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COCOS GRAM (-) AEROBIOS Y ANAEROBIOS

FACULTATIVOS
FAMILIA NEISSERIACEAE
GNERO NEISSERIA
Neisseria Meningitidis
I. Caractersticas de familia. Especies
II. Accin patgena e inters clnico
III. Aislamiento. Caracteres bioqumicos. Diagnstico bacteriolgico
Neisseria Gonorrhoeae
I. Caractersticas de familia. Especies
II. Accin patgena e inters clnico
III. Aislamiento. Caracteres bioqumicos. Diagnstico bacteriolgico
GENERO MORAXELLA CATARRHALIS
IV. Caractersticas de familia. Especies
V. Accin patgena e inters clnico
VI. Aislamiento. Caracteres bioqumicos. Diagnstico bacteriolgico
COCOS GRAM (-) AEROBIOS Y ANAEROBIOS FACULTATIOS
Los microorganismos que se encuentran en esta seccin corresponden a cocos aerobios o anaerobios
facultativos que pertenecen a un amplio grupo de microorganismos con caractersticas bioqumicas !
genticas m"s o menos distintas aunque ta#onmicamente se estudian de forma con$untan. Dentro de este
grupo se estudia%
&nero Neisseria
Moraxella catarrhalis
GNERO NEISSERIA.
El gnero 'eisseria se inclu!e en la familia 'eisseriaceae el cual se encuentra en a seccin ( del
)anual de *erge!+s son aerobio e!ri"!o. ,ienen forma "o"oi#ea $ % "ara a#$a"e&!e a'(a&a#a lo
que les confiere el a'e"!o #e )ra&o #e "a*+ con tendencia a agruparse en #i'(o"o"o, se ti-en de ro$o
con la tincin de &ram. .on i&-./i(e &o *or-a& e'ora. Estos microorganismos son "a'&.*i(o ! se
desarrollan me$or en a-bie&!e 01-e#o. /roducen "a!a(aa 2 $ o3i#aa 2, 0tili1an los a12cares como
fuente de energa acidificando el medio.
.on patgenas estrictas del 3ombre aunque algunas especies son saprofitas de las mucosas.
CLASIFICACI4N5 ES6ECIES M7S IM6ORTANTES
El gnero Neisseria tiene tras especies importantes%
I. Neisseria !eningitidis. Es un microorganismo estricto que necesita un medios especficos para
ser cultivada a temperatura 456478C. Es patgena ! produce -e&i&)i!i.
II. Neisseria gonorrhoeae. Es una ba"!eria e3i)e&!e 8%e re8%iere& "%(!i/o e'e"9*i"o !
enriquecidos con C9
:
con una temperatura de 456478C. .on sensible a agentes e#ternos. .on
patgenas para el 3ombre ! producen )o&orrea.
III. Neisseria sa"r#$itas. .on microorganismos 'o"o e3i)e&!e, "re"e& e& -e#io #e "%(!i/o
)e&era(e ! comunes a temperatura ::6458C. ;esisten a los agentes e#ternos ! no son patgenas
para el 3ombre
ACCI4N 6AT4GENA E INTERS CL:NICO
I. Neisseria !eningitidis.
El meningococo es par"sito obligado no se encuentran libres en la naturale1a. .uelen asociarse
formando diplococos. Afecta especialmente a ni-os entre los < meses ! los 5 a-os coloni1a las
mucosas orofarngea ! nasofarngea es com2n el estado de portador del microorganismo sin sntomas.
;especto a su estructura antignica% depende de la c"psula membrana ! de presencia de fimbrias.
La ";'%(a presenta una gran resistencia a ser destruida ! contiene polisac"ridos que permiten
dividir al meningococo en serogrupos. Los m"s patgenos son A * ! C ! los m"s frecuentes
en nuestros medio el serotipo * ! C.
La membrana contiene 'ro!e9&a que tienen una accin to#ica sobre las clulas que invaden.
La *i-bria facilitan la ad3erencia a las clulas de las mucosas respiratorias.
