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Anlisis de Zinc por espectrofotometra UV-Visible

Anlisis de Zinc (II) en Avena por medio de Espectrofotometra UV-visible


Alejandro Aranda Aguirre, Judith Ramos Chavez
Laboratorio de Qumica Analtica e Instrumental, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Ingeniera
e-mail: alex_aranda219@hotmail.com , judirach@hotmail.com

RESUMEN
En el presente trabajo se presenta el anlisis de Zinc (II) por Espectrofotometra UV-visible, analizado en
anteriores trabajos
[1]
.

El anlisis en este trabajo fue para una muestra de avena comercial. Los anlisis de Zinc (II)
se realizaron a partir de la acomplejacin del Zinc (II) con la ditizona (Difeniltiocarbazona) en medio acuoso,
gracias a su favorable formacin de complejos de coloracin rojiza con la ditizona. La determinacin de Zinc (II)
se realiz tomando en cuenta ciertas variables como pH, concentracin de los patrones de Zinc (II), cantidad de
ditizona y de muestra. Se analiz los patrones y la muestra Zinc (II) con un tampn de pH 5 debido a que la
interferencia disminuye drsticamente en un rango de pH de 4,5-5,5 adems de la estabilidad de los ditizonatos.
Los datos experimentales de los patrones se obtuvo a partir de zinc granulado debido a que la mayora de las sales
de Zinc son hidroflicas (absorbiendo mucha humedad) y luego se utiliz la espectrofotometra UV-visible para
obtener la curva de calibracin, adems el tratamiento previo de la muestra se hizo con digestin acida.
Palabras claves: Espectrofotometra UV-visible, ditizona, pH, buffer, digestin acida.

ABSTRACT
In the coming work presents the analysis of Zinc (II) by UV-visible spectrophotometry, discussed in previous work
[1]. Analyses of Zinc (II) were made from the complexation of Zinc (II) with dithizone (Difeniltiocarbazona) in
aqueous medium, thanks to its favorable reddish complex formation with dithizone. Determining Zinc (II) was
performed taking into account variables such as pH, concentration patterns Zinc (II), amount of sample and
dithizone. Analyzed sample patterns and Zinc (II) with a buffer of pH 5 because it drastically reduces interference
in a pH range of 4.5-5.5 in addition to the stability of dithizonate. Experimental data patterns obtained from
granulated zinc because most Zinc salts are hydrophilic (high moisture absorbing) and then used the UV-visible
spectrophotometer to obtain the calibration curve, and the pretreatment sample made with acid digestion.
Keywords: UV-visible spectrophotometry, dithizone, pH, buffer, acid digestion.

1. Introduccin
La espectrofotometra de absorcin molecular es
un mtodo basado en la medicin de la absorbancia de
radiacin en la regin visible o ultravioleta del
espectro electromagntico de sustancias en solucin.
Generalmente, las disoluciones se encuentran en
medio acuoso y las especies son molculas o iones,
mas no tomos. A diferencia de la espectrofotometra
de absorcin molecular, la absorcin atmica consiste
en la atomizacin del analito de una muestra acuosa.
Este vapor atmico es posteriormente atravesado por
un haz de luz a determinada longitud de onda. La
longitud de onda elegida es caracterstica del elemento
que se analiza.
El procedimiento para obtener el espectro de
absorcin es sencillo. Primero, en el recipiente R
(referencia) se coloca el solvente, que no contiene al
analito; segundo, se coloca la disolucin que contiene
al analito en el recipiente M (muestra), se encienden
las lmparas, el monocromador selecciona la longitud
de onda deseada y este haz de luz se hace incidir en
ambas celdas con ayuda de un juego de espejos.
Finalmente, el registro de la absorbancia del analito es
visualizado en la computadora.


