Posgrado en INGENIERA DEL

AGUA Y DEL TERRENO.

CURSO: INSTRUMENTACIN Y
MTODOS DE ANLISIS
UMICO
TEMA: ESPECTROSCOPA
IN!RARRO"A #$
!%nda&en'os.
"os( L%)s Serrano Mar'*ne+
Es,e-'ros-o,)a )n.rarro/a
#. INTRODUCCIN
La espectroscopia vibracional fue una de lar primeras tcnicas espectroscpicas
que encontr un uso extendido, en particular la espectroscopia de absorcin infrarroja
(IR) que recibe su nombre de la regin del espectro electromagntico implicada. a!
una segunda forma de espectroscopia vibracional (Raman) que se sustenta en un
fundamento f"sico diferente ! proporciona informacin similar ! complementaria al IR.
La regin IR del espectro electromagntico se encuentra entre #$%&&'#& cm
'#
. (anto
desde el punto de vista de las aplicaciones como de los aparatos se puede dividir en tres
)onas* IR cercano (+IR)* #$%&&',&&& cm
'#
, IR medio* ,&&&',&& cm
'#
-IR lejano* ,&&'#&
cm
'#
, siendo en el IR medio donde se dan la ma!or"a de las aplicaciones anal"ticas
tradicionales, aunque desde la dcada de los %& la utili)acin del +IR .a experimentado
un innegable auge. /l +IR requiere una m"nima o nula preparacin de la muestra !
ofrece un an0lisis cuantitativo sin consumir o destruir la muestra. 1on frecuencia se
combina con un espectrofotmetro 2isible'3ltravioleta ! dispositivos de fibra ptica
para an0lisis remoto, encontrando especial inters en control de procesos.
4or su parte el IR lejano requiere el uso de fuentes ! materiales pticos especiales. /s
utili)ado para el an0lisis de compuestos org0nicos, inorg0nicos u organomet0licos que
contengan 0tomos pesados (masa atmica superior a #5) ! proporciona informacin 6til
en estudios estructurales.
4or lo que respecta al IR medio, existen espectrofotmetros comerciales desde
#5,&, aunque los avances m0s significativos en la tcnica se produjeron con el
desarrollo de instrumentos que incorporan el mtodo de transformada de 7ourier (7('
IR), que .a mejorado la calidad de los espectros ! minimi)ado el tiempo requerido para
la obtencin de datos. o! en d"a, casi todos los instrumentos utili)ados en
espectroscopia infrarroja est0n equipados con sistema de an0lisis que utili)an
transformadas de 7ourier de .a) sencillo.
3na de las grandes ventajas de la espectroscopia IR es su versatilidad, !a que
permite estudiar pr0cticamente cualquier muestra con independencia del estado en que
se encuentre* l"quidos, disoluciones, pastas, polvos, fibras, films, gases o superficies son
algunos ejemplos.
Como primera aproximacin, un espectro IR se obtiene al pasar radiacin a
travs de una muestra y determinar que fraccin de esta radiacin incidente ha sido
absorbida. La energa particular a la que aparece cada pico en un espectro guarda
relacin con la frecuencia de vibracin de una parte de la molcula.
1omo en otros procesos de absorcin de radiacin electromagntica, la
interaccin de la radiacin infrarroja con la materia provoca en sta alguna alteracin.
/n el caso que nos ocupa, esta alteracin guarda relacin con cambios en el estado
vibracional de las molculas. /l espectro vibracional de una molcula se considera una
propiedad f"sica 6nica ! por tanto caracter"stica de sta molcula. 8s", entre otras
aplicaciones, el espectro IR se puede usar como 9.uella dactilar: en la identificacin de
muestras desconocidas mediante la comparacin con espectros de referencia.
Los espectros son a menudo complicados ! resulta dif"cil asignar cada una de las
bandas que aparecen en ellos a movimientos atmicos espec"ficos. /sto no es siempre
necesario para extraer informacin mu! valiosa, de modo que el conocimiento
9incompleto: de los espectros no disminu!e su utilidad para reali)ar an0lisis
cuantitativos ! cualitativos. ;e .ec.o, la espectroscopia IR junto a la espectrometr"a de
masas ! la resonancia magntica nuclear, forman la base del an0lisis org0nico
cualitativo contempor0neo centrado en la identificacin de la estructura molecular de
compuestos ! me)clas desconocidas. (ambin es cada ve) ma!or relevancia del IR en el
campo del an0lisis cuantitativo, en el que la estimacin de contaminantes atmosfricos
provenientes de los procesos industriales ocupa un lugar relevante.
0. A1SORCIN EN EL IN!RARRO"O
$.#. <odelo mec0nico'cu0ntico de vibraciones* oscilador armnico
/n el tema anterior se estudi el origen del espectro de absorcin a partir de la
interaccin de la radiacin electromagntica con la materia. /n el caso concreto de la
absorcin de radiacin infrarroja, es posible adoptar un modelo cl0sico, visual e
intuitivo, que mati)ado desde el punto de vista de la mec0nica cu0ntica ilustra la
aparicin de los espectros en funcin de los movimientos vibratorios en la molcula.
3na simple molcula diatmica como el monxido de carbono (1=>) mantiene
unidos sus 0tomos mediante el solapamiento de varios orbitales. 8 una cierta distancia
internuclear .a! un balance entre las fuer)as atractivas ! las interacciones repulsivas que
tienen lugar entre los electrones internos de los dos 0tomos. /sta distancia de
equilibrio se puede modificar suministrando energ"a, ! en este sentido podemos pensar
en la molcula como dos masas conectadas por un resorte* un enlace qu"mico actuar"a
como un muelle que conecta dos 0tomos con masas <
#
! <
$
. Las masas vibran con
unas frecuencias caracter"sticas que dependen de ellas ! de la fortale)a del muelle (!)
seg6n la expresin de la f"sica cl0sica*
#
? @
$A
B
C
<
#
<
$
C @
<
#
D <
$
;onde ? es la frecuencia natural de vibracin de las masas- ! es la constante de fuer)a
del muelle (enlace qu"mico) que es una de medida de su rigide)- ! C es la masa
reducida.
Las tendencias que marca esta expresin se observan experimentalmente ! por tanto
permiten su aplicacin con cierto xito*
E Cuanto m"s fuertes o rgidos son los enlaces qumicos mayores son las
frecuencias observadas.
E Las masas atmicas menores tienden a originar frecuencias mayores.
Los cambios en la frecuencia debidos a las masas se aprecian bien cuando el
.idrgeno se sustitu!e por deuterio. 8s", es frecuente conseguir asignaciones de las
vibraciones de diferentes partes de una molcula observando los cambios de los
espectros vibracionales al reali)ar sustituciones isotpicas.
8 pesar del xito de esta analog"a, encontramos limitaciones en algunos
aspectos, sobre todo en los extremos de la vibracin donde esta expresin deber"a
contemplar por un lado la repulsin interelectrnica ! por otro la posible disociacin de
la molcula. 8dem0s, a escala atmica la teor"a cu0ntica requiere que slo sean posibles
ciertos niveles de energ"a, en otras palabras, el 9muelle molecular: slo podr"a ser
estirado en porciones de magnitud determinada. 8s", una ve) reali)ada esta
transicin entre la mec0nica cl0sica ! la cu0ntica, las soluciones de la ecuacin de
Fc.rGdinger para un oscilador armnico de masa C muestran que las energ"as permitidas
son*
E 2 3?456#708 5 2 9: #: 0;
a! dos aspectos interesantes de los niveles de energ"a en un oscilador armnico
que conviene resaltar* el estado energtico m0s bajo no tiene energ"a vibracional cero
sino / @ #H$.?, mientras que la separacin entre dos niveles contiguos cualesquiera es de
.?. /n ambos casos estas cantidades son ma!ores si el enlace es r"gido ! las masas de los
0tomos implicados en la vibracin son pequeIas.
