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Bases tericas

Cromatografa:
La cromatografa es un mtodo fsico de separacin para la caracterizacin de
mezclas complejas, la cual tiene aplicacin en todas las ramas de la ciencia. Es un
conjunto de tcnicas basadas en el principio de retencin selectiva, cuyo objetivo es
separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar
las cantidades de dichos componentes. Diferencias sutiles en el coeficiente de
particin de los compuestos da como resultado una retencin diferencial sobre la fase
estacionaria y por tanto una separacin efectiva en funcin de los tiempos de retencin
de cada componente de la mezcla.
La cromatografa puede cumplir dos funciones bsicas que no se excluyen
mutuamente:
Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos ms puros y que
puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas sntesis).
Medir la proporcin de los componentes de la mezcla (finalidad analtica). En
este caso, las cantidades de material empleadas son pequeas.
Cromatografa de papel:
Es la ms sencilla de las tcnicas, pero slo nos dar resultados cualitativos. Est casi
en desuso. El mtodo se basa en un mecanismo de reparto, y consiste en depositar
una pequea cantidad de muestra en el extremo de una tira de papel de filtro, que se
deja evaporar. Luego se introduce la tira en una cubeta que contenga el disolvente, de
manera que ste fluya por la tira por capilaridad. Cuando el disolvente deja de
ascender o ha llegado al extremo, se retira el papel y seca. Si el disolvente elegido fue
adecuado y las sustancias tienen color propio se vern las manchas de distinto color
separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el papel se somete a
procesos de revelado.
Hay varios factores de los cuales depende una cromatografa eficaz: la eleccin del
disolvente y la del papel de filtro.






Cromatografa en capa fina:
La cromatografa en capa fina se basa en la preparacin de una capa, uniforme de un
absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro
soporte. La fase mvil es lquida y la fase estacionaria consiste en un slido. La fase
estacionaria ser un componente polar y el eluyente ser por lo general menos polar
que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se desplacen con mayor
velocidad sern los menos polares.
La mezcla a analizar se deposita a una pequea distancia del borde inferior de la placa
y se introduce en una cubeta que contiene la fase mvil, que asciende a lo largo de la
placa por capilaridad, desplazando a los componentes de la mezcla a diferentes
velocidades, lo que provoca su separacin. Cuando el frente del disolvente se
encuentra prximo al extremo superior de la placa esta se saca y se visualiza.
La relacin entre la distancia recorrida por un compuesto y por el disolvente desde el
origen se conoce como Rf (rate factor).

Rf= Distancia recorrida por el compuesto
Distancia recorrida por el disolvente

La bsqueda del eluyente requiere probar con varios disolventes de diferente polaridad
o con mezclas. Para compuestos poco polares, que se desplazan con mucha facilidad,
se debe utilizar un disolvente apolar como el hexano y en el caso de compuestos de
polaridad media, mezclas de hexano y acetato de etilo.
La mayora de las placas de cromatografa llevan un indicador fluorescente que
permite la visualizacin de los componentes activos a la luz ultravioleta (254 nm). En el
caso de componentes que no absorban a la luz ultravioleta, la visualizacin requiere
utilizar un agente revelador. El revelador reacciona con los productos proporcionando
productos coloreados.














Detalles experimentales
Materiales:
Capilar delgado
Probeta
Corchos
Tijeras
Regla lpiz
Papel filtro
Muestras:
Flores rojas secas y trituradas
Reactivo:
cido clorhdrico metanolico
Acido actico glacial

A. Cromatografa de papel:

Pesar 1 gr de la muestra y se aade 5 mL e cido clorhdrico
metanolico.
Filtre la mezcla usando papel filtro.
Se pone la solucin (acido clorhdrico metanoico + acido actico
glacial) en la probeta no ms de 1 cm y se tapa con un corcho.
Corte en un tira el papel filtro y colocarlo en la probeta
Se traza con un lpiz un lnea de 1 cm del borde inferior del papel
y se marca con un punto el lugar donde se colocara la mezcla a
separar.
Se aplica la muestra en el papel con un capilar delgado y se deja
secar.




Materiales:
Capilar delgado
Vaso precipitado
Corchos
Tijeras
Regla lpiz
Placa cromatografico
Muestras:
Flores rojas secas y trituradas
Reactivo:
cido clorhdrico metanolico





B. Cromatografa de placa:

Se prepara la solucin (acido clorhdrico metanoico + acido actico
glacial) en el vaso precipitado.
Se traza con un lpiz un lnea de 1 cm del borde inferior del papel
y se marca con un punto el lugar donde se colocara la mezcla a
separar.
Sobre la placa se coloca la muestra utilizando un tubo capilar muy
fino a una distancia de 1 cm del extremo inferior, de la forma que
se produzca una mancha y se deja secar.
Se introduce la placa en el disolvente sin que la mancha llegue a
introducirse en el. se tapa y se deja correr el cromatograma.
Luego que el eluyente ha alcanzado una altura conveniente (1 cm
antes del extremo superior) se retira la placa del vaso precipitado
y se lleva a la campana para que se seque.
Se marca con un lpiz la altura alcanzada por el eluyente.





























Recomendaciones

Estar atento cuando el eluyente esta llegando a la lnea superior que se marco
con lpiz.

La muestra se debe colocar en el centro de la lnea inferior del papel o placa
marcado con lpiz para evitar que se corra hacia los costados.


El eluyente tiene que estar en el recipiente ante de poner el papel o la placa
para que este se sature todo el ambiente del recipiente.





















Bibliografa

Anlisis qumico e instrumental moderno. Harold F. Walton y Jorge Reyes. Ed.
Revert. Mxico D.F
Anlisis Qumico Cuantitativo. Gilbert H. Ayres. Ed. Harla. Mexico D.F.

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