Figura N1: Representacin del muestreo de absorcin
de una muestra.
Anlisis de Zinc por espectrofotometra UV-Visible
El zinc es un elemento esencial, ya que interviene
en el metabolismo de protenas y cidos nucleicos.
Segn su abundancia en el organismo se le clasifica
como oligoelemento. Cada oligoelemento tiene un
rango de concentraciones considerado ptimo para el
funcionamiento del organismo. Por lo que tanto su
dficit como una concentracin por encima de sus
valores normales pueden ser perjudiciales para el
organismo. En el caso de los hombres adultos, el
consumo recomendado es de 15 mg/da, para mujeres
adultas es de 12 mg/da y para los nios pre-
adolescentes de 10 mg/da (WHO, 1996). La ingesta
promedio de cinc es de 15-45 mg/da, por lo que una
ingesta mayor a la recomendada puede provocar
efectos adversos sobre la salud como los vmitos,
diarreas, dolor abdominal y prdida de apetito. La alta
ingesta de cinc se asocia tambin a una deficiencia de
cobre y hierro. En contraste, su deficiencia puede
provocar retraso en el crecimiento, dermatitis,
anorexia, prdida de la memoria, alopecia, entre otros.
(National Institute of Health, 2011).
El procedimiento ms accesible para analizar zinc
por espectrofotometra UV-visible es por medio de la
acomplejacin con ditizona. La ditizona es un reactivo
utilizado en la determinacin de metales debido a que
forma complejos coloreados con muchos de ellos.
Tradicionalmente, el procedimiento para medir la
absorbancia de los complejos de ditizona implicaba la
extraccin del complejo en un solvente orgnico como
cloroformo o tetracloruro de carbono (Snell F. 1967),
(Morrison, 1957), (P.R. Subbaraman, 1969), (Cooper
& Sullivan, 1951), (Hibbard, 1937), (White, 1936). No
obstante, dicho procedimiento resulta tedioso,
consume tiempo y no es selectivo. Adicionalmente, el
cloroformo y el tetracloruro de carbono se encuentran
en la lista de solventes declarados por la EPA como
cancergenos (EPA, 1980).
La estructura de los ditizonatos metlicos ha sido
determinada mediante el anlisis de rayos X de los
cristales de estos complejos (Sandell & Onishi, 1978),
(Meriwether & Breither, 1965). Dichos estudios
demostraron que la molcula est conformada por dos
ligandos bidentados de ditizona coordinados
tetradricamente al ion metlico. Esta unin se realiza
mediante un tomo de azufre y uno de nitrgeno de
cada residuo de ditizona. La geometra de estos
complejos metlicos es similar en el caso del
mercurio, cobre y zinc.

Figura N2: Complejo de ditizona en un metal M.
Donde M = Hg(II), Zn(II), Cu(II).
El ditizonato de zinc absorbe a 522 nm por lo que
en adelante, las curvas de calibracin de sus complejos
son medidas a esta longitud de onda o
aproximadamente a esta longitud.

Figura N3: Barrido espectral del ditizonato de Zinc.
Los surfactantes han empezado a utilizarse como
disolventes alternativos en el anlisis
espectrofotomtrico (Khan & Ahmed, 2005); Song, et
al (2006); Garca, A. et al (1986), Bhajan S. et al
(1989). Estas molculas anfiflicas tienen la ventaja de
ser pticamente transparentes, su uso es permitido, son
relativamente no txicos y estables (Medel, 1986).
El surfactante Tritn X-100, polioxietilen-tert-
octilfenol, es un surfactante de tipo no inico, el Tritn
X-100 ha sido empleado en la solubilizacin de la
ditizona y los ditizonatos que esta forma.
[1]


Figura N4: Estructura del Tritn X-100.

