatografa Lquida con deteccin UV (ultravioleta) en una poblacin
determinada del sector Tazajal del Municipio Naguanagua Estado Carabobo.
1.2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS
1.2.2.1 Disear un plan de muestreo en la zona de recoleccin, para el agua
potable.
1.2.2.2 Disear el mtodo de Screening de muestras para la determinacin del
contenido de benceno, tolueno y etilbenceno en agua potable
1.2.2.3 Disear el mtodo de Cromatografa Lquida con deteccin UV para la
determinacin de benceno, tolueno y etilbenceno.
1.2.2.4 Determinar las concentraciones de benceno, tolueno y etilbenceno en
muestras sintticas y muestras reales.
1.2.2.5 Comparar los resultados obtenidos de las muestras estudiadas con los
lmites que establece la Gaceta Oficial de la Republica Bolivariana de
Venezuela, Nmero 36.395.
1.2.2.6 Estimar los costos asociados al desarrollo del sistema de Screening y la
tcnica de Cromatografa Liquida con deteccin UV.
1.2.2.7 Proponer la aplicacin del sistema de Screening y el Sistema de
Cromatografa Liquida con deteccin UV ante los organismos que se encargan
del control de calidad de agua potable.


68
1.3 JUSTIFICACIN DE LA INVESTIGACIN
Siendo el agua una fuente sensible a la contaminacin y principal vehculo
responsable de la transmisin de enfermedades, es relevante su estudio. Por ello los
proyectos ambientales, estn recibiendo una creciente atencin como resultado de la
concientizacin del pblico y de la preocupacin y presin de los gobiernos en
relacin a las enfermedades causadas por la contaminacin del agua. Asimismo, es
importante prestar atencin al sector industrial, ya que es el origen de la presencia de
compuestos aromticos, en agua para consumo humano.
En esta visin, como una medida para establecer un mayor grado de seguridad
y confiabilidad a los anlisis de compuestos orgnicos e inorgnicos presentes en
agua potable, se cuenta con los sistemas de HPLC utilizado actualmente en una
amplia variedad de campos. Entre las caractersticas de estos sistemas sobresale:
sensibilidad, fcil adaptacin a las determinaciones cuantitativas exactas, idoneidad
para la separacin de especies no voltiles y sobre todo su gran aplicabilidad a
sustancias que son de primordial inters en la industria, en muchos campos de la
ciencia y para la sociedad en general. Adems dicho mtodo tiene como finalidad
obtener una ptima proteccin ambiental, al mismo tiempo de continuar un desarrollo
sostenido en pro de la conservacin de los cuerpos de agua para consumo humano
(Blanco, 2001). Otro mtodo a utilizar lo constituye el sistema Screening, sistema de
automatizacin de respuesta rpida que permite la reduccin de errores debidos a la
participacin humana, caracterizado por presentar un mayor nfasis cualitativo que
cuantitativo con un tratamiento de la muestra nulo o simple (Valcrcel. 2000).
Finalmente, este estudio pretende ofrecer el desarrollo de dos metodologas
capaces de determinar compuestos de alta toxicidad como son los hidrocarburos
aromticos, a fin de contribuir en la evaluacin de la calidad de las aguas destinadas a
consumo humano y por ende a la toma de medidas de prevencin y tratamiento por
parte de los entes gubernamentales para la consecucin de alternativas de solucin
ante esta problemtica.

69

CAPTULO II

MARCO TERICO

El propsito esencial del marco terico es resaltar los aspectos bibliogrficos
pertinentes al tema en estudio, teoras, postulados, fuentes de tipo legal, as como
tambin los estudios precedentes los cuales, sustentan la investigacin.
2.1 ANTECEDENTES
En lo concerniente a los antecedentes, se han recopilado algunas
investigaciones, que por su importancia y relacin con este estudio, han servido de
base para el desarrollo del mismo.
Energy (2007), en su publicacin sobre el tolueno establece que ste es una
amenaza para el agua. Por su volatilidad escapa parcialmente a la atmsfera, pero su
solubilidad en agua es suficiente para provocar problemas de contaminacin en los
cuerpos de agua superficiales y subterrneos. Experimentos de laboratorio han
demostrado que el tolueno permanece un tiempo medio de 5 horas en un cuerpo de
agua uniformemente mezclado, de 1 metro de profundidad, antes de escapar a la
atmsfera.
El Consejo Superior de Investigaciones Cientficas Espaol (2006), realiz un
estudio ambiental y sanitario de la Ra de Huelva, como una accin especial a la
Comisin Interministerial de Ciencia y Tecnologa (CICYT), concluyendo que el
Comit Local del Medio Ambiente preocupado por la calidad del agua potable ha
analizado las concentraciones de hidrocarburos aromticos policclicos,
organoclorados y bifenilos policlorados, as como la de metales pesados y metaloides
en agua potable tomada en domicilios de Huelva y Lepe. Muchos de los compuestos

70
analizados se encuentran a niveles indetectables y otros cuando se detectan, estn
presentes a niveles por debajo de los lmites mximos permitidos por la legislacin
vigente, excepto en una muestra de agua tomada en la zona de Gran Va en Huelva en
la que el nivel de zinc (120 ppm) super ligeramente el valor lmite de 100 ppm.
Chavarras M. (2006), en su artculo plantea que la agencia estadounidense no
tena a finales de 2005, ninguna regulacin que estableciera lmites sobre el contenido
seguro de benceno en bebidas, exceptuando el caso del agua embotellada, para la que
se utiliza el nivel mximo establecido por la Agencia de Proteccin del Medio
Ambiente de EEUU (EPA) en 5 partes de benceno por milln de partes de aire (ppb),
como estndar de calidad. Desde la confirmacin de la alerta en EEUU, y hasta abril
de 2006, la Administracin de Drogas y Alimentos (FDA) ha realizado anlisis en
muestras de bebidas recogidas en establecimientos de Maryland, Virginia y
Michigan. Slo cuatro de las muestras analizadas contenan niveles de benceno
superiores a los considerados seguros. A su vez, plantea que el problema de la
presencia de bencenos en bebidas se identific por primera vez en 1990, y ahora
algunos expertos estadounidenses denuncian que todava no se ha hecho nada, para
solucionar el problema o, al menos, para establecer contenidos mximos seguros en
todas las bebidas. Lo que s se ha podido determinar hasta ahora son los factores que
contribuyen a la formacin de benceno. Segn recientes investigaciones, la
temperatura y la luz elevadas estimulan la formacin de la sustancia en presencia de
sales del benzoato y del cido ascrbico (vitamina C), que suelen aadirse a las
bebidas para inhibir el crecimiento de bacterias. Las sales de benzoato estn tambin
presentes de forma natural en frutas y sus zumos como el arndano. La FDA tiene
previsto continuar recogiendo muestras y trabajar con la industria para entender mejor
cmo actan las fuentes que propician la formacin de benceno en bebidas.
Los sntomas se traducen en vmitos, irritacin del estmago, mareo,
somnolencia o convulsiones, entre otros. Coincidiendo con la Agencia Internacional

71
para la Investigacin del Cncer, el Departamento de Salud y Servicios Humanos de
EEUU (DHHS) determinan que el benceno es un carcingeno reconocido. No se
conocen an los efectos del consumo de alimentos o lquidos con bajos niveles de
benceno. En humanos, y tal y como reconoce la EPA, an no se conocen los efectos
que podra causar la exposicin prolongada a alimentos o agua contaminada con
benceno.
La Biotecnologa y Desarrollo Sostenible (2005), establece que la variabilidad
qumica presente en aguas para consumo humano, es producto de las prcticas
humanas. La afectacin del ecosistema al cual el hombre pertenece, no depende del
desarrollo de la sociedad, sino de las actividades que se realicen en el rea y las
precauciones que se tomen para no afectar al medio ambiente.
Saade L. (2005), en su investigacin plantea que despus de la explosin de la
fbrica petroqumica de Jilin de la compaa (pblica) China National Petroleum
Corporation, se observ que varias sustancias que contenan benceno cayeron al ro
Songhua y contaminaron el agua, el nivel de benceno era 108 veces mayor que los
niveles de seguridad nacional. El benceno es un disolvente muy utilizado en la
industria y se considera un poderoso cancergeno.
Club Ecolgico en Ashgabat Turkmenistn en Asia (2004), tiene como
objetivo aumentar la calidad del agua potable en pro de mejorar la salud de la
poblacin y prevenir epidemias. Las aguas de drenaje y residuales estn
contaminadas con productos txicos (pesticidas, fenoles, estroncio), metales pesados
(cobre, zinc, plomo, entre otros) y otros residuos industriales. En base a esto, plantean
adoptar como medida la creacin de instalaciones para la depuracin de sustancias
qumicas de las aguas potable, de lluvia y las residuales, as como hacer uso de
materiales absorbentes modificados obtenidos a partir de materiales locales para
purificar el agua tanto de pesticidas (hexaclorociclohexano (HCH), Dicloro-difenil-

72
tricloroetano (DDT), diclorodifenildicloroetileno (DDE), tipo Metafos, carbofosfatos,
tipo Rogor, hHvings) como de fenoles, istopos radiactivos (Na-24, Ar-41, Zn-95,
Ru-106, Mo-99), residuos orgnicos y metales pesados (cobre, zinc, cadmio, entre
otros). De igual forma se estableci para el suministro de agua potable un dispositivo
para purificar agua denominado Cheshme. Dado que el estado no es capaz de
abastecer con agua potable de calidad a toda la poblacin este dispositivo constituye
una alternativa econmica, apenas cuesta seis dlares. Comprando este dispositivo los
habitantes se ayudan a s mismos y al estado.
Economy J. (2003), afirma que el mundo se enfrenta a una severa crisis del
agua, numerosos informes advierten que en una dcada o dos, el agua y no la comida
o el petrleo, ser la ms seria carencia a la que el mundo deber enfrentarse.
Economy es director del Centro para la Purificacin Avanzada de Agua, cuyo
objetivo en sus investigaciones es el uso de la fibra de carbn para desarrollar
membranas altamente selectivas que filtren contaminantes orgnicos especficos, tales
como pesticidas, pero tambin metales como plomo, arsnico o mercurio.
Pino E. (2001), concluy que la determinacin de hidrocarburos aromticos
policclicos (HAPs), agentes cancergenos potenciales y de indudable relevancia en la
contaminacin del medio marino, es sin duda una etapa clave en los controles de
contaminacin medioambiental. La investigacin se desglosa en tres apartados. En
primer lugar se estableci las metodologas para la extraccin de HAPs contenidos en
sedimentos marinos utilizando las tcnicas de extraccin asistida por microondas
(EAM) y por ultrasonidos (EAU), haciendo uso de polioxietilen-10-lauril ter
(POLE) como medio micelar. La determinacin analtica de estos contaminantes se
realiz por cromatografa lquida de alta resolucin, (HPLC) La optimizacin del
proceso se realiz por medio del diseo experimental. Tras la optimizacin, se aplic
la metodologa a extractos de HAPs de sedimentos tras EAM o EAU, obtenindose
altas recuperaciones e incrementos significativos en los lmites de deteccin.

73
Asimismo, se ensay el proceso para determinar hidrocarburos en agua de mar
(donde las concentraciones de estos compuestos son muy bajas, lo que acarrea
problemas para su determinacin si se utilizan tcnicas convencionales). La ausencia
de un material de referencia de agua de mar contaminado con hidrocarburos, oblig a
validar la metodologa por comparacin de los resultados con los obtenidos con
tcnicas convencionales, con resultados igualmente satisfactorios. Esta tesis se
engloba dentro del desarrollo de procesos ms eficaces en el tratamiento de muestras,
etapa absolutamente crtica en Qumica Analtica, y que precisa de mejoras para
igualarse en precisin a los sistemas de deteccin.
La Agencia para las Sustancias Txicas y el Registro de Enfermedades
(ATSDR). (2001), establece que la exposicin al benceno a travs de alimentos,
bebidas o agua es menor que la exposicin a travs del aire. El agua potable contiene
tpicamente menos de 0.1 ppb de benceno. Se ha detectado benceno en algunos
alimentos, bebidas alcohlicas y agua embotellada. La gente con agua de grifo
contaminada con benceno puede exponerse al beber el agua o ingerir alimentos
preparados con el agua contaminada.
Sawyer C. (2000), plantea que los contaminantes orgnicos e inorgnicos en
trazas en los abastecimientos pblicos de agua relacionados con la salud pblica, han
sido objeto de especial inters durante casi un siglo. Los contaminantes en trazas se
definen arbitrariamente como aquellos cuyos estndares para el agua potable son
generalmente 1 mg/L, o menos. Su estudio se ha justificado a travs del tiempo
debido: 1) al surgimiento de enfermedades, como la de Itai-Itai, ocurrida en Japn,
asociada al consumo de agua del ro Jinsut, con contenido de cadmio; 2) el
descubrimiento del mercurio metlico que escapaba de los laboratorios y las
industrias, especialmente de la manufactura del cloro, poda convertirse en mercurio
metlico, concentrarse en la vida acutica y pasar a travs de las cadenas alimenticias
a los humanos, especialmente por el consumo de pescado; 3) la evidencia presentada,

74
que ciertos compuestos orgnicos e inorgnicos pueden ser cancerigenos; 4) la
conciencia de que el reciclaje intenso de las aguas residuales es inminente para
complementar los abastecimientos de agua potable. De igual forma establece, que las
mayora de los compuestos orgnicos en trazas regulados para el agua potable son
compuestos orgnicos antropognicos.
El Programa de Informacin de Salud Popular (1998), report que la filtracin
de contaminantes txicos en los depsitos de agua subterrnea o superficial utilizada
para beber o para uso domstico tambin causa problemas de salud en los pases
industrializados. En Europa y Rusia la contaminacin del agua pone en riesgo la
salud de unos 500 millones de personas. En el norte de Rusia, medio milln de
personas de la pennsula Kola beben agua contaminada con metales pesados, prctica
que ayuda a explicar las altas tasas de mortalidad infantil y las enfermedades
diarreicas e intestinales all notificadas.
Valcrcel (1996) establece que el enfoque iterativo al flujo inverso fue usado
para la extraccin liquido/ liquido de hidrocarburos en muestras de agua. El propsito
ofreci diversas posibilidades de estudiar los procesos de extraccin continua
pudindose obtener analticamente informacin til a partir de mediciones simples.
Los hidrocarburos aromticos fueron separados efectivamente en funcin de los
componentes ms polares y quince compuestos diferentes fueron agrupados de
acuerdo de acuerdo a sus propiedades de extraccin. Las muestras sintticas simples
fueron clasificadas usando la efectividad de la extraccin en diferentes longitudes de
onda en el rango ultravioleta. Tambin fueron analizadas muestras de agua natural
aportando resultados satisfactorios.

75
2.2 BASES TERICAS
En esta seccin se plantean los fundamentos tericos en los que se apoya la
presente investigacin.
2.2.1 Transporte, distribucin y transformacin de contaminantes
Los agentes qumicos se desplazan en el medio ambiente a partir de la fuente
de contaminacin, transportados en fluidos como el agua y el aire, se distribuyen en
las fases slida, liquida y gaseosa, experimentando transformaciones qumicas y
biolgicas. La Figura 2.1 muestra un esquema de cmo son transportados los
diferentes contaminantes y las rutas ambientales de exposicin.

Figura 2.1 Elementos de las rutas medio ambientales de exposicin. Glynn (2000).
En el agua subterrnea; el mecanismo de transporte depende de la
conductividad del medio; en medios con alta conductividad predomina la adveccin
(proceso de transporte causado por el movimiento en masa de un fluido), mientras
que en medios con baja conductividad, como arcillas, los mecanismos de transporte
ms importantes son la dispersin o la difusin. En sistemas lquidos casi estticos,

76
como embalses estratificados, predominan los mecanismos de difusin, aunque la
dispersin tambin puede desempear un papel importante en el movimiento e
intercambio de materia segn el eje vertical.
A su vez, los procesos de transporte, distribucin y transformacin
medioambiental determinan cmo se modifica cualitativa y cuantitativamente el
contaminante desde su fuente y por tanto, cules son los niveles de exposicin
previsible en el punto de contacto con los receptores potenciales (Moreno, 2003).
2.2.2 Potabilidad del agua
El suministro de agua potable es un problema que ha ocupado al hombre desde la
antigedad. Ya en la Grecia clsica se construan acueductos y tuberas de presin
para asegurar el suministro local. En algunas zonas se construan y construyen
cisternas que recogen las aguas pluviales. Estos depsitos suelen ser subterrneos
para que el agua se mantenga fresca y a salvo de la luz del sol. En Europa se calcula
con un gasto medio por habitante entre 150 y 200 litros de agua potable al da aunque
se consumen como bebida tan slo entre 2 y 3 litros (Wikipedia, 2001).
Para que se pueda considerar el agua como potable y en consecuencia apta para el
consumo, sta debe cumplir con los siguientes requisitos:
Estar libre de agentes productores de enfermedades.
Libre de sustancias txicas.
La concentracin de minerales y materia orgnica dentro de los lmites
mximos permisibles que establecen los entes gubernamentales.
Las propiedades fsicas, tales como color, sabor, olor, turbidez deben estar
acorde con lo establecido en la legislacin.
Estos requisitos estn relacionados con el control de la calidad del agua. Este
proceso se inicia con la preparacin y supervisin de la hoya hidrogrfica de la fuente

77
de abastecimiento, continua en la planta de tratamiento y termina en el sistema de
distribucin:
Fuente de abastecimiento: Para conservar y mejorar la calidad natural del
agua, es imprescindible el saneamiento de la hoya, drenaje de cinegas, prevencin
de las erosin, preparacin del sitio de embase previo a su inundacin, control del
crecimiento de la vegetacin acutica, algas y regulacin de actividades
recreacionales.
Planta de tratamiento: Independientemente de la calidad del agua cruda, un
efluente de cualquier composicin puede obtenerse mediante mtodos de
tratamiento apropiados; por supuesto que las consideraciones de tipo econmico
son factores limitantes. Cualquier agua suministrada para consumo humano debe
ser desinfectada, independientemente de su calidad en estado natural o despus de
aplicrsele algn proceso de tratamiento.
Sistema de distribucin: Los conductos para direccionar el agua pueden ser
afectados por sta, causando cambios en la calidad del agua transportada. Est
dentro de la responsabilidad de los ingenieros el seleccionar materiales
apropiados a la calidad del agua que se transporta, as como efectuar ajustes en la
calidad del agua para hacerla apropiada a los materiales utilizados en los
conductos. La corrosin de metales y desintegracin del cemento y concreto
puede mantenerse dentro de lmites aceptables, ningn conducto debe ponerse en
servicio al instalarse o despus de una reparacin, sin antes desinfectarse. En el
mantenimiento del sistema de distribucin los factores de mayor importancia son:
el control y eliminacin de las conexiones cruzadas entre el sistema de
abastecimiento pblico, sistemas privados contaminados y la prevencin en la
plomera de las viviendas de flujo inverso o sifonaje de agua contaminada desde
la pieza sanitaria hacia la tubera de agua.