La va de entrada es la respiratoria coloni1ando las mucosas del aparato respiratorio superior
atraviesan la mucosa farngea pasa al torrente sanguneo causando bacteriemia que puede ser
transitoria pero durante la cual se locali1a en las meninges produciendo un cuadro de -e&i&)i!i< (os
procesos infecciosos varan desde una sepsis oculta con recuperacin r"pida 3asta una enfermedad
fulminante.
.uele comen1ar por una rinofaringitis leve que evoluciona complic"ndose a bronquitis afectando
m"s a ni-os. =iebres cefaleas vmitos ! rigide1 muscular particularmente en la nuca acompa-ada de
estupor u obnubilacin.
En ocasiones se presenta una -e&i&)o"o"e-ia es decir una septicemia con o sin meningitis es una
enfermedad que pone en peligro la vida. La trombosis de los peque-os vasos ! la afectacin
multiorg"nica son los rasgos caractersticos. .on frecuentes las petequias de peque-o tama-o en tronco
! e#tremidades son indicativas de complicaciones 3emorr"gicas coagulopatas ! s3oc> sptico cu!o
pronstico es grave.
La meningitis meningoccica es mas frecuente en la infancia ! durante os meses fros ! puede
presentarse en brotes epidmicos.
/ara efectuar el #ia)&.!i"o #e (a -e&i&)i!i 'or -e&i&)o"o"o e #ebe !o-ar %&a -%e!ra #e
LCR ! dada la labilidad de este microorganismo debe trasladarse el LC; al laboratorio ! procesarse
r"pidamente. El tubo para cultivo debe mantenerse a temperatura ambiente ! el LC; reservado para
otras pruebas en la nevera. La /C; es un mtodo sensible especfico ! r"pido los resultados est"n
disponibles en ? 3oras !a que el tratamiento tiene que iniciarse lo antes posible.
.e disponen de vacunas preparadas con los polisac"ridos capsulares serogrupos A C @ AB45.
II. Neisseria gonorrhoeae.
.on par"sitos obligados para el 3ombre. 'o es parte de la flora normal de los seres 3umanos. .olo
se encuentra en la mucosa de regiones genital ! anorrectal de la orofaringe o de la con$untiva en el
momento de la infeccin. /resenta afinidad por las mucosas urogenitales se trasmite por va se#ual.
;especto a su estructura antignica% es parecida al meningococo.
La membrana contiene una serie de 'ro!e9&a5 6or, O'a, Ra-' que producen diferentes
acciones t#icas con distintas caractersticas antignicas.
/resenta *i-bria que facilitan la ad3erencia a las mucosas dificultando la fagocitosis.
/osee una e&#o!o3i&a que inactivan los anticuerpos cercanos a la bacteria.
Go&orrea es una infeccion genital se transmite por contacto se#ual incluso por relaciones
se#uales rectales ! se#o orogenital. ,ambin puede diseminarse de una madre infectada al recin
nacido durante el parto Coftalmia neonatalD. ,ras un contacto se#ual los gonococos se ad3ieren a la
mucosa urogenital ! posteriormente penetran a los te$idos produciendo endoto#inas provocando una
irritacin de la 1ona afectada.
E& (o /aro&e 'ro#%"e %re!ri!i '%r%(e&!a con disuria ! e#udado uretral. El periodo de
incubacin del microorganismo varia entre B a BE das. La ma!ora de los 3ombres presentan sntomas
agudos pero en ocasiones 3a! casos asintom"ticos. El e#udado es purulento a mucoide que depende
del periodo de incubacin ! de si el paciente 3a orinado recientemente. .i la infeccin ascendente no
se trata puede dar lugar a epididimitis prostatitis epididimoorquitis ! estenosis en la uretra.
