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Investigación de la microbiología del agua de la FES Zaragoza.

Pérez González Dora Alicia, Marroquín Segura Rubén, Tequianes Bravo Lilia,
Flores Pimentel Maurilio. Laboratorio de Inmunología y Microbiología L313
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza, UNAM, Campus II. Batalla 5 de mayo
s/n, Col. Ejercito de Oriente 09230, Del. Iztapalapa México, D.F. Tel: 56230758

INTRODUCCIÓN:
En la FES Zaragoza y en clínicas multidisciplinarias se tiene un monitoreo
permanente de la potabilidad del agua dentro del programa Institucional de
análisis microbiológico del agua potable y el estudio de la familia Vibrionaceae a la
cual pertenecen géneros de importancia en salud pública como son: Vibrio y
Aeromonas. Dicho programa es desarrollado con recursos de la carrera de
Química Farmacéutico Biológica y este estudio es revelante porque la carrera
tiene como propósito el formar profesionales que se desempeñarán en el futuro en
el área Bioquímica Clínica.
El género Aeromonas pertenece a la familia Vibrionaceae, son bacilos Gram
negativos de vida libre que se encuentran en agua dulce o salada, cloradas en
grifos de tuberías sanitarias y de desague, peces, suelos y en alimentos. Su
importancia médica radica en que ocasiona cuadros diarreicos similares a los de la
toxina de Vibrio cholerae. Las tres especies de riesgo para el ser humano A.
hydrophila, A. Sobria y A. caviae, pero se han caracterizado otras especies debido
al grado considerable de complejidad genética (HGs) y heterogeneidad biológica.

METODOLOGÍA:
El estudio se realizó con 70 muestras de agua potable, de puntos fijos como:
cisternas, grifos, filtros, tanques de almacenamiento, tomando 4 muestras
semanalmente de las instalaciones de la FES zaragoza UNAM Campus I, Campus
II y otras dependencias de la UNAM como: CENDI Zaragoza, CCH Oriente, y
Clínicas Multidisciplinarias. Se empleó el método de enriquecimiento doble en
agua peptonada concentrada alcalina 10X y 1X. Aislamiento: a partir del
crecimiento se sembró una placa de TCBS y una placa de agar sangre ampicilina
(30 µg/mL). Se seleccionaron aquellas colonias aisladas con presencia de α y/o β
hemólisis. Se realizaron tinciones de Gram. Para la caracterización de las colonias
se utilizaron tres métodos: A) método presuntivo (Factor de CAMP). B)método
miniaturizado en microplaca. C)método convencional: pruebas seleccionadas por
los criterios de Abbott; producción de gas a partir de glucosa, producción de indol,
movilidad y ornitina descarboxilasas, prueba rojo de metilo y reacción de Voges-
Proskauer, descarboxilación de la lisina, fermentación de la glucosa y lactosa junto
con la formación de sulfuros, utilización de citrato, reacciones de oxidación y/o
fermentación, pruebas para descarboxilasas (medio Moeller); otras pruebas
especiales fueron la prueba de oxidasa y catalasa. Se realizó la determinación de
los productos extracelulares: desoxirribonucleasas (DNAasa), lipasas, proteasas
(gelatinasas y caseinasas) y producción de hemolisinas.
Posteriormente se determinó el titulo de aerolisina utilizándose el método
hemolítico de Asao (1986), se usaron glóbulos rojos de rata y se calcularon las
unidades hemolíticas al 50%. Para la detección de la enterotoxina, se realizó la
prueba de asa ligada de conejo según Bernheimer (1975), se usó un conejo
Nueva Zelanda blanco con peso de 2.5 Kg. Se midió el volumen de líquido
acumulado en cada asa una acumulación de 0.5 mL/cm o más se reporta como
prueba positiva, un fluido sanguinolento indica probable destrucción de la mucosa.

RESULTADOS:
Se observó que de las 70 muestras de agua se obtuvieron 37 aislamientos del
género Aeromonas lo que represento el 52% de los muestreos realizados .
Obteniéndose los siguientes porcentajes de las especies de Aeromonas: A.
hydrophila 45.9%, A. sobria 18.9%, A. caviae 0.2%, A. jandaei 13.5%, A.
salmonicida 2.7% y A. veronii 2.7%. Todas las cepas de Aeromonas presentaron
actividad de aerolisina usando glóbulos rojos de rata. La actividad de aerolisina al
50%, fue mayor en A. hydrophila con 448.8 unidades seguida de A. caviae con
334 y A. Sobria con 261. A. hydrophila mostraron presencia de enterotoxina en
diferentes grados.