78
Criterios para la calidad del agua potable en los sistemas de distribucin: se
establece, que a la entrada del sistema de distribucin que cumpla con un
tratamiento de purificacin; no hay razn para tolerar la presencia de organismos
coliformes. Si estos se encuentran presentes en alguna ocasin, deber revisarse la
eficacia del proceso de purificacin. Mientras que el agua en el sistema de
distribucin, una vez que se halla en la red de distribucin puede contaminarse
por agentes externos ajenos al sistema de captacin, al almacenamiento o a los
sistemas de purificacin. (Guevara. 2002)
2.2.3 Fuentes de abastecimiento
El suministro de agua debe ser de calidad satisfactoria y cantidad adecuada,
fcilmente disponible, relativamente barata, de fcil recoleccin y dispuesta despus
de usada. El agua se suministra con los siguientes propsitos:
1. Bebida y preparacin de alimentos.
2. Bao y lavado.
3. Calefaccin y aire acondicionado.
4. Riego de los jardines.
5. Limpieza de calles.
6. Uso recreacional en piscinas.
7. Uso ornamental en fuentes.
8. Generacin de vapor.
9. Uso industrial diverso.
10. Proteccin de la vida y propiedades contra incendios.
11. Remocin mediante transporte hidrulico de residuos ofensivos y potencialmente
dainos provenientes de viviendas e industrias.
Las fuentes de abastecimientos pueden clasificarse en la siguiente forma:
1. Agua de lluvia:
2. Agua superficial

79
3. Agua subterrnea, estas pueden ser: manantiales naturales, pozos, galeras
filtrantes, pozos y galeras.
En la tabla 2.1 se presentan las caractersticas de las aguas superficiales y las
aguas subterrneas.
TABLA 2.1
Caractersticas del agua superficial y subterrnea.
A) Aspectos cuantitativos y de explotacin
Aguas superficiales Aguas subterrneas
Generalmente aportan nuevos caudales Generalmente slo disponen de caudales
relativamente bajos.
Caudales variables Poca variabilidad del caudal.
No siempre precisan bombeo Generalmente requieren bombeo
Generalmente la captacin debe hacerse
distante del sitio de consumo
Permite ms cercana al sitio de utilizacin
Costos de bombeos relativamente bajos Costos de bombeo ms altos
Fuente: (Arocha, 2002) B) Aspectos cualitativos
Parmetro Aguas superficiales Aguas subterrneas
Turbiedad Variable (baja o muy alta) Prcticamente ninguna
Color Variable Constante, bajo o ninguno
Temperatura Variable Constante
Mineralizacin Variable, generalmente muy alta Constante y dependiente del subsuelo
Dureza Generalmente baja Dependiente del suelo, generalmente
alta
Estabilizacin Variable, generalmente algo
corrosivas
Constante generalmente algo
incrustantes
Contaminacin
bacteriolgica
Variable, generalmente
contaminadas
Constante, generalmente poca o
ninguna
2.2.3.1 Agua subterrnea
El agua subterrnea es la mayor fuente de agua dulce existente. Conocindose,
como aquellas que se han filtrado desde la superficie de la tierra hacia abajo por los
poros del suelo (Glynn, 2000). Tambin se le conoce como aguas por debajo del nivel

80
fretico (Kiely, 2001). Las formaciones de suelo y roca que se han saturado de
lquido se conocen como depsitos de agua subterrnea o acuferos. Donde el agua
normalmente se extrae de estos depsitos por medio de pozos. La velocidad a la cual
el agua se mueve a travs del suelo para rellenar el pozo se ve influenciada por el
tamao de los poros del suelo, la viscosidad del agua, entre otros. Este flujo
(velocidad) puede variar desde 1 m/da hasta 1 m/ao. No obstante, un depsito de
aguas subterrneas slo puede soportar una rapidez de extraccin de la misma
magnitud que la del suministro que recibe de manera continua por filtracin. Una vez
que este flujo se excede, el nivel fretico comienza bajar, con lo cual los pozos
existentes se secan y se requiere una costosa perforacin para localizar nuevos pozos
(Glynn, 2000).
El agua subterrnea se puede extraer de: pozos de materiales granulares tales
como grava y arena, de cavernas y fisuras en rocas y de combinaciones de esas
formaciones. Los abastecimientos de agua subterrnea tienen una hoya parecida a las
fuentes superficiales con excepcin de que la recarga es por infiltracin a travs de
las aberturas del suelo. La mxima produccin de una fuente subterrnea es
directamente proporcional al tamao del rea de recarga y a la diferencia entre la
cantidad de lluvia y escorrenta superficial ms la perdida por transpiracin. Si la
superficie superior del agua subterrnea puede ascender o descender libremente con
los cambios estacinales en la recarga, el flujo es libre o no confinado y la superficie
de agua tiene pendiente aproximadamente igual a la superficie de la tierra. Si el
estrato de agua subterrnea se coloca por debajo de una capa material impermeable,
el flujo es confinado el agua ascender en un pozo que se perfore en esta zona. Los
manantiales de agua subterrnea afloran cuando la superficie de la tierra desciende
por debajo de la mesa de agua. Una obstruccin embalsa el agua subterrnea aguas
arriba obligndola a rebosar. Cuando una grieta en la capa impermeable superior
permite que el agua escape del confinamiento. En la construccin de embalses al

81
fundar las presas en la roca se almacena tanto el agua superficial como el agua
subterrnea utilizndose la capacidad total de la hoya.
Cuando se construye un pozo el nivel de agua desciende por el bombeo, con lo
cual el agua fluir hacia el pozo desde diferentes direcciones debido al gradiente
hidrulico que se establece. El desarrollo de manantiales para abastecimiento de agua
permite la captacin del flujo subterrneo pudindose incrementar el rendimiento
instalado tuberas colectoras o galeras en la formacin que alimenta el manantial. La
contaminacin del agua de manantial en el punto de captacin se previene por
exclusin de filtracin superficial mediante construccin de una cmara hermtica
que penetra en el acufero y mediante el desvo de la escorrenta superficial en la
vecindad del manantial. Los pozos son estructuras escavadas, clavadas o perforadas
dependiendo del tipo de formacin que debe atravesar y la profundidad a que debe
llegar. Las excavadas se usan en formaciones blandas (arena y grava) cuando se trate
de pozos de poca profundidad. Con excepcin de rocas duras, particularmente calizas,
sin cubierta de grava y arena, los pozos generalmente no son contaminados por
filtraciones laterales sino por contaminacin superficial que penetra por el sitio de
perforacin. Forros sanitarios hermticos que penetran el acufero y con una longitud
desde la superficie no menor a 3 metros, junto con desvo de las aguas superficiales y
proteccin contra inundacin garantizaran la calidad del agua extrada de fuentes
subterrneas puras.
El agua de los pozos, es por lo general de calidad uniforme y carece de
turbidez, sin embargo, puede requerir ablandamiento. Cabe decir, que la calidad de
estas aguas es difcil de vigilar cuando se estn utilizando un gran nmero de pozos,
siendo fundamental la construccin correcta de stos para impedir la contaminacin
del agua. Siendo la ubicacin de los tanques spticos en relacin con los pozos
crtica.

82
De igual forma se debe considerar que el agua de lluvia que escurre a travs
de terrenos de rellenos industriales y sanitarios disuelve sustancias que constituyen un
serio peligro para la calidad de las aguas subterrneas locales (Glynn, 2000). En este
sentido, un acufero se define como una formacin de roca portadora de agua que
contiene cantidades suficientes de sta para ser explotada y trada a la superficie
mediante pozos. El acufero puede ser confinado o no confinado (libre). (Kiely,
2001). Como se muestra en la Figura 2.2. El acufero superior es no confinado, es
decir, tiene una lnea de nivel fretico natural con libertad para subir o bajar. Mientras
que el acufero confinado esta restringido por un estrato superior impermeable, que
inhibe el movimiento del agua hacia arriba. Cuando se perforan una serie de pozos en
el acufero confinado, el agua se elevar y llegar a su propia lnea de nivel fretico
(Kiely, 2001).

Figura 2.2 Esquema de los tipos de acufero. (Kiely, 2001).


83
2.2.3.2 Consideraciones para la seleccin de un pozo como fuente de
abastecimiento de aguas destinadas al consumo humano.
Es importante tomar en cuenta los siguientes aspectos para seleccionar
un pozo como fuente de abastecimiento (Arocha, 2002):
Determinacin de la calidad del agua.
Evaluacin de un acufero de proteccin.
Evaluacin de riesgos de contaminacin de agua subterrnea.
Determinacin de la extensin y magnitud de la contaminacin subterrnea.
Qumica del agua subterrnea, la cual vara dependiendo de la naturaleza de los
subsuelos y las rocas a las que atraviesa. Si los lechos de roca caliza y los subsuelos
dominados por caliza son comunes el agua subterrnea con frecuencia es dura,
conteniendo altas concentraciones de calcio, magnesio, y bicarbonato, mientras que en
las zonas donde hay presencia de rocas volcnicas y arenisca, es normal un agua ms
blanda (Kiely, 2001).
2.2.3.3 Fuentes de contaminacin del agua subterrnea
Se suele considerar que el agua subterrnea es pura y segura para beber ya que
sufre un proceso de filtracin y limpieza a travs de la cubierta del subsuelo y lecho
rocoso que no tienen las aguas superficiales. Sin embargo, esto no garantiza la pureza
del agua subterrnea, pudiendo surgir problemas debido a las condiciones naturales
del terreno o a la contaminacin por las actividades humanas (Kiely, 2001).
Estas pueden ser contaminas tanto por una fuente puntual como por una fuente
difusa. En zonas rurales y granjas en donde hay pozos de extraccin de aguas, cabe la
posibilidad de que algunos lixiviados con contaminantes propios de la agricultura
puedan entrar en contacto con las aguas subterrneas. La propagacin de fertilizantes
y pesticidas usados en la tierra son un foco potencial de contaminacin difusa. Por el
contrario los accidentes producidos por derrames de aceite o las fugas en los propios

84
tanques de combustible son un foco potencial de contaminacin en un punto (Kiely,
2001).
En la tabla 2.2 se muestran algunos parmetros a considerar al momento de
realizar los anlisis en las aguas subterrneas.
Tabla 2.2
Parmetros utilizados para evaluar la contaminacin de agua
subterrnea
Parmetros recomendados
Apariencia
Sedimento
pH
conductividad elctrica (CE)
Dureza total
Coniformes generales
E.Coli
*
Calcio (Ca)
Magnesio(Mg)
Sodio (Na)*

Potasio (K)*
Cloruro (Cl)*
Sulfato (SO
4
)*

Nitrato (NO
3
)*
Amonaco (NH
3
)*
Hierro (Fe)*
Manganeso (Mn)
*
Parmetros opcionales
(dependiendo de las circunstancias locales y razones para el muestreo)
Fluoruro (F)
Ortofosfato
Nitrito (NO
2
)*
DBO*
Oxigeno disuelto*
cidos grasos*

Trazas de orgnicos*
COT*
Boro (B)*
Cadmio (Cd)
Cinc(Zn)
Cobre (Cu)
Plomo (Pb)
Otros metales.

* Buenos indicadores de contaminacin. Fuente: (Kiely, 2001).
Cabe mencionar, que existen contribuciones industriales a la contaminacin
del agua subterrnea, tal es el caso de los pesticidas, disolventes industriales, aceites
refinados, entre otros.
Al considerar los pesticidas. Merece la pena distinguir entre los que se usan
para aplicaciones agrcolas y no agrcolas, entre los focos de contaminacin puntuales
y difusos. Los usos no agrcolas se corresponden al control de hierbas en mrgenes de
carreteras, campos de juego, alrededores de viviendas, polgonos industriales y en
lneas de ferrocarril.

85
Existen ms de 32000 compuestos pesticidas diferentes en uso, conteniendo
unos 1800 ingredientes activos (Kiely, 2001).stos varan en su solubilidad,
persistencia, movilidad y toxicidad y en consecuencia en los riesgos que presentan
para el agua subterrnea.
En lo concerniente a los disolventes clorados, los suministros de aguas
subterrneas se enfrentan a una amenaza creciente de una amplia gama de productos
orgnicos sintticos, como resultado de su evacuacin casual, fugas o derrames. De
stos los disolventes clorados se usan con mayor frecuencia en la industria. Estos
disolventes se utilizan como desengrasante para varios procesos en la industria del
metal, textil, electrnica, qumica, papel y cuero. Tambin suelen estar presentes en el
lixiviado de vertederos. Los disolventes industriales se caracterizan por ser difciles
de muestrear debido a la volatizacin y los anlisis son costosos, resistentes a la
degradacin y por tanto son persistentes (Kiely, 2001).
Los aceites minerales refinados incluyen gasolina, combustible diesel, entre
otros, varan en viscosidad, pero tienen densidades menores que la del agua y una
composicin heterognea dominada por los hidrocarburos. Produciendo problemas de
gusto y olor en el agua subterrnea.
De igual forma la gasolina sin plomo utiliza un aditivo para aumentar los
octanos, llamado metil butil ter terciario (MTBE) forma en un 5 % de las mezclas
normales. Es diez veces ms soluble en agua que los dems componentes de la
gasolina, se disuelven y extiende rpidamente en el agua subterrnea. (Kiely, 2001).
El MTBE tiene la ventaja de ser un buen indicador de la contaminacin por gasolina,
debido a su solubilidad y a su bajo umbral de gusto (10 g/l) haciendo ms fcil y
rpida la identificacin de la contaminacin en agua subterrnea que otros
ingredientes ms txicos como benceno.

86
2.2.3.4 Vulnerabilidad del agua subterrnea
Otro aspecto importante a considerar es la vulnerabilidad, trmino utilizado
para representar las caractersticas geolgicas e hidrolgicas intrnsecas que
determinan la facilidad con la que el agua subterrnea puede contaminarse por la
actividad humana. Estas aguas dependen de la cantidad relativa de los contaminantes
presentes y de la capacidad de atenuacin de contaminantes de los materiales
geolgicos. Desde el punto de vista hidrulico estn conectadas a la superficie
terrestre, siendo la efectividad de esta conexin la que determina la vulnerabilidad
relativa a la contaminacin.
En general en el lecho rocoso se produce poca atenuacin de contaminantes
porque el flujo es casi todo a travs de fisuras. En consecuencia, el subsuelo: arenas,
gravas, depsito glaciares o arcillas glaciares, lodos, arcillas de lago, turba, son las
caractersticas naturales ms importantes que influyen sobre la vulnerabilidad de
aguas subterrneas y la prevencin de su contaminacin. El agua subterrnea presenta
un riesgo mayor a la contaminacin donde hay ausencia de subsuelos o estos son
poco profundos. A continuacin se plantea la influencia de los factores geolgicos e
hidrogeolgicos:
Influencia de los subsuelos. Lo suelos actan como una capa protectora sobre
el agua subterrnea tanto por medios fsicos como qumicos o bioqumicos, en los que
los sedimentos de grano fino del tipo de las arcillas como depsitos glaciares. Arcillas
lacustres y turbas tienen baja permeabilidad y en consecuencia actan como una
barrera o retencin al movimiento vertical de los contaminantes. En las zonas en que
se encuentran estos sedimentos, el agua superficial tiene ms riesgo que la
subterrnea ya que la mayora de los contaminantes no pueden emigrar haca abajo y
slo pueden moverse lateralmente. Si la permeabilidad es alta como para permitir
lentos movimientos intergranulares de los contaminantes, tal es el caso de los
depsitos arenosos o barros, donde los sedimentos pueden percolar hacia fuera y
absorber bacterias y virus, en contraste a los depsitos de alta permeabilidad en arena

87
y gravas permiten un fcil acceso de los contaminantes por los espacios porosos. En
general, mientras ms contenido en arcilla y menor permeabilidad mayor proteccin
del agua subterrnea de la contaminacin.
Influencia del tipo del permeabilidad. La permeabilidad, es una medida de la
capacidad de una roca para transmitir agua y puede subdividirse en dos tipos.
Primero, donde el agua se mueve entre los granos del subsuelo como en arenas y
gravas, se llama permeabilidad primaria o intergranular. Segundo, donde el agua se
mueve por fisuras o uniones y a lo largo de planos de estratificacin, se le conoce
como permeabilidad secundaria o de fisuras.
El flujo intergranular es ms lento que el flujo por fisuras en rocas para la
mayora de los casos, los tamaos de huecos o poros suelen ser menores y los
caminos de flujo suelen ser ms irregulares. Adems, la cantidad de agua almacenada
en rocas granulares suele ser mayor que la de rocas fisuradas. En contraste con las
rocas en las que predomina el flujo por fisuras, el flujo lento en rocas con
permeabilidad intergranular retrasa la entrada de contaminantes al agua subterrnea.
De igual forma, los tamaos relativamente pequeos de poro permiten la filtracin y
absorcin de bacterias y virus.
El recorrido irregular dentro de una matriz porosa da lugar a dispersin
hidrodinmica que reduce la concentracin de contaminante. Para los contaminantes
que alcanzan el nivel fretico y entran al agua subterrnea, la dilucin es mucho
mayor en rocas con permeabilidad intergranular y por tanto las concentraciones de
contaminantes resultantes son mucho menores. La situacin es crtica en zonas de
roca caliza crstica (tipo de roca presente en los humedales, disolucin de la caliza)
donde los caudales son muy altos, por encima de 100 m/h en algunos casos debido al
ensanchamiento de fisuras por solucin, la presencia de poco campo para la
atenuacin y una dilucin limitada. En consecuencia, generalmente hay mucho mayor
degradacin y purificacin de contaminantes en rocas con permeabilidad
intergranular que en las de permeabilidad por fisuras (Kiely, 2001).