,ambin e#iste gonorrea orofarngea ! anal en 3omose#uales ! bise#uales generalmente son
asintom"ticos pero en ocasin es se producen 3emorragias ! tenesmo Cesfuer1o inefica1 ! doloroso
para evacuar la ve$igaD
En las mu$eres causa infeccin del "+r/i3 %!eri&o CcervicitisD que puede ascender al 2tero
causando e&#o-e!rioi, a('i&)i!i Cinflamacin de las trompasD aguda produciendo cicatrices en las
trompas de =alopio embara1os ectpicos ! esterilidad. /eritonitis siendo una de las causas de
e&*er-e#a# i&*(a-a!oria '+(/i"a. El periodo de incubacin vara de F6BE das ! en ambos se#os
puede producir infeccin rectal CproctitisD
Go&o"o"e-ia son las infecciones gonoccica disemina CI&DD con septicemia tambin se pueden
presentar infecciones de la piel ! de las articulaciones. Las manifestaciones clnicas de I&D son fiebre
lesiones 3emorr"gicas en piel artralgias migratorias artritis supurativas de rodillas tobillos.
,ras la infeccin en las mu$eres particularmente se produce un estado de portador asintom"tico en
el crvi# uretra ! recto. Durante el parto la mu$er infectada puede infectar la con$untiva del recin
nacido dando lugar a una con$untivitis purulenta.
AISLAMIENTO. CARACTERES BIO=U:MICOS. >IAGN4STICO BACTERIOL4GICO.
A. NEISSERIA MENINGITI>IS
?. To-a #e -%e!ra.
El LCR se obtiene por puncin lumbar se dividir" en tres tubos el B
er
tubo se utili1ar" para la
tincin ! serologa el :8 tubo para cultivar ! el 4
er
tubo se reali1ar" el 3emocultivo.
,ambin se recoge a&)re $ e3%#a#o *ar9&)eo. .e deber"n e#aminarse lo antes posible ! si 3a!
que transportarla se utili1a un medio de transporte como el ,3a!er6)artin
@. E!%#io -i"ro".'i"o.5 el B
er
tubo de LC; se centrifuga ! con el sedimento se reali1a%
Ti&"i.& #e Gra- se observan diplococos caractersticos de color ro$o. Cuando te-imos por
&ram la sangre perifrica se observan microorganismos $unto con los leucocitos.
Ti&"i.& #e aA%( #e -e!i(e&o. Con el sobrenadante se estudian las globulinas ! la alb2mina.
B. Ai(a-ie&!o $ "%(!i/o. .e siembra el :8 tubo
Agar sangre ! agar c3ocolate. En agar c3ocolate las colonias se
observan de tama-o mediano lisas redondas 32medas gris a
blancaG las cepas capsuladas son mucoidesG puede 3aber un tinte
verdoso en el agar por deba$o de la colonia.
Agar )ueller6Hinton enriquecido con C9
:

)edio ,3a!er6)artin se compone de agar c3ocolate suplementado
con antibiticos para in3ibir microorganismos.
)edio 'eI @or> Cit! C'@CD parecido al ,a!er )artin

C. 6r%eba #e i#e&!i*i"a"i.&5
Ca!a(aa 2
9#idasa J
G(%"oa 2 La identificacin definitiva depende de la deteccin de "cido producido a
partir de la glucosa pero no de otros a12cares por un metabolismo o#idativo.
Ma(!oa 2
>Naa -
Re#%""i.& #e &i!ra!o a &i!ri!o (VD-)
Ga--a-)(%!a-i( a-i&o'e'!i#aa 2
6&alactosidasa 6
.istemas multipruebas% ;I) 'eisseria H'ID
E. Sero!i'i*i"a"i.&5
Inmunofluorescencia del LC; o suero
Contrainmuno6electroforesis. ELI.A
/C;
E#isten en el comercio antisueros para la identificacin de '. meningitidis serogrupos
A * C @ ! AB45 los tipos que causan enfermedad sistmica con ma!or frecuencia.
F. A&!iobio)ra-a
6lactamasa CJD% La produccin de betalactamas en 'eisseria meningitidis es en e#tremo
rara pero se est" empe1ando a observar una sensibilidad menos a la penicilina. 'o 3a!
mtodos ptimos de laboratorio establecidos para detectar este nivel relativamente ba$o
de resistencia ! se desconoce su impacto sobre la eficacia clnica de la penicilina. La
Crecimiento en
agar chocolate a
37C en
atmsfera de CO
2
teraputica de apo!o para el s3oc> es el tratamiento con antimicrobiano con penicilina
ceftria#ona o cloranfenicol.