4or 6ltimo, comentar que considerando un oscilador no'armnico como modelo
se afinan los resultados, sobre todo en los comportamientos extremos. Las principales
diferencias son que la separacin entre niveles se .ace m0s pequeIa conforme aumenta
el n6mero cu0ntico ! que la regla de seleccin es a.ora Jv @ K #,$,LM. /sto implica
que adem0s de la transicin fundamental son posibles otras a niveles m0s altos, aunque
con probabilidad menor ! decreciente. Fon los !a mencionados sobretonos que
aparecer0n a valores de frecuencia m6ltiplos de la vibracin fundamental.
$.$. <odos normales de vibracin
Las vibraciones en molculas poliatmicas son muc.o m0s complejas que en la
simple molcula diatmica que slo puede vibrar en un modo (stretc.ing).
/l n6mero de modos independientes de vibracin en una molcula de + 0tomos
se calcula asumiendo que el movimiento de cada 0tomo se puede describir en trminos
de despla)amientos a lo largo de tres direcciones espaciales, de modo que tendremos L+
despla)amientos a considerar (la molcula posee L+ grados de libertad). (res
combinaciones de esos despla)amientos resultan en el movimiento en el espacio de toda
la molcula ! por tanto se corresponden con traslaciones de su centro de masas. Fi la
molcula es no'lineal, otras tres combinaciones de despla)amientos especifican la
rotacin de toda la molcula alrededor de su centro de masas, por lo que quedan L+'N
combinaciones de despla)amientos en los 0tomos que dejan el centro de masas ! la
orientacin de la molcula inalterados, ! que son las distorsiones de la molcula que nos
interesan. (!)g%ra #: debajo)
#na molcula lineal de $ "tomos posee %$&' modos de vibracin, y una no
lineal %$&(. )*emplos+ C,
-
%x%&' . /0 1
-
, %x%&( . %0 23
(
%x4&( . 5'.
/stos modos normales son por tanto movimientos particulares del colectivo de
0tomos que conforman la molcula, independientes unos de otros ! con su frecuencia de
vibracin caracter"stica (7igura $). 8unque estos movimientos sean colectivos, en
muc.os casos es posible identificar la vibracin como principalmente de tipo stretching
o de tipo bending.
!)g%ra 0. Los tres modos normales del
$
> ?
#
@ LNO$ cm
'#
, ?
$
@ #O5O cm
'#
, ?
#
@ LPON cm
'#
.
/n teor"a se podr"a alterar cada enlace de la molcula, por lo que el n6mero
m0ximo de modos vibracionales stretching para un enlace dado vendr"a dado por el
n6mero de enlaces de ese tipo en la molcula. /n el caso del
$
> tenemos dos enlaces
>' que dar"an lugar a dos modos stretching ?(>'). /n realidad los dos enlaces no
vibran de forma independiente, sino que sus movimientos se acoplan ! vibran en fase o
en oposicin de fase, dando lugar a un modo simtrico ! otro asimtrico de las
'#
vibraciones (?
#@ LNO$ cm
! ?
L @ LPON cm'#
) con frecuencias parecidas porque ambos modos
suponen el estiramiento de los enlaces >'. ;e forma an0loga, slo un 0ngulo define
'#
esta molcula ! genera un 6nico modo vibracin bending para el
$
>. (?
$@ #O5O cm
)
Las absorciones stretching de un enlace aparecen a frecuencias m"s altas que las
correspondientes absorciones de tipo bending asociadas a ese enlace.
La excitacin de un modo asimtrico requiere mayor energa que el correspondiente
modo simtrico.
8 medida que intervienen ma!or n6mero de 0tomos en la molcula aumentan el
n6mero de modos normales ! con ellos la dificultad de visuali)arlos individualmente. /l
conocimiento de la simetr"a de la molcula como un todo ! de la simetr"a de cada modo
normal es crucial a la .ora de racionali)ar el estudio de las vibraciones moleculares. La
(eor"a de Qrupos aborda en profundidad el conocimiento de la simetr"a ! es una
.erramienta imprescindible para la comprensin terica de la espectroscopia
vibracional.
$.L. Randas activas en infrarrojo
+o todos los modos normales de una molcula necesariamente aparecen en el
espectro como picos de absorcin, siendo determinante para la seleccin de los mismos
la simetr"a de la molcula.
E El requerimiento general para absorber radiacin infrarroja es que la vibracin debe
producir un -a&<)o ne'o en e= &o&en'o d),o=ar de la molcula. (+=+ inactivo-
1=> activo)
E /n molculas altamente simtricas es frecuente que pares o triadas de modos sean
idnticos. /n este caso se llaman modos de vibracin degenerados ! dan lugar a una
sola banda. (/j. S(1>)
N
una 6nica banda stretching)
E Regla de exclusin* si una molcula tiene centro de inversin ninguno de sus modos
normales puede ser activo a la ve) en IR ! Raman, pudiendo ser un modo inactivo en
ambos.
E Las vibraciones que tienen frecuencias mu! cercanas suelen aparecer como una sola
banda.
E Las vibraciones que tienen poca intensidad pueden no ser observadas.
>. APARIENCIA DE LAS 1ANDAS
1omo se .a comentado, en los espectros de IR no se observan saltos vibracionales puros
(a una 6nica frecuencia ?), que dar"an lugar a bandas discretas mu! agudas. Los niveles
rotacionales son de muc.a menor energ"a ! .a! mu! poca diferencia entre una
transicin vibracional pura ! una rotacional'vibracional, por lo que se permiten
transiciones a niveles rotacionales cercanos. /l efecto observado en los espectros de
l"quidos ! slidos es la aparicin de bandas anc.as en el intervalo de frecuencias
permitido. /n un espectro t"pico se representa el T ( (transmitancia) frente al n6mero
de ondas expresado en cm
'#
(#HU que es proporcional a la frecuencia ? ! por tanto a la
energ"a / @ .?) ! se observan absorciones de distinta intensidad en el intervalo en
estudio. (!)g%ra >. /spectro de acetona). /n el an0lisis cuantitativo es m0s com6n
representar 8bsorbancia frente a n6mero de ondas.
!)g%ra >
)n resumen+ los enlaces vibran al absorber la energa adecuada dando lugar a un
espectro caracterstico. 2eg6n la fortale7a de los enlaces y la masa de los "tomos
implicados ser" necesaria m"s o menos energa para que se produ7ca la absorcin de la
radiacin. 8dem"s la simetra de la molcula y la de cada modo normal definen las
absorciones activas, por lo que el espectro IR se convierte en una propiedad molecular
especfica del compuesto en cuestin.
Posgrado en INGENIERA DEL AGUA Y DEL TERRENO.
CURSO: INSTRUMENTACIN Y MTODOS DE ANLISIS UMICO
TEMA: ESPECTROSCOPA IN!RARRO"A 0$E?%),os @ ,re,ara-)An de
&%es'ras.
"os( L%)s Serrano Mar'*ne+
B. INSTRUMENTACIN Y PREPARACIN DE MUESTRAS
Los espectrofotmetros IR tienen los mismos componentes b0sicos que el resto
de aparatos utili)ados en procesos de absorcin, por ejemplo en el estudio de la )ona
visible'ultravioleta del espectro. R0sicamente, se necesita un instrumento para medir la
transmisin de radiacin electromagntica de una muestra en funcin de la longitud de
onda o del n6mero de ondas. /l elemento m0s importante debe permitir aislar la
radiacin de regiones espectrales definidas ! permite diferenciar entre los distintos tipos
de espectrofotmetros* no dispersivos, dispersivos ! de transformada de 7ourier (7().