88
Cuando se refiere a gravas y arenas, un nivel fretico profundo reduce la
probabilidad de contaminacin porque los contaminantes tienen que viajar ms lejos
y son ms lentos en alcanzar el agua subterrnea (Kiely, 2001). En lo concerniente a
los factores geolgicos e hidrogeolgicos estos pueden ser examinados y
representados en mapas, proporcionando una evaluacin de vulnerabilidad de agua
subterrnea para cualquier regin o emplazamiento. (Kiely, 2001).
2.2.4 Compuestos aromticos
2.2.4.1 Tolueno
El Tolueno es un componente de la gasolina de automocin, de la que
representa un 5-7%. Se utiliza extensamente como disolvente en pinturas, lacas,
colas, como agente de limpieza y en la industria qumica, como intermedio en la
fabricacin de numerosos compuestos orgnicos, como el cido benzoico,
benzaldehdo, benceno y uretano, as como explosivos y tintas. Tambin se han
detectado emisiones de tolueno de fuentes naturales, como volcanes e incendios
forestales. El tolueno es un contaminante que puede estar presente en suelos, aguas
superficiales y subterrneas. En el apndice D.1 se presenta la ficha internacional de
seguridad qumica para este compuesto, caracterizado por ser voltil (presin de
vapor a 25 C, 28,4 mmHg), por lo que su evaporacin es el principal mecanismo de
distribucin en el medio ambiente. Se evapora fcilmente desde la superficie de
suelos y aguas. El tiempo de vida media de su volatizacin desde ros y lagos se ha
estimado en 1 hora y 4 das, respectivamente. Su solubilidad en agua es moderada, de
526 mg/L a 25 C. Reacciona en el aire con los radicales hidroxilo generados por va
fotoqumica, con un tiempo de vida media de 3 das. (Moreno, 2003).
La biotransformacin en el medio ambiente se produce con rapidez, tanto en
la superficie del suelo como en aguas. En suelos superficiales, su tiempo de vida
media por biodegracin se ha calculado en 71 das. En aguas, la velocidad de
degradacin del tolueno depende de las condiciones de oxigenacin del medio. En

89
condiciones aerobias, el tiempo de vida media es de 4 das, mientras que en
condiciones anaerbicas es de 56 das.
El tolueno posee una movilidad alta en suelos y no tiende a adsorberse a la
fraccin slida de suelos y sedimentos. Presenta una moderada tendencia a la
concentracin en organismos acuticos en distintas especies de peces. Posee un buen
grado de absorcin por inhalacin e ingestin. Tras su absorcin, se distribuye
preferentemente al sistema nervioso central, dado su alto grado de irrigacin
sangunea y contenido en lpidos. Adems del sistema nervioso central, el tolueno se
distribuye a otros tejidos en funcin de su contenido lipdico y alcanza su mxima
concentracin en el y tejido adiposo. (Moreno, 2003).
2.2.4.2 Benceno
El benceno es un componente minoritario (1-2) % de la gasolina de
automocin. Desempea un papel importante en la gasolina sin plomo por sus
propiedades antidetonantes. En la actualidad, su principal aplicacin es la industria de
sntesis qumica, aunque durante muchos aos se ha utilizado como disolvente de uso
general. Las principales fuentes de exposicin medioambiental al benceno son las
emisiones a la atmsfera de vapor de gasolina y de los humos de motores de
combustin. (Moreno, 2003).
El benceno es un compuesto muy voltil (presin de vapor a 25 C, 94,8
mmHg), por lo que la volatizacin es el proceso ms importante en su distribucin
medioambiental. Se evapora fcilmente desde la superficie de suelos y aguas. El
tiempo de vida media por vlatizacin estimado en ros y lagos es de 1 hora y 3,5 das,
respectivamente. El vapor de benceno reacciona en el aire con radicales hidroxilo
generados por va fotoltica, con un tiempo de vida media para este mecanismo de
degradacin de 13 das. Es soluble en agua, por lo que el benceno en fase vapor
presente en la atmsfera se ve arrastrado fcilmente por la lluvia (solubilidad, 1,790

90
mg/L a 25 C). Su movilidad en el suelo es elevada y posee poca tendencia a
adsorberse en suelos y sedimentos. (ver apndice D.2 ficha internacional del benceno)
La biodegradacin del benceno en medio anaerbico parece ser muy lenta,
tanto en suelos como en aguas, por lo que esta ruta de transformacin
medioambiental no es importante. Tampoco experimenta hidrlisis en el medio
ambiente. Presenta escasa tendencia a la bioconcentracin en organismos acuticos.
La absorcin de benceno tiene lugar por inhalacin, por ingestin y por va cutnea.
La ruta de exposicin ms importante es la inhalacin, aunque la ingestin tambin es
una va eficaz de absorcin. El benceno esta clasificado como agente cancerigeno de
acuerdo con los estudios realizados en animales de laboratorios y personas. Estudios
epidemiolgicos llevados a cabo en trabajadores de la industria de la refinera del
petrleo, fabricacin del calzado y la industria qumica en general revelan los efectos
cancerigenos del benceno. (Moreno 2003).
2.2.4.3 Etilbenceno
El etilbenceno se utiliza fundamentalmente como base para la sntesis de
estireno y como componente de la gasolina (fraccin BTEX) y el combustible de
aviacin. Es tambin un contaminante que puede estar presente en suelos y aguas
subterrneas. Es un compuesto voltil (presin de vapor a 25 C, 9,6 mmHg), para el
que la evaporacin es un mecanismo importante de distribucin en el medio
ambiente. Se evapora fcilmente desde la superficie de suelos y aguas. El tiempo de
vida media de su volatizacin desde ros y lagos se ha estimado en 1,1 y 99 horas,
respectivamente. Su solubilidad en agua es baja, 169 mg/L a 25 C. Reacciona en el
aire con los radicales hidroxilo generados por va fotoqumica, con un tiempo de vida
media de 55 horas. (Moreno, 2003).
Se biodegrada con rapidez en el medio ambiente en condiciones aerobias. En
estudios realizados en acuferos contaminados con gasolina se ha observado la
biodegradacin total del etilbenceno en un plazo de 10 -16 das, en medio aerobio. Su

91
movilidad en suelos es moderada, ya que tiende a adsorberse a la fraccin slida de
suelos y sedimentos. La hidrlisis no constituye una va de transformacin ambiental
importante para este compuesto. No tiende a bioconcentrarse en organismos
acuticos. El etilbenceno presenta una baja toxicidad en animales y en el hombre,
tanto en condiciones agudas como crnicas. En el apndice D.3 se presenta la ficha
internacional del etilbenceno. Sus efectos txicos principales se producen en el
sistema nervioso central, en el que acta como depresor. Tambin es un agente
irritante de mucosas, sistema respiratorio y ojos. (Moreno, 2003).
2.2.5 Fundamentos tericos de las metodologas de anlisis.
En este apartado se describen los fundamentos tericos de las metodologas
analticas desarrolladas en el presente trabajo de investigacin.
2.2.5.1 Sistemas de Anlisis por inyeccin en flujo (FIA)
El anlisis por inyeccin en flujo (FIA), constituye el mtodo ms moderno de
flujo continuo, se basa en introducir volmenes de muestras medidos con gran
precisin en una corriente no segmentada (Skoog H, 2002). Entre sus ventajas se
destacan:
Anlisis ms rpidos (tpicamente entre 100 y 300 muestras/ hora)
Mejores tiempos de respuesta (menores a 1 minuto desde la inyeccin de la
muestra hasta la respuesta del detector).
Menor coste de disolventes (debido a la menor anchura de los tubos)
Exceptuando el sistema de inyeccin, el equipo es ms simple y ms flexible.
Las dos ltimas ventajas son de particular importancia, porque permiten hacer
medidas automticas a relativamente pocas muestras de carcter no rutinario de una
forma fcil y econmica.

92
El equipo para realizar un anlisis por inyeccin en flujo es relativamente
sencillo, lo conforma una bomba peristltica y un tubo plstico flexible por donde es
transportado la muestra, una vlvula de inyeccin en flujo y un detector (Holler,
2002). En el sistema de transporte de muestra y reactivos, habitualmente la disolucin
circula a travs del sistema por medio de una bomba peristltica, mediante unos
rodillos, un fluido (gas o lquido) que se encuentran en el interior de un tubo plstico.
Las abrazaderas comprimen continuamente el tubo contra los rodillos, para lograr una
corriente permanente de fluido a travs del tubo. (Ver Figura 2.3). El caudal se
controla mediante el dimetro interno del tubo y la velocidad del rotor. En lo
concerniente a los inyectores de muestra y detectores, son muy similares en cuanto al
funcionamiento a los utilizados en el sistema de cromatografa liquida de alta
resolucin. (HPLC). Donde los volmenes de muestra en los procedimientos de
inyeccin abarcan desde 5 a 200 L, siendo los ms usuales en la mayora de las
aplicaciones los de 10 a 30 L.

Figura 2.3 Detalle de los rodillos de una bomba peristltica. (Holler, 2002)
En la Figura 2.4, se observa la forma de introducir la muestra. Cuando la
vlvula de inyeccin est en la posicin indicada, (posicin 1) los reactivos fluyen
por una derivacin, mientras que la muestra fluye a travs de la vlvula.Al girar la
vlvula 90 grados, (posicin 2), la muestra entra en la corriente y forma una zona
perfectamente definida. En la prctica, cuando la vlvula est en esta posicin, el

93
flujo a travs de la derivacin cesa porque el dimetro del bucle de muestra es mucha
mayor que el tubo de la derivacin. Aunque a veces se usa la inyeccin con una
jeringa, la mejor forma de introducir la muestra es mediante vlvulas de bucle
similares a las de cromatografa. Finalmente la deteccin se realiza con equipos de
absorcin y emisin atmica; espectrofotmetros y fotmetros, siendo estos ltimos
los ms utilizados.

Figura 2.4 Sistema de inyeccin de una muestra a baja presin
Sistema de screening. En los laboratorios de anlisis es cada vez ms frecuente la
introduccin de sistemas de medida de respuesta rpida que generan respuestas ms
de tipo cualitativo que cuantitativo. La repuesta cualitativa suele ser binaria del tipo
SI/NO y puede responder a distintas situaciones: presencia/ausencia de un
determinado analito en una muestra, presencia/ausencia por encima de un
determinado nivel (normalmente de concentracin) que habitualmente viene fijado
por la legislacin o el cliente.
El sistema de screening de muestras. Este sistema incluye todas aquellas
metodologas analticas rpidas que tienen como objetivo identificar y seleccionar un
grupo de muestras en un conjunto de las mismas que tengan un analito (o grupo de


94
los mismos) por encima de un determinado nivel de concentracin. Dentro de este
grupo se engloban tambin aquellas metodologas que permiten la caracterizacin del
proceso de seleccin de objetos y sistemas relacionados con el problema analtico
planteado. Los sistemas screening de muestras responden a los objetivos de
simplificacin y rapidez. Se caracterizan por ser procedimientos analticos simples.
Tanto en instrumentos como en operacin (el tratamiento de la muestra es nulo o
simple), originan una respuesta final binaria (si/no) con connotaciones cualitativas y
que requiere una confirmacin mediante la aplicacin de un proceso analtico
completo; la respuesta binaria obtenida se emplea de forma inmediata para la toma de
decisiones (Valcrsel, 2000).
Los objetivos de un sistema screening de muestra son:
Proporcionar una respuesta rpida y fiable acerca de una caracterstica especfica
de una muestra para responder a una demanda informativa que as lo requiere.
Minimizar las operaciones previas del proceso analtico
Minimizar el uso permanente de instrumentos de alto coste de adquisicin y
mantenimiento.
En lugar de que todas las muestras sean sometidas a los mismos. Slo lo harn
aquellas en las que el sistema de screening haya originado una respuesta positiva con
un determinado grado de fiabilidad. La Figura 2.5 se observa un esquema que el rol
de los sistemas de screening de muestras. Las muestras son filtradas a travs del
mismo, en la mayora de los casos, slo un grupo pequeo origina una respuesta si
y stas sern las que deban ser sometidas al proceso analtico convencional. Tanto
para confirmar la respuesta del screening como para extraer ms informacin.


95

Figura 2.5 Esquema del papel que desempea un sistema de screening de muestras.
Fuente: Valcrcel (2000)

2.2.5.2 Sistema de cromatografa liquida de alta resolucin - HPLC
La cromatografa es una tcnica de separacin basada en un proceso fsico-
qumico de los constituyentes de una mezcla. Se ha convertido en un mtodo analtico
de primer orden para identificar y cuantificar los compuestos de una fase liquida o
gaseosa homognea. El principio bsico se fundamenta en los equilibrios de
distribucin de los compuestos presentes entre dos fases no miscibles de la que una,
llamada estacionaria, est inmovilizada en una columna o fijada sobre un soporte y la
otra, llamada mvil, se desplaza al contacto de la primera. La elucin (proceso en el
cual, se separan los solutos a travs de una fase estacionaria por el movimiento de una
fase mvil) a velocidades diferentes de los compuestos presentes por la fase mvil
conduce a su separacin. De todos los mtodos analticos e instrumentales, la
cromatografa es el que tiene el mayor campo de aplicabilidad y por ello, ocupa una
posicin dominante El esquema de trabajo puede resumirse de la siguiente manera
(Rouessac y Rouessac, 2003)

96
Se inmoviliza en una columna un slido finamente dividido llamado fase
estacionaria.
Se coloca en la parte superior de la columna un pequeo volumen de muestra que
hay que separar.
Se fuerza a la mezcla disuelta, a travs de la fase mvil, a atravesar la columna de
arriba abajo para arrastrar los diversos constituyentes. Si los compuestos de la mezcla
migran a velocidades diferentes, podrn recogerse separadamente. En la Figura 2.6
se observa un sistema de HPLC de la casa comercial Waters.

Figura 2.6 Sistema de HPLC Waters, utilizado en el Laboratorio de
Cromatografa Lquida de Alta Presin (Feo, 2007)

La HPLC es una tcnica cromatogrfica de reparto o posicin en la que la
muestra se fracciona entre una fase mvil que es lquida y una fase estacionaria
(Bermejo, F. 1991). Utiliza una presin muy elevada para forzar el paso del
disolvente por una columna que contiene partculas muy finas, consiguiendo as
separaciones de gran resolucin (Harris D, 2001).

97
Deriva de una evolucin de la cromatografa en columna, cuyos resultados, en
trminos de selectividad y de resolucin han mejorado mucho por la miniaturizacin
y la utilizacin de fases estacionarias muy elaboradas. Es la tcnica ms utilizada de
todos los tipos de cromatografa de elusin.
Los componentes bsicos de un sistema para HPLC son:
Depsitos para la fase mvil (disolventes).
Sistema de bombeo para proporcionar presin a la fase mvil.
Sistema de inyeccin de muestras.
Columna cromatogrfica.
Termostatos para las columnas.
Detectores.
Sistema para el tratamiento de datos y registrador.
En la Figura 2.7 se muestran los componentes bsicos del Sistema de
Cromatografa Liquida, HPLC. Donde se destaca, la bomba de alta presin,
sistema de inyeccin, columna de separacin, detector y sistema para registro de
datos.

98

Figura 2.7 Componentes bsicos de un sistema para HPLC. (Hernndez L. 2002)
Aspectos Importantes.
Como algunas de las fases mviles usadas en HPLC pueden ser qumicamente
activas como cidos, bases o lquidos corrosivos, es esencial que los componentes del
sistema estn fabricados con materiales resistentes, por lo que la mayora de las partes
en contacto con la fase mvil suelen estar fabricadas con acero inoxidable
(Hernndez L. 2002). Los disolventes ms usados en HPLC son agua, disoluciones
tampn acuosas y disolventes orgnicos como el metanol. Deben ser
espectroscpicamente puros, exentos de partculas slidas y desgasificados, esto se
lleva a cabo con un gas inerte muy poco soluble como el helio. Como fase
estacionaria lo ms comn es usar partculas microporosas esfricas de slice muy
puro, que son permeables al disolvente (Harris, D. 2001).
Los recipientes que se utilicen para almacenar la fase mvil tienen que ser inertes,
es decir, el disolvente no deber extraer especie alguna del material con el que estn

99
construidos. Suelen ser botellas de vidrio y tubos de tefln. Estn provistos de unos
filtros, indispensables para eliminar los gases disueltos y partculas que pueda
contener la fase mvil (Loro J. F. 2001).
Debido a las elevadas presiones de trabajo y al pequeo tamao de las partculas
de la fase estacionaria, se utiliza una bomba que es la encargada de introducir la fase
mvil o disolvente a travs de la columna. Los sistemas de bombeo debern reunir las
siguientes caractersticas: (Hernndez, L. 2002): generar presiones superiores a 6000
psi., capaces de cubrir un amplio rango de flujo entre 0,1 y 10 ml/min con una
precisin del 0,5 % y que est libre de pulsaciones, construidos con materiales inertes
respecto a los disolventes empleados.
Las bombas empleadas en HPLC son de tres tipos:
Bombas recprocas o de vaivn, son las ms utilizadas. Estn formadas por una
pequea cmara cilndrica que se llena y luego se vaca por oscilacin de un
pistn de zafiro. El bombeo produce un flujo pulsado que despus debe
amortiguarse. Su principal ventajas es que se alcanzan presiones elevadas y se
suministra un caudal constante, pudindose adaptar a la tcnica de elucin con
gradiente, debido a su pequeo volumen interno (Skoog, D. A, 2001).
Bombas neumticas o de presin constante, hacen uso de la presin de un gas
aplicado al recipiente conteniendo la fase mvil. Son sencillas, no provocan
pulsaciones pero estn limitadas a presiones relativamente bajas. (Hernndez, L.
2002).
Bombas de desplazamiento o tipo jeringa, consisten en una cmara equipada con
un mecanismo de tornillo. Suministran un flujo libre de pulsaciones pero con una
capacidad limitada a unos 250 ml. (Loro J. F. 2001).


100
Los volmenes que se inyectan de muestra debern ser pequeos para evitar la
sobrecarga de la columna. Hay varios tipos: a) el mtodo simple es la utilizacin de
una jeringa de alta presin con un diafragma (septum) a la entrada de la columna.
Est limitado a una presin mxima de operacin de 1500 psi. b) Las vlvulas de
inyeccin con bucles de volumen conocido, es el mtodo ms utilizado (Harris, D.
2001).En la Figura 2.8 se muestra un inyector que emplea jeringa de la casa
comercial Waters

Figura 2.8 Inyector modelo U6K de la Waters, posicin para cargar la muestra.
(Feo, 2007)
En las columnas cromatogrficas es donde se produce la velocidad diferencial de
los solutos que permite su separacin (Loro J. F. 2001). El material de las columnas
cromatogrficas suele ser de acero inoxidable cuya longitud vara de 5 a 30 cm. y un
dimetro de 1 a 5 mm. La eficacia de las columnas aumenta al disminuir el tamao de
las partculas de la fase estacionaria. El tamao tpico de las partculas es de 3-10 um
(Harris, D. 2001). Las columnas son costosas y se degradan con facilidad, por eso, se
protege la entrada de la columna con otra ms corta, la precolumna, que retiene por
adsorcin las impurezas de forma irreversible (Harris, D. 2001).
No es necesario el control estricto de la temperatura de la columna, pero las
separaciones resultan ms reproducibles cuando la temperatura se mantiene
constante. Los instrumentos comerciales modernos estn equipados con calentadores
que regulan la temperatura de la columna.

101
El papel del detector es indicar los momentos de aparicin de los componentes, y
proporcionar indicacin cuantitativa y cualitativa de los mismos. Revela la presencia
de las sustancias a la salida de la columna estratigrfica. El detector es un dispositivo
capaz de convertir una propiedad fsica, no medible directamente, en una seal
elaborable y ofrece informacin sobre la naturaleza y magnitud de la propiedad fsica.
El detector utilizado depende de la naturaleza de la muestra y deber reunir una serie
de caractersticas como son, tener una sensibilidad elevada, buena estabilidad y
reproducibilidad, amplio margen de respuesta lineal, insensible a cambios en la
presin y la temperatura. El detector se coloca al final de la columna, responde a la
concentracin del soluto y se registra en funcin del tiempo, obtenindose una serie
de picos, generando un grafico que se denomina cromatograma. La posicin de los
picos en el eje del tiempo puede servir para identificar los componentes de la muestra.
(Hernndez, L. 2002).
Caractersticas de los detectores:
Sensibilidad. Medida de la efectividad de un detector para convertir la muestra
en una seal elctrica medible.
Linealidad. Rango de masa concentracin de muestra sobre el cual el
detector mantiene una sensibilidad constante sin una desviacin arbitraria. El
significado prctico de la linealidad del detector es el que le indica al analista la
concentracin para la cual el detector es confiable. Hay dos lmites en la curva de
linealidad: el lmite de concentracin inferior, que es dado por el lmite de deteccin y
el lmite Superior, definido por un porcentaje de desviacin arbitrario de la curva de
linealidad.
Rango Dinmico Lineal. Rango sobre el cual la sensibilidad del detector es
constante.