Anlisis de Zinc por espectrofotometra UV-Visible
2. Parte experimental
Reactivos y equipos
La muestra para la determinacin de zinc(II),
fue de Avena en polvo 3 OSITOS de Cont. Neto de
250g.
Entre los otros reactivos se emple zinc
granulado, cido clorhdrico concentrado, agua ultra
pura, fosfato dihidrgeno de potasio (KH
2
PO
4
), fosfato
cido disdico anhidro (Na
2
HPO
4
), Tritn X-100 y
ditizona (5-difenilcarbazona).
El anlisis de zinc (II) se realiz en un
espectrofotmetro UV Shimadzu, con celdas de vidrio
de 1,00 cm.
Preparacin de las disoluciones estndares de Zinc
La disolucin patrn de 23,4 ppm es preparada
por disolucin de 117,0 mg de cinc metlico en 5 mL
de cido clorhdrico concentrado, se enras con agua
ultrapura en una fiola de 100 mL, luego se extrajo 10
mL con una pipeta volumtrica y se diluy en una
fiola de 500 mL. Las disoluciones estndar se
prepararon por dilucin de 3 mL, 5 mL, 10 mL, 15
mL, 20 mL, de la disolucin patrn en fiolas de 50
mL. Las concentraciones finales se muestran en la
tabla N1.
Tabla N 1: Concentraciones finales de los patrones
Concentracin de la disolucin patrn de Zinc: 23,4 ppm
Volumen de la
disolucin patrn
a diluir (mL)
Volumen final de
las
disoluciones(mL)
Concentracin
final de
Zinc
+2
(mg/L)
3 50 1,40
5 50 2,34
10 50 4,68
15 50 7,02
20 50 9,36

Preparacin de la Solucin Tampn
Buffer fosfato (pH=5) (Christian, 1986); La
disolucin de 200 mL se prepar por disolucin de
5,168 g de KH
2
PO
4
y 0,0858 g de Na
2
HPO
4
en agua
ultra pura y se enras hasta alcanzar el volumen final.
Preparacin de la Solucin de Tritn X -100
Tritn X-100 5% v/v (pH=5)/buffer fosfato;
La disolucin de 100 mL se prepar por dilucin de 5
mL de Tritn X-100 en el buffer fosfato de pH 5. Se
enras con dicho buffer hasta completar el volumen
final.
Disolucin saturada de ditizona
Se prepar una disolucin fresca de ditizona
para cada ensayo. La disolucin de 100 mL se prepar
al disolver 25,3 mg de ditizona, C1
3
H
12
N
4
S, en la
disolucin de Tritn 5% preparada previamente. Con
ayuda de un agitador magntico, se agit por 20
minutos y filtr con papel Whatman N 40 para
remover el slido no disuelto.
Preparacin de los Complejos
En una fiola de 10 mL se agreg 0,5 mL de las
disoluciones del ion metlico y 4 mL de la disolucin
de ditizona saturada, solubilizada en el surfactante
Tritn X-100 al 5%. Estas fiolas se enrasaron con la
disolucin de Tritn X-100 al 5%. Se analizaron las
disoluciones de los complejos formados frente a un
blanco preparado con igual cantidad de ditizona y
tritn.
Tabla N 2: Concentraciones finales de zinc en los
complejos
Nombre
Ditizona
en Tritn
5%
(mL)
Conc. (ppm)
de Zn
+2

V
(alcuota)
=0.5
mL
Conc.(ppm)
de Zn
+2
en
fiola de 10
mL
Blanco 4 - -
Patrn
N1
4 1,40 0.07
Patrn
N2
4 2,34 0.117
Patrn
N3
4 4,68 0.234
Patrn
N4
4 7,02 0.351
Patrn
N5
4 9,36 0.468

Los complejos de cinc se prepararan en fiolas
de 10 mL, mediante la mezcla de 1 mL del ion
metlico en un rango de concentraciones de 0,124 a
0,824 ppm. A estas se les agrega igual cantidad de
ditizona y se enrasan con la disolucin del surfactante
hasta completar el volumen final.
Tratamiento de la muestra
En un vaso de 150 mL se pes 3g de avena
previamente molida en un mortero con piln, luego se
agreg 30 mL de agua y 1 mL de HCl concentrado,
Anlisis de Zinc por espectrofotometra UV-Visible
se puso en bao mara durante unos 20 minutos luego
se deja reposar y se filtra en papel filtro Whatman N
42 se lava el vaso con destilada para filtrar todo, el
filtrado si an contiene restos se pasa por centrifuga
para luego enrasar en una fiola de 50 mL.
Preparacin de la muestra problema
Se sac 1 mL de la fiola de 50 mL de la
muestra por duplicado para utilizarlo para el anlisis,
se le hecho a dos fiolas de 10 mL por separado y se le
adiciono 4 mL de la ditizona disuelta en tritn al 5% y
se enraso con tritn al 5%, obteniendo as la muestra
problema a analizar.