B. NEISSERIA GONORRHOEAE.
?. To-a #e -%e!ra. La muestra se toma de la primera 3ora de la ma-ana antes de la primera
miccin. Las muestras obtenidas con 3isopos son aceptables si se siembra dentro de las < 3oras
desde la recoleccin. En el 3ombre se toma la muestra de la uretra en los 3omose#uales del
recto ! en la mu$er uretra cuello uterino ! recto. El me$or mtodo para el cultivo ! el transporte
de 'eisseria gonorr3oeae es inocular el
agar de inmediato despus de la
recoleccin de la muestra ! colocar el
medio en una atmsfera con elevada
concentracin de CC9
:
D para su
transporte.
Si!e-a GEMBEC5 la placa contiene
-e#io #e T0a$er-Mar!i& -o#i*i"a#o.
El comprimido generador de C9
:
se
coloca en el pocillo ! la placa se cierra !
se coloca en una bolsa de pl"stico con
cierre 3ermtico. La 3umedad en el agar
activa el comprimido lo que genera una
atmsfera de C9
:
en la bolsa. La
superficie del agar se estra en forma
cru1ada para obtener colonias aisladas !
la placa se incuba en C9
:
al 465K.
El sistema LE)*EC debe incubarse a 456478C apenas se recibe la placa en el laboratorio. Los
lquidos corporales articulares o LC; deben mantenerse a temperatura ambiente o colocarse a
478C antes de ser cultivados !a que son sensibles al fro. ,odo volumen de lquido claro ma!or
de B ml en el que se sospec3a la presencia de cualquiera de estos patgenos debe centrifugarse a
temperatura ambiente a B5EE rpm durante B5 min. Luego se elimina el sobrenadante ! el
sedimento se pasa a la agitadora vorticial ! sembrarlo en los medios apropiados. ,odas estas
muestras deben ser manipuladas en cabinas de bioseguridad.
@. E!%#io -i"ro"o'i"o. Ti&"i.& #e Gra-5 se reali1a un frotis para reali1ar esta tincin ! se
observan diplococos gramnegativas con los lados ad!acentes aplanadosG morfologa tpica de
granos de caf $unto con otros grmenes con morfologa parecida que puede dar lugar a error si
el e#amen diese negativo no indica ausencia de gonococos.
B. Ai(a-ie&!o $ "%(!i/o. )edos selectivos ! generales el
gonococo es m"s problem"tico &o "re"e e& a)ar a&)re $
re8%iere %& a)ar "0o"o(a!e e&ri8%e"i#o 'ara e( "re"i-ie&!o. .e
incuba a temperaturas 456478C con un grado de 3umedad al 7EK !
C9
:
al 56BEK.
C. Me#io a)ar "0o"o(a!e% medio general ! no selectivo para algunas
cepas gonoccicas que son in3ibidas por la vamcomicina presente
en la ma!or parte de los medios selectivos. En agar c3ocolate se
observan colonias peque-as blanco6gris"ceas conve#as
transl2cidas brillantes con bordes lisos o irregularesG puede 3aber 3asta cinco tipos de colonias
diferentes en las placas.
Me#io T0a$er - Mar!i& medio base de agar c3ocolote enriquecido con suplementos ! los
antimicrobianos colistina Cin3ibe bacilos gram6D nistatina Cin3ibe las levadurasD !
vancomicina Cin3ibe las bacterias gram JD. Me#io T0a$er - Mar!i& -o#i*i"a#o (MTM)5
lleva lo mismo que el anterior nombrado inclu!endo trimetoprim Cin3ibe el crecimiento
conflu!ente de /roteusD.
Me#io Mar!i& LeHi (ML)5 similar al ),).
Me#io NeH YorI Ci!$ (NYC)5 medio transparente con sangre lisada de caballo plasma de
caballo diali1ado de levadura ! los mismos antibiticos que en el ),).
E. 6r%eba #e i#e&!i*i"a"i.&5
Ca!a(aa 2
9#idasa J
G(%"oa 2
Ma(!oa J
>Naa (-)
Ga--a-)(%!a-i( a-i&o'e'!i#aa J E!a 'r%eba #i*ere&"ia (a #o &eieria.