DISCUSIÓN:
De acuerdo a los datos que se encuentran en la literatura, principalmente el
estudio de Janda J M y col; en el sentido de que Aeromonas se puede aislar de
cualquier muestra clínica y otras fuentes, se justifica el impulsar la investigación
sobre la influencia de las especies de Aeromonas aisladas de poblaciones con
diversas patologías en nuestro país. Todas las enfermedades requieren para su
diseminación de un foco de infección una ruta de trasmisión como es el agua. Una
característica del género es que su hábitat potencial es el agua, tanto en aguas
residuales, cloradas y de consumo humano, algunas especies crecen en agua a
un pH 5.2-9.8 y a una temperatura óptima de 28°- 30° C, pueden crecer tanto en
aguas con muy baja cantidad de materia orgánica, debido a estas características
del género Aeromonas y se tienen los siguientes datos de sistemas de agua
potable municipal : en los sistemas de distribución de agua potable en Londres y
Essex RU se reportó un porcentaje de aislamiento de A. hydrophila de 25% en
agua potable clorada en verano y de 7% en invierno, del análisis de aguas no
tratadas las tasas de aislamiento subieron al 82% en verano y 75% en invierno.
Knochel y Jeppensen en Dinamarca encontraron el 28 % de muestras positivas
para Aeromonas, representando A. hydrophila el 97% de los aislamientos.
Ghanem et al en el Cairo, aislaron el 90% de Aeromonas, Krovacek et al en
Suecia reportaron un 85% de aislamiento de las muestras para Aeromonas y A.
hydrophila representó el 67% del total de los aislamientos, el resto fue para A.
sobria. En nuestro estudio encontramos que de 70 muestreos realizados en la red
de agua potable, se aislaron 37 cepas del género Aeromonas lo que correspondió
al 58.85% y que de estos aislamientos A. hydrophila representó el 45.9 % y A.
sobria 18.9%. Estos resultados son muy similares a los reportados por Krovacek
en Suecia.
El significado en la salud pública, de detectar Aeromonas mesofílicas en el
suministro de agua potable no está bien entendido ya que el establecer la
aparición de un brote de Aeromonas en el agua potable y la asociación
epidemiológica es difícil; los coliformes fecales son indicadores de contaminación
fecal y se utilizan para evaluar la calidad sanitaria del agua, y poder determinar si
es o no potable. Aeromonas se ha aislado en aguas en las que no se han
detectado coliformes indicándose en consecuencia que su presencia no se
correlaciona con la de estos indicadores. Algunos autores consideran que
Aeromonas podría considerarse como un indicador del funcionamiento del sistema
de tratamiento y potabilización del agua. De las 37 cepas que se aislaron las
Aeromonas también produjeron una gran cantidad de enzimas extracelulares que
degradan activamente complejos proteicos, polisácaridos, mucopolisacáridos y
moléculas que contienen lípidos. Estas enzimas son útiles en la identificación de la
bacteria, en sus funciones fisiológicas y son considerados frecuentemente factores
asociados a la virulencia, en éste y en otros géneros bacterianos, un estudio en
Holanda reportó una alta ocurrencia de Aeromonas en el agua potable que
coincidió con un aumento en el número de casos de diarrea.
La presencia de productos extracelulares como la actividad hemolítica (aerolisina)
que se determinó en las Aeromonas aisladas confirman los estudios hechos por
Asao (1986), Howard (1987) y Bernheimer (1975), para estos autores la aerolisina
es por mucho el más importante contribuyente a la patogenicidad del género. En
México existen datos escasos del aislamiento de Aeromonas a partir de muestras
de agua potable, fuente potencial de infecciones intestinales

CONCLUSIÓN:

La presencia del género Aeromonas en agua potable indicó que está


contaminada, siendo A. hydrophila la especie que se aisló con más frecuencia,
también se demostró que las cepas aisladas producen factores de virulencia.
PROPUESTA
En algunos países el género Aeromonas se encuentra entre las principales causas
de diarrea, es oportuno dar a conocer la incidencia de infecciones producidas por
esta cepas ya que este género está probablemente subestimada en México y sólo
se investigan de forma rutinaria en algunos laboratorios clínicos. A pesar de que
se han explorado ya algunos de los campos sobresalientes de este género desde
el punto de vista clínico y sanitario, hasta la fecha estos estudios han tenido una
limitada difusión entre los microbiólogos clínicos e investigadores. Además el
aislamiento de Aeromonas con capacidad de producir factores de virulencia en
nuestra red de agua potable, nos sugieren que la presencia de estas bacterias
pudieran estar asociadas a cuadros diarreicos, es necesario establecer la
importancia de Aeromonas como patógeno humano en nuestro país.