3. Clculos
Obtencin de la longitud de onda para el anlisis
de los estndares
Para obtener la longitud de onda se utiliz el
patrn ms concentrado de Zinc, para obtener un
barrido espectral, y obtener el pico ms alto y con eso
la longitud de onda adecuada para poder analizar la
muestra:


Grfica N1: Espectro de absorcin UV-Visible del
estndar ms concentrado (Patrn N5)
Con lo cual se obtuvo el pico ms alto
(Abs=0.77) a una longitud de onda de 519,20 nm.
Luego se pas a obtener la absorbancia del
blanco a esa longitud de onda y se corrigi con el
blanco la absorbancia de los patrones, con lo cual se
obtuvo la siguiente tabla de datos:
Tabla N3: Absorbancia de los estndares
Concentracin
Zn(II) (ppm)
Absorbancia
0.070 0.050552
0.117 0.100464
0.234 0.175964
0.351 0.285248
0.468 0.348770
Con la tabla anterior se pudo graficar la
calibracin lineal para los patrones resultando la
siguiente grfica:

Grfica N2: Curva de Calibracin de los estndares

Denotando una linealidad con el R2 de 0,9926
lo cual es muy bajo por lo cual se hizo un anlisis de
residuo para eliminar algunos puntos. La grafica de
residuos se muestra a continuacin:

Grfica N3: Grfica de residuos
Eliminando el 4to punto y el segundo punto
(este ltimo debido a que al eliminar el 4to punto
sobresali este punto y se opt por eliminarlo), con lo
cual se obtuvo una grfica mejor de la calibracin
lineal de los patrones:
y = 0.7542x + 0.0052
R = 0.9926
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin de Zn (II) (ppm)
Zn (II)
-0.005
0
0.005
0.01
0.015
0.02
0.025
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
Concentracin de Zn (II) (ppm)
Residuos
Complejo de
Zn(II) - Ditizona
Longitud de onda (nm)
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Anlisis de Zinc por espectrofotometra UV-Visible

Grfica N4: Curva de calibracin corregida
Lo cual nos da una linealidad con el R
2
de 0,9999.
Adems los parmetros de la recta son:
Y = a+bx
Donde a = -0,0009; b = 0,7486 y X esta en
ppm, Y es la absorbancia obtenida.
Se pueden obtener los lmites de confianza
para la pendiente y la ordenada al origen de nuestra
recta de ajuste:
a tSa
b tSb
pero para eso se obtuvo la siguiente tabla:
Tabla N4: Clculos

Siendo S
a
y S
b
(tomando los valores de la Tabla N4):
La siguiente tabla resume los parmetros
estadsticos que se halaron en lo anterior
Tabla N5: Parmetros Estadsticos
Parmetros Estadsticos valor

0.00205411

0.0001771

0.00726153
n 3
t ( = 0,05) 12.71

a tSa = -0,0009 0,0023

b tSb = 0,75 0,09
Determinacin de la concentracin de Zinc en la
muestra de avena
Despus del tratamiento de la muestra se
midi la absorbancia para dos muestras
Tabla N6: Muestra de Avena

N Muestra Absorbancia
1 0.236984
2 0.246155

Aplicando la ecuacin de la recta de
calibracin se obtuvo los siguientes resultados:
Tabla N7: Concentraciones de Zn en la muestra

N Muestra
Concentracin de Zinc
(ppm)
1 0.31777
2 0.33002
M(prom) 0.323895

Y la incertidumbre de esta concentracin es:


S
Xo
= 0.003825847
Lmite de confianza de la muestra al 95%: t=12,71
x t SXo =0.323895 12,71 (0.003825847)
= 0.32 0.05 ppm
Clculo de la concentracin en la avena
Como diluyo en 50 mL y se sac en 1mL para el
anlisis.