/n estos 6ltimos se utili)a un interfermetro que permite una modulacin de la
radiacin dependiente de la longitud de onda. >tro elemento esencial en los
espectrofotmetros es una fuente de radiacin que debe aportar la ma!or intensidad
posible en la regin de longitud de onda que se est0 investigando. Las fuentes de
radiacin trmicas (slido inerte calentado elctricamente) son las m0s utili)adas,
proporcionando una radiacin continua, en contraste, el uso de fuentes l0ser suministra
longitudes de onda mu! concretas. /l propsito del sistema ptico es transmitir la
radiacin desde la fuente al detector con la m"nima prdida. Los sistemas de lentes de
vidrio o cuar)o utili)ados en otras regiones no tienen utilidad en el IR porque absorben
radiacin, de modo que se utili)an espejos de vidrio con un recubrimiento de oro o
aluminio. /l sistema ptico va equipado con un compartimento para la muestra, en el
que sta se sit6a en el camino de la radiacin, bien mediante celdas u otros accesorios
que permitan reali)ar medidas diferentes a la transmisin.(/j. 8ttenuated (otal
reflectance 8(R) /l detector se emplea para convertir la seIal ptica en una seIal
elctrica f0cilmente medible, como el voltaje. /sto se consigue con la a!uda de equipos
electrnicos para amplificar ! digitali)ar las seIales. <ientras que los primeros
espectros se registraban de forma analgica sobre papel, .o! en d"a el ordenador es un
componente esencial con m6ltiple posibilidades para procesar ! almacenar los
espectros. Los aparatos basados en el mtodo de transformada de 7ourier ofrecen una
relacin seIalHruido muc.o mejor ! ma!or rapide) en la obtencin de espectros, por lo
que se imponen en el mercado. 8 continuacin se esquemati)a un instrumento de este
tipo. (!)g%ra B, a continuacin)
PC
!%e
n'e
In'er
.erA
&e'
ro
M%e
s'ra
De'e
-'or
A&
,=).
A7D
De'e
-'or
,.#. /spectrofotmetros 7('IR
Los espectrofotmetros dispersivos son los primeros que se utili)aron, aunque
mu! pocos quedan activos en la actualidad para medidas de rutina en el IR'medio.
/mplean un dispositivo para restringir la longitud de onda que se mide de forma
sucesiva, frente a la medida simult0nea de todas las longitudes de onda que reali)an los
aparatos basados en la transformada de 7ourier. /n stos 6ltimos el componente m0s
importante es el interfermetro (7igura O)
source
detector
sample
!)g%ra C./squema de un espectrmetro 7('IR con un interfermetro <ic.elson
cl0sico.
/n un interfermetro <ic.elson el .a) de radiacin que viene de la fuente se
divide mediante un espejo semipermeable (beamsplitter) en dos .aces parciales que se
reflejan en sendos espejos, uno fijo ! otro mvil, vuelven al beamsplitter ! se
recombinan en interferencia. 3n despla)amiento del espejo mvil cambia el camino
ptico en ese bra)o del interfermetro, introduciendo una diferencia de fase entre los
.aces ! por tanto un cambio en la amplitud de la interferencia. La intensidad de seIal
que llega al detector tras atravesar la muestra, representada como funcin de la
diferencia en la tra!ectoria de ambos .aces (retardo) es lo que se llama interferograma.
1on una radiacin monocrom0tica se obtiene una seIal coseno, que en el caso de
caminos pticos idnticos en ambos bra)os proporciona una interferencia constructiva
sin diferencia de fase entre los .aces ! por tanto una intensidad m0xima. Fi la fuente
suministra diferentes radiaciones el patrn de interferencia corresponde a la suma de las
seIales coseno generadas por las frecuencias individuales. /n la 7igura N se muestran
algunos interferogramas ! los espectros (intensidad en funcin de frecuencia o n6mero
de ondas) a los que dan lugar mediante la tratamiento matem0tico de transformada de
7ourier, observ0ndose que para bandas espectrales anc.as el m0ximo del interferograma
cae r0pidamente.
!)g%ra D* /spectros (i)qda.) ! sus respectivos interferogramas. Radiacin
monocrom0tica(a) ! radiacin continua de una fuente trmica (d)
/ste proceso que permite recoger informacin simult0nea acerca de la respuesta
de la muestra a todas las frecuencias en el rango de estudio se podr"a comparar con la
audicin de un concierto. /l o"do recoge la onda sonora compleja producida por la
orquesta, el nervio auditivo trasmite esta onda al cerebro, que a su ve) devuelve la
informacin sobre los instrumentos involucrados ! su intensidad en la orquesta* la
transformada de 7ourier de las ondas complejas traducidas a frecuencias e intensidades.
4or ra)ones tcnicas el inteerferograma no se guarda de forma continua sino punto a
punto. /sto requiere registrar de forma simultanea el patrn de interferencia de una lu)
monocrom0tica (laser e'+e .abitualmente) con un detector de diodo, de modo que ste
determina los puntos que ser0n recogidos (8s" la escala de frecuencia del
instrumento se relaciona con el l0ser, que aporta una referencia interna para cada
interferograma). La ma!or"a de espectrmetros 7('IR son instrumentos de un solo .a)
con un diseIo similar al que se muestra en la siguiente !)g%ra E.
)l estudio simult"neo de longitudes de onda en los aparatos basados en el
mtodo de transformada de 3ourier permite una relacin se9al:ruido mucho me*or y
mayor rapide7 en la obtencin de espectros que la ofrecida por los espectrmetros
dispersivos.
,.$. 8ccesorios est0ndar
Fe resumen aqu" las posibilidades existentes para situar la muestra en el .a) de
radiacin IR ! conseguir unas medidas de transmisin ptimas.
Las celdas son contenedores con un camino ptico definido apropiados para
situar muestras l"quidas o gaseosas en el paso del .a), que deben cumplir los siguientes
requisitos*
E Las ventanas deben ser permeables al paso de la radiacin a las
longitudes de onda en uso, ! a ser posible no porovocar pVrdidas por
reflexin o dispersin.
E /l material debe ser resistente a la muestra.
E /l camino ptico debe estar perfectamente definido para an0lisis
cuantitativo ! permitir variaciones en el an0lisis cualitativo.
E /n la medida de lo posible deben permitir recuperar la muestra.
/n la (aba siguiente se resumen los materiales m0s comunes utili)ados en las
ventanas de las celdas, especificando la regin espectral de aplicacin ! otras
propiedades de inters. /s f0cil deducir los cuidados en el manejo ! almacenamiento que
requerir0n la ma!or"a de estos materiales.
Material Range (cm
-
1
)
Properties
AgBr 22,000-
286
A soft crystal; insoluble in water; darkens upon exposure to U
radiation; will cold flow!
Ag"l #0,000-
$60
%oft crystal t&at is insoluble in water; darkens upon exposure to
U
radiation; will cold flow!
Al
2
'
$
(%app&ire)
*0,000-
#,6*0
+lass-like! %app&ire (Al
2
'
$
) is an extre,ely &ard
,aterial w&ic& is useful for U, -./ and ./
applications t&roug& * ,icrons!
A01./
(+eAs%e +lass)
##,000-62*
A01./ (A,orp&ous 0aterial 1rans,itting ./) is a glass;
insoluble in water, resistant to corrosion!
Ba2
2
63,000-
340
A &ard, brittle crystal; insoluble in water; good resistance to
fluorine and fluorides; no fog!
"a2
2
33,000-
#,##0
A strong crystal; resists ,ost acids and alkalis; wit&stands
&ig& pressure; insoluble in water; no fog!
"d1e 20,000-
400
5ower t&er,al conductity t&an 6n%e (used wit& "'
2
lasers)! Attacked by oxidi7ers! Also known
as .rtran-6!
"&alcogenide
(As%e1e glass)
4,000-800 +ood for 0id-./ fiber optics; c&e,ically inert!
"s. 40,000-
200
%oft crystal; soluble in water; &ydroscopic; offers an extended
trans,ission range! Because t&is ,aterial is so soft and
extre,ely &ygroscopic, it is 9ery difficult to polis&!
+e *,*00-600 A &ard, brittle crystal; insoluble in water; well suited for A1/!
:Br 40,000-
400
ery soft, water soluble crystal; low cost and good
trans,ission range; fogs!
:/%-*
(1&alliu,
Bro,ide-
.odide)
20,000-
2*0
A soft crystal, defor,s under pressure; good A1/ ,aterial!