102
Ruido. Es cuantificado por el promedio de la amplitud pico-pico de la seal.
El significado de conocer el nivel de ruido de un detector es un factor determinante en
la determinacin de la cantidad mnima detectable y el lmite inferior del rango lineal.
Lmite de Deteccin. Est definido como la mnima cantidad de sustancia que
puede producir una seal que sea el doble del nivel de ruido.
Corriente de Fondo. Seal constante de salida generada por el proceso en el
que un detector est operativo sin que alguna sustancia pasa a travs de l. Esta seal
es muy importante, ya que permite diagnosticar el buen o mal funcionamiento del
detector.
Sistema para el tratamiento de datos y registrador.
La separacin efectuada se conserva en un registro individual llamado cromatograma.
sta es una imagen que traduce visualmente en una pantalla o en un papel la
evolucin, en funcin del tiempo, de un parmetro que depende de la concentracin
instantnea del soluto a la salida de la columna. Este grfico se obtiene gracias a un
detector situado a la salida de la columna (Rouessac y Rouessac, 2003).
2.2.5.3 Sistema de extraccin en fase slida
La preparacin de muestras es un componente clave en cada anlisis qumico.
La importancia de la preparacin de la muestra, en particular la extraccin en fase
slido enfrenta tres intereses principales. La remocin de interferencias de la muestra
matriz, la concentracin del analito (especie que se desea determinar) y el desarrollo
de la prctica del sistema analtico.
La extraccin en fase slida (SPE, siglas en ingles solid phase extraction) es
una potente y simple tcnica de limpieza de muestras de forma rpida y econmica.
Una columna SPE consiste en un lecho de adsorbente de partculas gruesas
mantenido entre dos discos porosos en un tubo desechable. La SPE permite la

103
preconcentracin de la muestra con un riesgo mnimo de prdida o contaminacin de
la misma (Seorns, 2003)
Un mtodo tpico de extraccin en fase slida, consiste en:
1. Activacin. El primer paso es la activacin en la que se utiliza un solvente orgnico
para humidificar la fase. Con fases hidrofbicas (ej. C18) se usa un solvente polar,
como el metanol. Con fases estacionarias polares (ej. Slice) se usa un solvente no
polar, como el cloruro de metileno.
2. Acondicionamiento. La fase estacionaria de la extraccin se acondiciona con el
mismo solvente de la matriz (naturaleza de la muestra, ejemplo agua, aire etc.) por
ejemplo, con matrices acuosas el solvente es agua. El acondicionamiento permite
alinear la fase estacionaria lejos de la superficie de la slice, permitiendo la
interaccin entre el analito y la fase estacionaria. Cualquier solvente orgnico residual
se elimina en esta etapa, asegurando que los componentes de inters sean retenidos en
la parte superior de la columna.
3. Retencin. Las interacciones entre las molculas de la muestra y la fase
estacionaria controlan la retencin en el adsorbente de la extraccin. Para maximizar
las interacciones la muestra (analitos + matriz) deben cargarse en el adsorbente de la
extraccin a aproximadamente 3 ml/min. Este caudal puede controlarse mediante una
vlvula en la estacin de vaco. Los componentes de inters han de retenerse en el
adsorbente de SPE mientras que la matriz y los contaminantes deben eluirse y
descartarse. Durante las etapas 1-3 el adsorbente de la extraccin en fase slida ha de
mantenerse hmedo siempre, puesto que el secado del mismo puede acarrear una
prdida de muestra.
4. Eliminar interferencias. Usando un solvente o una serie de solventes de fuerza
creciente los contaminantes pueden eliminarse del adsorbente de SPE hasta que solo

104
los analitos de inters queden atrapados. Por ejemplo, al retener compuestos
hidrofbicos en C18 la contaminacin puede eliminarse con un lavado de agua:
metanol 50:50 puesto que los compuestos de inters no se eluyen del adsorbente de
SPE hasta que no se use un mayor porcentaje de solvente orgnico. Con un lavado
adecuado las impurezas se eliminan con un adecuado eluyente de lavado. El
adsorbente de SPE se deja secar generalmente con nitrgeno. El secado es esencial si
el eluyente de lavado no es miscible con el solvente de elucin final.
5. Elucin. La elucin de los analitos se efecta mediante un eluyente adecuado y a
un caudal de 1 ml/min. El adsorbente de SPE y la interaccin analito-adsorbente
determinan el eluyente final de elusin. Por ejemplo, con un adsorbente hidrofbico
como C18, el solvente de elucin es usualmente un solvente orgnico muy polar
(como acetonitrilo, metanol o mezclas de estos eluyentes con agua). Tras la elusin
los analitos y el eluyente se recuperan en el recipiente colector. A continuacin, se
muestra en la Tabla el sentido de la fuerza de elusin de los disolventes.
TABLA 2.3
Extraccin en fase slida (SPE): Fuerza de elucin de los disolventes

Fase Normal Fase Inversa

Hexano Menor
Isooctano
Tolueno
ter
Cloroformo
Diclorometano
Tetrahidrofurano
Acetona
Acetato de etilo
Acetonitrilo
Isopropanol
Metanol
Agua Mayor
Hexano Mayor
Isooctano
Tolueno
ter
Diclorometano
Tetrahidrofurano
Isopropanol
Acetato de etilo
Cloroformo
Acetona
Acetonitrilo
Metanol
Agua Menor
Fuente: Seorns, 2003


105

Entre las ventajas y desventajas de la extraccin en fase slida se tienen:

Es una tcnica muy sencilla y relativamente econmica
Existen numerosos adsorbentes disponibles en el mercado para SPE
Se pueden acoplar a otras tcnicas de separacin
Emplean poco volumen de disolvente
La SPE es muy efectiva para extraer compuestos polares o apolares de muestras
lquidas
Est limitada a muestras lquidas La figura 2.9 muestra esquemticamente el
proceso de separacin.

Figura 2.9 Procedimiento de la Extraccin en Fase Slida (SPE) (Seorns, 2003)


106

2.2.5.4. Sistema de espectrofotometra ptica, UV- VIsible.

En espectroscopia se estudia la absorcin y emisin de radiacin
electromagntica (luz) por la materia. En un sentido amplio, la espectroscopia trata
todas las interacciones de la radiacin electromagntica con la materia y por tanto,
incluye dispersin de luz y rotacin del plano de rotacin de luz polarizada por
sustancias ptimamente activas. La Figura 2.10 muestra los componentes bsicos del
espectrofotmetro.

Figura 2.10 Instrumentacin bsica en UV Visible
Espectro de absorcin. El espectro se le conoce como una representacin grfica
frente a una longitud de onda () especfica. Pueden absorber en la regin ultravioleta
del espectro electromagntica. Como se trata de una absorcin de la luz a nivel
molecular se llevan a cabo entre: electrones de un enlace entre tomo, orbital
enlazante (baja energa o estado fundamental), orbital antienlazante (alta energa o
excitado) y electrones no compartidos tales como (N
2
, O
2
, S
2
).
Componentes del espectrofotmetro:
Fuentes de radiacin.
Selectores de longitud de onda.
Recipientes para muestras.
Detectores de radiacin.

2
Receptculo
de la muestra
3
Selector de
longitud de
d
4
Detector
fotoelctrico
5
Sistema de
tratamiento
de la seal y
sistema de
1
Lmpara

107
Fuente de radiacin:
Lmpara de filamento de wolframio que emite en la zona del visible. Descarga
elctrica a travs de gases.
En la regin UV se usan fuentes de descarga elctrica tales como la lmpara de
hidrgeno o la de deuterio.
Monocromadores
Sistemas para dispersar la radiacin policromtica y aislar una radiacin
monocromtica (una sola ).
Filtro
Absorbe las que no interesan
Recipiente muestra
Permite el paso de la radiacin sin absorberla o dispersarla.
Cuarzo o slice fundida
La longitud es de 1 cm.
Detectores
Miden la intensidad de radiacin del haz emergente.
Fotoelctricos.
Los fotones tienen suficiente energa para excitar a los electrones exteriores del
ctodo, produciendo su ionizacin
Se genera una corriente de electrones proporcional a la intensidad de la radiacin
que llega al detector.
Detectores
Tubo fotomultiplicador
Similar a un fototubo de vaco
Respuesta rpida
Sensibilidad muy elevada
Los electrones son arrastrados por un campo elctrico, adquiriendo mayor energa.
Al chocar con un snodo transmite su energa y desplaza ms electrones y as

108
Aplicaciones de Sistema de espectrofotometra ptica UV- Visible
Anlisis cualitativo.
El espectro de absorcin UV permite identificar especies a partir de las bandas de
absorcin de mayor intensidad
Anlisis cuantitativo.
Es una de las tcnicas ms tiles para realizar determinaciones cuantitativas
Muchas especies inorgnicas y orgnicas absorben selectivamente en esta zona
Sustancias con grupos cromforos o coloreadas.
En general presenta: gran sensibilidad, puede analizar sustancias en concentraciones
entre 10-4 y 10-5M, es una tcnica selectiva, se puede encontrar una banda de en la
que solo absorba el componente deseado, buena precisin y facilidad de manejo, las
especies no absorbentes pasan a serlo cuando reaccionan y dan productos coloreados.
En la Figura a continuacin se muestra el principio de operacin del sistema UV
correspondiente al modelo HP8452A en este sistema un simple rayo alineado de luz
es pasado a travs de la muestra antes de ser dispersado sobre el diodo.
Simultneamente se realiza el ajuste a la longitud de onda (Skoog, H 2002)

Figura 2.11 Sistema ptico de deteccin con lmpara de deuterio. (Skoog, H 2002)
Celda
muestra
Lmpara de
deuterio
Rendija
Lente
Lente del
espectrofotmetro
Diodo
Obturador
Retcula ptica

109
2.3 Bases Legales.
Gaceta Oficial de la Repblica Bolivariana de Venezuela. Normas Sanitarias de
Calidad del Agua Potable. Nmero 36.395.
Captulo I. Disposiciones preliminares.
Artculo 1. El objetivo de las Normas sanitarias de calidad del agua Potable, es
establecer los valores mximos de aquellos componentes o caractersticas del agua
que representan un riesgo para la salud de la comunidad, o inconvenientes para la
preservacin de los sistemas de almacenamientos y distribucin del lquido, asi como
la regulacin que asegure su cumplimiento.
Artculo 4. El agua potable debe cumplir con los requisitos microbiolgicos,
organolpticos, fsicos, qumicos, y radioactivos que establecen las presentes normas.
Artculo 5.- Cuando el agua que se designe al suministro como potable no cumpla
con los requisitos establecidos en las presentes Normas, el responsable del sistema de
abastecimiento respectivo deber aplicar el tratamiento que la haga apta para dicho
uso.
Artculo 7. Cuando se excede el valor mximo aceptable en estas normas el ente
responsable del sistema de abastecimiento de agua potable debe investigar la causa,
informar a la autoridad sanitaria competente y tomar las medidas correctivas.
Captulo III. De los aspectos organolpticos, fsicos y qumicos
Artculo 14.- El agua potable deber cumplir con los requisitos establecidos en la
tabla 2.4 que se presentan a continuacin, los compuestos sealados en color azul son
los seleccionados para su estudio en el presente trabajo.

110
TABLA 2.4
Componentes Orgnicos
Componentes Valor Mximo
Aceptable
Componentes Valor Mximo
Aceptable. mg/L
Bromoformo 100
Cloroformo 200
Dibromoclorometano 100
Benceno 10
Tolueno 700
Xileno 500
Aldrn y Dieldrn 0.03
Clordano 0.2
DDT y sus metabolitos 2.0
2-4 D 30
Heptacloro 0.03
Heptacloro Expsido 0.1
Hexaclorobenceno 1.0
Lindano 2.0
Metoxicloro 20
Acrilamida 0.5
Benzopireno 0.7
1-2 Dicloroetano 30
1-1 Dicloroeteno 30
Etilbenceno 300
Pentaclorofenol 9.0
2-4-6 Triclorofenol 200

TABLA 2.5
Componentes relativos a la calidad organolptica del agua potable
Componentes o Caractersticas Unidad Valor deseable menor a Valor mximo
aceptable
Color UCV (b) 5 15
Turbiedad UNT 1 5
Olor o sabor ___ Aceptable para la mayora de los
consumidores
----
Slidos disueltos totales mg/l 600 1000
Dureza total mg/l CaCO
3
250 500
pH ___ 6,5 - 8,5 9,0
Aluminio mg/l 0,1 0,2
cloruro mg/l 250 300
(b) UCV: unidades de color verdadero, UNT: Unidades nefelomtricas de turbiedad

111
Captulo V. De la frecuencia de muestreo y anlisis del agua para suministro
como potable.
Artculo 16. El agua que se suministre como potable deber someterse a
mediciones sistemticas para la evaluacin de parmetros microbiolgicos,
organolpticos, fsicos y radiactivos en muestras representativas del sistema de
abastecimiento con la frecuencia que establecen estas Normas.
Artculo 19. La frecuencia mnima para la captacin de muestras y anlisis de las
caractersticas organolpticas, fsicas y qumicas se presentan en el cuadro
siguiente:
TABLA 2.6
Frecuencia mnima para el anlisis de los parmetros relacionados con las
caractersticas organolpticas, fsicas y qumicas del agua potable.

Frecuencia Mnima Componente o
caracterstica Aguas Superficiales Aguas Subterrneas
Color y Turbiedad
Aluminio (a)
PH
Dureza
Una (01) muestra
quincenal en aguas no
sometidas a tratamiento de
clarificacin.
Una (01) muestra diaria
en aguas tratadas.
Dos (02) muestras
anuales en aguas no
sometidas a tratamientos de
clarificacin.
Una muestra (01) diaria
en aguas tratadas.
Color
Sabor
Aspecto
Conductividad elctrica
Temperatura
Cloro Residual



(a) Realizar el anlisis de este elemento con la frecuencia establecida slo si se adiciona
durante el tratamiento de clarificacin.


112
Artculo 20. Los entes responsables del abastecimiento del agua potable estn en la
obligacin de enviar mensualmente los resultados de los anlisis efectuados a la
Autoridad Sanitaria Competente.
Artculo 21. Los anlisis que se refieren las presentes Normas deben ser realizados
por profesionales idneos en laboratorios competentes a juicio de la Autoridad
Sanitaria, siguiendo las metodologas establecidas en el Mtodo Estndar para el
anlisis de aguas y aguas residuales (AWWA y AVHA).
Capitulo VI. Disposiciones Finales
Artculo 23.- La Autoridad Sanitaria Competente que tenga a su cargo los programas
de Ingeniera Sanitaria, establecer los plazos dentro de los cuales los responsables
del suministro de agua potable debern instalar los sistemas o procedimientos que se
requieran para el tratamiento de las aguas, de manera que cumplan con los requisitos
de potabilidad establecidos en las presentes Normas y fijar los plazos dentro de los
cuales deben proceder a cambiar o complementar las fuentes de abastecimiento que
se requieran.
2.4 Definicin de Trminos:
Compuestos Orgnicos: Son sustancias qumicas basadas en cadenas de carbono e
hidrgeno. En muchos casos contienen oxgeno, y tambin nitrgeno, azufre, fsforo,
boro y halgenos. No son molculas orgnicas los carburos, los carbonatos y los
xidos de carbono. (Wikipedia, 2001)
Componentes Inorgnicos: Todos aquellos compuestos que estn formados por
distintos elementos, pero en los que su componente principal no es el carbono
siempre. (Wikipedia, 2001)

113
Agua Potable: Se considera as al efluente de la planta de tratamiento, alimentadores
principales y secundarios, ramales abiertos y cerrados, estaciones de bombeo y
estanques de almacenamiento. (Guevara. 2002)
Adveccin: Se le denomina a los mecanismos responsables del transporte de un
contaminante en medios fluidos. (Kiely, 2001).
Dispersin: Es provocada por la mezcla turbulenta en el fluido en movimiento o por
diferencias en densidad asociadas a los gradientes de temperatura (Kiely, 2001).


114

CAPTULO III

METODOLOGA

En este captulo, se describe la metodologa utilizada de manera secuencial,
presentando las actividades y procedimientos seguidos para el desarrollo y
cumplimiento de los objetivos planteados.

3.1 DISEO DE LA INVESTIGACIN
La presente investigacin por su intencin y de acuerdo a los objetivos
planteados, se enmarca en los estudios tecnicistas, de acuerdo a Orozco, Labrador y
Palencia (2002), quienes consideran:
Si el inters del investigador es hallar la solucin de un problema
prctico, econmico, social, ambiental, sanitario o satisfacer una
necesidad detectada mediante la puesta en funcionamiento de un
programa, plan, estrategia, equipo o prototipo inventado, diseado, y/o
adaptado por el investigador a la situacin planteada se estar en
presencia de un estudio tecnicista, enfocada al componente ocupacional,
la cual lo hace apropiada para carreras con sesgo hacia el hacer, esto es
carreras tecnolgicas, diseo e ingeniera y en especialidades de
postgrado en salud, cultura y educacin, entre otros. P.21

Atendiendo a lo anteriormente expuesto, este estudio se enmarc en criterios
tecnolgicos en la modalidad de proyectos especiales tal como lo indica Orozco,
Labrador y Palencia (2002), ya que corresponde a la produccin de tecnologa dura,
inventos y desarrollo de prototipos, para satisfacer necesidades generales o
especficas y requieren de un estudio de factibilidad funcional, tcnico y/o
econmico (p.24)
Lo que antecede permite deducir que este proyecto est orientado a responder
a la necesidad de incorporar propuestas para la determinacin de benceno, tolueno y
etilbenceno presentes en aguas destinadas al consumo humano en una comunidad del

115
Estado Carabobo, a fin de ofrecer posibles soluciones a la problemtica que ocasiona
la presencia de stos compuestos en las aguas.
El diseo de la investigacin se encuentra fundamentado en un estudio de
campo, el cual segn la Universidad Pedaggica Experimental Libertador (1998)
corresponde:
Al anlisis sistemtico de problemas de la realidad, con la finalidad bien
sea de describirlos, interpretarlos, entender su naturaleza y factores
constituyentes, explicar sus causas y efectos o predecir su ocurrencia,
haciendo uso de mtodos caractersticos de cualquiera de los paradigmas
o enfoques de investigacin conocidos o en desarrollo. p.65
Tambin se enmarca en un tipo de investigacin experimental. Al
respecto Tamayo y Tamayo (1997) la define: como la manipulacin de una variable
experimental no comprobada, en condiciones controladas, con el fin de describir de
qu modo o por qu causa se produce una situacin. (p. 56).
En esta perspectiva se llev a efecto el experimento en principio con
unas ciertas condiciones iniciales para lo concerniente a la fase de transicin,
preparacin de patrones, entre otros, de manera de ajustar las condiciones ptimas y
lograr una mayor sensibilidad requerida por el anlisis.
Este estudio comprende las siguientes fases: diagnstico, factibilidad y
desarrollo de la propuesta.