;educcin de nitritos C6D
6&alactosidasa C6D
.istemas multipruebas% ;I) 'eisseria! H'ID
F. 6r%eba ero(.)i"a.
Hemoaglutinacin
Inmunofluorescencia indirecta
/rueba de ELI.A
6r%eba Mo&o"(o&a( I && test% consiste en determinar a travs de los anticuerpos
monoclonales e( ero)r%'o 'er!e&e"ie&!e a (a %be'e"ie #e &eieria.
E&a$o -o(e"%(are "o-er"ia(e5 Estos 3an sustituido a los ensa!os moleculares antiguos como
el ELI.A. En la actualidad se utili1an ensa!os con o&#a #e >NA &o a-'(i*i"a#o que tienen un
sistema de deteccin quimioluminiscente para la determinacin directa de la presencia de ;'A
ribosmico Cr;'AD gonoccico en muestras genitales ! con$untivales. Esta prueba se reali1a en
pacientes de alto riesgo es r"pida Cresultados en : 3orasD ! es adecuada para la deteccin simult"nea
de muc3os pacientes.
La venta$a que tiene este mtodo es que tiene la capacidad de identificar C3lam!dia trac3omatis
de las misma muestra en el mismo momento. El D'A de 'eisseria &onorro3oeae puede encontrarse
en una muestra 3asta 4 semanas despus del tratamiento e#itoso de modo que los ensa!os moleculares
amplificados no pueden utili1arse para evaluar la curacin.
K. A&!ibio)ra-a
6Lactamasa CJD resistencia a la penicilina. .i bien la resistencia a la penicila por la
produccin de betalactamasa se 3a tornado mu! com2n entre '. gonorr3oeae no 3a!
casos descritos de resistencia a la ceftria#ona que no es afectada de manera notoria por
la encima. /or consiguiente al parecer no se requiere la evaluacin sistem"tica de los
antibiticos como orientacin para el empleo de este agente teraputico.
Las quinolonas tambin se utili1an muc3o para tratar la gonorrea pero como est"n
apareciendo casos de resistencia a estos agentes se necesitan mtodos de evaluacin
para determinarlos ! rastrearlos.
Crecimiento en Agar Thayer
Martin
El tratamiento recomendado inclu!e ceftria#ona o quinolonas Cciproflo#acino
oflo#acino levoflo#acinoD. Los macrlidos tambin pueden utili1arse.
MORAXELLA CATARRHALIS
*acteria que en los 2ltimos a-os se a reorgani1ado en funcin de los "cidos nucleicos. Es un
diplococos &ram M Ccolor ro$oD morfolgica ! bioqumicamente seme$ante a las 'eisserias. Aerobios
estricto catalasa J ! o#idasa J. 'o forma parte de la flora 3abitual del tracto respiratorio superior.
CLASIFICACI4N5 ES6ECIES M7S IM6ORTANTES
La especie m"s importante es la Mora%e&&a 'atarrha&is anteriormente llamada *ran3amella
catarr3alis 'eisseria catarr3alis el resto de especies de )ora#ellas est"n en el grupo *&' o#idasa 6 que
no crecen en )c Con>e!.
ACCI4N 6AT4GENA E INTERS CL:NICO
En las infecciones causadas por ). catarr3alis por lo com2n interviene una cepa endgena del
paciente. Las infecciones de M( 'atarrha&is se locali1an en el aparato respiratorio orofaringe !
e#cepcionalmente causa infecciones respiratorias traqueobromquiales sunisitis ! otitis.
;especto a su car"cter antignico su virulencia est" asociada a%
Ad3erirse al epitelio respiratorio farngeo.
/osee protenas asociadas con la membrana que son capaces de fi$ar transferrina ! lactoferrina lo
que les proporciona un medio para adquirir 3ierro para su desarrollo.
Cuadro clnico% actualmente es aceptado como el tercer patgeno m"s importante en el tracto
respiratorio 3umano despus de .treptococcus pneumoniae ! Haemop3ilus influen1ae. Afecta
especialmente a ni-os ! ancianos en infecciones del tracto superior respiratorio inclu!e otitis media
sinusitis ! neumona. Las infecciones del tracto respiratorio inferior Claringitis bronquitis neumonaD con
enfermedad pulmonar obstructiva crnica CE/9CD en adultos.