%oluble in bases and insoluble in acids! 1oxic!
-a"l 40,000-
62*
ery soft, water soluble crystal; low cost and good
trans,ission range; fogs!
;olyet&ylene
(&ig& density)
600-$0
<xcellent for 2ar-./, 9ery c&eap, attacked by few sol9ents,
difficult to clean
6n%
("leartra
n)
#3,000-
8$$
A water-free for, of 6n%! .nsoluble in water! Also known as
.rtran-2
6n%e #3,000-
320
A &ard and brittle crystal; inert; ideal ,aterial for A1/! Also
known as .rtran-#!
1eldas desmontables* /l tipo m0s sencillo de celda consta de dos ventanas
circulares de unos $O mm de di0metro separadas por un espaciador de aluminio o (efln
con un grosor variable entre #& ! O&&Wm dependiendo de la intensidad ! concentracin
del espectro a medir. (!)g%ra F) /l camino ptico que dicta el espaciador no se define de
forma precisa, !a que est0 influenciado por la cantidad ! viscosidad de la muestra que
quede entre el mismo ! la ventana. 4or este motivo las celdas desmontables slo se
utili)an en medidas cualitativas.
!)g%ra F* #.' ventanas- $.' anillo espaciador- L.' anillos intermedios- ,.' soporte.
1eldas con camino ptico definido* 8l igual que las anteriores tienen dos
ventanas con un espaciador del grosor adecuado, aunque en este caso una de las
ventanas presenta dos orificios para el llenado del la celda. /stos orificios
contin6an en el anillo intermedio ! el soporte para acabar en un cuello que se
cierra con un tapn de (efln. 3na ve) cerradas pueden contener disolventes con
puntos de ebullicin por encima de N&X1, aunque .a! que tener en cuenta que la
muestra se calienta con el paso de la radiacin ! que el consiguiente aumento de
presin puede traducirse en la evaporacin parcial o completa de la muestra por
fugas entre las ventanas ! el espaciador. +ormalmente se montan una ve) ! se
reutili)an. 1omo alternativa se encuentran celdas comerciales selladas que
permiten utili)ar disolventes con puntos de ebullicin m0s bajos. /stas celdas se
emplean en medidas cuantitativas en las que es necesario conocer con exactitud
el camino ptico ! mantenerlo constante, al menos durante la serie de medidas de
calibracin ! de la muestra en estudio.
!)g%ra G* celda para an0lisis cuantitativo de l"quidos.
1eldas para gases* ;e acuerdo con la menor densidad de los gases se necesita un
camino ptico ma!or que t"picamente puede estar entre O ! #& cm (esta 6ltima se
muestra en la !)g%ra #9). 3na celda consiste en un cilindro de unos ,O mm de di0metro
con dos orificios que se puedan cerrar ! resistentes a vac"o, terminada en dos ventanas
paralelas en torno a O& mm de di0metro. 1uando .a! que determinar tra)as en gases
poco absorbentes se usan celdas de multireflexin, que mediante un sistema de espejos
permiten alcan)ar caminos pticos incluso de ,&m.
!)g%ra #9
Foportes para pastillas ! films* Fe pueden utili)ar dos pastillas de YRr de unos
#L mm de di0metro colocadas en un soporte simple adecuado para estudios rutinarios.
>tra opcin es fijar directamente films o l0minas de polietileno entre las que se coloca
una suspensin de la muestra en una pie)a de cartn perforada que adem0s se ajuste a
los ra"les dispuestos para la sujecin de los soportes est0ndar.
7inalmente mencionar que para cantidades mu! pequeIas de muestra existen las
correspondientes microceldas para gases ! l"quidos, as" como las .erramientas para
preparar micropastillas. 8simismo existen concentradores de la radiacin para dirigirla
exactamente sobre la muestra.
,.L. 4reparacin de muestras
4or lo que respecta a las muestras, la /spectroscopia IR es una tcnica vers0til
que permite obtener espectros de slidos, l"quidos ! gases utili)ando en cada caso las
celdas o soportes adecuados. 1omo se .a comentado, el material en cuestin debe ser
transparente a la radiacin incidente ! los .aluros alcalinos son los que m0s se emplean
en los mtodos de transmisin (+a1l, YRr, Y1l etc.). /n comparacin con otras
tcnicas instrumentales, las muestras a anali)ar requieren poca o ninguna preparacin.
Rasta con moler el slido en una matri) de YRr o disolver la muestra en un disolvente
apropiado (se prefiere 11l
,
o 1F
$
). /l agua debe ser retirada de la muestra siempre que
sea posible, !a que tiene una fuerte absorcin en la regin infrarroja. /l tiempo de
an0lisis para obtener un espectro en una muestra rutinaria es de # a #& minutos,
dependiendo de la resolucin ! el n6mero de barridos requerido.
;e acuerdo con la le! de Reer I @ I
o
e
'abc
la trasmitancia ( @ IHI
o
es funcin de la
absortividad, el camino ptico ! la concentracin, de modo que para obtener un espectro
de intensidad moderada de una muestra slida o l"quida no diluida son suficientes
caminos de &.&#'&.&O mm. /s necesario variar este par0metro en funcin de la
concentracin de la muestra. 8unque las cantidades en an0lisis de rutina pueden variar
en funcin de la muestra disponible, el l"mite inferior cuando el slido se anali)a en un
disolvente adecuado, estar"a en torno a #'#& Wg- # mg para pastillas de YRr- para
anali)ar un l"quido, basta con &,O Wl. ! para anali)ar un gas, es suficiente una
concentracin de O& ppb (en este caso con el comentado aumento del camino ptico).
;reparacin de muestras lquidas+ Las celdas mencionadas en el apartado anterior se
usan para medir disoluciones diluidas de muestras slidas ! l"quidas disueltas en
disolventes transparentes al IR. ;esafortunadamente ning6n disolvente es transparente a
lo largo de todo el IR medio. Los m0s utili)ados son* el 11l
,
para la regin ,&&&'#LL&
cm
'#
! el 1F
$
para la regin #LL&'N$O cm
'#
. 8mbos disolventes son bastante txicos !
deben ser manipulados con precaucin. Fe puede reempla)ar el 11l
,
con el 11l
$
'11l
$
o
con el 1
$
1l
$
, menos txicos, ! sustituir el 1F
$
con n'.exano o n'.eptano. Los
disolventes polares, como el agua o los alco.oles son raramente usados, !a que
absorben fuertemente en el IR medio ! reaccionan con los .aluros de los metales
alcalinos, como el +a1l, com6nmente usados como ventanas transparentes al IR.
4ara ensa!os cualitativos es suficiente una gota colocada entre las ventanas de una celda
desmontable, mientras que con muestras de dbil absorcin se usan espaciadores de $O'
O& Wm. a! que cerrar con cuidado la celda, evitando atrapar burbujas de aire !
apretando los tornillos suficientemente pero sin romper las ventanas.
La preparacin de disoluciones es un paso importante en los estudios por IR. ;isolver
muestras slidas, reducir la viscosidad de l"quidos ! sobre todo, diluir la muestra para as"
poder usar caminos pticos m0s largos ! reproducibles en el an0lisis cuantitativo.
("picamente se anali)an disoluciones de una concentracin de &,&O T a #&T en clulas
de &,# a # mm de espesor. 3na combinacin pr0ctica puede ser un #& T de
concentracin ! un camino ptico de &,# mm. 4uesto que se necesitan vol6menes
pequeIos de muestra, se suele utili)ar el mtodo gravimtrico en su preparacin.
;reparacin de muestras slidas * La ma!or"a de los compuestos org0nicos presentan
numerosos picos de absorcin en el infrarrojo medio, ! encontrar un disolvente que no
d lugar a solapamiento de picos es con frecuencia imposible. 1omo consecuencia, a
menudo se obtienen los espectros de dispersiones del slido en una matri) l"quida o
slida. Qeneralmente, en estas tcnicas la muestra slida se debe pulveri)ar .asta que el
tamaIo de sus part"culas sea menor que la longitud de onda de la radiacin (Z$ Wm) para
evitar los efectos de la dispersin de la misma.