3.2 DESARROLLO DE LAS FASES DEL PROYECTO
3.2.1 Fase I: Diagnstico
Se realiz un estudio diagnstico terico a travs de la recoleccin de
material bibliogrfico mediante la indagacin de informacin presente en pginas
web y revistas especializadas. Con la finalidad de detectar las fuentes del
contaminante (compuestos aromticos), su fundamento de ubicacin del pozo,

116
transporte, transformacin una vez presentes en las aguas de consumo humano y su
afectacin en la colectividad.
Adicionalmente, se tom en consideracin para el diagnstico: la permisologa
respectiva por parte de los agentes encargados de custodiar la zona de estudio,
accesibilidad para la toma de muestra, factibilidad en el traslado tanto antes como
despus de la toma, la presencia de talleres mecnicos los cuales operan sin ningn
tipo de control en los vertidos de sus desechos y la fuente de abastecimiento la cual se
correspondi con un pozo surtidor de agua potable ubicado a dos kilmetros del
conjunto residencial y a 300 metros de distancia del ro Cabriales como se observa en
la Figura 3.1). Aunado a esto, se seleccion la poblacin del Bayona country I debido
a que diferentes miembros que conforman la comunidad, haban venido manifestando
su descontento con la calidad del agua potable que consumen, indicando
observaciones con respecto a la caractersticas fsicas de sta, las cuales son recogidas
en el instrumento aplicado a los habitantes del conjunto residencial (ver captulo IV,
apartado 4.1.2), lo que facilit la toma de muestras, ya que se encontr con toda la
disponibilidad para la llevarla a cabo.

Figura 3.1 Ubicacin del pozo surtidor de agua al conjunto residencial Bayona
Country I, el cual se encuentra detrs del Centro Comercial Cristal en
la zona de Naguanagua.
Por otra parte, en esta fase se realizaron los estudios estadsticos para la
seleccin de la poblacin y la muestra conjuntamente con las tcnicas de recoleccin
de datos; elementos de gran relevancia para complementar el diagnstico y llevar a
Ubicacin del
Pozo
Rio Cabriales

117
feliz trmino la investigacin. De acuerdo con lo anterior el objetivo comprendido en
esta fase es el siguiente:
1. Diseo del plan de muestreo en la zona de recoleccin, para las aguas de
consumo humano.
Esta etapa tiene por finalidad establecer el nmero de muestras a tomar con la
finalidad de aseverar la presencia o ausencia de compuestos aromticos en muestras
de agua para consumo humano, en el sector Tazajal del Municipio Naguanagua
Estado Carabobo.

Poblacin.
Orozco, Labrador y Palencia (2002) definen la poblacin como la
delimitacin especial del estudio, es decir hasta donde puede alcanzar la
generalizacin de los resultados (p.41). En este estudio, la poblacin estuvo
conformada por el agua para consumo humano de los apartamentos que conforman el
Conjunto Residencial Bayona Country I (254 apartamentos), del sector Tazajal del
Municipio Naguanagua Estado Carabobo. El Conjunto Residencial Bayona Country
I, tiene un periodo de construccin menor a cinco aos, conformado por 14 edificios;
de los cuales 7 poseen 5 pisos y los otros poseen 4 pisos constituido por un sistema
interno de tuberas de plstico color azul, cuya agua para consumo proviene del pozo
(sin tratamiento) cuya ubicacin se menciono anteriormente.
Muestra.
Fue aplicada la frmula de tamao de muestras para poblaciones finitas
(Miller y Miller, 2002) con la finalidad de escoger una muestra que represente a esta
poblacin con un nivel de confianza del 99%. De este clculo result una muestra que

118
represent el 20% de la poblacin superando el nivel de confianza establecido. Para
realizar un muestreo aleatorio simple donde todos los apartamentos tengan la misma
posibilidad de ser elegidos como parte de la muestra, a cada apartamento le fue
asignado un nmero aleatorio con distribuido uniforme en el intervalo [0,1].
Quedando de esta forma las matrices dadas en las Tablas A y B. (ver apndice G).

La siguiente frmula lgica condicional fue aplicada para seleccionar
los apartamentos de la muestra:
SI(Rand(Apto)<0,201;SI;NO),
Donde:
Apto es la entrada de la frmula y representa el apartamento de la
poblacin, conforme a la Figura 4.1 expuesta en el captulo IV)
Rand (Apto) representa el nmero aleatorio asignado. Las salidas de la
frmula son SI o NO. As, si la salida es SI, el apartamento es asignado a la
muestra. De esta forma quedaron asignados a la muestra los apartamentos indicados
en la Figura 4.1. en esta muestra es que fueron realizadas las mediciones o tomas de
muestras de agua.

Generndose como resultado la seleccin de 52 apartamentos como base
estadstica para la realizacin del muestreo respectivo. (expuesta en el Captulo IV)
De igual forma, se utiliz un instrumento de recoleccin de datos y verificacin del
uso del agua, como se muestra en la Tabla 3.1. La toma de la muestra se llevo a cabo
segn el protocolo establecido por la Norma COVENIN 2614. (Apndice C)


119
TABLA 3.1
Instrumento utilizado para la toma de la muestra.

Persona responsable:
Fecha de la captacin:

Hora de la captacin:

Identificacin de la muestra (# recolector)
Localizacin exacta del lugar de captacin
Color de la muestra
pH
Caracterstica fsica
Informacin de las condiciones climticas y
ambientales

Procedencia
Observaciones

A partir de la Tabla 3.1 se realiz un anlisis al instrumento aplicado a los
habitantes del conjunto residencial, considerando las pautas para toma de muestra de
la Norma Venezolana COVENIN 2614,1994. Se recopilaron los datos
correspondientes a: fecha, hora de captacin, identificacin de la muestra,
localizacin, color, pH, caracterstica fsica, procedencia, frecuencia del suministro

120
entre otros, sobresaliendo la caracterstica fsica del agua de acuerdo a la opinin de
los habitantes. ste resultado se presenta en el captulo IV en la Figura 4.2
Procedimiento para la Toma de la Muestra
Para la toma de muestra se procedi de la siguiente forma: haciendo uso de la
matriz aleatoria de seleccin de los apartamentos se acudi al lugar, al cual
previamente se le solicit el permiso (anexo C) para la realizacin de la toma, as
como se les inform a los habitantes del conjunto residencial del da y hora en que
sera llevado a cabo dicha toma. Las muestras se tomaron directamente del grifo de la
vivienda, haciendo uso de recipientes de vidrio color mbar los cuales fueron
previamente lavados con una solucin de potasa alcohlica al 10 % por espacio de
una hora, luego se enjuago 3 veces con agua destilada y finalmente se secaron en la
estufa a 60 C.
Durante la captacin de la muestra, se abri el grifo de la vivienda y se dejo
fluir libremente por 5 minutos a fin de remover todos los sedimentos adheridos a las
tuberas. Finalmente se recolecto la muestra en el envase previamente preparado,
inmediatamente se coloc la tapa de manera de evitar contaminacin atmosfrica.
Esta recoleccin se llev a cabo durante cuatro das, tomando un promedio de 20
muestras por cada sesin.

Procedimiento para la preparacin de la Muestra
Una vez completada la etapa de recoleccin de las muestras se procedi a su
preparacin para el anlisis, realizado de la siguiente manera: cada muestra se filtr al
vaci utilizando membranas del filtracin de acetato de celulosa 0.45 m marca
Sartorius, con la finalidad de eliminar impurezas, ver Figura 3.2. Posteriormente los

121
compuestos de inters fueron extrados de la matriz acuosa utilizando minicolumnas
empacadas C
18,
Sep Pak, marca Waters ver Figura 3.3, stas fueron previamente
acondicionadas utilizando el siguiente procedimiento: se hicieron pasar a travs de la
mimicolumna 3 ml de metanol previamente filtrado, a continuacin se pasaron 4 ml
de una solucin compuesta por 50 % metanol y 50 % acetonitrilo y finalmente se
pasaron 4 ml de una solucin de composicin 50 % agua y 50 % acetonitrilo
.

Sistema de extraccin y preconcentracin.
Se diseo un sistema de extraccin y preconcentracin conformado por una
bomba peristltica modelo: Hp 89052A Hewlett Packard, tubos de bomba de silicn
de dimetro interno 0.110 mm y la minicolumna C
18
previamente acondicionada (de
acuerdo al procedimiento descrito), ver Figura 3.4. El diseo para este procedimiento
est basado en una extraccin de tipo slido lquido, el cual opera de la siguiente
manera: 500 ml de la muestra previamente filtrada es introducida al sistema haciendo
uso de una bomba peristltica, con un flujo de operacin de 28.3 ml/min. Esta es
introducida en su totalidad en la minicolumna C
18.
Posteriormente un 1 ml del extracto de los compuestos de inters es
recuperado invirtiendo la direccin de flujo (Manganiello, Arce, Ros y
Valcrcel, 2002).utilizando como solvente de recuperacin acetonitrilo grado
HPLC marca J.T. Baker. Los extractos de las muestras fueron conservados a
temperatura de 4 C en envases de plsticos como se muestra en la Figura 3.5
para posteriormente ser analizados por el Sistema de Screening de Muestras
diseado en este trabajo.

122

Figura 3.2 Partes del Sistema de filtracin modelo Kontes Ultra Ware utilizado en
el presente trabajo: (1)muestra a filtrar, (2) recipiente colector, (3) bomba
de vaco, (4) ubicacin de la membrana y detalles de la membrana.

Figura 3.3 Minicolumnas C
18
utilizados para la extraccin de los Compuestos
Aromticos (benceno, tolueno y etilbenceno), diagrama interno: (a)
soportes de empaque (b) empaque C
18
, (c) cuerpo de polietileno.

Membrana de
celulosa de 0,45
4
1
2
3
b
c
a

123

Figura 3.4 Diseo del sistema de extraccin y preconcentracin. El sentido de la
flecha contina indica la direccin de flujo para el procedimiento de
extraccin y preconcentracin. El sentido de la flecha punteada indica la
direccin de flujo para el proceso de recuperacin del extracto.

Este procedimiento de preconcentracin de la muestra se realiz con la
finalidad de detectar mediante la instrumentacin diseada. Los lmites mximos
permisibles que establece la Gaceta Oficial Venezolana.

Adicionalmente se realiz la medicin del pH de cada una de las muestras
utilizando un pH.metro modelo PhM 62 standard y marca radiometer Copenhagen
con la finalidad de chequear si el mismo se encontraba dentro de los parmetros
establecidos dentro de la Gaceta Oficial de la Republica Bolivariana de Venezuela,
N 36.395. (Ver apndice A).
Bomba Peristltica
MUESTRA
Vial de Recoleccion
Desecho
Acetonitrilo

Minicolumna C
18

124
(a) (b)
Figura 3.5 (a) Envases para almacenar el extracto recuperado: tubos cnicos de
plstico. (b) cubeta utilizada por refrigerar los tubos.

3.2.2 Fase II: Factibilidad Funcional
En esta seccin se indica la viabilidad de desarrollar los mtodos de anlisis
para llevarlos a la prctica, tomando en consideracin la necesidad detectada,
recursos humanos, tcnicos, financiero y beneficiarios; haciendo hincapi en la
disponibilidad y las condiciones especficas. A continuacin se describen los
objetivos relacionados con esta etapa:
2. Disear el mtodo de Screening de muestras para la determinacin del
contenido de benceno, tolueno y etilbenceno en agua potable.
A continuacin se describen los equipos y materiales empleados para el desarrollo del
mtodo de Screening de muestras:
Equipos analticos y materiales para los sistemas de flujo
Ultra micro celda de flujo, volumen 60 l, Hewlett-packard (5061-3395)
Bomba peristltica, modelo HP 89052A, Hewlett-packard
Tubos de Bombas, especfico para el manejo se solventes orgnicos.
Vlvula de inyeccin (Rheodyne modelo 5041, 0,8 mm de paso), con un lazo de
inyeccin de 20 L.
Detector UV, modelo Hewlett-packard 8452A
Sistema de registro de datos


125
Ultramicro celda de Flujo
A continuacin, se muestra la Figura 3.6 donde se presenta una vista y un
diagrama de la ultramicro celda de flujo utilizada, donde se sealan sus principales
partes. Estas celdas se caracterizan por requerir muy poco volumen de inyeccin de
muestra, tienen 1 cm. de longitud y alta sensibilidad.

Figura 3.6 Vista y diagrama de partes de una Ultramicro celda de flujo: (a)
entrada de muestra, (b) salida de la muestra, (c) agujero que da paso
al haz de luz que incide sobre la muestra.

Bomba peristltica y tubos de bomba

Estas bombas se caracterizan por suministrar cantidades precisas de lquidos.
Operan a baja a presin y poseen un cabezal de 12 rodillos los cual permite trabajar
con diferentes velocidades de flujo. Puede rotar el lquido en ambos sentidos. El
motor esta provisto de un disco de pulsacin y una fotoclula que asegura la alta
precisin y la reprodubilidad en la velocidad de flujo. Los tubos de bomba utilizados
estn diseados de un material resistente a los solventes orgnicos y su dimetro
interno es 0,045 mm. La bomba utilizada opera a un voltaje de 100/120 voltios, un
QS

b
a
c
Volumen de celda 60 l

126
a
b
a
b
c
amperaje de 2 amps y 60 Hz de frecuencia. En la Figura 3.7 se muestra una vista de la
bomba utilizada en el presente trabajo y detalle del cabezal de impulsin.

Figura 3.7 Bomba peristltica y vista de planta indicando los rodillos que dan
movimiento al flujo (a) entrada de la muestra, (b) salida de la muestra, (c)
ubicacin de los tubos de bomba
Vlvula de inyeccin
Se utiliz una vlvula de inyeccin de volumen fijo, equipada con un bucle de
inyeccin de 20 l, en la Figura 3.8 se observa una vista de la vlvula y su ubicacin
en el sistema diseado. La ventaja de este sistema de inyeccin de volumen fijo se
traduce en mayor precisin y reprodubilidad de las medidas analticas. El modelo de
vlvula 5041 utilizado en el presente trabajo consta de un conector externo que
convierte la disposicin de seis puertos en una de cuatro puertos donde los flujos se
intercambian para dar lugar a las posiciones de carga e inyeccin, mediante un
movimiento manual de la vlvula, la Figura 3.9 muestra en detalle este
procedimiento.


127

Figura 3.8 Vista de la ubicacin de la vlvula de inyeccin en el sistema de
Screening diseado y vista de cerca da la vlvula de inyeccin.

Fura 3.8 Vista de la ubicacin de la vlvula de inyeccin en el Sistema de Screening
diseado y vista de cerca de la vlvula de inyeccin.

Figura 3.9 Procedimiento de inyeccin de la muestra: Posicin de carga de la muestra:
(a) La muestra se inyecta al sistema haciendo uso de una jeringa, la cual
llena completamente el bucle y el exceso de muestra sale por (d). Durante
este proceso la solucin portadora (90/10 Acetonitrilo/ Agua) esta pasando
continuamente al sistema entre (b) y (c). Posicin de inyeccin de la
muestra: para este proceso se gira la manilla de la vlvula a la posicin de
inyeccin y la muestra es arrastrada al sistema haciendo pasar la solucin
portadora a travs del bucle de inyeccin.

Posicin de carga de la muestra
Posicin de inyeccin de la muestra
a
d
a
Celda
Celda
c
c
d
b
b

128

Detector UV
El detector utilizado consta de un sistema de arreglo de diodos en fila para
transformar la radiacin emergente en una seal elctrica, reportndose como el valor
de la absorbancia de la muestra. Se caracteriza por ser sensible, elevada relacin
seal/ruido, capacidad de respuesta constante, rpido tiempo de respuesta. La fuente
de radiacin utilizada para medir en la regin ultravioleta, UV, fue una lmpara de
deuterio. La Figura 3.10 muestra un diagrama del detector utilizado y detalle de una
vista de la ultramicro celda acoplada al detector.

Figura 3.10 Diagrama del detector UV donde se indica el lugar de acoplamiento de la
ultramicro celda y una vista de cerca.

Sistema de registro de datos
La respuesta del detector se encuentra acoplada a un computador mediante
una interface electrnica que permite tener un registro de los datos que se van
obteniendo. Estos datos son manejados mediante el Software Chem Station UV
visible, HP 95- 96.


129
Diseo del sistema de Screening de muestras y procedimiento de operacin
En la Figura 3.11 se muestra un esquema del diseo del sistema de Screening
de muestras desarrollado en el presente del trabajo.
Figura 3.11 Esquema del diseo del sistema de Screening UV-Visible.
Procedimiento de operacin: La solucin portadora (90/10 acetonitrilo/agua) se introdujo
al sistema por medio de una bomba peristltica, con un flujo de 5.8 ml/min. Los patrones
de la mezcla de aromticos (benceno, tolueno y etilbenceno) y las muestras fueron
inyectados al sistema mediante la vlvula que se observa en el diagrama, la cual esta
provista de un bucle de inyeccin de 20 l (posicin de carga de la muestra). Al girar la
vlvula a la posicin de inyeccin, la solucin portadora arrastra la muestra hacia la
ultramicro celda. All la muestra es irradiada por un haz de luz correspondiente a la regin
ultravioleta del espectro electromagntico en un rango comprendido entre 240 - 254 nm.
Esta seal es captada por un detector de arreglo de diodos, reportndose en unidades de
absorbancia. Una interfase electrnica conectada del detector a la computadora permite el
Solucin
Portadora
90/10
ACN/H
2
0
Residuo
Vlvula de inyeccin

Bomba Peristltica
PC
Detector UV de arreglo de diodos
Muestra
QS
Seal
Ultramicro celda

130
registro y manipulacin de los datos. El programa utilizado para manejar los datos es un
software comercial Chem Station- UV visible de la casa comercial Hewlett Packard.
3. Disear el mtodo de cromatografa lquida con deteccin UV para la
determinacin de benceno, tolueno y etilbenceno en agua potable.
A continuacin se describen los equipos y materiales empleados para el desarrollo del mtodo de Cromatografa
Liquida con deteccin UV:
Equipos analticos y materiales para el sistema de Cromatografa Liquida

Sistema de bombeo, modelo 510 HPLC, Waters.
Sistema de inyeccin de muestras, modelo U6K, Waters
Jeringa de inyeccin de capacidad 25 l, modelo Hamilton, Waters
Columna cromatogrfica, modelo Sunfire C
18
, 5m
Detector de UV modelo 2485, Waters.
Registrador, modelo Perkin Elmer, R50.

