Identificacin de aletas de tiburones

y branquias de mantarayas
Sebastin Hernndez Muoz
Pesquera artesanal
pez espada (Xiphias gladius)
tiburn mako (Isurus oxyrhinchus)
Pesquera de tiburones en Chile
pez espada (Xiphias gladius)
Pesquera industrial
Pesquera de tiburones en Chile
aletas troncos
flota Caldera flota Coquimbo
Pesquera y comercializacin
Regulacin del Finning
Fiscalizacion - SERNAPESCA
Especies de tiburones capturados
Isurus oxyrhinchus Alopias vulpinus
Lanma nasus Sphyrna zygaena
Prionace glauca
Alopias superciliosus
Registros de desembarque
Qu sabemos?
Prionace glauca Isurus oxyrinchus
Alopias vulpinus Lanma nasus
Tollo
Registros de desembarque y exportaciones agrupa algunas
especies dentro de una misma categoras - no especies biolgicas
Mustelus mento
Mustelus whitneyi
Galeorhinus galeus
Qu sabemos?
Ya que en la prctica del Finning se
descarta el tronco, se pierden
caractersticas diagnsticas
Se dificulta la identificacin de especies
Lamnidae
Morfologa crptica
Alopi idae
Se dificulta la identificacin de especies
100
50
Total (608.174 ton.)
China (415.813 ton.)
Hong Kong (96.708 ton.)
Espaa
Singapur
Indonesia
Otros pases
Porcentaje en peso
Importadores de aletas desde Chile
0
2
0
4
0
6
0
8
0
10
0
12
0
1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005
Ao
T
o
n
e
l
a
d
a
s
107
106
34
Variacin exportaciones de aletas
Secaderos Quebrada seca
Calibre
Proceso de secado de las aletas
Tipo de aleta
Secaderos Quebrada seca
Proceso de secado de las aletas
Especie
Secaderos Quebrada seca
Proceso de secado de las aletas
Proceso de secado de las aletas
Proceso de secado de las aletas
Almacenaje de aletas
No se tiene informacin exacta
Qu especies son comercializadas
en la zona centro-norte de Chile?
Se necesitan herramientas que nos
permitan identificar especies a partir
de una aleta:
Marcadores Moleculares
Morfometra
Anlisis Digital de Imgenes
Partidores especie-especficos (primers)
Marcadores Moleculares
5-AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3
5-AGGTGCCTGTAGTGCTGGTAGACACA-3
P. glauca
Shivji et al. 2002
I. oxyrinchus
Marcadores Moleculares
5-GTCGTCGGCGCCAGCCTTCTAAC-3
L. nasus
Partidores especie-especficos (primers)
ITS2
TTCGCC
AAGCGG
Fish5.8SF
ATACGCC
TATGCGG
TGCGATC
ACGCTAG
Fish28SR
5-AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3
Amplicn diagnstico 929 pb
Amplicn diagnstico 1350 pb
Diseo partidores especie-especficos
5.8S
ADNr
28S
ADNr
Marcadores Moleculares
ITS2
TTCGCC
AAGCGG
Fish5.8SF
ATACGCC
TATGCGG
TGCGATC
ACGCTAG
Fish28SR
Amplicn diagnstico 929 pb
Amplicn diagnstico 1350 pb
5.8S
ADNr
28S
ADNr
Marcadores Moleculares
Diseo partidores especie-especficos
GACACA
CTGTGT
ITS2
Fish5.8SF
ATACGCC
TATGCGG
TGCGATC
ACGCTAG
Fish28SR
Amplicn diagnstico 771 pb
Amplicn diagnstico 1350 pb
5.8S
ADNr
28S
ADNr
Marcadores Moleculares
Diseo partidores especie-especficos
TCTAAC
AGATTG
ITS2
Fish5.8SF
ATACGCC
TATGCGG
TGCGATC
ACGCTAG
Fish28SR
Amplicn diagnstico 556 pb
Amplicn diagnstico 1350 pb
5.8S
ADNr
28S
ADNr
Marcadores Moleculares
Diseo partidores especie-especficos
ITS2
Fish5.8SF
Fish28SR
Amplicn diagnstico 782 pb
Amplicn diagnstico 1350 pb
5.8S
ADNr
28S
ADNr
Marcadores Moleculares
S. mokarram
Amplicn diagnstico 445 pb
S. lewini S. zygaena
Amplicn diagnstico 249 pb
Diseo partidores especie-especficos
Identificar las especies de tiburones que
son comercializados como aletas en la zona
centro-norte, a partir de marcadores
moleculares especie-especficos
Determinar la relacin entre el nombre del
mercado y la identidad gentica de la
especie, a partir de las aletas
Evaluar la capacidad de los comerciantes
para reconocer aletas, mediante la
apariencia de stas
OBJETIVOS
Secadero Panul Secadero Placilla
Se obtuvieron 654
muestras de aletas
Objetivo 1: Identificar especies de
tiburones que son comercializados
Recoleccin y Extraccin de ADN
Kit Qiagen Inc. T
3-4 hrs.