Pas')==as: 3na de las tcnicas m0s populares es la formacin de pastillas de YRr
(tambin se .an usado otros .aluros de metales alcalinos). Las sales de .aluros tienen la
propiedad de flujo en fr"o (cold flo<), por lo que, cuando se somete a la presin
adecuada este material finamente pulveri)ado, sinteri)a ! forma una tableta transparente
que se asemeja a un cristal. 8l usar esta tcnica, se me)cla a fondo un miligramo o
menos de la muestra finamente pulveri)ada, con aproximadamente #&&'L&& mg de
polvo de YRr. La me)cla se puede reali)ar con un mortero ! su mano o en un pequeIo
molino de bolas. 4osteriormente se presiona la me)cla en un troquel especial entre P&&
! #&&& BgHcm
$
.asta obtener un disco transparente. Fe obtienen mejores resultados si el
disco se prepara a vac"o para eliminar el aire ocluido. 8 continuacin, el disco se coloca
en la tra!ectoria del .a) del instrumento para su examen espectroscpico. Los espectros
obtenidos presentan a menudo bandas a L,O& ! #N,& cm
'#
debidas a la .umedad
absorbida.
!)g%ra ##. (roquel para fabricar discos uniformes con reproducibilidad
4ara muc.os compuestos las pastillas de YRr producen espectros excelentes para
medidas cualitativas que aparecen en las colecciones de espectros (+o es una tcnica
mu! utili)ada en el an0lisis cuantitativo). 8l ser un compuesto inico, el YRr transmite a
lo largo de la ma!or parte de la regin del infrarrojo .asta una frecuencia de
aproximadamente ,&& cm
'#
. /l ioduro de cesio absorbe por debajo de $&& cm
'#
! se
utili)a para ma!or transparencia a bajas frecuencias.
;espus del prensado es importante reali)ar una limpie)a cuidadosa de todos los
accesorios, puesto que los residuos de YRr pulveri)ado son .igroscpicos ! mu!
corrosivos una ve) .6medos. /n relacin con esto conviene resaltar la elevada polaridad
de los .aluros alcalinos que pueden incluso interactuar f"sica o qu"micamente con la
muestra, de tal modo que el espectro registrado por este mtodo puede diferir si lo
medimos empelando alguno de los mtodos que se comentan a continuacin. 8lgunos
cambios son la .idratacin de la muestra, saponificacin de esteres, sustitucin de
grupos funcionales por .aluro o descomposicin del producto. Fi se observan anomal"as
en la identificacin de la muestra es recomendable probar otra tcnica de preparacin.
S%s,ens)ones: 1uando los slidos no son solubles en un disolvente transparente en la
regin del infrarrojo ni es conveniente prepararlos en forma de pastillas de YRr, sus
espectros de infrarrojo se suelen obtener por dispersin del analito en una suspensin de
un aceite mineral o un .idrocarburo fluorado. Las suspensiones se preparan moliendo de
$ a O mg de la muestra finamente pulveri)ada (tamaIo de part"cula Z$ Wm) en presencia
de una o dos gotas de un aceite .idrocarbonado pesado (+ujol, !)g%ra #0). Fi es
probable que interfieran las bandas del .idrocarburo se pueden sustituir por #,L'
.exaclorobutadieno. /n cualquiera de los casos, la suspensin resultante se examina
luego como una delgada pel"cula entre dos placas de sal o dos l0minas de polietileno.
!)g%ra #0
LH&)nas de=gadas de ,o=*&eros: Fe pueden obtener, con a!uda de un par de placas
calientes ! una prensa, l0minas delgadas de pol"meros con un espesor altamente
reproducible, desde #O .asta O&& Wm. Respecto a la cantidad de muestra necesaria, para
.acer un disco de $& mm de di0metro basta con #& mg de pol"mero si se quiere .acer
una l0mina de #O Wm de espesor. /sta l0mina se anali)ar0 por transmisin.
;ebido a que ciertos pol"meros, como el nailon, se oxidan ! descomponen un poco por
encima de su temperatura de reblandecimiento, es preciso elevar la temperatura en su
justa medida ! prensar el pol"mero con cuidado.
(emperaturas de reblandecimiento orientativas para varios pol"meros
Fi la muestra de pol"mero es soluble en un disolvente mu! vol0til es posible
preparar un film a partir de una disolucin mu! concentrada que se deja evaporar sobre
un soporte met0lico.
8l igual que ocurre con las pastillas de YRr, films delgados de polietileno se pueden
utili)ar como soporte de muestras l"quidas o de suspensiones de slidos en +6jol. /stos
films se montan a su ve) sobre pie)as de cartn compatibles con los mecanismos de
sujecin estandard de los aparatos.
;reparacin de muestras gaseosas * /n el caso de los gases se requiere un mtodo de
trabajo diferente a los mencionados. /s tambin posible reali)ar estudios cuantitativos !,
con la suficiente resolucin, el espectro permite obtener conclusiones adicionales sobre
el diseIo molecular basadas en la estructura fina rotacional.
Las muestras gaseosas suelen distribuirse ! almacenarse en cilindros met0licos o de
vidrio, desde lo que .a! que transferirlas a la celda, normalmente utili)ando un aparato
de vac"o que tras la evacuacin del sistema permite una medida exacta de la presin
parcial. ;espus de forma similar se aIade nitrgeno para conseguir la presin total
deseada, puesto que .a! una importante dependencia de la absortividad con esta
magnitud que .a! que considerar en los ensa!os cuantitativos. 8s", es mu! importante
utili)ar la misma presin total en las medidas de la muestra ! en la correspondiente
calibracin
,.,. >tros mtodos ! accesorios
(ambin se puede observar el comportamiento de los slidos en el infrarrojo por
tcnicas de reflectancia ! por el mtodo fotoac6stico. /stos espectros son, con
frecuencia, similares a los espectros de absorcin ! proporcionan la misma clase de
informacin.
A--esor)os de re.=e-'an-)a 'o'a= a'en%ada 4RTA8: /sta gama de dispositivos son
especialmente 6tiles para obtener espectros IR de muestras que no pueden ser colocadas
en los soportes .abituales para el mtodo de transmisin. 8s", son apropiadas para
estudiar slidos gruesos insolubles o mu! absorbentes, muestras l"quidas, inclu!endo
l0minas, recubrimientos, polvos, .ilos, ad.esivos, pol"meros ! muestras acuosas. La
R(8 requiere poca o ninguna preparacin para la ma!or"a de las muestras ! es una de las
tcnicas de muestreo m0s vers0tiles.
La R(8 ocurre cuando un .a) de radiacin entra desde un medio m0s denso (con un
ma!or "ndice de refraccin) en un medio menos denso (con un menor "ndice de
refraccin). La fraccin del .a) incidente reflejado se incrementa cuando aumenta el
0ngulo de incidencia. (oda la radiacin incidente se refleja en la interfa) cuando el
0ngulo de incidencia es ma!or que el 0ngulo cr"tico (que es funcin del "ndice de
refraccin). /l .a) penetra una distancia mu! pequeIa m0s all0 de la interfa) .acia el
medio menos denso antes de que suceda la reflexin completa. /sta penetracin se
llama [onda evanescente\ ! se produce a una profundidad de unas pocas micras. Fu
intensidad se ve atenuada por la muestra en las regiones del espectro IR donde la
muestra absorbe.