Sistema de bombeo

A continuacin, se muestra la Figura 3.12 donde se presenta una vista frontal
de la bomba utilizada en el presente trabajo, donde se sealan los componentes ms
importantes. La bomba es de alto desempeo, diseada especficamente para sistemas
de Cromatografa Lquida, pueden manejar flujos entre 0,1 a 9,9 ml/min. Posee un
controlador, el cual muestra la presin de operacin del sistema y a su vez acta
como una alarma en caso de que exista sobre presin. Su rgimen de operacin es
isocrtico (la composicin del lquido de bombeo, fase mvil, no varia con el
tiempo). Su manipulacin es manual del tipo doble cilindro pistn y opera entre 0 a
6000 Psig,

131

Figura 3.12 Vista frontal del sistema de bombeo y sealizacin de sus componentes:
(a) sistema controlador de presin, (b) selector de flujo (c) interruptor de
encendido y apagado, (d) sistema de doble cilindro pistn, (e) vlvula de
purga.
Sistema de inyeccin de muestras
El sistema de inyeccin es de volumen variable (en el orden de 5 a 20
microlitros, l). Para introducir la muestra se utiliza una jeringa de alta precisin.
Como se observa en la Figura 3.13

Figura 3.13 (a) Vista frontal del sistema inyector sealando sus partes; (1) vlvulas
de carga e inyeccin, (2) puerto de inyeccin, (3) recolector de
desechos. (b) jeringa utilizada para la inyeccin.
a
b
c
e
d
1
2
3
(a)
(b)

132

Columna de separacin cromatogrfica.
En la columna cromatogrfica se verifico la separacin de la mezcla de las
especies de compuestos aromticos estudiados. Este accesorio es la base de la
determinacin de la concentracin de cada uno de los componentes de la mezcla
(benceno, tolueno y etilbenceno). Est constituida internamente por un relleno de
carbono C
18
con un tamao de partcula de 5 m, lo cual favorece la eficiencia de
separacin. Su exterior se encuentra protegida por un tubo de acero inoxidable
para resistir altas presiones (hasta 680 atm) y la accin qumica de la fase mvil.
Sus dimensiones son 150 mm de longitud por 3 mm de dimetro interno.

Figura 3.14 Vista de la columna de separacin cromatogrfica.
Detector de UV modelo 2485 Waters.
El sistema de deteccin consta de un panel de control que permite ajustar las
condiciones de operacin tales como: atenuacin (AUFS) y longitud de onda (nm).
En la pantalla se puede observar el tiempo de retencin y absorbancia (). La fuente
de radiacin es una lmpara de deuterio (que cubre el espectro de absorcin de la
regin ultravioleta). El detector utilizado se caracteriza por su alta sensibilidad,
elevada relacin seal/ruido, capacidad de respuesta constante y rpido tiempo de
respuesta. En la Figura 3.15 se observa una vista frontal del detector y un diagrama
indicando sus dimensiones.


133

Figura 3.15 Vista y diagrama del detector indicando sus dimensiones.
Registrador,
El registrador permite conservar la informacin obtenida una vez efectuada la
separacin bajo la modalidad de cromatograma. El registrador permite realizar los
ajustes del papel utilizado, seleccionando la velocidad del papel en un rango de (10,
15, 20, 30,40 y 60) y en unidades de (cm/min; mm/min; mm/h; cm/h). En la Figura
3.16 se observa el modelo de registrador utilizado.

Figura 3.16 Vista del registrador en el sistema de Cromatografa Lquida.

134
Esquema del Sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV y procedimiento
de operacin.
En la Figura 3.17 se muestra un esquema del sistema de Cromatografa
Liquida con deteccin UV y procedimiento de operacin desarrollado en el presente
del trabajo.

Figura 3.17 Esquema del sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV
utilizado.
Procedimiento de operacin: La fase mvil (50/40/10 acetonitrilo/agua/
tetrahidrofurano) se introdujo al sistema por medio de la bomba con un flujo de 0,4
ml/min, un filtro previo colocado dentro del reservorio de fase mvil previene la
entrada de impurezas. Los patrones de la mezcla de aromticos (benceno, tolueno y
etilbenceno) y las muestras fueron inyectados al sistema mediante una jeringa marca
Hamilton de capacidad 25l. Los patrones y las muestras son introducidos al sistema
por medio de una vlvula de inyeccin de volumen variable. La vlvula (al igual que
Registrador
Detector
Columna de separacin
Filtro de entrada
Bomba
Direccin de flujo
Traductor de
presin
Vlvula de
inyeccin
Desecho

135
la utilizada en el sistema de Screening de muestras) tiene dos posiciones una de carga
y otra de inyeccin. Una vez inyectada la muestra al sistema, esta pasa a la columna
transportada por la fase mvil, una vez all ocurre la interaccin de los componentes
de la muestra con la fase estacionaria de la columna (relleno tipo C
18
) y la
composicin de la fase mvil lo cual da lugar a la separacin de las especies de
inters (benceno, tolueno y etilbenceno). Las especies van eluyendo de la columna
una a una y pasan al detector donde absorben la radiacin correspondiente a la
longitud de onda seleccionada (Skoog H,. 2002), 254 nm, esta absorcin queda
registrada en la pantalla del detector y el registrador muestra el pico cromatografico
correspondiente a cada especie detectada. La funcin del amortiguador de pulsaciones
es atenuar el ruido que produce la bomba y que puede dar lugar una lnea base
inestable. El traductor de presin, permite registrar los cambios de presin del
sistema, alertando posible obstruccin de las tuberas o en la propia columna por
causa de impurezas presentes en la muestra.
Procedimiento para acondicionar la Columna Cromatografica
Las columnas cromatograficas requieren para su mejor desempeo un paso
previo de acondicionamiento con la finalidad de mejorar su eficiencia en el proceso
de separacin de las especies. A continuacin se expone las etapas que se llevaron a
cabo:
Se paso acetonitrilo previamente filtrado y desgasificado grado HPLC a un
flujo de 0,4 ml/min durante 1 hora.
Se paso una solucion de acetonitrilo agua (50/50) % previamente filtrada y
desgasificada, a un flujo de 0,4 ml/min durante 1 hora.
Finalmente se paso la fase mvil acetonitrilo-agua- tetrahidrofurano. (50-40-
10) % previamente filtrada y desgasificada, a un flujo de 0,4 ml/min durante 2 horas.


136

Recomendaciones para el trabajo con sistemas de flujo
A continuacin se menciona la recomendacin ms importante para el trabajo
con sistemas de flujo, tanto el de Cromatografa Liquida como el de Screening de
Muestra:
Filtrar todas las soluciones de operacin (Fase mvil, solucin portadora,
soluciones de limpieza, etc.). Este proceso permite eliminar interferencias que pueden
afectar a la columna, tuberas y los sistemas de deteccin. Las soluciones son pasadas
a travs de un membrana de Durapore, 0.45 m de poro, 47 mm de dimetro de
Milipore, durante el proceso de filtrado al vaco se eliminan los gases disueltos (O
2
,
N
2
) y micropartculas en suspensin que pueda estar presenten dichas soluciones.
Este proceso permite eliminar interferencias que pueden afectar a la columna y al
sistema de deteccin. En la Figura 3.18 se observa el sistema de filtrado al vaci y la
forma de colocar la membrana de filtracin.

Figura 3.18 Sistema de filtracin y vista del proceso de colocacin de la membrana
de filtracin. (a) colocacin de la membrana Durapore.

a
Salida
de
vaco

137
4. Determinar las concentraciones de benceno, tolueno y etilbenceno
en muestras sintticas y muestras reales.
En este objetivo se tom a consideracin la calibracin del Sistema de Screening de
Muestras y del Sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV para la
determinacin de las concentraciones benceno, tolueno y etilbenceno en muestras
sintticas y muestras reales.
Sistema de Screening de Muestras - Construccin de la curva de calibracin:
Para la realizacin de la curva de calibracin se consider el estudio previo de los
lmites permisibles de cada una de las especies (benceno, tolueno y etilbenceno) segn la
Norma Sanitaria de Calidad del Agua Potable, publicada en Gaceta Oficial Nmero
36.395. Observndose que para el benceno el nivel de toxicidad permitido es 10 g/L
(ppb), para el tolueno 700 g/L (ppb) y para el etilbenceno 300 g/L (ppb). Esta
informacin fue un factor preponderante para la preparacin de los patrones ya que era
necesario asegurar que el primer patrn se encontrara por debajo de los 10 g/L, valor
mximo aceptable para el benceno, de manera de garantizar la presencia de esta especie
en las muestras a evaluar, por ser el compuesto aromtico de mayor riesgo. Para alcanzar
la deteccin de esta concentracin con el sistema diseado, las muestras son pre -
concentradas durante el tratamiento en un factor de 500 veces. Para la calibracin del
Sistema de Screening se prepararon tres patrones constituidos por una mezcla de los tres
aromticos antes mencionados, en un orden de concentraciones de (100, 300 y 500) g/L
El rango de longitud de onda seleccionado fue fijado entre 240 254 nm (Skoog H,.
2002). La curva de calibracin se construyo a partir de la medicin de la Absorbancia
(AU) en funcin de las concentraciones de aromticos establecidas expresadas en g/L.
Preparacin de Patrones. Para la preparacin de los patrones se procedi de la
siguiente manera: Se preparo una solucin de 1000 g/L constituida por los tres
compuestos aromticos. Para esto se tomaron 200 L de cada solucin individual de 10
ppm correspondiente a benceno, tolueno y etilbenceno, se llevaron a un matraz de 2 ml y

138
posteriormente se aforo con acetonitrilo grado HPLC. A partir de esta solucin se
realizaron las diluciones, correspondientes para la preparacin de los patrones (100, 300 y
500) g/L con los cuales se construyo la curva de calibracin, usando acetonitrilo como
solvente. El blanco utilizado fue el mismo acetonitrilo utilizado como solvente de
dilucin.

Sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV - Construccin de la curva de
calibracin:
Para la preparacin de la curva de calibracin utilizada en este sistema se tom el
mismo criterio de preparacin de la curva preparada para el sistema de Screening de
muestras. En la calibracin del sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV se
prepararon cinco patrones constituidos por una mezcla de los tres aromticos antes
mencionados, en un orden de concentraciones de (80, 90, 100, 110 y 120) g/L. La
longitud de onda seleccionada fue 254 nm (Skoog, H,. 2002). La curva de calibracin se
construy a partir del clculo de las reas de pico en funcin de las concentraciones de
aromticos establecidas expresadas en g/L.
Preparacin de Patrones: Para la preparacin de los patrones se procedi de la
siguiente manera: Se preparo una solucin de 1000 g/L constituida por benceno, tolueno
y etilbenceno. Para esto se tomaron 200 g/L de cada solucin individual de 10 ppm
correspondiente a benceno, tolueno y etilbenceno y se llevaron a un matraz de 2 ml,
posteriormente se aforo con acetonitrilo grado HPLC. A partir de sta solucin se
realizaron las diluciones correspondientes para la preparacin de los patrones (80, 90,
100,110 y 120) g/L .Con los cuales se construy la curva de calibracin, usando
acetonitrilo como solvente. El blanco utilizado fue acetonitrilo. Caracterstico de los
reactivos utilizados. Las caractersticas de los reactivos utilizados en cuanto a pureza,
proveedor, formula qumica y aplicacin se muestran en la Tabla 3.2

139
TABLA 3.2
Caractersticas de los reactivos utilizados (solventes y patrones)

3.2.3 Fase III: Propuesta
Una vez realizadas las fases correspondientes al estudio de diagnstico y factibilidad,
se procedi a la determinacin de los costos asociados a los mtodos diseados y a
establecer las pautas para la aplicacin de los mismos. La alternativa de solucin que se
propone en esta investigacin esta referida al cumplimiento de la Norma Sanitaria de
Calidad del Agua Potable, publicada en Gaceta Oficial Nmero 36.395. Los objetivos
relacionados a esta etapa se corresponden a:
5. Comparar los resultados obtenidos de las muestras estudiadas con los
lmites que establece la Gaceta Oficial de la Republica Bolivariana de
Venezuela, publicada en Gaceta Oficial Nmero 36.395.
En una primera evaluacin de las muestras se utiliz el sistema de Screening de
Muestras el cual permite establecer una respuesta positiva y/o negativa de la presencia de
Solventes y/o
patrones
Descripcin Distribuidor y N
0

de referencia
Formula del
compuesto
Aplicacin
Benceno 99.9 % pureza Aldrich
(71-43-2)
C
6
H
6

C
6
H
6
Preparacin de
patrones
Tolueno 99,9 % pureza

Aldrich
(108-88-3)
C
6
H
5
CH
3

C
6
H
5
CH
3
Preparacin de
patrones
Etilbenceno 99.9 % pureza

Aldrich
(100-41-4)
C
6
H
5
C
2
H
5

C
6
H
5
C
2
H
5
Preparacin de
patrones
Metanol 99,9 % pureza, grado
HPLC
Sigma -Aldrich

CH
4
O Preparacin de
patrones
Acetonitrilo 99, 9 % pureza, grado
HPLC
Burdick & Jackon
(CAS 75-05-8)
CH
3
CN Blanco, fase
mvil, solucin
portadora
Agua Agua ultra pura

Sistema Mili-Q
plus
H
2
O fase mvil,
solucin portadora
tetrahidrofurano. 99.9 % pureza, grado
HPLC

Mallinckrodt
ChromAR HPLC
C
4
H
8
O Fase mvil

140
compuestos aromticos. Si la respuesta es positiva se pasa a una segunda evaluacin
mediante el sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV donde se amplia el nivel
de informacin con la finalidad de verificar que los compuestos benceno, tolueno y
etilbenceno se encuentran dentro de los lmites permisibles, los cuales se muestran a
continuacin en la Tabla 3.3
TABLA 3.3
Lmites permisibles establecidos por la Normas Sanitarias de Calidad del
Agua Potable
Componentes Orgnicos Valor Mximo Aceptable.( g/L)
Benceno

10
Tolueno

700
Etilbenceno

300
Fuente: Normas Sanitarias de Calidad del Agua Potable. Nmero 36.395
6. Estimar los costos asociados al desarrollo del sistema de Screening de
Muestras y la tcnica de Cromatografa Liquida con deteccin UV.
Para llevar a cabo este objetivo se contempl las condiciones de trabajo para ambos
mtodos, de manera de verificar costos y determinar las ventajas econmicas de disear
un mtodo de screening de muestras previo a un mtodo de separacin y determinacin
como es el caso del mtodo de Cromatografa Liquida con deteccin UV.
Una vez evaluadas las alternativas para la deteccin de compuestos aromticos en
agua para consumo humano, se procedi a conocer los precios de cada uno de los
reactivos utilizados en la preparacin de las muestras, as como tambin de equipos y
materiales necesarios para la puesta a punto de los sistemas, Conociendo la cantidad de
reactivo para preparar y tratar las muestras con los sistemas estudiados en los objetivos 2

141
y 3, se determin el costo total requerido. Esta informacin es comentada ampliamente en
el capitulo IV.
7. Proponer la aplicacin del sistema de Screening de Muestras y el sistema de
Cromatografa Liquida con deteccin UV ante los organismos que se encargan
del control de calidad de aguas de consumo humano
Una vez llevado a cabo los estudios de variables de operacin determinacin
de muestras, tiempo de anlisis, cantidad, toxicidad de los reactivos empleados,
costos asociados a los equipos y materiales utilizados se establecen las pautas para
proponer su aplicacin a los organismos encargados de evaluar las especies
estudiadas en forma rutinaria y/o en aquellos casos que se observen posibles riesgos
de contaminacin de fuentes de abastecimiento por parte de agentes externos. (Ver
captulo. IV).


142
CAPITULO IV

ANLISIS DE RESULTADOS

En este captulo, se analizan los resultados correspondientes al diagnstico y
factibilidad. La tercera fase de la investigacin corresponde a la propuesta de las
metodologas diseadas, enmarcada en los objetivos 5, 6 y 7, los cuales contemplan la
comparacin de los resultados con los lmites permisibles que establece la Normativa
Nacional (Norma Sanitaria de Calidad del Agua Potable, 1998), estimacin de costos
de los mtodos propuestos y finalmente se presenta a los organismos encargados de la
evaluacin de la calidad del agua destinada al consumo humano las ventajas
derivadas del estudio.

4.1 Objetivo correspondientes a la fase de diagnstico

1. Disear un plan de muestreo en la zona de recoleccin, para las aguas de
consumo humano.
4.1.1 Determinacin del nmero de muestras matriz de seleccin
La Plantilla de seleccin de los apartamentos para la realizacin del muestreo,
se presenta a continuacin en la Figura 4.1.


143

Nota: apartamentos seleccionados para el muestreo.
Figura 4.1 Matriz de seleccin de muestreo aleatorio.

Edif. Apartamentos seleccionados
1 1.2 2.1
2 2.4 4.1
3 PB.2 2.3 4.1
4 PB.4 1.3 2.3 2.4
5 2.2 2.4 3.1 3.4 4.2
6 PB.1 PB.2 1.1 1.4 3.4
7 PB.2 PB.4 1.2 2.4
8 PB.1 2.1 2.3 3.1 3.4 4.1
9 1.2 1.3 4.1 4.4
10 2.3 4.2 4.3
11 2.2 3.2 4.3
12 PB.4 1.4 3.1 3.4 4.1
13 1.4 2.4 3.4
14 PB.4 1.2

144
4.1.2 Anlisis al instrumento aplicado a los habitantes del conjunto residencial
A continuacin se presentan en la Figura 4.2 una serie de observaciones con
respecto a la caracterstica fsica, representada en forma porcentual con respecto a las
52 muestras tomadas, destacndose un 50% correspondiente a la formacin de un
precipitado blanco en el fondo del recipiente cuando el agua es hervida.
Figura 4.2 Distribucin porcentual de los resultados arrojados por la hoja de
protocolo para la toma de muestra en relacin a la caracterstica fsica
del agua. 1. Presenta fuerte olor a cloro. 2. Al hervir se forma precipitado
blanco en el fondo del recipiente.3 Color marrn. 4. olor a barro o a tierra., 5.
El agua sale con arenilla., 6. Color amarillento.

Este hecho demuestra que no hay tratamiento para hacer el agua potable y de
acuerdo con esto se evidencia que no se hacen se llevan a cabo controles para
verificar la calidad del agua que surte a esa zona por tanto. La presencia de estos
precipitados refleja la naturaleza de las formaciones geolgicas con las que el agua ha
estado en contacto. Esto se presenta cuando al aumentar la temperatura se observa la
formacin de precipitados blanquecinos en forma de costras. La Figura 4.3 ilustra
este tipo de dureza se conoce como dureza por carbonato especialmente porque los
iones bicarbonato y carbonato con que se une el agua tiende a precipitar al llevar a
temperaturas elevadas el agua. Las aguas duras se originan en reas donde la capa
superior del suelo es gruesa y contiene formaciones de piedra caliza. Esta situacin se
explica mediante la ecuacin: CaCO
3

+ H
2
CO
3
Ca (HCO
3
)
2
. Esta dureza por
12%
50%
10%
8%
14%
6%
1
2
3
4
5
6

145
carbonato tambin se conoce como dureza temporal debido a que se puede hacer que
precipite por ebullicin prolongada (ver ecuacin) (Sawyer C, 2000).

Figura 4.3 Fuente de dixido de carbono y la solucin de sustancias que causan
Dureza (Sawyer C, 2000).

