UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEAR

CURSO DE ODONTOLOGIA - CAMPUS SOBRAL

MDULO DE PROCESSOS INFECCIOSOS
Prof Cesar Barbosa e Prof Iriana Zanin

Roteiro de aula prtica: Antibiograma: Mtodo de Difuso em gar

(Mtodo de Kirby Bauer)
Agentes qumicos utilizados no tratamento de doenas so chamados de
quimioterpicos. Os antibiticos so definidos como substncias produzidas por
microrganismos especficos capazes de inibir o crescimento ou matar outros.
A maioria dos antibiticos produzida por um pequeno gnero de fungos
(Penicillium e Cephalosporium) e bactrias (Bacillus e Streptomyces).
Ao longo do tempo, tem ocorrido um aumento significativo de cepas resistentes a
um ou vrios antibiticos (cepas multiresistentes). Antes de administrarmos um antibtico,
essencial checarmos a susceptibilidade do microrganismo ao agente prescrito. Assim,
poderemos minimizar a seleo e a disperso de cepas resistentes.
Muitos mtodos tm sido empregados para esta finalidade: E-Test, Sistema Vitek
(Bio-Meriuex), Diluio seriada (MIC - Minimal Inhibitory Concentration e MBC - Minimal
Bactericidal Concentration) e o mtodo dos discos de papel de filtro.
Este ltimo mtodo tambm denominado Mtodo de Kirby Bauer. Neste, a
cultura pura de uma cepa problema semeado por toda a superfcie de uma placa de
gar (Mueller Hinton, TSA, BHI ou outro) com o auxlio de um swab. A seguir, discos de
papel de filtro impregnados com antibiticos so aplicados sobre a superfcie do gar.
Aps o perodo de incubao, so realizadas as leituras, onde verificamos a sensibilidade
da cepa pela presena ou ausncia de halos de inibio.
Material:
-

Culturas bacterianas (Staphylococcus aureus e Serratia marcescens)

Salina estril para diluio
Placas de gar Mueller Hinton
Discos de antibiticos (AMO, AMC, TET e CIP)
Swabs
Pina esterelizada
Escala Mac Farland

Mtodo:
1. Agitar o tubo contendo cultura em meio lquido e realizar diluies para que a
concentrao final seja prxima escala 0,5 de Mac Farland (~ 108 ufc).
2. Umedecer o swab na cultura, pressionar sobre as paredes para retirar o
excesso.
3. Semear sobre toda a placa uniformemente.
4. Colocar os discos de antibticos com o auxlio da pina em pontos
equidistantes (Esquema 1).
5. Incubar por 24 a 48 h a 37C em aerobiose e fazer as leituras.

6. Verificar a presena ou ausncia dos halos de inibio ao redor dos discos,

medir o dimetro em mm e anotar os resultados.
Esquema 1

Nome:
Data:
Microrganismo:
Antibitico

Microrganismo:
Antibitico

Resultado
Dimetro

R/I/S

Resultado
Dimetro

R/I/S

Com base nos resultados, responda:

1. Algum dos antibticos agiu sobre todos os microrganismos?
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2. Algum dos microrganismos no foi sensvel amoxicilina? Em cada um dos
casos explique o que aconteceu. (Lembre-se algumas bactrias so Grampositivas e outras Gram-negativas).

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