/n la pr0ctica, la muestra se coloca en contacto "ntimo con un cristal denso ! altamente
refractivo, de ]nFe, bromuro de talio ^ ioduro de talio (YRF'O) o de Qe. /l .a) IR se
dirige .acia un extremo biselado del cristal ! se refleja internamente a lo largo del cristal
con una o m0s reflexiones. (anto el n6mero de reflexiones como la profundidad de la
penetracin decrecen con el incremento del 0ngulo de incidencia. 4ara un 0ngulo dado,
las ma!ores relaciones longitudHespesor dan un ma!or n6mero de reflexiones. /xiste una
variedad de tipos de accesorios de R(8, como los verticales de 0ngulo variable, de $O a
POX, los cristales .ori)ontales o las cubetas cil"ndricas de reflectancia interna para
evaluacin de l"quidos.
/l espectro resultante R(8'IR se asemeja al espectro IR convencional, pero con algunas
diferencias* las posiciones de las bandas de absorcin son idnticas en ambos espectros,
pero las intensidades relativas de las bandas correspondientes son diferentes. 8unque los
espectros R(8 se pueden obtener usando instrumentos dispersivos o por transformada de
7ourier, estos 6ltimos permiten obtener espectros de ma!or calidad en situaciones en las
que la intensidad de la seIal se .alla limitada.
Re.=e-'an-)a es,e-%=ar: 1onstitu!e un mtodo no destructivo para anali)ar capas
delgadas sobre sustratos selectivos sin necesidad de preparacin de la muestra. La
reflexin especular se observa cuando el medio reflectante es una superficie
enormemente pulida. /n este caso el 0ngulo de reflexin es igual al 0ngulo de
incidencia de la radiacin. Fi la superficie contiene una sustancia capa) de absorber
radiacin en el infrarrojo, la intensidad relativa de la reflexin es menor en las
longitudes de onda donde la superficie absorbe que en las longitudes de onda en las que
no .a! absorcin. 4or ello, la representacin gr0fica de la reflectancia, que es la fraccin
de la potencia radiante incidente que se refleja respecto a la longitud de onda o n6mero
de onda, proporciona un espectro para un compuesto que es similar, en su aspecto
general, al espectro de transmisin de la especie. Los espectros de reflexin especular se
pueden utili)ar para el examen ! caracteri)acin de las superficies lisas de slidos ! de
slidos revestidos, pero no se utili)a tanto como los espectros de reflexin difusa ! total.
Re.=e-'an-)a d).%sa: La espectrometr"a de reflectancia difusa es una forma efica) de
obtener espectros en el infrarrojo directamente sobre muestras pulveri)adas con un
m"nimo de preparacin de la misma. 8dem0s de a.orrar tiempo en la preparacin de la
muestra, permite la obtencin de datos de la regin espectral del infrarrojo convencional
de muestras que no .an sufrido una alteracin apreciable de su estado original. 4ara el
an0lisis, basta con .acer una me)cla al O T de la muestra molida en Y1l.
Posgrado en INGENIERA DEL AGUA Y DEL TERRENO.
CURSO: INSTRUMENTACIN Y MTODOS DE ANLISIS UMICO
TEMA: ESPECTROSCOPA IN!RARRO"A >$A,=)-a-)ones.
"os( L%)s Serrano Mar'*ne+
C. INTERPRETACIN DE LOS ESPECTROS: !RECUENCIAS DE GRUPO
3na ve) que se registra el espectro, sigue la etapa crucial de interpretacin del
mismo. 4or suerte sta se simplifica, debido a que las bandas se pueden asignar a partes
concretas de la molcula que producen lo que se llama frecuencias de grupo*
)nde,end)en'e&en'e de a ?%( es'( %n)do: %n gr%,o .%n-)ona= a<sor<e rad)a-)An
4genera %na <anda de IR8 en %n )n'er5a=o -on-re'o de .re-%en-)as. 8s", las
frecuencias de grupo permiten establecer si est0 presente o ausente en la muestra un
grupo funcional dado.
Fe .a ido acumulando informacin sobre la gama de frecuencias a la que pueden
esperarse que absorban los distintos grupos funcionales, ! se presenta en gr0ficas de
correlacin. Fe .an creado tambin bases de datos espectrales que facilitan la b6squeda
! comparacin, en ocasiones incluidas en el soft_are de algunos aparatos.
C.# Reg)ones es,e-'ra=es )&,or'an'es en e= IR
/l IR medio se suele estudiar en cuatro )onas*
#. Regin de vibracin de extensin `' (,&&&'$O&& cm
'#
)
/sta absorcin corresponde a la extensin de enlaces con .idrgeno (alco.oles,
aminas ! enlaces 1'), ! no se ve mu! afectada por el resto de la molcula por lo que
las bandas son bastante constantes en esa )ona.
Las vibraciones de stretching 1' de los grupos metilo ! metileno son las m0s
caracter"sticas a la .ora de identificar un compuesto como org0nico conteniendo al
menos un centro alif0tico, ! aparecen entre L&&&'$%O& cm
'#
.
/l >' stretching produce una banda anc.a en el rango LP&&'LN&& cm
'#
, que
probablemente es una de las m0s dominantes ! caracter"sticas entre las absorciones de
grupos funcionales. Fi .a! enlace por puente de .idrgeno (mu! frecuente aunque en
distinta extensin) se produce un ensanc.amiento de las bandas ! una ligera
disminucin en la frecuencia de absorcin. La distincin entre alco.oles primarios,
secundarios ! terciarios se .ace con la a!uda de las bandas 1'>' stretching ! >'
bending.
/l +' stretching se suele observar entre L,&& ! LL&& cm
'#
! generalmente es una
absorcin m0s aguda que la >'. Los compuestos con el grupo +
$
presentan una
estructura doblete mientras que las aminas secundarias tienen una 6nica banda aguda.
2i hay humedad en la muestra, absorciones anchas debidas a las vibraciones ,&
1 en torno a %'== y 5/== cm
&5
ocultan la existencia de otras posibles bandas en
esas 7onas.
$. Regin del triple enlace ($O&&'$&&& cm
'#
)
/n esta regin absorbe un n6mero mu! limitado de compuestos, de modo que su
presencia se .ace f0cilmente evidente ('1=+, 1=>, '1=1', '+
D
=1
'
').<ientras que el '
1=1' stretching se presenta como una banda mu! dbil, las dem0s son de intensidad
media.
L. Regin del doble enlace ($&&&'#OO& cm
'#
)
Las bandas principales se deben al grupo carbonilo 1@> (#%L&'#NO& cm
'#
) ! al doble
enlace 1@1, siendo la primera muc.o m0s intensa que la segunda ! una de las m0s
f0ciles de reconocer en el espectro. >tras bandas en esta )ona son la 1@+ ! la flexin de
aminas ! alco.oles.
)n la asignacin de stas flexiones y en la identificacin del grupo funcional que
contiene el carbonilo conviene chequear la 7ona >&1 stretching y el resto del
espectro para evitar confusiones
3na serie de bandas dbiles de combinacin entre $&&& ! #NO& cm
'#
se suelen
utili)ar para asignar el grado de sustitucin en anillos bencnicos.
,. Regin de .uella dactilar (#O&&'N&&cm
'#
)
/n esta regin del espectro pequeIas diferencias en la estructura ! la
constitucin de una molcula dan por resultado cambios importantes en la distribucin
de los picos de absorcin. 1omo consecuencia, =a -orres,onden-)a de dos es,e-'ros en
es'a reg)An -ons')'%@e %na ,r%e<a de s% )den')dad. <uc.os enlaces sencillos
absorben en esta regin ! se produce fuerte interaccin entre enlaces vecinos. ;ebido a
su complejidad, es mu! dif"cil interpretar de forma exacta el espectro en esta regin (a
diferencia de las anteriores), pero es esta complejidad ! singularidad la que permite la
utilidad de identificacin como 9.uella dactilar:.
C.0 A,=)-a-)ones de= IR en anH=)s)s -%a=)'a')5o
1omo se .a expuesto en el apartado anterior, la identificacin de grupos funcionales
espec"ficos, especialmente en molculas org0nicas, es la aplicacin principal de la
espectroscopia IR, en tanto que permite la caracteri)acin de sustancias desconocidas !
el seguimiento de especies concretas. 8 continuacin se presentan las principales
familias de compuestos en los que esta tcnica .a encontrado aplicacin cualitativa.