4.1.3 Valores de pH en las muestras estudiadas: El pH medido en las 52
muestras tomadas, arrojaron valores comprendidos en el intervalo de 6.5 a 7,
estos fueron comparados con los valores establecidos por la Normativa Nacional.
La cual establece que el valor deseable para el pH debe estar comprendido de 6,5

CAPA SUPERIOR DEL SUELO

Zona de intensa accin bacteriana-CO
2
en grandes cantidades
Alguna accin sobre compuestos bsicos CaCO
3
+ H
2
CO
3
Ca(HCO
3
)
2

SUBSUELO
Zona de menor accin bacteriana-CO
2
en pequeas cantidades
Accin continua sobre compuestos bsicos CaCO
3
+ H
2
CO
3
Ca(HCO
3
)
2

PIEDRA CALIZA
Zona de intensa accin qumica
CaCO
3
+ H
2
CO
3
Ca(HCO
3
)
2
MgCO
3
+ H
2
CO
3
Mg(HCO
3
)
2

G
r
i
e
t
a

Cueva
Lluvia

146
8,5 de acuerdo con esto, se evidencia que las muestra tomadas cumplen con la
Norma.
Objetivos correspondientes a la fase de factibilidad funcional

2. Disear el mtodo de Screening de muestras para la determinacin del
contenido de benceno, tolueno y etilbenceno en agua potable.
4.2 Sistema de Screening de Muestras
Este sistema fue diseado para la determinacin de compuestos aromticos
totales (benceno tolueno y etilbenceno). La metodologa se baso en identificar y
seleccionar aquellas muestras que contenan el grupo de compuestos aromticos
mencionados dentro del total del grupo muestreado. El sistema estudiado responde
los objetivos de este tipo de metodologa tales como simplificacin y rapidez
(Valcrsel, 2000).
4.2.1 Optimizacin de variables de operacin del Sistema de Screening de Muestras.
Velocidad de Flujo: para optimizar este parmetro se probaron varios tubos de bomba
peristltica de diferentes dimetro internos (0.015, 0.030, 0.045) mm. El tubo de
bomba seleccionado fue de dimetro interno de 0.045 mm el cual da como resultado
una velocidad de flujo de 5.8 mL/min. Este valor permite un tiempo de deteccin de
los compuestos en la muestra muy rpido, para un tiempo de anlisis total de 3
minutos por muestra lo cual se permite analizar 20 muestras/hora.
Volumen de inyeccin: para el estudio de esta variable se ensayaron con tres bucles
de inyeccin de diferentes volmenes (10, 20, 175) l. El bucle de inyeccin de
muestra seleccionado fue de 20 l. Este volumen resulto adecuado para el tamao de
muestra que puede colocarse dentro del espacio de la ultramicro celda (lugar donde
se lleva a cabo el proceso de absorcin de la luz). Este volumen dio lugar a valores de

147
respuesta reproducibles. Utilizando un bucle de inyeccin de 10 l se observo una
respuesta de deteccin poco reproducible y cuando se utilizaron bucles con
volmenes superiores como es el caso de 175 l se observaron valores de respuesta
negativos. En ambos casos un bucle de inyeccin muy pequeo y/o un bucle muy
grande con respecto a la capacidad de la ultramicro celda (60 l) dan lugar a valores
de absorbancia poco reproducibles y/o negativos.
Solucin Portadora: esta disolucin tuvo como funcin llevar la muestra a travs del
sistema. Por tanto se debe asegurar que tenga la polaridad adecuada para transportar
los compuestos de inters, en este caso las especies de benceno tolueno y etilbenceno.
Se prepararon diferentes composiciones de la solucin portadora (50/50 acetonitrilo/
agua y 90/10 acetonitrilo/ agua) a fin de seleccionar la mas adecuada. La solucin
portadora utilizada fue de 90/10 acetonitrilo/ agua, ya que cumpla con la condicin
establecida de polaridad. Adems, al aumentar la composicin del acetonitrilo se
garantizo mayor afinidad del medio de las muestras con la solucin portadora.
Rango de longitud de onda: el rango de longitud de onda, se selecciono de acuerdo a
la banda donde se presenta el pico de absorcin en la cual se observan las especies
(benceno tolueno y etilbenceno). Se realizaron ensayos a diferentes rangos de
longitud de onda segn datos bibliogrficos reportados por (Skoog, H. 2002) para
estudio de compuestos aromticos tales como: 190 a 500 nm, 200 a 350 nm, 230 a
260 nm, 240 a 254 nm. Seleccionando el intervalo de longitud de onda de 240 a 254
nm, en la Figura 4.4 se muestra el espectro de absorcin obtenido para el intervalo
antes mencionado. De esta manera se permiti captar la seal de los tres compuestos
aromticos estudiados. Considerando que cada especie reporta un pico de absorcin
mximo a una longitud de onda especfica comprendida dentro del intervalo
seleccionado. A continuacin en la Tabla 4.1 se observan las condiciones
experimentales optimizadas para el Sistema de Screening de compuestos aromticos.

148
Figura 4.4 Espectro de absorcin obtenido para la mezcla de compuestos aromticos
estudiados (benceno. tolueno y etilbenceno).

TABLA 4.1
Condiciones experimentales optimizadas para el Sistema de Screening de
Muestras de compuestos aromticos
PARAMETROS OPTIMIZADOS

VALORES
Velocidad de Flujo (ml/min)

5,8
Volumen de inyeccin (l)

20
Solucin portadora (v/v)

90/10, Acetonitrilo/ agua
Rango de longitud de onda (nm)

240 - 254.

4.2.2 Calibracin sistema de Screening de Muestras
Es importante recalcar que los sistemas de screening de muestras incluyen todas
aquellas metodologas analticas rpidas que presentan un mayor nfasis cualitativo
que cuantitativo (Valcrcel, 2000). El mtodo de screening diseado tiene como
objetivo identificar y seleccionar un grupo de muestras de agua en un conjunto de las
220
230
230 240 250
260 270
Wavelength (nm)

149
mismas que contengan compuestos aromticos por encima de los valores mximos
permisibles que establece la Normativa Nacional. La Tabla 4.2 muestra las Figuras de
merito del mtodo de Screening desarrollado. El criterio para la seleccin del rango
de determinacin fue acorde con los valores mximos aceptables establecidos por la
Gaceta Oficial Venezolana. El coeficiente de correlacin fue de 0,9929 lo cual indica
que la respuesta del detector guarda proporcionalidad con las diferentes
concentraciones de la mezcla de los compuestos estudiados. El lmite de deteccin
reportado fue 50 L, es importante resaltar que este valor se encuentra por encima del
valor mximo permisible para la especie benceno (10 L). Para compensar esta
limitacin instrumental la muestra es previamente preconcentrada en un factor de 500
veces. Lo cual garantiza que el valor mximo permisible para el compuesto de
benceno va hacer detectado por el mtodo de Screening de muestra propuesto.
La precisin del mtodo tambin fue estudiada. Un valor de desviacin estndar
relativa (RSD) por debajo del 10% indica una precisin aceptable para sistemas de
screening de muestras. Otra caracterstica importante es el nmero de muestras que
pueden procesarse por hora. La velocidad del mtodo queda expresada por este
parmetro (Skoog, H, 2002). El mtodo desarrollado permite procesar 20
muestras/hora, lo cual es equivalente a tres minutos por muestra, este resultado es una
herramienta a tomar en cuenta para la implementacin de un mtodo analtico
confiable, seguro y rpido ya que en un laboratorio de anlisis debe evaluarse la
calidad del agua para el consumo humano, donde la respuesta inmediata es conocer si
el agua evaluada es apta o no apta.


150

TABLA 4.2
Figuras de mrito para el sistema de Screening de Muestras en la
determinacin de compuestos aromticos en aguas
destinadas al consumo humano.

CARACTERSTICAS

RESULTADOS
Especies determinadas Compuestos aromticos totales
Ecuacin (*) S = 0,000393C 0,0045
Coeficiente de correlacin 0,9929
R
2
(del test de ANOVA) (%) 98,6
RSD (%) 8,3
Rango de determinacin (g/L) 100 - 500
Desviacin estndar de residual , S
y/x
0,01098
N de muestras / hora 20
Lmite de deteccin (**) (g/L) 50
(*)Variable dependiente: S seal
Variable independiente: C, (g/L) benceno., tolueno y etilbenceno.
(**) Se define como la seal ms tres veces su desviacin estndar
RSD: Desviacin estndar relativa.

3. Disear el mtodo de Cromatografa Lquida con deteccin UV para la
determinacin de benceno, tolueno y etilbenceno en aguas destinadas al
consumo humano.
4.3 Sistema de Cromatografa lquida con deteccin UV

Este sistema consisti en la separacin y cuantificacin de las especies
aromticas estudiadas (benceno. tolueno y etilbenceno). En este proceso los
componentes separados emergen en orden creciente de interaccin con la fase
estacionaria. El componente menos afn a esta fase es el benceno y por lo tanto es la
especie que aparece primero luego el tolueno y por ltimo el retenido ms

151
fuertemente etilbenceno. La Figura 4.5 muestra el cromatograma de de las tres
especies estudiadas.
Figura 4.5 Condiciones cromatogrficas: columna Sunfire C
18.
5m de dimetro
de partcula, dimensiones150 mm de longitud por 3 mm de dimetro
interno. Elucin isocrtica usando (50/40/10 acetonitrilo/agua/tetrahidrofurano
v/v). Flujo de 0,4 ml/min. Volumen de inyeccin 15 l Especies
separadas (110 g/L de patrn de mezcla):1.solvente; 2.Benceno; 3.
Tolueno; 4. Etilbenceno.
Tiempo (min)
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

(
A
U
)
1
2
3
4
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Tiempo (min)
1
2
3
4
a b

152
4.3.1 Variables de operacin del Sistema de Cromatografa Lquida
Fase mvil, rgimen de separacin y flujo: La fase mvil seleccionada fue (50/40/10
acetonitrilo/agua/tetrahidrofurano v/v). El rgimen de separacin fue del modo
elucin isocrtica con un flujo de 0,4 mL/min. Estas condiciones de cromatograficas
fueron previamente optimizadas por Manganiello y Mendoza, 2006.
Columna cromatografa: se utiliz la columna cromatografica previamente estudiada
en los trabajos de Manganiello y Mendoza, 2006, caracterizada por un relleno de
carbono C
18
con un tamao de partcula de 5 m, la cual arrojaba resultados ptimos
para lograr la separacin de los componentes benceno, tolueno y etilbenceno.
Detector de UV: en el detector se procedi a fijar los parmetros de operacin a
medida que se desarrollaba el proceso de separacin, donde qued establecido para el
anlisis de compuestos aromticos una longitud de onda de 254 nm para observar una
buena definicin de los picos, se utilizo una atenuacin instrumental de de 0,01
AUFS. Para lograr este valor de atenuacin se modifico en varias oportunidades
variando entre (0,01; 0,05; 0,025; 0,050; 0,01; 0,100) AUFS, notando que a menor
atenuacin existe mayor sensibilidad para la deteccin de las tres especies de estudio.
Registrador: Con la finalidad de obtener un pico bien definido en el papel a lo largo
de las inyecciones y tomando como base a la investigacin de Manganiello y
Mendoza, 2006, se procedi a fijar las unidades en el registrador en 40 cm/h.
Volumen de Inyeccin: Se estudiaron diferentes volmenes de inyeccin de la mezcla
de los compuestos aromticos. Estos volmenes oscilaron entre (5, 10, 15 y 20) l.
Siendo el volumen de 15l el ms ventajoso, ya que cuando se inyectaron cantidades
de 5 l.y 10 l se observo poca definicin en la separacin de las tres especies y
cuando se utilizaron volmenes de inyeccin 20 l los picos de las diferentes especies
de estudio se solapaban entre si. Por tanto el valor de 15 l seleccionado permite una
ptima separacin de los picos correspondientes a los compuestos de benceno,

153
tolueno y etilbenceno. A continuacin se presentan en la Tabla 4.3 las variables de
operacin del sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV.
TABLA 4.3
Condiciones experimentales optimizadas para el equipo de Cromatografa
Lquida para la determinacin de compuestos aromticos
Atenuacin (AUFS) 0,100
Velocidad del papel (cm/h) 40
Volumen de inyeccin (l) 15
Velocidad de flujo (ml/min)

0,4
Longitud de onda (nm) 254

4.3.2 Calibracin sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV
Las Figuras de merito para el sistema de Cromatografa lquida con deteccin
UV se muestran en la Tabla 4.4. Se prepararon curvas de calibracin para cada
una de las especies de estudio (benceno. tolueno. etilbenceno). El criterio para la
seleccin del rango de determinacin fue acorde con los valores mximos
aceptables establecidos por la Gaceta Oficial Venezolana. Los coeficientes de
correlacin para cada uno de los compuestos estudiados. Benceno, tolueno y
etilbenceno fueron: 0,9987; 0,9912; 0,9991 respectivamente. Estos valores
indican que la respuesta del detector guarda proporcionalidad con las diferentes
concentraciones de la mezcla de los compuestos estudiados. Los lmites de
deteccin reportados para las especies fueron para el benceno 50 L; tolueno
20 L; y etilbenceno 40 L. Es importante resaltar que el valor para el compuesto
de benceno se encuentra por encima del valor mximo permisible (10 L). Para
compensar esta limitacin instrumental la muestra es previamente preconcentrada
en un factor de 500 veces, tal como se comento para el sistema de Screening de
muestras. La precisin del mtodo tambin fue estudiada. Los valores de
desviacin estndar relativa (RSD) para cada especie se encontraron en el

154
intervalo de 0.20 a 1.61 por ciento. Estos valores muestran la alta precisin del
mtodo diseado y constituye un parmetro de calidad importante (Skoog, H,
2002). El nmero de muestras que pueden procesarse por hora fueron cinco
muestras, es importante destacar que aunque hay una inversin mayor de tiempo
por muestra esto se traduce a una mayor informacin por muestra evaluada. La
metodologa diseada permite determinar la concentracin de benceno, tolueno y
etilbenceno que estn presentes en cada una de las muestras estudiadas, esto
constituye una ventaja desde el punto de vista ambiental. Porque la especie de
benceno establece el grado de toxicidad de una fuente de agua para consumo
humano, dado que el limite mximo permisible de este compuesto es el mas bajo
(10 g/L).
TABLA 4.4
Figuras de mrito del equipo de Cromatografa Liquida para la determinacin
de benceno, tolueno y etilbenceno.
Especie Benceno Tolueno Etilbenceno
Ecuacin (*) S=0,0485C-1.87 S=0,065C-0,.7 S=0,0495C-1,46
Coeficiente de
correlacin
0,.9987 0,9912 0,9991
RSD (%) 1,61 0,23 0,20
R
2
(del test de ANOVA)
(%)
99,.75 98,.25 99,.83
Rango de determinacin
(g/L)
80-120 80-120 80-120
Desviacin estndar de
residual , S
y/x
0,.0379 0,1369 0,.0325
Lmite de deteccin
(g/L)(**)
50 20 40
(*)Variable dependiente: S: seal
Variable independiente: C, (g/L)
(**) Se define como la seal ms tres veces su desviacin estndar
RSD: Desviacin estndar relativa.


155
4. Determinar las concentraciones de benceno, tolueno y etilbenceno en
muestras sintticas y muestras reales.
4.4 Determinacin de muestras sintticas mediante el sistema de Screening de
Muestras.
La aplicabilidad del mtodo de Screening fue inicialmente chequeada utilizando
muestras sintticas que contenan las tres especies de aromticos. Estos resultados se
muestran en la Tabla 4.5.
TABLA 4.5
Concentraciones de las muestras sintticas obtenidas en el sistema de
Screening de Muestras

Muestra

Especies Concentracin
aadida
(benceno, tolueno,
etilbenceno)
(g/L)
Concentracin
encontrada
(benceno, tolueno,
etilbenceno)
(g/L)
Error
(%)

1 Mezcla de
aromticos
100

90,3

-9.7
2 Mezcla de
aromticos
300

319,3 6.4
3 Mezcla de
aromticos
300

312,9 4,3
4 Mezcla de
aromticos
300 308,.7 2,9
5 Mezcla de
aromticos
500

518,1 3.6
6 Mezcla de
aromticos
500

472,3 -5.5


156
Los resultados obtenidos en la Tabla 4.5 muestran las diferencias entre las
concentraciones encontradas y aadidas presentando un error promedio de 5,4%. Se
aplic el T Test por Parejas, programa estadstico Statgraphics plus versin 3.1,
observndose que no hay diferencias significativas entre la concentracin aadida y la
concentracin encontrada. El valor del t estadstico calculado fue 0,4193 para la
mezcla de aromticos. Este valor result menor que el valor tabulado (2,015 para 5
grados de libertad y un lmite de confianza de 95%). (Farrant T, 1997). De acuerdo
con el resultado obtenido del anlisis estadstico, el mtodo de Screening de muestra
desarrollado en el presente trabajo puede ser aplicado a las muestras reales de aguas
destinadas al consumo humano. De acuerdo a (Skoog W, 1997) el porcentaje de
error negativo est referido al error relativo, una forma de ser expresado en la qumica
analtica p. 13. (anexo D)
4.4.1 Determinacin de muestras sintticas mediante el sistema de Cromatografa
Liquida con deteccin UV
La aplicabilidad del mtodo de Cromatografa Lquida fue inicialmente
chequeada utilizando muestras sintticas que contenan las tres especies de
aromticos. Estos resultados se muestran en la Tabla 4.6. Los resultados obtenidos
muestran las diferencias entre las concentraciones encontradas y aadidas
presentando un error promedio para el benceno de 0,4%, para el tolueno 1,5% y para
el etilbenceno 0,4%. Se aplic el T Test por Parejas, programa estadstico
Statgraphics plus versin 3.1, observndose que no hay diferencias significativas
entre la concentracin aadida y la concentracin encontrada. Los valores del t
estadstico calculados fueron de 1,218; -0,031 y 1,33 para el benceno, tolueno y
etilbenceno respectivamente. Estos valores son menores que el valor tabulado (1,833
para 9 grados de libertad y un lmite de confianza de 95%). (Farrant T, 1997).De
acuerdo con los resultados obtenidos del anlisis estadstico, el mtodo de
Cromatografa Liquida con deteccin UV propuesto en el presente trabajo para la

157
identificacin y determinacin de benceno, tolueno y etilbenceno puede ser aplicado
muestras reales de aguas destinadas al consumo humano.
TABLA 4.6
Concentracin de las muestras sintticas en el equipo de Cromatografa
Liquida con deteccin UV
Muestra

Especies Concentracin
aadida
(g/L)
Concentracin
encontrada
(g/L)
Error (%)

1 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
80
80
80
79,7
80,0
80,0
-0,4%
0%
0%
2 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
80
80
80
79,7
80,0
80,0
-0,4%
0%
0%
3 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
90
90
90
90,1
87,7
90,1
0,1%
-2,6%
0,1%
4 Benceno
Tolueno
etilbenceno
90
90
90
90,1
87,7
90,1
0,1%
-2,6%
0,1%
5 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
100
100
100
90,1
103,1
100,2
0,1%
3,1%
0,2%
6 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
100
100
100
90,1
103,1
100,2
0,1%
3,1%
0,2%
7 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
110
110
110
110,7
110,8
108,3
0,6%
0,7%
-1,5%
8 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
110
110
110
110,7
110,8
110,3
0,6%
0,7%
-1,5%
9 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
120
120
120
121,0
118,5
120,4
0,8%
-1,3%
0,3%
10 Benceno
Tolueno
Etilbenceno
120
120
120
121,0
118,5
120,4
0,8%
-1,3%
0,3%