Igualmente se desconoce el modo de transmisin pudiendo ser de persona a persona por
diseminacin por gotitas respiratorias contaminadas mediante aerosol o por fuentes medioambientales !a
que ). catarr3alis es capa1 de sobrevivir en un esputo e#pectorado durante al menos tres semanas.
9casionalmente se 3an descrito casos de bacteriemia asociada a neumona o inmunosupresin
peritonitis Cprincipalmente en pacientes con di"lisis peritonealD sinusitis meningitis artritis
sptica celulitis osteomielitis endocarditis ! pericarditis.
.u aparicin m"s reciente se da en las infecciones nosocomiales.
=actores que contribu!en a agravar la enfermedad% diabetes alco3olismo.
AISLAMIENTO. CARACTERES BIO=U:MICOS. >IAGN4STICO BACTERIOL4GICO.
?. To-a #e -%e!ra.
.ecreciones respiratoriasG esputo fluido del odo medio ! aspirados de los
senos ma#ilares.
@. E!%#io -i"ro".'i"o. De la muestra se reali1a mediante la tincin de &ram
se observaran agrupadas en forma de diplococos C&ram 6D con los lados
ad!acentes planos
B. A'e"!o #e (a "o(o&ia. .e siembran en medios de cultivos
enriquecidos
Agar sangre de carnero al 5K ! agar c3ocolate ! crece bien en casi
todos los medios lquidos.
Deben incubarse a 4586478C durante 7: 3oras en una atmsfera
32meda enriquecida en C9
:
. Las especies patgenas crecen me$or en
condiciones de concentraciones elevadas de C9
:
C467KD. La 3umedad
puede lograrse si se coloca una almo3adilla con agua en el fondo.En
agar c3ocolate las colonias se obsevan grandes redondeadas no
pigmentadas o grises opacas lisasG consistencia friable en un disco de
gomaG la colonia puede tomarse intacta de la superficie del agar.
C. 6r%eba #e i#e&!i*ia"i.&5
Ca!a(aa 2
9#idasa J
>Naa 2 'r%eba 8%e (a #i*ere&"ia #e (a &eieria
&lucosa J
;educcin de nitratos ! nitritos J
9N= de la glucosa negativa.
Licuefaccin de la gelatina C::8CD 6
)ovilidad 6
Esculina J
6&alactosidasa 6
=AD CV
6
D
.istemas multipruebas
)anuales
;I) 'eisseria
H'ID
A&!ibio)ra-a
6lactamasa CJD% La 'ro#%""i.& #e be!a(a"!a-aa es com2n entre los aislamientos de ).
Catarr3alis muc3os antibiticos betalact"micos mantienen su actividad. Varios otros
agentes tambin son eficaces de modo que por lo general no se requieren pruebas de
sensibilidad para orientar la teraputica.
Ha! varios betalact"micos eficaces que inclu!en combinaciones de un betalact"mico ! un
in3ibidor de la betalactamasa cefaloporinas macrlidos quinolonas ! trimetoprima6
sulfameto#a1ol.
T0a$er-
Mar!9&
A)ar "0o"o(a!e
@@LC
A)ar N%!ri!i/o
BELC
O3i#aa Ca!a(aa
Ga--a-)(%!a-i(
a-i&o'e'!i#aa
N. Go&o0rroeae 2 - - 2 2 -
N. Me&i&)i!i#i 2 - - 2 2 2
M. Ca!arr0a(i / 2 2 2 2 -
G(%"oa Ma(!oa La"!oa Fr%"!oa Sa"aroa
N. Go&o0rroeae 2 - - - -
N. Me&i&)i!i#i 2 2 - - -
M. Ca!arr0a(i - - - - -
Re#%""i.& #e &i!ri!o >Naa -Ga(a"!oi#aa -(a"!a-aa
N. Go&o0rroeae 6 6 6 J
N. Me&i&)i!i#i V
6
6 6 J
M. Ca!arr0a(i J J 6 J
Reduccin de nitratos a nitritos
(+)