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USO DE LOS VIRUS EN LA BIOTECNOLOGA

Descubrimiento de antibiticos mediante bacterifagos.


Actualmente se est poniendo especial nfasis en el descubrimiento de nuevos
antibiticos. Para ello se buscan protenas celulares esenciales en el crecimiento, que sean
inhibidas por pequeas molculas o compuestos naturales. Una estrategia consiste en
aprovechar la informacin gnica codificada en los bacterifagos. stos, a travs del curso
de la evolucin han desarrollado protenas nicas que inactivan o redirigir el metabolismo
celular para multiplicarse, actuando sobre protenas clave de la bacteria.
Un ejemplo claro de ello es el organismo modelo Escherichia coli; por ejemplo la protena
gp2 del fago T7 acta sobre la RNA polimerasa inhibiendo la transcripcin.
En una primera aproximacin de esta estrategia, que se ha llevado a cabo durante mucho,
tiempo, sin conseguir los resultados esperados, es la denominada fagoterapia, que
consiste en la administracin de bacterifagos, donde usan a los virus no como
herramienta antibacteriana en s, sino como fuentes de informacin, que nos indican que
dianas bacterianas, son susceptibles de ser inhibidas, para conseguir antibiticos. Segn
este punto de vista, utilizando la informacin contenida en los fagos, se puede identificar
protenas particularmente susceptibles en la clula y priorizar esas dianas para la
bsqueda de nuevos frmacos. La meta ltima es buscar un compuesto qumico que
mimetice el efecto producido por las protenas vricas.
Con esta aproximacin al uso de fagos, se consigue obtener molculas fcilmente
administrable, difusibles, y sin efectos txicos, o reacciones inmunolgicas, que son los
principales problemas que presenta la fagoterapia.
FUSIN CELULAR DIRIGIDA
La fusin celular es un proceso esencial en el desarrollo de los organismos. Por ejemplo, el
zigoto, es el resultado de la fusin entre un vulo y un espermatozoide. Tambin, varios
tejidos como el muscular, se forman por sincitios de clulas mononucleadas. La fusin
celular, tambin tiene importancia en la plasticidad celular de las clulas stem y en la
patognesis.
As mismo, tiene multitud de aplicaciones en biotecnologa, como en la produccin de
anticuerpos. Conocer como se produce y poder dotarla de cierta especificidad, tendra
aplicaciones potenciales en terapia gnica contra el cncer, viroterapia, y desarrollo de
nuevas vacunas.
Los virus envueltos que infectan clulas eucariticas, presentan un modelo de estudio,
relativamente simple, de la fusin celular.
En este trabajo, se tom como modelo el virus del sarampin. La fusin celular est
mediada por un ptido fusognico compuesto por dos glicoprotenas: H que media el
reconocimiento especfico (SLAM, CD46)y F, que promueve la fusin celular, cuando hay
un cambio conformacional provocado por la unin del receptor a H.
UTILIZACIN DE VIRUS COMO VECTORES EN LA DETECCIN Y TRATAMIENTO DE TUMORES
Para lograr desarrollar terapia gnica contra el cncer se necesitan vectores que acten a
nivel sistmico y marquen especficamente clulas tumorales en cualquier parte del
cuerpo. Los mayores obstculos radican en que el vector se distribuya por todo el cuerpo,
y que slo infecte a las clulas tumorales, sin daar a las sanas. Estas dos condiciones las
cumple los vectores virales Sindbis, los cuales proceden del virus Sindbis pero con
modificaciones, para que no sean capaces de replicarse y sean seguros y controlables.
El virus Sindbis se transmite a las clulas de mamferos mediante las picaduras de
mosquito, y se distribuye por el organismo a travs del torrente sanguneo. Esta capacidad
de distribuirse la mantiene el vector modificado, y su vida media es relativamente grande
VISUALIZACIN DE TUMORES Y METSTASIS EN ANIMALES VIVOS CON VIRUS
PORTADORES DE TRANSGENES DE PROTENAS EMISORAS DE LUZ
Con el objetivo de utilizar virus como marcadores de tumores y metstasis en animales
vivos, se ha analizado, a tiempo real, la localizacin, supervivencia y replicacin de virus
modificados en cuyo genoma est presente un gen que codifica protenas facilmente
visibles.
Se ha usado un virus de la vacuna recombinante: rVV-RUC-GFP, construido al insertar el
cassette RUC-GFP por recombinacin homloga, el cual contiene las secuencias de cDNA
de una luciferasa y de la protena verde fluorescente, bajo el control de promotores
sintticos de expresin temprana/tarda del virus de la vacuna. El cassette se introduce en
una regin del genoma no esencial para el funcionamiento del virus.
En el apartado anterior ya se expuso el funcionamiento de la
luciferasa. Y la GFP es una protena que emite fluorescencia verde al ser expuesta a luz
ultravioleta o azul.
Gracias a esas protenas que emiten luz se puede monitorizar el movimiento del virus
desde la zona en que se inyecta en los ratones hasta los tejidos tumorales, donde
sobrevive y se replica durante semanas y sin producirse viremia, lo cual se ha observado
tanto en ratones inmunocompetentes como en inmunodeprimidos; y en tumores propios
del ratn y en inyectados.
Tras inyectar el virus en ratones sanos se distribuye por el cuerpo a travs de la sangre, y
no aparecen infecciones significativas en ningn rgano. La luminiscencia observada va
disminuyendo progresivamentecomo consecuencia de la eliminacin de los virus por parte
del sistema inmune. Sin embargo, cuando se inyecta el virus en ratones con tumores se
observa luminosidad en los tumores. Y dicha luminosidad se va incrementando
progresivamente, seal de que el virus se est replicando.
Se detectan luminiscencia de la luciferasa y de la GFP, y ambas sealescoinciden
exactamente en las mismas zonas.
El virus se replica en los tumores porque son zonas en las que elsistema inmune no acta
como en el resto del organismo, lo que le permiteinfectar a las clulas tumorales.
La replicacin vrica en los tumores se comprueba al analizar tejidosextrados de los
animales
Actualmente, estn disponibles 4 tipos diferentes de vacunas:

Las vacunas de virus vivos usan la forma del virus debilitada (o atenuada). La vacuna
contra el sarampin, las paperas y la rubola (triple viral) al igual que la vacuna contra la
varicela (viruela) son ejemplos de este tipo.
La vacuna elaborada con microbios muertos (inactivada) se hace de una protena u otros
pequeos fragmentos tomados de un virus o bacteria. La vacuna antigripal es un ejemplo.
Las vacunas toxoides, como las vacunas antidiftrica y antitetnica, contienen una toxina
o qumico producido por la bacteria o virus. Estas vacunas hacen que uno sea inmune a los
efectos dainos de la infeccin en lugar de la infeccin en s.
Las vacunas biosintticas contienen substancias artificiales que son muy similares a
pedazos de virus o bacterias. La vacuna conjugada Hib (Haemophilus influenzae tipo B) es
un ejemplo.