Taq polimerasa (enzima)
partidores o primers
agua
cloruro de magnesio
nucletidos (A, C, G y T)
buffer
Reactivos
5-AGAAGTGGAGCGACTGTCTTCGCC-3
5-AGGTGCCTGTAGTGCTGGTAGACACA-3
5-GTCGTCGGCGCCAGCCTTCTAAC-3
5-AGTGCTTGACCATTCGGTGTGCGT-3
ADN
?
Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
Resultados amplificacin multiplex
M
M
1 2 4 3 6 5 7 9 8
N
929 pb
771 pb
1000 pb
554 pb
89,3%
13,6%
1,7%
? ?
I. oxyrhinchus
L. nasus
P. glauca
A. superciliosus
Proporcin de especies (secaderos)
0,2%
Nombre mercado Identificacin gentica
Martillo (N=22) S. zigaena (86%)
no identificado (14%)
Carcharhinus(N=25) G. galeus (56%)
S. zigaena (20%)
Carcharhinido (12%)
C. obscurus (8%)
I. paucus (4%)
Cola de zorro (N=5) A. superciliosus (100%)
No clasificada A (N=22) A. vulpinus (100%)
No clasificada B (N=22) S. zigaena (41%)
G. galeus (56%)
S. lewini (14%)
Carcharhinido (13%)
Bodega Paico
A. superciliosus
S. lewini
S. zygaena
G. galeus
C. obscurus
I. paucus
Conclusiones
P. glauca
I. oxyrinchus
A. vulpinus
L. nasus
Manuscrito II
-Reducir muchas variables a un nmero ms
pequeo de variables que resumen la informacin
de las variables originales (pueden ser usados para
posteriores anlisis)
Anlisis
multivariado
P1A
P1P
P1H
P1I
P1B
Morfometra
imagen problema filtro compuesto especie-especfico
Patrn de difraccin
Tcnica de correlacin digital invariante
Anlisis digital imagen
Anlisis digital imagen
Tcnica de correlacin digital invariante
imagen problema filtro compuesto especie-especfico
posicin escala rotacin
Anlisis digital imagen
Tcnica de correlacin digital invariante
Anlisis morfomtrico
Manuscrito II
D1A
D1P
D1H
D1L
D1I
D1B
P1A
P1P
P1H
P1I
P1B
CDM
CTR
CST
CTL
CPU
CFL
CPL
CPV
CFW
Bodega Paico
Evaluar la utilidad de mtodos diagnsticos morfomtricos y
morfolgicos, para la discriminacin aletas
Anlisis de imagen
Manuscrito II
Bodega Paico
Evaluar la utilidad de mtodos diagnsticos morfomtricos y
morfolgicos, para la discriminacin aletas
Resultados anlisis gentico
P. glauca I. oxyrinchus L. nasus
Manuscrito II
Aletas hmedas
P < 0.0001
Resultados anlisis discriminante (PCA)
Manuscrito II
P < 0.0001
Aletas secas
Manuscrito III
Manuscrito III
Manuscrito III
Manuscrito II
anlisis de imagen
Sinergia de ambas metodologas
anlisis gentico
P. glauca I. oxyrinchus L. nasus
Identificacin de especies
Manuscrito II
anlisis de imagen
Sinergia de ambas metodologas
anlisis gentico
P. glauca I. oxyrinchus L. nasus
Identificacin de especies
Manuscrito II
anlisis de imagen
Sinergia de ambas metodologas
anlisis gentico
P. glauca I. oxyrinchus L. nasus
Identificacin de especies
1,489 fins
41 species
Proyecto de ID visual de aletas
Objetivo Inicial: Desarrollar las herramientas morfologicas
Para la ID de aletas especies CITES
Guia de identificacion de las
aletas
CITES App II
(Sept 2014)
Establecer la fiscalizacin
visual de la ID de las aletas
(comercializadas/exportadas)
Paso 1: Encontrar la primera aleta dorsal
Es la aleta del mismo color en ambos lados?
SI.Posible aleta dorsal
No.Aleta pectoral
Paso 1: Encontrar la primera aleta dorsal
Existe una fila de cartlago en la base, con cada pieza de
cartlago cercanos al adjacente?
Si.
= aleta dorsal
(es muy probable que
se observe el borde
libre de la dorsal)
No.
Solo material esponjoso,
En algunos casos se
observa partes de cartlago
= lbulo inferior aleta caudal
Paso 2: Seguir el siguiente caja de flujos para ID aletas dorsales
Primera aleta dorsal del tiburn martillo
(i.e., son largas y they are tall and finas)
Los aletas dorsales de los tiburones martillos son largas en
altura (en proporcin ms largas que anchas < 2.5).