^ Co&,%es'os orgHn)-os
3na de las principales aplicaciones de la /spectroscopia IR es la identificacin de
compuestos org0nicos. aa se .an comentado las principales )onas del espectro que
denotan la aparicin de grupos funcionales. /n las tablas de correlacin se encuentra
informacin ex.austiva para un gran n6mero de grupos org0nicos.
^ Co&,%es'os )norgHn)-os
Los compuestos inorg0nicos son estudiados .abitualmente por IR. Reciben especial
atencin los compuestos de boro, silicio ! fsforo.
^ Po=*&eros
/sta tcnica es un mtodo .abitual para la caracteri)acin de pol"meros, ofreciendo
informacin sobre la estructura ! composicin del material. 8s", se obtienen datos de
isomer"a conformacional ! configuracional, enlaces por puente de .idrgeno, orden en la
cadena ! cristalinidad.
^ S)s'e&as <)o=Ag)-os
La comprensin de las relaciones entre la estructura ! la funcin de los materiales
biolgicos es uno de los retos en la biolog"a actual. La /spectroscopia IR .a demostrado
ser una .erramienta poderosa en el estudio de molculas biolgicas, especialmente las
prote"nas ! los l"pidos.
D. ANLISIS CUANTITATIIO
1ada propiedad de una sustancia que dependa claramente de su concentracin puede
utili)arse como base para un mtodo de an0lisis cuantitativo. /n el caso del IR se utili)a
la cantidad de radiacin electromagntica absorbida, ! el par0metro a medir es el
cociente entre la intensidad de la radiacin (de una longitud de onda determinada) antes
! despus de atravesar la muestra. La le! de Reer describe la relacin entre esta
magnitud determinada experimentalmente ! la concentracin*
A 2 $=og4I7I
o
8 2 a J < J -
donde < es el espesor de la celda que atraviesa la radiacin ! a: la absortividad
molar, es una constante para cada sustancia a una longitud de onda. /sta relacin de
proporcionalidad directa motiva que sea la absorbancia la magnitud utili)ada en
estudios cuantitativos, mientras que la transmitancia se prefiere en los estudios
cualitativos. 8s" pues, una representacin de la absorbancia frente a la concentracin
debe ser lineal con una pendiente a< ! debe pasar por el origen.
/n teor"a, para anali)ar una disolucin de concentracin desconocida se deben
preparar disoluciones patrn, elegir una banda adecuada, medir la absorbancia a esa
longitud de onda ! dibujar una recta de calibrado. La concentracin de la muestra
problema se .allar0 en esta recta de calibrado a partir del dato experimental de
absorbancia medido en el aparato. 8lgunos matices importantes a esta situacin son
necesarios* respecto a la preparacin de disoluciones de concentracin conocida, deben
tener valores de 8bsorbancia adecuados, ni demasiado dbiles ni demasiado intensos-
.a! que elegir cuidadosamente el pico de absorcin entre los m0s intensos que no
presenten solapamiento (el stretc.ing del grupo carbonilo 1@> es mu! utili)ado)-
cuando aparecen picos asimtricos (frecuente en muestras slidas) se debe utili)ar el
0rea bajo las bandas en lugar de la altura m0xima. /stos ! otros aspectos se anali)an con
m0s detalle a continuacin.
?eterminacin de la absorbancia
7rente a la determinacin del 0rea total bajo una banda, se suele preferir la medida
de la intensidad en el m0ximo de un pico 8
max
en la posicin de n6mero de ondas
correspondiente. 4ara ello se registra el fondo (bacBground) colocando la celda con el
disolvente puro, que debe tener un "ndice de refraccin similar al del material utili)ado
en la ventana. Luego se pone la muestra en la celda ! se registra el espectro, a partir del
cual se calcula la intensidad. (7igura #) 4ara ello se tra)a una l"nea perpendicular en el
m0ximo de absorcin ! su transmitancia se mide en el eje a. /l valor de la l"nea de base
en este eje se toma como I
o
de modo que el c0lculo de 8 es inmediato. 8ctualmente los
aparatos van acompaIados de un soft_are que permite reali)ar estas medidas de forma
sencilla ! automati)ada, ! la presentacin en absorbancia es una opcin disponible.
!)g%ra # .10lculo de 8bsorbancia 8
max
@ 'log (&.$PH&.P5) @ &.,NN
8bsortividad y calibracin
aa se .a comentado que se debe obtener emp"ricamente la relacin entre A ! - en
cada nueva situacin mediante una recta de calibrado. /sta debe incluir el rango de
concentracin de las muestras problema para evitar errores acarreados por la
extrapolacin. /xisten varias fuentes de errores, algunas son un termostatado
insuficiente, una resolucin espectral demasiado baja, divergencia del .a) en la celda,
camino ptico variable, ventanas no paralelas, reflexin o efectos de interferencia
/n la reali)acin de la recta de calibrado, normalmente se evita usar la l"nea de
fondo como base de evaluacin, puesto que aporta incertidumbre a las medidas !
requiere reali)ar un espectro adicional. Lo .abitual es tomar una l"nea entre dos puntos a
ambos lados de la banda en cuestin, que estn en posiciones reproducibles ! con
valores de transmitancia similares, normalmente en m"nimos de absorcin (7igura $, a).
4or otra parte, el camino ptico < se selecciona de modo que el m0ximo de la muestra
patrn de concentracin m0s elevada tenga un valor aproximado de ( @ &.$O.
!)g%ra 0 >pciones para determinarar la l"nea de fondo. Los valores entre
flec.as se convierten a 8
max.
8 continuacin se recogen los datos ! la recta de calibrado correspondiente a una
muestra de aspirina disuelta en cloroformo, en la que se utili)a la banda de carbonilo a
#PN, cm
'#
(7igura L)
La transferencia de datos de calibracin de un espectrmetro a otro, as" como el uso
de valores de absortividad publicados en la bibliograf"a suelen acarrear errores, por lo
que no son pr0cticas recomendables.
;e un modo similar es posible reali)ar el an0lisis multicomponente, en el caso m0s
sencillo con dos sustancias cu!as bandas en evaluacin no interfieran. 3n ejemplo
podr"a ser una me)cla de acetona ! ben)onitrilo, utili)ando respectivamente las bandas a
#P#O ! $$L& cm
'#
. (ambin se suele emplear en el an0lisis de un componente de una
me)cla, especialmente cuando las sustancias que la componen son mu! parecidas (ej.
ismeros estructurales). /l espectro IR de ismeros es mu! distinto en la )ona de la
.uella dactilar.!, como se .a comentado, esta tcnica es no'destructiva ! requiere una
cantidad mu! pequeIa de muestra. 3n ejemplo t"pico es el an0lisis de me)clas de
.idrocarburos arom0ticos, como ilustra con la siguiente figura en la que aparecen
espectros de ismeros 1
%

#&
* o'xileno, m'xileno, p'xileno ! etilbenceno.
!)g%ra B
Las rectas de calibrado slo son v0lidas si se mantiene invariable el camino
ptico. 4ara trabajar con independencia de ste se .acen medidas relativas, de manera
que en lugar de representar la 8
max
de la muestra se utili)a el cociente entre este valor !
la absorbancia de una sustancia est0ndar 8
st
. 8mbas medidas se reali)an con la misma
celda ! un est0ndar .abituaI es el ciclo.exano puesto que tiene tres bandas de distinta
intensidad que permiten su utili)acin para distintos rangos de camino ptico. 1uando se
trabaja con pastillas en estudios cuantitativos es recomendable utili)ar este mtodo.