158
4.4.2 Determinacin de muestras reales aplicando el mtodo de Screening de
Muestras y el mtodo de Cromatografa Lquida con deteccin UV.
En la Tabla 4.7 se muestran los resultados obtenidos para la determinacin de
los compuestos aromticos estudiados (benceno, tolueno y etilbenceno). Los
resultados alcanzados de las 52 muestras analizadas mediante el mtodo de Screening
de Muestras, provenientes del conjunto residencial Bayona Country I, no evidencian
la presencia de hidrocarburos aromticos (mezcla de benceno, tolueno y etilbenceno).
Solo cinco muestran requirieron ampliar el nivel de informacin mediante el mtodo
de Cromatografa Lquida con deteccin UV. Es importante agregar que las posibles
interferencias por parte de otros compuestos que pudieran estar presentes en las aguas
destinadas a consumo humano, fueron estudiadas previamente en los trabajos de
Manganiello y Mendoza, 2006. El uso de las minicolumnas C
18
adems de extraer
estos insumos permiten separar los compuestos de inters de posibles compuestos
obstaculizadores presentes en las aguas analizadas (Waters.2005)
TABLA 4.7
Valores de benceno, tolueno y etilbenceno obtenidos en la determinacin de
compuestos aromticos en muestras de agua destinadas al consumo humano
Mtodos desarrollados
Mtodo de Screening
de muestra.
Mtodo de cromatografa lquida con deteccin UV Muestra
Concentracin de
compuestos
aromticos (benceno,
tolueno y etilbenceno)
(g/L)
Concentracin
Benceno
(g/L)
Concentracin
Tolueno
(g/L)
Concentracin
Etilbenceno
(g/L)
1 ND -------------- ------------- -------------
2 ND ------------- ------------- -------------
3 ND -------------- ------------- -------------
4 ND ------------- ------------- -------------
5 ND ------------- ------------- -------------
6 ND ------------- ------------- -------------
7 ND ------------- ------------- -------------
8 ND ------------- ------------- -------------
9 ND ------------- ------------- -------------
10 ND ------------- ------------- -------------


159
Continuacin TABLA 4.7
11 ND ------------- ------------- -------------
12 ND ------------- ------------- -------------
13 ND ------------- ------------- -------------
14 ND ------------- ------------- -------------
15 ND ------------- ------------- -------------
16 Valor a comprobar ------------- 0,05 -------------
17 Valor a comprobar ------------- ------------- 0,15
18 ND ------------- ------------- -------------
19 ND ------------- ------------- -------------
20 ND ------------- ------------- -------------
21 ND ------------- ------------- -------------
22 ND ------------- ------------- -------------
23 ND ------------- ------------- -------------
25 ND ------------- ------------- -------------
26 ND ------------- ------------- -------------
27 ND ------------- ------------- -------------
28 ND ------------- ------------- -------------
29 ND ------------- ------------- -------------
30 ND ------------- ------------- -------------
31 ND ------------- ------------- -------------
32 ND ------------- ------------- -------------
33 ND ------------- ------------- -------------
35 ND ------------- ------------- -------------
36 ND ------------- ------------- -------------
37 ND ------------- ------------- -------------
38 ND ------------- ------------- -------------
40 ND ------------- ------------- -------------
41 ND ------------- ------------- -------------
42 ND ------------- ------------- -------------
43 ND ------------- ------------- -------------
44 ND ------------- ------------- -------------
45 ND ------------- ------------- -------------
46 ND ------------- ------------- -------------
47 ND ------------- ------------- -------------
48 ND ------------- ------------- -------------
49 ND ------------- ------------- -------------
50 ND ------------- ------------- -------------
51 ND ------------- ------------- -------------
52 ND ------------- ------------- -------------
ND: no detectado.

160
5. Comparar los resultados obtenidos de la muestra estudiada con los lmites
que establece la Gaceta Oficial de la Republica Bolivariana de Venezuela,
Nmero 36.395.
4.5 Valores de las muestras obtenidos del equipo de Cromatografa Lquida con
deteccin UV.
Una vez evaluadas las muestras en el sistema de Screening. Aquellas muestras
que arrojaron una respuesta positiva se pasaron a una segunda evaluacin mediante el
sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV, de manera de verificar que los
compuestos benceno, tolueno y etilbenceno se encuentran dentro de los lmites
permisibles segn la Gaceta Oficial Venezolana. A continuacin en la Tabla 4.8 se
establecen los resultados de las cinco muestras reales analizadas.
TABLA 4.8
Valores de las muestras obtenidos del equipo de Cromatografa
Lquida con deteccin UV.

Componentes
Orgnicos
Muestra Valores obtenidos por la tcnica
de Cromatografa Liquida.
(g/L)
Valor Mximo
Aceptable.
(g/L)
Benceno

__ ________ 10
Tolueno

1 0,05 700

Etilbenceno

2
3
4
5
0,15
0,13
0,15
0,16

300
Fuente: Normas Sanitarias de Calidad del Agua Potable. Nmero 36.395

Los resultados producidos mediante este mtodo confirman que las
concentraciones de tolueno y etilbenceno presentes en estas muestras se encuentra por
debajo del valor mximo permisible que establece la Gaceta Oficial Venezolana. La
presencia de estos compuestos fue apenas del 9,6% de la muestras. Este hecho puede
ser explicado por mantenimiento individual de las tuberas de cada apartamento

161
donde se hayan empleado materiales que puedan contener este tipo de compuestos
(pegamento, disolvente en pinturas, lacas, colas, como agente de limpieza, entre
otros) (ATSDR, 1999).
Los aportes de este trabajo demuestran el importante rol que representan los dos
sistemas de deteccin desarrollados. El sistema de Screening es simple y rpido para
la determinacin de compuestos aromticos (benceno. tolueno y etilbenceno) en
muestras de aguas de consumo humano. Este sistema presenta buena sensibilidad y
precisin y constituye una herramienta muy til cuando se considera un nmero
importante de muestras. El sistema de Screening nos da informacin de la presencia
o no presencia de las especies aromticas antes mencionadas. Si la respuesta es
afirmativa es decir que hay presencia de aromticos, entonces se pasa al otro sistema
de deteccin, Cromatografa Liquida con deteccin UV. el cual nos permite ampliar
el nivel de informacin, discriminando que especies aromticas se encuentran
presentes y sus respectivas concentraciones. Adicionalmente podemos determinar con
esta informacin el grado de toxicidad del sistema, conociendo la especie aromtica y
su concentracin. Tal es el caso del benceno, especie altamente peligrosa por su
probada accin cancerigena sobre seres vivos (Moreno, 2003).
7. Estimar los costos asociados al desarrollo del sistema de Screening y la
tcnica de Cromatografa Liquida con deteccin UV.
A Continuacin se expresan los costos de los materiales y suministros requeridos
para la aplicacin del sistema de Screening de muestra y la tcnica de Cromatografa
Liquida con deteccin UV.
4.6 Costos asociados a la preparacin de patrones y materiales: en este apartado se
contemplan los gastos de soluciones patrones de los compuestos estudiados (benceno,
tolueno y etilbenceno) y solventes. As como tambin micropipetas (accesorios para
la toma de volmenes) y dems insumos necesarios para su preparacin. Estos costos
son propios a los dos sistemas de deteccin desarrollados en el presente trabajo.

162

TABLA 4.9
Costo de los solventes utilizados en el sistema de screening y de

TABLA 4.10
Costos establecidos para los materiales requeridos para la preparacin de
patrones para el sistema de Screening y de Cromatografa Liquida con
deteccin UV
Cantidad Caractersticas costo
(Bs.F)
costo
($)
1 micropipeta digital de volumen variable 100 - 1000 l.
autoclavable. socorex (suiza) 825-1000
1.357,00

532,15
1 micropipeta digital de volumen variable 10 - 100 l.
autoclavable socorex (suiza) 822-0100
1.168,00

458,03
1 puntas amarillas 1 - 200 l para micropipetas gilson, 58,00 22,74
1 puntas azules 101 - 1000 l para micropipetas gilson,
socorex.
111,00 43,53
1 Sistema de filtracin y des gasificacin de gases.
(Bomba de vaco + embudo y matraz recolector)
6597,00 2587,06
TOTAL 9.291 3.645,51
Se consider una conversin de 1$ ~2,55Bs.F
Solventes y/o
patrones
Descripcin Distribuidor y N
0
de
referencia
costo
(Bs.F)
costo
($)
Benceno 99.9 % pureza.1 lt Aldrich (71-43-2)C
6
H
6
94,35 37,00
Tolueno 99,9 % pureza.1 lt Aldrich
(108-88-3)C
6
H
5
CH
3

49,22 19,30
Etilbenceno 99.9 % pureza. 1 lt Aldrich
(100-41-4) C
6
H
5
C
2
H
5

67,58 26,50
Metanol 99,9 % pureza, grado
HPLC. 2,5 lt
Sigma -Aldrich

91,00 35,69
Acetonitrilo 99, 9 % pureza,
grado HPLC.2,5 lt
Burdick & Jackon
(CAS 75-05-8)
248,00 97,25
tetrahidrofurano. 99.9 % pureza, grado
HPLC. 4 lt
Mallinckrodt ChromAR
HPLC
482,00

189,02

163
4.6.1 Sistema de extraccin y preconcentracin: en este apartado se consideran los
costos asociados a la extraccin de los tres compuestos aromticos de estudio, de las
muestras de agua destinadas al consumo humano. Estos costos al igual que los
calculados para la seccin anterior son propios de los dos mtodos desarrollados

TABLA 4.11
Costos de los materiales necesarios para la realizacin de la extraccin
preconcentracin de las muestras de benceno, tolueno y etilbenceno.

Suministro Caractersticas costo
(Bs.F)
costo
($)
Bomba peristltica modelo: Hp 89052A Hewlett
Packard
4757.03 1865.5
Tubos de bomba silicn de dimetro interno 0.110 mm
132.60 63.77
Mini columnas
(Cartucho SepPaK)
relleno C
18.
cuerpo
de

polietileno
(10 unidades por paquete)

1,074.58 421,40
4.6.2 Sistema de screening: en esta seccin se describen los costos inherentes al
diseo del Sistema de Screening propiamente dicho.
TABLA 4.12
Costos de los equipos utilizados para la aplicacin del sistema
de screening de Muestras.
Equipo Caractersticas costo
(Bs.F)
costo
($)
Ultra micro celda de
flujo,Detector UV
Sistema de registro de
datos
volumen 60 l, Hewlett-packard (5061-
3395)
modelo Hewlett-packard 8452A
9580,35 3.757,00
Bomba peristltica modelo HP 89052A, Hewlett-packard 4757.03 1865.5
Tubos de bomba material resistente a los solventes orgnicos
y dimetro interno es 0,045 mm.
132.60 63.77
Vlvula de inyeccin
Rheodyne modelo 5041, 0,8 mm de paso),
con un lazo de inyeccin de 20 L.
476,72 186,95
TOTAL 14.946,70 5873.22

164
4.6.3 Sistema de cromatografa liquida con deteccin UV: en este apartado se
describen los costos asociados al sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV
exclusivamente.
TABLA 4.13
Costo de los equipos utilizados para la aplicacin del sistema de

Equipo Caractersticas costo
(Bs.F)
costo
($)
Sistema de bombeo modelo 510 HPLC, Waters. 42717,60 16.752,00
Sistema de
inyeccin de
muestras
modelo U6K, Waters

4029,.00 1.580,00
Jeringa de
inyeccin
capacidad 25 l, modelo
Hamilton, Waters
79.05 31,00
Registrador
Modelo Perkin Elmer, R50.
3825.00 1500,00
Columna
cromatografica
Modelo Sunfire C
18
, 5m

3825.00 1500.00
Detector UV modelo 2485, Waters. 5069,41 12.927,00

TOTAL
59.545,06 34.290,00

4.6.4 Comparacin de Costos para ambos sistemas de deteccin: Las tablas
4.12 y 4.13 muestran los costos asociados al sistema de Screening de Muestras y al
sistema de Cromatografa Liquida con deteccin UV respectivamente. Donde se
revela que los costos del sistema de Screening con respecto al sistema
Cromatogrfico es aproximadamente 75 % ms econmico. Este resultado confirma
la utilidad de un sistema de Screening previo a un sistema de separacin y
determinacin. El presente trabajo no sugiere la eliminacin del sistema de
Cromatografa sino la implementacin del sistema de screening con la finalidad de

165
ahorrar tiempo de anlisis, costos de reactivos y aumentar la vida til de los equipos
utilizados para estos sistemas.
7. Proponer la aplicacin del sistema de Screening y la tcnica de Cromatografa
Liquida con deteccin UV ante los organismos que se encargan del control
de calidad de aguas de consumo humano.
4.7 Propuesta de aplicacin del sistema de Screening y la tcnica de
Una vez evaluadas las caractersticas, el diseo y las condiciones de operacin
del sistema de Screening, es conveniente recalcar las cualidades que lo identifican
tales como: permite anlisis rpidos y sencillos mediante un tiempo de respuesta
breve, lo que implica que puede ser utilizado para la determinacin de un nmero
elevado de muestras, con un considerable ahorro de costos de operacin y capacidad
de respuesta. No obstante, este sistema combinado con el sistema de Cromatografa
Lquida con deteccin UV, constituye un equipo de trabajo a considerar para lograr
ahorro en los suministros utilizados en la aplicacin de la tcnica cromatogrfica, ya
que utilizando previamente la tcnica de Screening se permite medir la presencia o
no de compuestos aromticos totales, para luego ampliar la informacin,
determinando cada especie aromtica con su respectiva concentracin con la tcnica
de Cromatografa Liquida. Adems, en su forma clsica aplicar, slo el anlisis por
Cromatografa Lquida con deteccin UV implica un mayor tiempo durante el
proceso de anlisis y un mayor gasto de insumos que repercuten en la eficacia de los
anlisis, llegando hacer en algunos casos una aplicacin innecesaria de llegarse a
observar ausencia de la captacin de una determinada especie con lo cual se podra
haber evitado su operacin si se hubiese pasado previamente por un Screening de
Muestras. Por tanto, esta metodologa permite ser aplicada en cualquier laboratorio de
calidad de aguas a un costo moderado.

166
En este sentido, una revisin llevada cabo de manera local permiti indagar
acerca de cuales son los laboratorios que determinan aromticos y bajo que tcnica lo
realizan en el Estado Carabobo, para lo cual se contacto al: Laboratorio
Anmiproquim, donde se informo que no miden aromticos sino que trasladan las
muestras a la Universidad simn Bolvar. Adems se informo que Hidrocentro, en su
sede de la Planta de tratamiento Alejo Zuloaga no mide aromticos. Segn afirmacin
de L. Medina (entrevista personal, marzo, 2008).


CAPTULO V

CONCLUSIONES

El diseo estadstico determin el nmero de muestras analizadas (52
apartamentos) para determinar la posible contaminacin por compuestos
aromticos.
El sistema de Screening de muestras fue diseado para reportar presencia
y/o ausencia de compuestos aromticos totales. Permiti evaluar 20
muestras /h con un gasto mnimo de solvente y reactivos.
Del total de muestras evaluadas por el Sistema de Screening slo 5 resultaron
positivas, stas fueron analizadas por el sistema de Cromatografa Lquida,
cuyas concentraciones se hallaron por debajo de los valores mximos
permisibles que establece la Gaceta Oficial para las especies detectadas de
tolueno y etilbenceno.
El agua proveniente del pozo de abastecimiento de la zona de estudio, no
presenta contaminacin por compuestos aromticos del tipo benceno, tolueno
y etilbenceno.
Los sistemas diseados, aplicados en forma secuencial aportan a los
laboratorios de rutina donde se procesan gran cantidad de muestras de agua,
rapidez, ahorro del gasto de reactivo, disminucin de mano de obra,
simplificacin del anlisis. Adems da respuesta si una determinada zona
presenta contaminacin o no permitiendo establecer el grado de
contaminacin al conocer las especies que se encuentran presentes.

.Capitulo V. Conclusiones y recomendaciones Aleyda L. Montanez Palencia

115
Los costos del sistema de Screening con respecto al sistema Cromatogrfico
es aproximadamente 75% ms econmico, constituyendo un factor indicativo
de justificacin para su implementacin en los laboratorios de alto
desempeo.
En base a lo expuesto anteriormente, es factible la implementacin de los
sistemas propuestos en la presente investigacin, por parte de los organismos
que se encargan de la vigilancia de la calidad del agua de consumo.
Es importante recalcar que los resultados obtenidos durante la investigacin
tienen un comportamiento temporoespacial, es decir, la ausencia de
compuestos aromticos particularmente benceno, tolueno y etilbenceno en el
agua potable que consumen los habitantes del conjunto residencial, constituye
un hecho en la actualidad, pero no garantiza que sean perdurables en el
tiempo, sobretodo si el pozo de abastecimiento no recibe el tratamiento
adecuado.

.Capitulo V. Conclusiones y recomendaciones Aleyda L. Montanez Palencia

116
RECOMENDACIONES

Para prever la contaminacin de agua subterrnea y superficial se debe
concientizar a la poblacin en lo concerniente a la prohibicin de descargas en
alcantarillados sanitarios y pluviales cercanos a pozos de abastecimientos.
Se sugiere el acoplamiento del sistema de Screening de muestras al sistema de
Cromatografa Lquida con deteccin UV, como una excelente alternativa que
permita reducir el tiempo de anlisis al momento de procesar un nmero
significativo de muestras.
El anlisis de las aguas para consumo humano es vital para el desarrollo de la
poblacin, por tanto se requiere agotar recursos tcnicos, econmicos y
humanos, con el objeto de ofrecer agua de ptima calidad.
En referencia al conjunto residencial Bayona country I y como bien lo
establece la Gaceta Oficial Nmero 36.395 deben realizarse anlisis
peridicos a esta agua con el propsito de brindar bienestar a esta comunidad.

Bibliografa Aleyda L. Montaez Palencia
118 118
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125
ANEXO A

Sistema de tuberas pertenecientes al conjunto residencial
Bayona country I

126
Anexo B fotos de la Avenida valencia

En las fotos se muestran diferentes vistas de la Avenida Valencia donde se puede
observar la presencia de talleres mecnicos a lo largo de la va.

127

128
Anexo D

Error relativo expresado en las Tablas del captulo IV.

El error relativo E
r
, viene dado por la expresin:

100 *
Xv
Xv Xi
Er

=

Donde:

Xi: representa el valor menor.
Xv: representa el valor mayor.

El error relativo tambin se puede expresar en tantos por mil (%). As el error relativo
de la medida de los datos Tabla 4.5 y Tabla 4.6 se puede expresar como 9,7.
(Skoog W,1997
129
130
131

Aleyda Montañez

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AGUA POTABLE MEDIANTE SCREENING DE MUESTRAS

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