Coloracin gris y/o caf con base delgada con filas de
pequeas piezas de cartlago.
Cornuda cruz
(Sphyrna zygaena)
El tiburn cola de zorro (Alopias) tiene una
base delgada de la aleta dorsal, donde las
piezas de cartlago son de forma irregular
Otras aletas alta (en proporcin ms largas que anchas <
2.5) son gris oscuras con una base delgada
Hammerhead sharks (3 large species, all CITES App II)
Key Feature: High aspect ratio (i.e., fin is tall and narrow)
Fin is light grey or brown, without other markings
Fin base is narrow and has row of small, oval cartilage
Gua de identificacon de los apndices
prebranquiales (placas de las branquias) de
especies de Mbulas para la aplicacin de
medidas para el comercio
Guy Stevens (Ph.D. Student)
The Manta Trust - Director
University of York
El gnero Manta inclute especies tales como la
manta ocenica (Manta birostris) y la manta de
arrecife (Manta alfredi). Estas especies fueron
incluidas en el Apndice II en la 16
th
Conferencia
de las Partes de la Convencin Internacional del
Comercio de Especies en Peligro de Extincin
de la Fauna y Flora (CITES).
Las Mantarayas son especies relativamente
cercanas a las Mbulas. De stas ltimas se han
identificado 9 especies en la actualidad, las
cuales pertenecen a la familia Mobulidae y son
conocidas como Mbulas.
Oceanic Manta Ray Manta birostris
74
IUCN Classification:
Vulnerable globally
Manta ocenica (Manta birostris)
Manta de arrecife (Manta alfredi)
Apndices Prebranquiales
Todas las especies de Mbulas son filtradores, los cuales utilizan su boca
y sus modificados filamentos branquiales para succionar y retener el
plancton y peces pequeos. Cada individuo tiene 5 pares de
hendiduras branquiales, las cules estan internamente sostenidas por
un placa branquial formadar por filamentos branquiales conocidos
como apndices prebranquiales, los cuales retienen el alimento.
Hendiduras branquiales
Apndices prebranquiales que rodean las
hendiduras branquiales internamente en la boca
Pesquera de Mbulas y Mantas
Las placas branquiales de las Mantas y
Mbulas son usadas en el mercado
Asitico con fines medicinales. Debido
a esta razn la demanda de estos
productos ha incremedo las pesqueras
de estas especies.
Cuando las placas branquiales son
removidas de los individuos
capturados. Los pescadores cortan
por la mitad las placas y stas son
secadas para posteriormente ser
comercializadas.
Caractersticas morfolgicas
En general, las Mobulas son mas pequeas que las Mantas y puedenser identificadas
por sus diferencias morfolgicas de su boca.
MANTA:
Boca posicin
terminal
MOBULA:
Boca ventral
SI NO
La boca, esta distribuida en
posicin terminal?
Las Mobulas tiene la mandbula inferior (cartlago de Meckel) en forma de una lnea
la cual se ubica muy cerca al borde de la mandbula inferior, de esta manera cuando
la boca esta cerrada, los bordes de la mandbula inferior se encuentran ms atrs
que ventral (como es el caso de las Mantas (terminal).
Identificacin de las placas branquiales
Hay tres caractres importantes que
pueden ser utilizados rpidamente
para identificar cada tipo de placa
branquial:
- Tamao placa branquial
- Color placa branquial
- Bordes de los filamentos branquial
30cm regla
1. Tamao: medicin de la longitud total
de la placa branquial comercializada
2. Color: bi-color (abajo)
o uniforme (arriba)
30cm regla
3. Bordes de los
filamentos:
suaves (arriba) o
separados/bristled
(abajo)
Clave para la identificacin de las placas
branquiales de Mbulas comercializadas
Pregunta 1:
La placa branquial, es mas larga que
30cm y su coloracin es uniforme
(caf oscuro/negruzca)?
SI =Manta
NO =Ir a pregunta 2
Manta
Pregunta 2:
Tienen las placas branquiales un
borde central de coloracin
blanca y/o con separados
filamentos branquiales?
SI =Mobula
NO =Manta
Mbula
Placas branquiales de
Mantarayas -
Manta birostris & M. alfredi
30cm regla
1. Tamao placas branquiales = Largas
2. Coloracin placas branquiales =
uniforme caf oscuro/negro
3. Filamentos branquiales = Suaves
Borde
filamentos
Placas branquiales
caf/negro y borde
de los filamentos
suaves
Thanks
Funding
Sources
The Manta Trust Team
The Manta Ray of Hope Team
Prof. Callum Roberts
Dr. J ulie Hawkins
Dr. Giuseppe Notarbartolo di
Sciara
Sarah Fowler
Image Credit
Daniel Fernando
Shawn Heinrichs
Paul Hilton
Gisela Kaufmann
Thomas Peschak
Guy Stevens
The Pew Environment Group
The Save Our Seas Foundation