8n"lisis de gases* Los gases requieren un mtodo de evaluacin algo diferente, debido a
la dependencia de la absorbancia con la presin ! temperatura. Fe comien)a
introduciendo en la celda el gas patrn puro ! seguidamente nitrgeno .asta un valor de
presin total determinado, que ser0 constante en todo el proceso para dar cuenta del
ensanc.amiento de las bandas producido por aumentos en este par0metro. Fi la banda en
evaluacin es demasiado intensa se dilu!e .asta una presin parcial que la sit6e en un
rango adecuado. ;espus se dilu!e el gas patrn a menores presiones parciales,
aIadiendo nitrgeno para alcan)ar el valor prefijado de presin total, obteniendo as" una
recta absorbancia H presin parcial v0lida para la temperatura en estudio. Fi .a! cambios
en la temperatura de medida , el valor de presin parcial se debe corregir con la
expresin 4H( @ 4bH(b
Interpretacin y tratamiento de los resultados Los avances de la tecnolog"a de los
computadores asociados a la espectroscop"a .a permitido la expansin del IR
cuantitativo. La aplicacin de mtodos estad"sticos al an0lisis de datos experimentales se
conoce como quimiometr"a, ! .o! en d"a se considera el 6ltimo paso en la determinacin
de la composicin de una muestra* el c0lculo ! la evaluacin de los resultados anal"ticos.
Los mtodos m0s frecuentes en la espectroscopia infrarroja son los m"nimos cuadrados
cl0sicos (1LF), inverso (ILF) o parcial (4LF) o la regresin de componentes principales
(41R). 1uando no es necesario conocer la concentracin espec"fica de las especies, sino
conocer cuales de ellas est0n presentes en una me)cla compleja, se usan otros mtodos
de reconocimiento de patrones multivariable como el an0lisis lineal discriminante
(L;8) o redes neurales artificiales (8++s). /stos mtodos pueden comparar muc.as
variables dentro de un juego de datos, como intensidad, frecuencia ! anc.ura de banda.
E. APLICACIONES INDUSTRIALES Y MEDIOAM1IENTALES.
/n los apartados anteriores se .a puesto de manifiesto la gran variedad de
compuestos que pueden ser estudiados por espectroscopia IR ! los distintos an0lisis
(cualitativo ! cuantitativo) que se pueden reali)ar. 8 continuacin se introducen algunas
disciplinas concretas en las que se .a constatado la utilidad de esta tcnica.
Industria farmacutica* La espectroscopia IR es un complemento ideal a la Resonancia
magntica +uclear ! la /spectrometr"a de masas, ! se .a utili)ado ampliamente tanto en
la evaluacin de materiales crudos como en la produccin de los compuestos activos !
excipientes. La caracteri)acin de los diferentes polimorfos de una droga se puede llevar
a cabo por IR ! cobra especial relevancia porque la actividad de una de las formas puede
ser mu! superior a las dem0s. 3n ejemplo de estas diferencias se aprecia en la figura que
recoge dos variedades polimrficas de un agente antiinflamatorio, el acetato
de cortisona (7igura O). 8unque los espectros son complejos por debajo de #O&& cm
'#
,
es f0cil observar las diferencias en la regin #%&&'#O&& cm
'#
, as" como en la banda del
>'stretching entre LN&&'L#&& cm
'#
.
La tcnica acoplada Q1'IR es un mtodo apropiado para detectar drogas ! complementa
a la perfeccin el mtodo generalmente aceptado como definitivo (Q1'<F). 4or
ejemplo las anfetaminas se .an diferenciado de forma satisfactoria por Q1'IR. /stas son
molculas estructuralmente parecidas que se pueden confundir con facilidad,
especialmente las drogas de diseIo derivadas de la propia anfetamina. 8unque no se
pueden diferenciar mediante su espectro de masas, existen diferencias acusadas en su
infrarrojo.
Industria alimentaria* (anto el IR'medio como el cercano (+IR) se .an utili)ado para
obtener informacin cualitativa ! cuantitativa de muestras de alimentos. ctos son
me)clas complejas que contienen agua, prote"nas, grasas ! carbo.idratos como
componentes ma!oritarios.
3n mtodo importante es el empleado para determinar ismeros trans& en grasas !
aceites (principalmente triglicridos). 8unque la configuracin cis& aparece de forma
predominante en la naturale)a, durante el procesado industrial puede ocurrir la
isomeri)acin en un grado importante que es necesario conocer. 8mbos ismeros tienen
en com6n una banda intensa a ##NL cm
'#
del grupo ster (1'>, que puede servir de
banda de referencia en estudios cuantitativos) ! se diferencian por el bending fuera del
plano del grupo 1@1' que aparece en la regin %,&'P&& cm
'#
para el cis&, ! como un
pico mu! caracter"stico a 5NN cm
'#
para el trans&. La determinacin del contenido en
trans& se puede obtener relacionando la concentracin de ste con el cociente de
absorbancias entre las bandas a##NL ! 5NN cm
'#
.
4or su parte el +IR se .a empleado en el control de la lec.e, con un importante
despla)amiento de las bandas a menores longitudes de onda conforme disminu!e la
concentracin de grasa ! prote"nas' La concentracin de alco.ol en vinos ! bebidas de
ma!or graduacin tambin se .a reali)ado con xito mediante el +IR., as" como el
estudio de muestras adulteradas con metanol o etilnglicol.
Control de la contaminacin+ /l control rutinario de los niveles de sustancias txicas en
el medioambiente (aire, agua ! suelo), .a impulsado el desarrollo de tcnicas para
an0lisis cuantitativo autom0tico. /n el caso de los vapores nocivos se necesitan celdas
grandes (#'$& m.) ! una bomba para que la muestra de aire circule por el aparato. Los
instrumentos se suelen dedicar a un solo contaminante empleando un sistema de filtros
para seleccionar la longitud de onda, aunque tambin los .a! para an0lisis
multicomponente. Fon de uso com6n las medidas de F>
$
, 1+, 1l1>, +
L
,
$
F !
1l. 8plicaciones t"picas son el control de formalde.ido en f0bricas de pl0sticos !
resinas, de anestsicos en quirfanos o de monxido de carbono en aparcamientos. /n el
caso de contaminantes slidos como los pesticidas tambin se .a utili)ado con xito la
espectroscopia IR.
,tros usos+ /sta tcnica se .a empleado con xito en el estudio de combustibles fsiles,
por ejemplo determinando su contenido de agua. /l an0lisis multicomponente se .a
aplicado al estudio de minerales, aunque .a! una dependencia marcada con el tamaIo de
part"cula. 4or 6ltimo, el IR se .a utili)ado en cat0lisis para identificar las especies
adsorbidas en la superficie ! el modo en que tiene lugar esta unin. 3no de los sistemas
mejor estudiados es el monxido de carbono sobre metales.
1I1LIOGRA!A:
E <odern Infrared Fpectroscop!, Ftuart, Qeorge, <cInt!re. 81>L Sile!d Fons.
E Infrared and Raman spectra of inorganic and coordination compounds, Y.
+aBamoto, Sile! ($&&,)
E Inorganic spectroscopic met.ods 8. Y. Rrisdon, ]eneca'>xford 3niversit!
4ress
E Infrared 1.aracteristic Qroup 7requencies Sile!d Fons. (#55,).
E IR Fpectroscop!, an introduccin. Qen)ler ! Qremlic., Sile!' 21 ($&&$)
E Infrared Fpectroscop!* 7undamentals and 8pplications R. Ftuart fo.n Sile! d
Fons, ($&&,)
DIRECCIONES KE1 INTERESANTES:
E Infrared.als.lbl.gov <u! buena, 7ree spectral database for organic compounds.
tutoriales, ejercicios de identificacin, aplicaciones, videos, linBs a empresas !
otras fuentes de informacin.
E Ftarting page for Infrared spectroscop!. Fe puede acceder desde la anterior o a
travs de(.ttp*HH.ome.planet.nlHgsBoBHtec.niquesHirH ) <u! buena.
E 1.emistr! SebRooB ;atabase, simulation, texts, problemas, free soft_areM
E .ttp*HH___.spectroscop!no_.comHFp!Hbase.tmlHFp!H#,##%#,&'&'&'&'&'.ome'
&'&,&&..tml 4ortal de Sile! para espectroscopistas con enlace a p0ginas