Y segn en el empaque de la avena la cantidad de Zinc
es de 1,35mg para una porcin de 18 g.

Entonces la concentracin en la avena tericamente es
de

por lo cual se tendr:


Tabla N8: Comparacin
Avena "3 ositos"
Concentracin de
Zinc (ppm)
Valor Obtenido 53.3
Valor Referencial 75

y = 0.7486x - 0.0009
R = 0.9999
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Concentracin de Zn
+2
(ppm)
Zn (II)
X
i
Y
i
y* e
2
(x
i
-x`)
2
x
i
2

0.07 0.050 0.0515 9.025E-07 0.0350 0.0049
0.234 0.175 0.1742 2.86151E-06 0.0005 0.054756
0.468 0.348 0.3494 4.55355E-07 0.0443 0.219024


4.21937E-06 0.0800 0.27868
Anlisis de Zinc por espectrofotometra UV-Visible
Dando un porcentaje de error de:
%Error= (75-53,3)/75 x 100% =28,9%
4. Discusiones de los Resultados
Para poder obtener una mejor relacin con la
longitud de onda que se va a escoger para el anlisis de
la muestra se pas a hacer un barrido espectral del
ligando solo y del complejo y se superpuso en una
sola grafica para poder obtener la mejor ubicacin de
la longitud de onda la cual se observa a continuacin,
lo diferente en este caso es que el anlisis se hizo un
da anterior con los mismos patrones pero la ditizona
si tuvo q ser fresca (del da) pero la correlacin de la
mxima absorcin y su longitud de onda no vario
mucho de un da al otro.

Grfica N5: Espectros de absorcin de UV-Visible

El espectro de color rojo es del ligando solo
observando el valle formado justo en el pico ms alto
del complejo , lo que implica el mayor ajuste en esta
zona y la mejor aplicacin en este punto de la
absorbancia por eso se utiliz la longitud de onda
antes mencionada. Mejorando as la curva de
calibracin.
La recta de calibracin obtiene un R2 de
0.9999 que nos presenta una gran linealidad adems
segn los intervalos de confianza la recta pasa por el
origen de los ejes as mismos la pendiente se acerca a
1, dando una gran apreciacin a la recta.
El tratamiento de la muestra trajo consigo un
problema ya que la digestin acida no fue completa
debido a que en otras pruebas anteriores salieron
negativos los resultados, por lo cual se opt por esa
forma de anlisis de corto tiempo, as que la
concentracin obtenida en el laboratorio es menor a la
referencial en el paquete por que la digestin no
disolvi por completo la avena tratada.
Todo el proceso se hizo con base de agua
bidestilada o ultrapura, debido a que la ditizona es muy
sensible a los iones presentes en trazas.
5. Conclusiones
Se obtuvo la concentracin de 53,3

en la
muestra de 3g de la avena:3 Ositos mediante una
curva de calibracin por el mtodo de
Espectrofotometra UV-visible, y el referencial es de
75,0

dando un porcentaje de error de 28,9 %.


Agradecimientos
Agradeciendo a la Facultad de Ciencias de la
U.N.I y al profesor encargado del trabajo de
laboratorio, el profesor Larry Aguirre por la paciencia
en esperar a que obtengas resultados buenos en el
trabajo.
Referencias Bibliograficas:
[1] FLORES MARIOS, Betty Mercedes. Diseo y
validacin de un mtodo de anlisis por
espectrofotometra UV-vis para cinc (II) y
mercurio (II) en muestras acuosas. Tesis de
licenciatura. Pontificia Universidad Catlica del
Per, Facultad de Ciencias e Ingeniera,
Lima,2011
[2] Skoog, Douglas A. Holler, F. James, Crouch,
Stanley R. Principios de anlisis instrumental.
Editorial CENGAGE Learning. 6 edicin.
Mxico: 2008.






nm.
400.00 500.00 600.00 700.00 800.00
A
b
s
.
2.000
1.500
1.000
0.500
0.000
-0.500
Text
Complejo de
Zn(II) - Ditizona
Ditizona
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

Longitud de onda (nm)